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不同菌龄酿酒酵母细胞壁蛋白差异性分析 被引量:5
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作者 成建国 董亮 +3 位作者 付莹莹 张利 郭继强 赵长新 《食品与发酵工业》 CAS CSCD 北大核心 2012年第4期116-119,共4页
以酿酒酵母为研究对象,比较了完整细胞提取法、稀碱缓冲液提取法及溶菌酶和β-葡聚糖酶复合酶法等三种酵母菌细胞壁蛋白提取方法,分析了不同菌龄酵母细胞壁差异性蛋白。结果表明:溶菌酶和β-葡聚糖酶复合酶液水解纯化好细胞壁提取蛋白... 以酿酒酵母为研究对象,比较了完整细胞提取法、稀碱缓冲液提取法及溶菌酶和β-葡聚糖酶复合酶法等三种酵母菌细胞壁蛋白提取方法,分析了不同菌龄酵母细胞壁差异性蛋白。结果表明:溶菌酶和β-葡聚糖酶复合酶液水解纯化好细胞壁提取蛋白的方法具有所得胞壁蛋白条带较多,且纯度较高的优点,确定了此方法为提取酵母细胞壁蛋白的最佳提取方法。同时,通过SDS-PAGE电泳分析发现,不同菌龄酵母细胞壁蛋白存在着较大的差异性,并确定了分子质量在36 ku、17 ku和12 ku为不同酵母代数细胞壁的3个主要差异性蛋白,其中36 ku、17 ku处条带蛋白随着菌龄的增加酵母细胞壁蛋白表达量逐渐减少,而12 ku处条带蛋白随着菌龄的增加酵母细胞壁蛋白表达量逐渐增加。 展开更多
关键词 酿酒酵母 细胞壁蛋白 SDS-PAGE电泳分析
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棉花细胞壁蛋白基因分离鉴定与表达分析 被引量:3
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作者 李学宝 黄耿青 +2 位作者 许文亮 王秀兰 汪虹 《华中师范大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 2005年第4期509-513,共5页
棉纤维起源于棉花胚珠外层表皮细胞.研究棉纤维发育,具有重要理论和实践意义.从棉纤维等组织cDNA文库中分离了186个棉花细胞壁结构蛋白基因,按照所编码的蛋白质结构特点,可将这些基因分为三类:富含脯氨酸细胞壁蛋白(P ro line-rich ce l... 棉纤维起源于棉花胚珠外层表皮细胞.研究棉纤维发育,具有重要理论和实践意义.从棉纤维等组织cDNA文库中分离了186个棉花细胞壁结构蛋白基因,按照所编码的蛋白质结构特点,可将这些基因分为三类:富含脯氨酸细胞壁蛋白(P ro line-rich ce llw a ll prote ins,PRP s)基因、伸展蛋白(Ex tens ins)或者富含羟脯氨酸糖蛋白(Hydroxypro line-rich g lycoprote in,HRGP)基因,富含甘氨酸蛋白(G lyc ine-rich prote ins,GRP s)基因.采用cDNA m icroarray技术,比较上述基因在开花后10天的野生型棉花纤维和无絮无绒(fuzzless-lin tless,fl)突变体胚珠表皮中表达谱发现,其中有7个基因在野生型纤维中特异性或高效性表达,表明它们可能与纤维发育有关. 展开更多
关键词 棉纤维 细胞壁蛋白 基因表达谱分析
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植物细胞壁蛋白质组学研究进展 被引量:3
3
作者 刘艳丽 金孝芳 +4 位作者 马林龙 曹丹 龚自明 焦春海 韦朝领 《生物化学与生物物理进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2018年第8期833-840,共8页
