抗纤灵方对单侧输尿管梗阻大鼠肾组织肝细胞生长因子mRNA及细胞外信号调控蛋白激酶1/2和p38磷酸化的影响

目的:研究中药复方抗纤灵方对单侧输尿管梗阻(unilateral ureteral obstruction,UUO)所致肾纤维化大鼠肝细胞生长因子(hepatocyte growth factor,HGF)基因表达和丝裂原激活的蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)通路的影响,初步探讨其发挥疗效的作用机制。方法:雄性SD大鼠18只随机分为3组,每组6只。用单侧输尿管结扎术建立大鼠肾纤维化模型,抗纤灵灌胃给药2周后检测血肌酐(serum creatinine,Scr)、血尿素氯(blood urea nitrogen,BUN)及梗阻肾羟脯氨酸含量;采用逆转录-多聚酶链反应(reverse transcription polymerase chain reaction,RT-PCR)检测HGF mRNA表达;采用蛋白免疫印迹法检测其受体c-Met蛋白表达及MAPK通路信号分子细胞外信号调控蛋白激酶1/2(extracellular signal-regulated protein kinase 1/2,ERK1/2)和p38磷酸化情况。结果:与假手术组比较.模型组大鼠Scr、BUN及梗阻肾羟脯氧酸含量均显著增高;肾组织HGF mRNA水平显著下调,c-Met蛋白表达显著上调,且ERK1/2和p38明显磷酸化。中药干预后,BUN及羟脯氨酸含量显著降低,肾组织HGF mRNA水平明显上调,ERK1/2和p38磷酸化被显著抑制。结论:抗纤灵方可通过增加肾纤维化保护性因子HGF mRNA的表达及抑制肾组织MAPK通路分子ERK1/2和p38磷酸化以改善肾间质纤维化大鼠肾功能,减少其胶原含量。

雌激素受体β与磷酸化细胞外信号调控蛋白激酶1、2在卵巢癌中的表达及其临床意义

目的:探讨上皮性卵巢癌组织中雌激素受体β(ERβ)与磷酸化细胞外信号调控蛋白激酶1、2(p-ERK1/2)的表达及其与临床病理参数的关系。方法:选取2010年10月至2011年12月青岛大学医学院附属医院经病理证实的上皮性卵巢癌组织标本70例,卵巢良性肿瘤24例,正常卵巢组织24例。采用RT-PCR和免疫组织化学SP法检测上述组织中ERβ和p-ERK1/2的表达。结果:(1)卵巢癌组织中ERβmRNA相对表达水平(0.3764±0.9826)显著低于卵巢良性肿瘤(0.4900±0.3742)及正常卵巢组织(0.4980±0.0434)(P<0.05)。卵巢癌组织中ERβ表达与组织学分型、细胞学分级及淋巴转移有关(P<0.05);ERβ蛋白阳性表达率及其与临床病理特征关系与ERβmRNA一致;(2)ERK1/2 mRNA相对表达水平(0.6007±0.1554、0.6951±1.3694)显著高于卵巢良性肿瘤(0.3575±0.0479、0.5125±0.0411)及正常卵巢组织(0.3027±0.1024、0.5431±0.0811)(P<0.05);ERK1/2表达与细胞学分级、临床分期及腹水有关(P<0.05);p-ERK1/2蛋白阳性表达率及其与临床病理特征与p-ERK1/2 mRNA一致。ERβ蛋白与p-ERK1/2蛋白表达呈负相关(r=-0.282,P<0.05)。结论:ERβ低表达和p-ERK1/2高表达于卵巢癌组织,可能在卵巢癌的发生、发展中有重要作用。

