人参皂苷Rb1通过抑制NF-κB p65介导的炎症和氧化应激改善内皮细胞复制性衰老

【目的】本研究旨在探讨人参皂苷Rb1对内皮细胞复制性衰老的作用和机制。【方法】建立人原代脐静脉内皮细胞(HUVEC)复制性衰老模型,根据细胞形态的变化、衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-Gal)染色阳性率和纤溶酶原激活物抑制剂1(PAI-1)的表达水平评估HUVEC衰老;将复制性衰老模型细胞分为0、20、40、80、100μmol/L Rb1组,不同浓度人参皂苷Rb1处理衰老细胞48 h后观察衰老指标SA-β-Gal染色和PAI-1蛋白变化,每组3个复孔;采用Western blot方法检测对照组(CPDL 2的HUVEC)、模型组(衰老细胞组)及人参皂苷Rb1组核因子κB p65(NF-κB p65)的活性,每组3个复孔;检测对照组、模型组及人参皂苷Rb1组细胞培养液中氧化应激和炎症指标,每组3个复孔。【结果】累计细胞群体倍增值(CPDL)16的HUVEC可作为复制性衰老模型;与0μmol/L Rb1组相比,80μmol/L Rb1组SA-β-Gal染色阳性细胞数和PAI-1蛋白表达均明显降低(P <0.001);复制性衰老细胞中超氧化物歧化酶(SOD)的活力明显低于对照组(P <0.001),而丙二醛(MDA)、白细胞介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量及NF-κB p65的活性均明显高于对照组(P <0.001),80μmol/L人参皂苷Rb1处理后SOD活力明显增加(P <0.05),MDA、IL-6、TNF-α的产量明显减少(P <0.05),NF-κB p65活性降低(P <0.001)。【结论】人参皂苷Rb1可通过抑制NF-κB p65介导的氧化应激和炎症反应延缓复制性内皮细胞衰老。

人参三七川芎提取物延缓内皮细胞复制性衰老的机制研究

目的:探讨人参三七川芎提取物对内皮细胞复制性衰老(humanumbilical vein endothelial cells,HUVECs)的影响。方法:体外培养的HUVEC-2C传代至第8代,造成内皮细胞复制性衰老模型。细胞分为4组,8代衰老模型组、维生素E(Vit E)组(50 mg.L-1)、中药高、低(50,20 mg.L-1)剂量组,采用衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色法观察细胞衰老改变,流式细胞仪分析细胞周期,激光共聚焦显微镜观察细胞内活性氧(ROS)含量,硝酸还原酶法检测培养液一氧化氮(NO)和抗超氧阴离子水平,Western-blot法检测各组细胞AngⅡ1型和2型受体(AT1R和AT2R),NAD(P)H氧化酶p47phox的蛋白表达。结果:8代衰老模型组β-gal染色阳性细胞数明显增多,细胞停滞在G0/G1期,激光共聚焦显微镜下ROS荧光强度明显增强,培养液中抗超氧阴离子、NO含量减少,p47phox,AT1R,AT2R蛋白表达上调。给予高、低剂量中药处理后,可明显改善细胞的衰老状态,β-gal染色阳性细胞数减少,G0/G1期细胞减少,G2/M期细胞增加,ROS荧光强度减弱,抗超氧阴离子、NO含量较8代衰老模型组增加,p47phox,AT1R,AT2R蛋白表达下调,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论:人参三七川芎提取物能够延缓内皮细胞复制性衰老,通过活性氧途径下调NADPH氧化酶p47phox的表达,最终使ROS产生减少;同时,中药提取物还能降低衰老内皮细胞AT1R,AT2R的表达,改善内皮功能,这可能是益气活血中药延缓内皮细胞衰老的主要原因之一。

T细胞复制性衰老与老年人应用疫苗的有效性

根据病原菌的不同有时需要疫苗增强机体的细胞免疫水平和／或增强机体的体液免疫水平。中和抗体是传统上评价疫苗有效性的金标准，但现在越来越清楚的了解，很多病原菌，除了体液免疫产生的中和抗体，机体免疫系统中的其他组分可能对机体抵御病原菌起到长期的保护作用。认识到疫苗引起细胞免疫反应甚至比体液免疫更加重要。

不同年龄不同组织中的端粒限制性片断长度测定的意义

目的 探讨端粒长度与高等真核细胞生物中正常体细胞增殖能力间的关系。方法 以不同年龄的正常腮腺组织及正常皮肤表皮组织做标本 ,利用Southern杂交方法测定每份标本的端粒限制性片段长度 ,然后比较同一组织不同年龄的端粒限制性片段长度 ,并进行统计学分析。结果 同一年龄不同组织的端粒限制性片段长度是不同的。皮肤表皮的端粒限制性片段长度平均值随年龄增长而变短 ;腮腺组织的端粒限制性片段长度平均值未随年龄增长而变短。结论 端粒缩短是细胞复制性衰老的主要原因。在不同的组织中 。

衰老相关分泌表型的生物学意义及其在肿瘤和老年病中的作用机制

1细胞衰老的基本概念及其特点正常二倍体细胞在体外连续培养在经历一段快速增殖期,经过一定次数的群体倍增后,进入增殖活力下降期,最后停止有丝分裂,直到培养细胞衰老死亡。将这种正常人体细胞在体外分裂潜能受限制的现象称为细胞衰老,或者更准确地说,细胞复制性衰老(replicative senescence)[1],因为复制性衰老发生时的细胞群体倍增次数取决于细胞供者的种属、年龄和遗体背景,所以对于体外细胞衰老过程的研究有助于阐述体内衰老的基本过程。细胞在外界应急(stress)条件下(癌基因的活化、H2O2以及射线照射等)也可发生早衰(premature senescence)现象[2-3]。早衰与复制性衰老的区别在于复制性衰老伴有端区的缩短,而早衰没有端区缩短。

α-硫辛酸增强人脐带间充质干细胞免疫抑制作用的实验研究

核因子NF-E2相关因子2(nuclear factor erythroid 2-related factor 2, NRF2)是细胞抗氧化应激的关键分子,激活NRF2可以有效逆转干细胞的衰老表型。该文主要研究NRF2激动剂α-硫辛酸(α-lipoic acid, ALA),增强脐带间充质干细胞(umbilical cord mesenchymal stem cells, UC-MSCs)免疫抑制能力。培养第5代和第18代的UC-MSCs,通过β-gal染色、CCK-8及免疫荧光检测细胞增殖能力和衰老表型。Western blot检测衰老相关蛋白p16以及NRF2信号通路相关分子NRF2、Ser40磷酸化的NRF2(pS40-NRF2)蛋白表达。qRT-PCR检测细胞免疫调节抑制因子吲哚胺-2,3-双加氧酶1(indoleamine 2,3-dioxygenase 1, IDO-1) mRNA表达水平的差异,流式细胞术检测UC-MSCs抑制外周血单个核细胞(peripheral blood mononuclear cell, PBMC)增殖能力的差异。结果显示, UC-MSCs在体外长期扩增过程中增殖能力降低并表现出衰老表型;Western blot检测NRF2及pS40-NRF2蛋白表达降低;IFN-γ依赖的IDO-1的mRNA表达水平显著降低,抑制PBMC增殖能力下降。ALA作用后β-gal染色阳性细胞数量减少并促进细胞增殖;IDO-1的mRNA表达增加以及抑制PBMC增殖的能力增强。该研究结果提示, ALA可以延缓UC-MSCs的衰老,并增强其免疫抑制能力。