植物细胞壁蛋白质在细胞代谢和发育调控、细胞壁组分修饰、信号转导及胁迫响应等生物学事件中具有重要功能.最近,国内外学者开展了大量植物细胞壁蛋白质组学的研究工作,并取得了巨大进展.本文详述了细胞壁蛋白质的分类、提取、鉴定及生... 植物细胞壁蛋白质在细胞代谢和发育调控、细胞壁组分修饰、信号转导及胁迫响应等生物学事件中具有重要功能.最近,国内外学者开展了大量植物细胞壁蛋白质组学的研究工作,并取得了巨大进展.本文详述了细胞壁蛋白质的分类、提取、鉴定及生物信息学分析的最新进展,总结了植物细胞壁蛋白质组学的应用和面临的挑战,提出了植物细胞壁蛋白质组学研究的框架图,以期为植物细胞壁蛋白质组学的广泛研究提供借鉴. 展开更多
关键词 植物 细胞壁蛋白 分类 分离 鉴定
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植物细胞壁蛋白与木质纤维素酶解 被引量:7
4
作者 韩业君 陈洪章 《化学进展》 SCIE CAS CSCD 北大核心 2007年第7期1153-1158,共6页
木质纤维素是生产生物能源和材料的重要原料。木质纤维素具有高度复杂的结构,其酶解效率除了受自身的凝聚态结构影响外,还受到细胞壁自身组分的影响。本文综述了植物细胞壁中主要蛋白的特征及其与木质纤维素酶解的关系。从植物自身细胞... 木质纤维素是生产生物能源和材料的重要原料。木质纤维素具有高度复杂的结构,其酶解效率除了受自身的凝聚态结构影响外,还受到细胞壁自身组分的影响。本文综述了植物细胞壁中主要蛋白的特征及其与木质纤维素酶解的关系。从植物自身细胞壁蛋白活性出发来研究木质纤维素的酶解,为研究其酶解机制和高效酶解方法提供了新思路。 展开更多
关键词 木质纤维素 纤维素酶 细胞壁蛋白 酶解 协同作用
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乳酸乳球菌细胞壁蛋白酶的分离纯化 被引量:7
5
作者 郭宇星 潘道东 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2008年第10期388-391,共4页
本研究确定了分离纯化乳酸乳球菌细胞壁蛋白酶(CEP)的最佳技术路线。用裂解液(50mmol/LTris-HCl,2mmol/LEDTA-Na2,100mmol/LNaCl,0.5%Tritonx-100,1mg/ml溶菌酶,pH8.5)悬浮菌体(20ml/g),37℃下保温3h,离心后取上清液即为粗酶液。粗酶液... 本研究确定了分离纯化乳酸乳球菌细胞壁蛋白酶(CEP)的最佳技术路线。用裂解液(50mmol/LTris-HCl,2mmol/LEDTA-Na2,100mmol/LNaCl,0.5%Tritonx-100,1mg/ml溶菌酶,pH8.5)悬浮菌体(20ml/g),37℃下保温3h,离心后取上清液即为粗酶液。粗酶液通过45%硫酸铵沉淀,DEAE-SephadexA-25和Sephacryl-S-300HR两步层析,可以得到纯化的细胞壁蛋白酶。蛋白酶提纯倍数达到74.048%,最后回收率为14.865%,PAGE电泳检测为一条带,SDS-PAGE检测蛋白酶为单体结构,分子量大约为53kD。用纯化后CEP酶解乳清蛋白,酶解液ACE抑制率为45%。 展开更多
关键词 ACE抑制活性 乳酸乳球菌 细胞壁蛋白
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瑞士乳杆菌细胞壁蛋白酶提取研究 被引量:7
6
作者 郭宇星 潘道东 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2007年第10期421-424,共4页