陷窝蛋白1与磷酸化细胞外信号调控蛋白激酶在尖锐湿疣皮损中的表达及意义

目的:探讨陷窝蛋白(caveolin)-1和磷酸化细胞外信号调控蛋白激酶(p-ERK)在尖锐湿疣(CA)组织中的表达及在CA发病中的作用和意义。方法:采用免疫组化En Vision法检测40例CA患者组织(CA组)和12例正常人包皮组织(正常对照组)中caveolin-1和p-ERK的表达和分布,比较二者在2组标本中棘层和基底层的表达差异及相关性。结果:1CA组与正常对照组相比,在棘层中caveolin-1的表达显著下降(P<0.05),p-ERK的表达显著上升(P<0.05),在基底层中caveolin-1和p-ERK的表达均无差异(P>0.05);2Caveolin-1和p-ERK在CA组棘层中表达呈显著负相关(P<0.05)。结论:CA皮损组织棘层中caveolin-1表达下降,p-ERK表达上升,二者的表达成负相关,caveolin-1表达下调可能引起ERK1/2信号通路活化加强,参与CA的发病。

细胞外信号调控激酶在邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯诱导的尿道下裂大鼠中的表达

目的在邻苯二甲酸二(2-乙基)己酯[di-(2-ethylhexyl)phthalate,DEHP]诱导的先天性尿道下裂大鼠模型上,研究细胞外信号调控激酶(extracellular signal-regulated kinase,ERK)1/2在DEHP暴露后的胎鼠阴茎中的表达变化,探讨尿道下裂发生机制。方法将SD孕鼠完全随机分为DEHP组[750 mg/(kg·d)DEHP+1.5 mL大豆油]和对照组(1.5 mL大豆油),每组20只,2组分别于母鼠怀孕天数(GD)第12～19天持续经口灌注给药。2组分别取10只孕鼠让其正常分娩,并计数每窝产雄性活仔鼠数量;出生后1、3、7、14、21、30日龄时称取雄性仔鼠体质量并测量肛门生殖器距离(anogenital distance,AGD);30日龄时逐个检查尿道下裂的发生情况。余孕鼠在GD20行剖宫产取雄性胎鼠,应用实时定量聚合酶链反应(qPCR)和免疫组化方法分别检测胎鼠阴茎组织中ERK1/2 mRNA和蛋白表达水平。结果 DEHP组孕期暴露诱导的尿道下裂发生率为28.2%。DEHP组每窝产雄性活仔鼠数量、各日龄雄性仔鼠体质量及AGD较对照组明显减少或缩短(P<0.01)。与对照组比较,DEHP组胎鼠阴茎组织中ERK1和ERK2 mRNA表达水平明显增加(P<0.05);DEHP组ERK1/2磷酸化蛋白表达水平有增加趋势。结论 DEHP诱导先天性尿道下裂发生可能与胎鼠阴茎组织中ERK信号的过度表达有关。

高迁移率族蛋白1通过调控Erk1/2、Cyclin D1及MMP14蛋白促进肝内胆管细胞癌进展

目的探讨高迁移率族蛋白1(high mobility group box1, HMGB1)在肝内胆管细胞癌(intrahepatic cholangiocarcinoma,ICC)进展中的作用及机制。方法运用免疫组化法检测75例ICC癌组织石蜡标本中HMGB1蛋白表达情况,分析其表达水平与临床病理特征关系;在体外,外源性HMGB1处理细胞及siRNA抑制HMGB1表达后运用CCK-8、细胞迁移、侵袭试验研究HMGB1对肝内胆管癌细胞恶性生物学行为的影响;运用western-blot检测细胞内蛋白。结果免疫组化检测结果显示54.67%(41/75)的肝内胆管细胞癌组织过表达HMGB1蛋白,HMGB1过表达与肿瘤分化程度(P=0.019)、临床分期(P=0.017)及血管侵犯(P=0.033)有明显正相关性。CCK-8结果显示HMGB1可以促进肝内胆管癌细胞HuCCT-1的增殖(P<0.05)。细胞迁移试验显示外源性HMGB1处理后细胞迁移数目增加到空白组的(1.85±0.08)倍(P<0.01);同时,siRNA抑制细胞HMGB1表达后细胞迁移数目减弱到空白组的(0.48±0.04)倍(P<0.01)。同样地,细胞侵袭试验结果显示外源性HMGB1处理后的HuCCT-1细胞穿过基质胶的数目增加到空白组的(1.46±0.05)倍(P<0.01);siRNA抑制细胞HMGB1表达后细胞侵袭数目减弱到空白组的(0.67±0.07)倍(P<0.01)。Western blot结果显示外源性HMGB1处理HuCCT-1细胞后细胞内Erk1/2、Cyclin D1及MMP14蛋白表达明显增加;siRNA沉默HMGB1表达后细胞内MMP14蛋白表达减弱。结论 HMGB1在肝内胆管细胞癌的进展中发挥作用,其机制可能与调控Erk1/2、Cyclin D1及MMP14蛋白相关。