瑞士乳杆菌细胞壁蛋白酶是其蛋白水解系统中一个非常重要的蛋白酶。本实验采用螯合Ca2+的方法对瑞士乳杆菌细胞壁蛋白酶的提取进行了研究,并确定了细胞壁蛋白酶提取的最佳实验条件。菌体用含有30mmol/LCaCl2的50mmol/LTris-HCl(pH7.10)... 瑞士乳杆菌细胞壁蛋白酶是其蛋白水解系统中一个非常重要的蛋白酶。本实验采用螯合Ca2+的方法对瑞士乳杆菌细胞壁蛋白酶的提取进行了研究,并确定了细胞壁蛋白酶提取的最佳实验条件。菌体用含有30mmol/LCaCl2的50mmol/LTris-HCl(pH7.10)缓冲液洗涤三次,然后用含有45mmol/LEDTA-Na2的50mmol/LTris-HCl(pH6.50)缓冲液悬浮,43℃保温,蛋白酶就会释放出来,90min后取出离心(4500r/min,20min,4℃),上清液即为粗酶液。粗酶液再经DEAE Sepharose CL-6B纯化,比酶活力提高了1.8倍。 展开更多
关键词 瑞士乳杆菌 细胞壁蛋白 蛋白酶活力
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重组毕赤酵母细胞壁蛋白的抽提和分析 被引量:1
7
作者 林影 周新莹 +3 位作者 韩双艳 张莉 叶燕锐 郑穗平 《华南理工大学学报(自然科学版)》 EI CAS CSCD 北大核心 2012年第5期101-106,120,共7页
建立稳定有效的细胞壁蛋白(CWPs)抽提方法,是开展毕赤酵母细胞壁蛋白质组学及甲醇代谢调控相关性研究的基础.为此,以具重组非共价结合壁蛋白Flo1p絮凝素的酵母GS115/KFS-CALB、具共价结合壁蛋白α凝集素的酵母GS115/KNS-CALB和具重组共... 建立稳定有效的细胞壁蛋白(CWPs)抽提方法,是开展毕赤酵母细胞壁蛋白质组学及甲醇代谢调控相关性研究的基础.为此,以具重组非共价结合壁蛋白Flo1p絮凝素的酵母GS115/KFS-CALB、具共价结合壁蛋白α凝集素的酵母GS115/KNS-CALB和具重组共价结合壁蛋白Pir1的酵母GS115/Pir1-CALB为对象,用热十二烷基磺酸钠(SDS)、昆布多糖酶、氢氟酸吡啶和温和碱水解对上述壁蛋白进行抽提,结果表明:3种壁蛋白已成功地展示于毕赤酵母细胞壁的表面;用这3种毕赤酵母锚定蛋白展示脂肪酶,对细胞的生长状况影响不大,而对展示酶的表达量影响较大,GS115/KFS-CALB、GS115/KNS-CALB和GS115/Pir1-CALB的脂肪酶水解比酶活最高达855.02、1239.40和210.47 U/g(以干细胞计);热SDS可有效抽提GS115/KFS-CALB上的Flo1p絮凝素,昆布多糖酶和氢氟酸吡啶可释放GS115/KNS-CALB上的α凝集素,而昆布多糖酶和温和碱可释放GS115/Pir1-CALB上的Pir1. 展开更多
关键词 巴斯德毕赤酵母 细胞壁蛋白 非共价结合 共价结合 抽提方法
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短芽孢杆菌细胞壁蛋白基因多启动子和信号肽编码序列的分离 被引量:3
8
作者 彭清忠 张惟材 朱厚础 《生物技术通讯》 CAS 2002年第1期23-25,共3页
具有高蛋白分泌能力的短芽孢杆菌分泌到胞外的蛋白质主要是细胞壁蛋白。本文通过PCR从5株筛得的具有高蛋白分泌能力且没有胞外蛋白酶活性的短芽孢杆菌中分离出细胞壁蛋白基因多启动子和信号肽编码序列,对其分析发现与具有高蛋白分泌能... 具有高蛋白分泌能力的短芽孢杆菌分泌到胞外的蛋白质主要是细胞壁蛋白。本文通过PCR从5株筛得的具有高蛋白分泌能力且没有胞外蛋白酶活性的短芽孢杆菌中分离出细胞壁蛋白基因多启动子和信号肽编码序列,对其分析发现与具有高蛋白分泌能力的短芽孢杆菌47和HPD31的相应序列高度同源。该结果表明分泌蛋白能力强的短芽孢杆菌细胞壁蛋白的合成可能受同样的机理调控。 展开更多
关键词 短芽孢杆菌 细胞壁蛋白基因多启动子 信号肽编码序列 聚合酶链式反应 分离
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鼠李糖乳杆菌LGG细胞壁蛋白的预测和功能分析 被引量:1
9
作者 朱德全 高峰 +5 位作者 姚嘉 张跃华 韩诚武 卢伟 栾积毅 刘向东 《安徽农业科学》 CAS 2017年第13期141-142,153,共3页
[目的]采用生物信息学方法预测鼠李糖乳杆菌LGG细胞壁蛋白和功能分析。[方法]以鼠李糖乳杆菌LGG基因组编码蛋白序列为研究对象,采用Phobius和Signal P 4.0软件分析该菌株的细胞壁蛋白,同时采用COG功能数据库对预测的细胞壁蛋白进行功能... [目的]采用生物信息学方法预测鼠李糖乳杆菌LGG细胞壁蛋白和功能分析。[方法]以鼠李糖乳杆菌LGG基因组编码蛋白序列为研究对象,采用Phobius和Signal P 4.0软件分析该菌株的细胞壁蛋白,同时采用COG功能数据库对预测的细胞壁蛋白进行功能分析。[结果]鼠李糖乳杆菌LGG基因组中含有41个细胞壁蛋白,这些蛋白的功能分析结果显示,41个细胞壁蛋白中,25个蛋白没有功能注释,16个有功能注释,主要与细胞壁和细胞膜的生物合成,碳水化合物的代谢与转运,蛋白质的翻译后修饰等功能有关。[结论]该研究从结构和功能上分析鼠李糖乳杆菌细胞壁蛋白,为分析益生菌适应环境的分子特征打下基础。 展开更多
关键词 鼠李糖乳杆菌LGG 基因组 细胞壁蛋白 功能
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嗜酸乳杆菌细胞壁蛋白酶的提取优化 被引量:3
10
作者 李敏 潘道东 《食品科学》 EI CAS CSCD 北大核心 2011年第23期260-265,共6页
为了获得较高酶活力的嗜酸乳杆菌细胞壁蛋白酶(CEP),对嗜酸乳杆菌CEP的提取方法进行优化。经过比较超声波破碎法、Ca2+-free法、溶菌酶裂解3种方法,确认溶菌酶裂解法结合使用非离子清洁剂破壁是提取嗜酸乳杆菌CEP的最佳方法。在单因素... 为了获得较高酶活力的嗜酸乳杆菌细胞壁蛋白酶(CEP),对嗜酸乳杆菌CEP的提取方法进行优化。经过比较超声波破碎法、Ca2+-free法、溶菌酶裂解3种方法,确认溶菌酶裂解法结合使用非离子清洁剂破壁是提取嗜酸乳杆菌CEP的最佳方法。在单因素试验的基础上,采用正交试验对嗜酸乳杆菌CEP的提取工艺进行优化,得出嗜酸乳杆菌CEP的最佳提取方法:用裂解液(50mmol/L Tris-HCl、100mmol/L NaCl、TritonX-100添加量1%、1.5mg/mL溶菌酶,pH 7.8)悬浮菌体(20mL/g),37℃保温3h,4℃、4500r/min离心20min,取上清液。溶菌酶裂解法提取CEP过程中各因素对CEP提取效果的影响依次为:溶菌酶质量浓度>裂解pH值>TirtonX-100添加量>保温时间。 展开更多
关键词 嗜酸乳杆菌 细胞壁蛋白酶(CEP) 提取
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保加利亚乳杆菌细胞壁蛋白酶基因克隆及结构分析 被引量:1
11
作者 张妍 肖明 +2 位作者 张爽 谢凤英 张兰威 《食品工业科技》 CAS 北大核心 2019年第20期107-111,119,共6页