MicroRNA-100-5p通过成纤维生长因子21靶向调控羊驼黑素细胞的黑色素生成

目前已知许多microRNA(miRNA)可以调节动物毛色及黑色素生成,但miR-100-5p调节黑色素的分子机制尚未完全了解。成纤维细胞生长因子21(fibroblast growth factor 21,FGF21)是miR-100-5p的预测靶基因,萤光素酶报告基因检测结果表明,miR-100-5p通过与FGF21的3′非翻译区(3′UTR)结合来调节FGF21。在本研究中,用miR-100-5p过表达质粒和阴性对照质粒转染羊驼黑素细胞,结果表明,miR-100-5p过表达显著降低FGF21的mRNA和蛋白质表达。同时,抑制细胞外调控MAP激酶(extracellular regulated MAP kinase,ERK)信号通路,上调小眼畸形相关转录因子(microphthalmia-associated transcription factor,MITF)、酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)和酪氨酸酶相关蛋白2(tyrosinase-related protein 2,TYRP2),从而增加了黑色素的产生。结果表明,miR-100-5p可能通过ERK信号通路靶向FGF21,从而调节黑色素生成。

微RNA-219通过ERK1/2通路改善炎症所致新生SD大鼠脑内少突胶质细胞成熟障碍

目的建立新生SD大鼠炎症模型,初步探究微RNA-219(miR-219)促进少突胶质细胞成熟的机制。方法将60只SD大鼠随机分为对照组、脂多糖(LPS)组(LPS 0.15 mg/kg腹腔注射)、LPS+miR-219 agomir组(LPS 0.15 mg/kg腹腔注射,miR-219 agomir 3μL侧脑室注射)、miR-219 antagomir组(miR-219 antagomir 3μL侧脑室注射)和LPS+miR-219 agomir+U0126组(LPS 0.15 mg/kg腹腔注射,miR-219 agomir 3μL侧脑室注射,U012630 mg/kg腹腔注射)。于大鼠出生第7天和第14天处死后取脑组织,采用qPCR检测脑组织中miR-219及炎症因子IL-1β、TNF-α的mRNA表达水平,蛋白质印迹法检测少突胶质细胞成熟标志物髓鞘碱性磷脂蛋白(MBP)和ERK 1/2表达水平,免疫荧光检测大鼠胼胝体少突胶质细胞的数量。结果与对照组相比,大鼠腹腔注射LPS后脑组织内IL-1β、TNF-αmRNA表达均升高(P<0.01),miR-219表达减少(P<0.01)。与LPS组相比,在用miR-219 agomir提升大鼠脑内miR-219的表达后MBP和ERK 1/2蛋白表达均增加(P<0.01),胼胝体少突胶质细胞数量增加。与对照组相比,在用miR-219 antagomir降低大鼠脑内miR-219的表达后,MBP和ERK 1/2蛋白表达均减少(P<0.01),胼胝体少突胶质细胞数量减少。用ERK 1/2通路抑制剂U0126处理后,miR-219对少突胶质细胞的促成熟作用受到了抑制(P<0.01)。结论在大鼠脑内miR-219对少突胶质细胞的促成熟作用是通过ERK 1/2通路发挥作用的。

反义FAK寡核苷酸抑制FAK-ERK1/2介导的平滑肌细胞迁移和粘附

目的 研究FAK ERK1 2信号通路在平滑肌细胞迁移和粘附中的作用及FAK反义寡核苷酸对其的调控作用。方法 通过纤粘连蛋白 (fibronectin ,FN)诱导平滑肌细胞迁移和粘附 ,以免疫沉淀和Westernblot方法检测粘着斑激酶 (focaladhesionkinase,FAK)和细胞外调控激酶 1 2 (extracellularregulationkinase ,ERK1 2 )及其磷酸化的表达量。将FAK反义寡核苷酸 (antisenseoligodeoxynucleotides,ODNs)经脂质体转染细胞 ,观察转染后反义ODN对FAK和ERK磷酸化、细胞粘附和迁移的影响。结果 FN在有效诱导平滑肌细胞迁移和粘附时FAK和ERK1 2也呈明显表达 ,FN2 0 μg·mL- 1 可使磷酸化处于较高表达量。脂质体可有效地介导ODNs转染。转染后FAK及ERK1 2磷酸化表达量明显减少。结论 由活化的FAK和ERK1 2介导的信号转导促进了细胞外基质诱导的SMCs迁移和增殖 ,反义FAKODNs可有效地对此进行抑制。

大鼠神经干细胞中MAPKK/MEK-MAPK/ERK信号转导通路的实验研究

目的应用丝裂原激活的蛋白激酶激酶(MAPKK/MEK)特异性阻滞剂PD98059孵育大鼠神经干细胞(NSC),探讨MAPKK/MEK-MAPK/ERK信号通路在NSC中的作用。方法体外分离、培养大鼠NSC,应用不同浓度的PD98059孵育NSC后进行WTS-8、Nestin,BrdU、β-tubulin-Ⅲ、Western blot检测。结果PD98059对NSC的存活、增殖和分化的影响呈剂量依赖性,在PD98059较高浓度时NSC的存活率明显下降(P<0.05),BrdU和β-tubulin-Ⅲ的阳性细胞数明显少于正常对照组(P<0.05)。PD98059阻断ERK表达的作用呈剂量依赖性。结论MAPKK/MEK-MAPK/ERK信号通路对大鼠NSC的存活、增殖、分化起重要作用。

肾上腺素α_2受体调控MAPK通路对VILI大鼠肺部炎症的影响

目的:研究肾上腺素α_2受体调控的炎症信号传导MAPK通路对呼吸机所致肺损伤大鼠肺部炎症反应的影响。方法:30只SPF级雄性SD大鼠随机均分成5组:常规潮气量通气组(C,8 mL/kg,呼吸频率90次/min),大潮气量通气组(H,20 mL/kg,呼吸频率50次/min),大潮气量通气盐酸右旋美托咪啶处理组(D,参数设置同H组),大潮气量通气育亨宾处理组(Y,参数设置同H组),大潮气量通气+盐酸右旋美托咪啶+育亨宾处理组(D+Y,参数设置同H组)。观察肺部病理改变,ELISA法检测支气管肺泡灌洗液(BALF)中的肿瘤坏死因子α、IL-1β、IL-6和IL-10,Western Blot方法检测各组肺组织中促分裂原活化蛋白激酶及其和磷酸化水平。结果:和C组相比,H组、D组、Y组和D+Y组大鼠肺组织病理改变,BALF中的TNF-α、IL-1β、IL-6、IL-10和MIP-2,以及肺部磷酸化ERK1/2均有明显增高。H组、Y组和D+Y组相比,D组肺组织和BALF中各项指标均显著降低。结论:α_2受体激动剂能通过调控MAPK通路显著减轻VILI所造成的肺部炎症反应,提示α_2受体在VILI所造成的肺部炎症反应中起到重要作用。