本文以保加利亚乳杆菌基因组为模板,利用PCR的方法扩增细胞壁蛋白酶基因(prtB),并且利用GeneBank数据库和生物软件对prtB进行对比和生物信息学分析,预测基因片段的相似性、表达出蛋白酶的蛋白大小、二级结构和膜结合性等性质。结果表明... 本文以保加利亚乳杆菌基因组为模板,利用PCR的方法扩增细胞壁蛋白酶基因(prtB),并且利用GeneBank数据库和生物软件对prtB进行对比和生物信息学分析,预测基因片段的相似性、表达出蛋白酶的蛋白大小、二级结构和膜结合性等性质。结果表明,测序后比对发现扩增片段与模板保加利亚乳杆菌prtB相似性为100%,证明基因片段未发生突变;prtB与德氏乳杆菌德氏亚种基因相似性为96%,与德氏乳杆菌乳酸亚种(Lactobacillus delbrueckii)基因相似性为82%,具有一定的保守性和特异性。prtB基因G+C含量为47.49%,A+T含量为52.51%,编码1831个氨基酸,分子量为3338.7 kD,将此蛋白命名为PrtB,等电点pI为8.76。保加利亚乳杆菌的PrtB为亲水性稳定蛋白,总平均亲水性为-0.583,有28个Ser、9个Thr和25个Tyr可能成为蛋白激酶磷酸化的作用位点,该蛋白为细胞外蛋白,其二级结构以不规则卷曲为主,其值为55.11%,α-螺旋和β-折叠仅占21.30%和23.59%。 展开更多
关键词 保加利亚乳杆菌 细胞壁蛋白 基因克隆 结构分析
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新发现的植物细胞壁蛋白 被引量:4
12
作者 李雄彪 《植物生理学通讯》 CSCD 1990年第6期11-13,共3页
分别从矮牵牛和菜豆基因文库中分离到的一种基因都编码富含甘氨酸的蛋白质(GRP),经免疫学方法证实,GRP为细胞壁蛋白。从玉米悬浮培养细胞中分离到富含苏氨酸与羟脯氨酸的糖蛋白(THRGP)和富含组氨酸与羟脯氨酸的糖蛋白(HHRGP)。氨基酸及... 分别从矮牵牛和菜豆基因文库中分离到的一种基因都编码富含甘氨酸的蛋白质(GRP),经免疫学方法证实,GRP为细胞壁蛋白。从玉米悬浮培养细胞中分离到富含苏氨酸与羟脯氨酸的糖蛋白(THRGP)和富含组氨酸与羟脯氨酸的糖蛋白(HHRGP)。氨基酸及中性糖的组成、分子形状、免疫特性等生化特点都表明THRGP和HHRGP是单子叶植物类型的细胞壁蛋白。 展开更多
关键词 细胞壁蛋白 植物细胞壁
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2型猪链球菌细胞壁蛋白SSU1664的表达、纯化及活性分析
13
作者 律清宇 陈哲 +3 位作者 郑玉玲 郝淮杰 姜永强 吕淑霞 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第7期757-759,共3页
目的:从猪链球菌05ZY中扩增SSU1664基因,在大肠杆菌中表达并评价其重组蛋白的活性。方法:根据05ZY基因组序列设计引物,PCR扩增SSU1664基因,构建表达载体,利用亲和层析对目的蛋白进行纯化,Western blot和ELISA法鉴定其免疫原性。结果:SSU... 目的:从猪链球菌05ZY中扩增SSU1664基因,在大肠杆菌中表达并评价其重组蛋白的活性。方法:根据05ZY基因组序列设计引物,PCR扩增SSU1664基因,构建表达载体,利用亲和层析对目的蛋白进行纯化,Western blot和ELISA法鉴定其免疫原性。结果:SSU1664基因能够在大肠杆菌中可溶性表达,Western blot显示其能与猪链球菌菌体免疫后的大鼠血清反应,ELISA检测显示在人感染猪链球菌患者血清中针对SSU1664蛋白的IgM含量显著性升高。结论:SSU1664蛋白具有较高的免疫原性,可作为潜在的猪链球菌疫苗候选分子和猪链球菌早期感染诊断的标志物。 展开更多
关键词 猪链球菌 细胞壁蛋白 疫苗
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动物双歧杆菌AD011细胞壁蛋白的预测和功能分析