吉非替尼对非小细胞肺癌细胞PC-9增殖的抑制作用及其机制

目的探讨吉非替尼对非小细胞肺癌细胞PC-9增殖的抑制作用及其机制。方法将生长状态良好的PC-9细胞随机分为四组,低剂量组、中剂量组、高剂量组分别给予1、10、100μmol/L吉非替尼干预8 h,对照组给予生理盐水。采用MTT法检测各组细胞增殖情况,实时荧光定量PCR法检测细胞凋亡相关因子Bax、Bcl2、Caspase3、Caspase9 mRNA及MEK/ERK信号传导通路相关因子Ras、Raf、MEK、ERK1/2 mRNA表达,免疫印迹法检测细胞凋亡相关蛋白Bax、Bcl2、Caspase3和Caspase9及通路相关蛋白Ras、Raf、MEK及ERK1/2表达。结果吉非替尼能够抑制PC-9细胞增殖,且其抑制率随着作用时间延长和作用浓度升高而提高(P均<0.01);与对照组比较,低、中、高剂量组Ras、Raf、MEK、ERK1/2、Bcl2 mRNA及蛋白表达明显降低,Bax、Caspase3、Caspase9 mRNA及蛋白表达明显升高,且低、中、高剂量组组间两两比较均有统计学差异(P均<0.01)。结论吉非替尼可抑制PC-9细胞增殖、促进其凋亡;其作用机制可能与抑制MEK/ERK信号转导通路的激活有关。

重组人生长激素对THP1单核细胞中活化蛋白1转录因子的影响

目的研究重组人生长激素(rhGH)对THP1单核细胞中活化蛋白1(AP-1)转录因子的影响。方法应用荧光素酶报告基因和凝胶电泳迁移率实验检测AP-1在rhGH诱导的单核细胞中的活化程度,用蛋白免疫印迹实验检测细胞外信号调控激酶(ERK)和磷酸化的ERK(p-ERK)的表达。结果与空白对照组比较,LPS组和rhGH组AP-1的转录活性升高(P<0.01);rhGH+脂多糖(LPS)组AP-1的转录活性较LPS组有明显下降(P<0.01)。同时,rhGH和LPS的预处理对ERK无显著影响,但均能促进p-ERK蛋白的表达,rhGH的预处理则能减弱LPS刺激p-ERK蛋白表达。结论 rhGH可通过双向调节ERK的磷酸化而影响THP-1单核细胞中AP-1的转录活性。

RhoA/ROCK/ERK-MAPK通路在高磷环境调节内皮细胞凋亡的机制

目的研究高磷环境下内皮细胞凋亡的可能调控机制和信号通路。方法人脐静脉内皮细胞(human umbilical vein endothelial cells,HUVECs)在正常磷(1.0 mmol/L)、高磷(3.0 mmol/L)、正常磷+辛伐他汀(simvastatin,SV,1.0 mmol/L+SV)及高磷+SV(3.0 mmol/L+SV)培养基中培养24 h,Western Blot评价Ras同源物基因家族成员A(Ras homolog gene family,member A,RhoA),Rho相关卷曲螺旋形成蛋白激酶1/2(rho-associated coiled coil forming protein kinase 1/2,ROCK1/2),细胞外信号调控激酶-丝裂原活化蛋白激酶(extracellular signal-regulated kinase-mitogen activated protein kinase,ERK-MAPK)、磷酸化细胞外信号调控激酶-丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylated-ERK-MAPK,p-ERK-MAPK)、p38丝裂原活化蛋白激酶(p38-Mitogen Activated Protein Kinase,p38-MAPK)、磷酸化p38-丝裂原活化蛋白激酶(phosphorylated-p38-MAPK,p-p38-MAPK)、以及精氨酸酶1(arginase1,ARG1)和一氧化氮合成酶(nitric oxide synthase,NOS)蛋白的表达,比色法和膜联蛋白V/碘化丙啶双染法(Annexin V-FITC/propidium iodide,Annexin V-FITC/PI)检测ARG活性和细胞凋亡率。结果高磷组RhoA,ROCK1/2,p-ERK MAPK,ARG1表达均上调,ARG活性升高,NOS表达下调,细胞凋亡增加;RhoA抑制剂SV能抑制高磷环境下p-ERK MAPK的活化和ARG1的表达,降低ARG1活性,促进NOS表达,减少内皮细胞凋亡。结论高磷环境HUVECs可通过RhoA/ROCK途径激活p-ERK MAPK的表达,增加ARG活性,抑制NOS表达,引起内皮细胞凋亡;SV可以通过抑制RhoA/ROCK/ERK-MAPK通路,改善内皮细胞凋亡。

细胞外信号调控激酶信号通路在钛颗粒诱导假体周围骨溶解的实验研究

目的探讨细胞外信号调控激酶(ERK)信号通路在钛颗粒诱导的小鼠气囊植骨模型中炎性骨溶解的作用。方法选取45只雌性SPF级BALB/c小鼠制备气囊植骨模型,将制备好背部气囊并植入供体小鼠颅骨骨片的45只小鼠随机分为三组(每组15只):空白对照组(气囊内注入PBS,腹腔注射生理盐水)、模型组(气囊内注射钛颗粒悬液,腹腔注射生理盐水)和钛颗粒+ERK抑制剂组(气囊内注射钛颗粒悬液,腹腔注射ERK抑制剂PD98059),2周后麻醉处死小鼠取出植入的颅骨及气囊壁组织。观察并评估植入颅骨的形态和颅骨中破骨细胞的形成情况;检测一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-1β、IL-6、核因子-κB受体活化因子(RANK)和核因子κB受体活化因子配体(RANKL)的表达量。结果与空白对照组比较,模型组植入气囊的颅骨骨块破坏严重,破骨阳性细胞显著增多,NO、TNF-α、IL-1β和IL-6等相关细胞因子的水平均显著增加(P<0.05),RANK、RANKL mRNA的相对表达量显著提高(P<0.05);与模型组比较,钛颗粒+ERK抑制剂组植入颅骨破坏程度减轻,破骨阳性细胞显著减少,NO、TNF-α、IL-1β、IL-6的水平均显著降低(P<0.05),RANK、RANKL mRNA的相对表达量显著降低(P<0.05)。结论ERK信号通路抑制剂PD98059能显著减轻磨损颗粒诱导的炎性骨溶解,该作用可能是通过对RANK/RANKL信号通路的调节而实现。

加减知柏地黄丸对特发性中枢性性早熟小鼠ERK1/2、OSX表达的影响

目的探讨加减知柏地黄丸对特发性中枢性性早熟(ICPP)小鼠细胞外信号调控激酶(ERK1/2)、成骨细胞特异性转录因子Osterix(OSX)表达的影响。方法将30只18日龄雌性SPF级C57小鼠随机分为正常组、模型组、加减知柏地黄丸高剂量组、加减知柏地黄丸低剂量组、甲地孕酮组和抑那通组,每组5只。在小鼠20日龄时,正常组给予生理盐水腹腔注射,其余组小鼠腹腔注射瘦素2 mg/kg建立ICPP模型。同时加减知柏地黄丸高、低剂量组分别给予加减知柏地黄丸水溶液3.9 g/mL、1.95 g/mL灌胃,甲地孕酮组给予甲地孕酮水溶液0.13 mg/mL灌胃,正常组和模型组给予等量蒸馏水灌胃,均1次/d,连续7 d;抑那通组分别于20日龄、22日龄和24日龄时依次给予抑那通1.574 mg/kg、1.180 mg/kg、1.180 mg/kg右后肢处肌注。实验结束后,qRT-PCR法检测股骨组织中ERK1、ERK2和OSX mRNA表达情况,Western blot法检测股骨组织中ERK1、ERK2表达情况,ELISA法检测血清骨生化指标[胰岛素样生长因子-1(IGF-1)、碱性磷酸酶(ALP)、鸟氨酸氨基甲酰转移酶(OCT)、N端中段骨钙素(N-MID)]水平。结果模型组股骨组织中ERK1、ERK2、OSX mRNA表达量和ERK1、ERK2蛋白表达量及血清IGF-1、ALP、OCT、N-MID水平均明显高于正常组(P均<0.05),加减知柏地黄丸高剂量组、加减知柏地黄丸低剂量组、甲地孕酮组股骨组织中ERK1、ERK2、OSX mRNA表达量和ERK1、ERK2蛋白表达量及血清IGF-1、ALP、OCT、N-MID水平均明显低于模型组(P均<0.05)。结论加减知柏地黄丸能通过抑制ERK1/2表达,抑制成骨细胞生长和分化成熟,从而延缓ICPP小鼠骨骺提前闭合。