14
作者 朱德全 王茗悦 +5 位作者 姚嘉 张跃华 韩诚武 卢伟 栾积毅 刘向东 《安徽农业科学》 CAS 2017年第8期159-160,共2页
[目的]运用生物信息学方法预测动物双歧杆菌AD011锚定于细胞壁的蛋白并进行功能分析,为后续研究该菌与宿主相互作用的分子机制提供基础资料。[方法]用Phobius和SignalP 4.0软件对动物双歧杆菌AD011全基因组编码蛋白中细胞壁蛋白进行预测... [目的]运用生物信息学方法预测动物双歧杆菌AD011锚定于细胞壁的蛋白并进行功能分析,为后续研究该菌与宿主相互作用的分子机制提供基础资料。[方法]用Phobius和SignalP 4.0软件对动物双歧杆菌AD011全基因组编码蛋白中细胞壁蛋白进行预测,同时采用COG(Cluster of Orthologous Groups of proteins)功能数据库对预测的细胞壁蛋白进行功能注释和聚类分析。[结果]动物双歧杆菌AD011基因组1 518个编码蛋白中,11个蛋白含有细胞壁的锚定基序,6个蛋白含有LP×TG基序,1个蛋白含有Lys M基序,1个蛋白含有PG结合区域,2个蛋白含有SLH结构域,1个蛋白含有NLPC_P60结构域。细胞壁蛋白功能分析结果显示,11个细胞壁蛋白中,9个蛋白没有功能注释,2个蛋白(NLP/P60 protein和1,4-beta-N-acetylmuramidase)参与细胞壁和细胞膜的生物合成。[结论]动物双歧杆菌AD011大多数细胞壁蛋白功能未知,还需在以后的研究中进行进一步的功能注释。 展开更多
关键词 两歧双歧杆菌 基因组 细胞壁蛋白 功能
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两歧双歧杆菌PRL2010细胞壁蛋白预测和功能分析
15
作者 朱德全 王茗悦 +6 位作者 张跃华 姚嘉 韩诚武 卢伟 栾积毅 邢蕾 刘向东 《安徽农业科学》 CAS 2017年第9期129-131,共3页
[目的]运用生物信息学方法预测两歧双歧杆菌PRL2010锚定于细胞壁的蛋白和功能分析,为后续研究该菌与宿主相互作用的分子机制奠定基础。[方法]用Phobius和Signal P 4.0软件对两歧双歧杆菌PRL2010全基因组编码蛋白中细胞壁蛋白进行预测,... [目的]运用生物信息学方法预测两歧双歧杆菌PRL2010锚定于细胞壁的蛋白和功能分析,为后续研究该菌与宿主相互作用的分子机制奠定基础。[方法]用Phobius和Signal P 4.0软件对两歧双歧杆菌PRL2010全基因组编码蛋白中细胞壁蛋白进行预测,同时采用COG(Cluster of Orthologous Groups of proteins)功能数据库对预测的细胞壁蛋白进行功能注释和聚类分析。[结果]两歧双歧杆菌PRL2010基因组1 706个编码蛋白中,28个蛋白含有细胞壁的锚定结构域。细胞壁蛋白功能分析结果显示,28个细胞壁蛋白中,21个蛋白没有功能注释,7个蛋白有功能注释,其中1个蛋白(exo-alpha-sialidase)参与碳水化合物代谢与转运,2个蛋白(bacteriophage endolysin和cell wall-associated protein)参与细胞壁和细胞膜的生物合成,2个蛋白(hypothetical protein BBPR_0440和Subtilisin family peptidase)参与蛋白质翻译后修饰,1个蛋白(beta-n-acetylhexosaminidase Nag Z)参与细胞内运输、分泌和囊泡运输,1个蛋白(metallophosphoesterase)功能只是预测的。[结论]两歧双歧杆菌PRL2010的大多数细胞壁蛋白功能未知,还需要在以后的研究中进一步分析和注释。 展开更多