子宫内膜癌中ERK1/2信号转导通路与雌、孕激素受体的相关性

目的检测丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)信号通路中细胞外信号调控激酶1/2(ERK1/2)在子宫内膜癌中的表达,探讨其与雌激素受体(ER)和孕激素受体(PR)表达间的相关性。方法用免疫组化方法(SP法)检测30例子宫内膜癌石蜡标本中ERK1/2以及ER和PR的表达;同法检测20例正常子宫内膜、13例增生过长子宫内膜石蜡标本中ERK1/2的表达;对标本的染色情况做半定量分析。结果ERK1/2在正常子宫内膜、增生过长子宫内膜和子宫内膜癌中的表达水平比较,差异无统计学意义(P>0.05)。磷酸化的ERK1/2(p-ERK1/2)在ER阳性与ER阴性子宫内膜癌中的高表达率比较(76.5%vs30.8%),差异有统计学意义(P<0.05);且p-ERK1/2的高表达率与ER的表达水平呈正相关(r=0.457,P<0.05);p-ERK1/2的高表达率与PR的表达水平无相关性(P>0.05)。结论ERK1/2信号转导通路与子宫内膜恶变过程无相关性,其活化与ER表达水平呈正相关。ER可能通过ERK1/2信号通路发挥其在子宫内膜癌中的调控作用。

盐酸右旋美托咪啶对呼吸机所致肺损伤大鼠ERK1/2激活的影响

目的研究盐酸右旋美托咪啶对呼吸机所致肺损伤大鼠肺部炎症损伤和细胞外信号调控蛋白激酶磷酸化的影响。方法 36只SPF级雄性SD大鼠随机均分成3组:常规潮气量通气组(C组,8ml/kg,呼吸频率90次/min),大潮气量通气组(H组,20ml/kg,呼吸频率50次/min),大潮气量通气盐酸右旋美托咪啶处理组(D组,20ml/kg,呼吸频率50次/min),每组12只。各组通气时间均为4h,呼吸末气道压力均为0。D组大鼠在机械通气的同时接受盐酸右旋美托咪啶溶液静脉泵入,泵入速度为0.5μg/(kg·h)。实验结束处死大鼠,收集支气管肺泡灌洗液和肺组织标本,光镜观察肺病理改变,ELISA法检测BALF中肿瘤坏死因子α,Westernblotting检测各组肺组织中ERK1/2、磷酸化ERK1/2(p-ERK1/2)水平。结果与C组相比,H组和D组肺部有明显病理改变,且干湿重比、总蛋白、白细胞计数、髓过氧化物酶、TNF-α和p-ERK1/2等指标均显著高于C组。与H组相比,D组肺部病理改变明显减轻,ERK1/2磷酸化水平和其他各项指标均显著降低。结论盐酸右旋美托咪啶静脉输注能显著减轻呼吸机所造成的肺损伤,减少肺部炎症因子的产生,并抑制ERK1/2激活。

子宫内膜样腺癌组织中p-ERK1/2的表达变化及意义

目的探讨细胞外信号调节激酶(p-ERK1/2)在子宫内膜样腺癌组织中的表达变化及其临床意义。方法用免疫组化SP法检测22份子宫内膜样腺癌(EEC)组织、20份非典型增生子宫内膜(EAH)癌组织和20份正常子宫内膜组织中p-ERK1/2的表达,并探讨其与临床病理参数的关系。结果 p-ERK1/2蛋白在正常子宫内膜组织、EAH组织和EEC组织中的表达率分别为30.0%(6/20)、65.0%(13/20)、45.5%(10/22)。与正常子宫内膜组织相比,EAH组织p-ERK1/2阳性表达率升高(P=0.030)。EEC组织中p-ERK1/2阳性表达率与正常子宫内膜组织及EAH组织比较均无统计学差异(P分别为0.306,0.207)。p-ERK1/2表达与临床病理参数无关(P均>0.05)。结论 EEC组织中p-ERK1/2表达未见升高,其过量表达与子宫内膜由正常到非典型增生相关,可能不直接参与EEC癌变过程。