关键词 两歧双歧杆菌 基因组 细胞壁蛋白 功能
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变异链球菌UA159细胞壁蛋白的预测和功能分析
16
作者 朱德全 郝莹莹 +5 位作者 姚嘉 张跃华 韩诚武 卢伟 栾积毅 刘向东 《安徽农业科学》 CAS 2017年第19期121-122,共2页
[目的]对变异链球菌UA159细胞壁蛋白进行预测和功能分析,为后续研究该菌致病机制奠定基础。[方法]用Phobius和Signal P 4.0软件预测变异链球菌UA159的细胞壁蛋白,并采用COG功能数据库对细胞壁蛋白进行功能注释。[结果]变异链球菌UA159... [目的]对变异链球菌UA159细胞壁蛋白进行预测和功能分析,为后续研究该菌致病机制奠定基础。[方法]用Phobius和Signal P 4.0软件预测变异链球菌UA159的细胞壁蛋白,并采用COG功能数据库对细胞壁蛋白进行功能注释。[结果]变异链球菌UA159共含有22个细胞壁蛋白,其中含有LPx TG锚定基序的有12个,含有Lys M基序的有3个,含有CW基序的有5个,含有GW基序的有1个,含有PG锚定基序的有1个。功能分析结果显示,22个细胞壁蛋白中有18个蛋白没有具体的功能注释,4个蛋白有具体的功能注释,其中beta-lactamase与防御机制功能有关;exo-beta-D-fructosidase与碳水化合物代谢与转运有关;分子伴侣蛋白ATP-dependent protease Clp E与蛋白质翻译后修饰和蛋白质折叠有关;cell wall-associated protein Wap A与细胞壁和细胞膜的生物合成有关。[结论]变异链球菌UA159全基因组大多数的细胞壁蛋白功能未知,需在以后研究中进行进一步的功能注释。 展开更多
关键词 变异链球菌 基因组 细胞壁蛋白 功能
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鸭源粪肠球菌细胞壁蛋白的SDS-PAGE分析
17
作者 韩梅红 谷长勤 《黑龙江畜牧兽医》 CAS 北大核心 2008年第4期72-73,共2页
关键词 SDS-PAGE分析 细胞壁蛋白 粪肠球菌 鸭源 慢性传染病 技术分析 球菌病 分离株
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黄瓜叶片细胞壁蛋白双向电泳体系的建立 被引量:3
18
作者 林梓浩 李玉红 +1 位作者 董从娟 陈鹏 《西北农林科技大学学报(自然科学版)》 CSCD 北大核心 2013年第9期91-97,104,共8页
【目的】建立一套适合黄瓜叶片细胞壁蛋白质组学研究的双向电泳体系,为黄瓜细胞壁蛋白质组学的后续研究奠定基础。【方法】以黄瓜品种“长春密刺”幼苗叶片为材料,比较2种不同提取介质(CaClz和LiCl溶液)对细胞壁蛋白的提取效果,对... 【目的】建立一套适合黄瓜叶片细胞壁蛋白质组学研究的双向电泳体系,为黄瓜细胞壁蛋白质组学的后续研究奠定基础。【方法】以黄瓜品种“长春密刺”幼苗叶片为材料,比较2种不同提取介质(CaClz和LiCl溶液)对细胞壁蛋白的提取效果,对比IPG胶条梯度、裂解液、上样量及等电聚焦程序对黄瓜叶片细胞壁蛋白双向电泳结果的影响。【结果】以0.2mol/LCaCl。和3moI/LLiCl溶液依次提取黄瓜叶片细胞壁蛋白,选用17cmpH3~10NLIPG胶条和裂解液1I(7mol/L尿素、2mol/L硫脲、40g/LCHAPS、10g/LDTT和1mmol/LPMSF),上样量800μg,按聚焦程序I(20℃水化14h,100V30min,250V30min,500V30min,1000V1h,线性升压5h至10000V,10000V聚焦6.5h)聚焦后进行双向电泳分离和考马斯亮蓝G-250染色,可获得重复性好、分辨率高的双向电泳图谱。【结论】建立并优化了适合于黄瓜叶片细胞壁蛋白质组学分析的双向电泳体系。 展开更多
关键词 黄瓜 叶片 细胞壁蛋白 双向电泳 条件优化
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植物细胞壁蛋白质提取方法的改进 被引量:4
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作者 朱畇昊 陈绍宁 +2 位作者 胡秀丽 叶永忠 王伟 《河南农业大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2009年第5期557-559,共3页
以玉米黄化苗的中胚轴为材料,利用盐分级分离细胞壁蛋白质.主要做了2点改进:1)利用超声波破碎植物组织细胞;2)增加苯酚抽提步骤除去可溶性细胞质蛋白、细胞壁蛋白质的回收及脱盐.整个过程不涉及过柱层析和透析步骤,因而缩短了提取时间,... 以玉米黄化苗的中胚轴为材料,利用盐分级分离细胞壁蛋白质.主要做了2点改进:1)利用超声波破碎植物组织细胞;2)增加苯酚抽提步骤除去可溶性细胞质蛋白、细胞壁蛋白质的回收及脱盐.整个过程不涉及过柱层析和透析步骤,因而缩短了提取时间,提高了细胞壁蛋白质的产率. 展开更多
关键词 玉米中胚轴 细胞壁蛋白 苯酚提取 SDS-PAGE
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宁夏枸杞果实细胞壁蛋白适宜提取方法研究 被引量:1
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作者 张琛 杨建军 +5 位作者 王晨 马洁 杨涓 刘根红 郑蕊 郑国琦 《南方农业学报》 CAS CSCD 北大核心 2021年第9期2534-2542,共9页
【目的】探索适合宁夏枸杞果实细胞壁蛋白提取方法,为后续进行宁夏枸杞蛋白质组学研究提供技术支持。【方法】以宁夏枸杞果实为试验材料,采用六步洗脱法去除胞浆蛋白,然后通过定量和电泳比较氯化钙提取法、氯化锂提取法、氯化钙加氯化... 【目的】探索适合宁夏枸杞果实细胞壁蛋白提取方法,为后续进行宁夏枸杞蛋白质组学研究提供技术支持。【方法】以宁夏枸杞果实为试验材料,采用六步洗脱法去除胞浆蛋白,然后通过定量和电泳比较氯化钙提取法、氯化锂提取法、氯化钙加氯化锂结合提取法和苯酚提取法对细胞壁蛋白的提取效果,通过双向电泳与液相色谱对所得细胞壁蛋白进行验证。【结果】六步洗脱法可较好地除去胞浆蛋白与其他干扰物质,4种方法对宁夏枸杞果实细胞壁蛋白的提取效果排序为:氯化钙提取法(272μg/g)>苯酚提取法(261μg/g)>氯化钙加氯化锂结合提取法(217μg/g)>氯化锂提取法(176μg/g)。裂解液I[7 mol/L尿素、2 mol/L硫脲、30 g/L 3-[3-(胆酰胺丙基)二甲氨基]丙磺酸内盐(CHAPS)、50 g/L二硫苏糖醇(DTT)]溶解蛋白质效果更优,蛋白质定量浓度更高、电泳条带更多、更清晰。氯化钙提取所得蛋白质样品双向电泳结果较好,蛋白质点数较多、清晰度和分辨率较高;通过液相色谱可看出氯化钙提取的细胞壁蛋白肽段种类多,且大部分相对丰度较高,并含有低丰度蛋白质。所测蛋白质分类中有细胞壁定位的蛋白质。【结论】氯化钙单独提取蛋白质样品的方法是宁夏枸杞果实细胞壁蛋白提取最优方法,所得蛋白质样品已达到进行蛋白质组学研究的标准。 展开更多
关键词 宁夏枸杞 细胞壁蛋白 提取方法
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