细胞外基质金属蛋白酶诱导因子、基质金属蛋白酶-9和赖氨酸去甲基化酶6B在浸润性乳腺癌组织中的表达及其病理诊断价值

目的探讨浸润性乳腺癌组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)和赖氨酸去甲基化酶6B(KDM6B)蛋白的表达及其与临床病理特征的关系,并分析3种蛋白的相关性及其在浸润性乳腺癌病理诊断中的价值。方法选择2014年1月至2017年12月河南中医药大学第五临床医学院/郑州人民医院病理科保存的124例浸润性乳腺癌患者的手术切除活检标本为研究对象,另选取同期保存的低级别导管内癌组织标本20例、高级别导管内癌组织标本27例、距离浸润性乳腺癌>1 cm处癌旁组织标本22例作为对照组。采用免疫组织化学法检测乳腺癌旁组织、低级别导管内癌、高级别导管内癌及浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的表达。分析EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的相对表达量与浸润性乳腺癌临床病理特征的关系;采用Spearman法分析浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN、MMP-9、KDM6B蛋白的相关性,受试者操作特征(ROC)曲线评估EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白对浸润性乳腺癌的诊断价值。结果高级别导管内癌和浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量显著高于乳腺癌旁组织和低级别导管内癌组织(P<0.05),KDM6B蛋白的相对表达量显著低于癌旁组织和低级别导管内癌组织(P<0.05);浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量显著高于高级别导管内癌组织(P<0.05),KDM6B蛋白的相对表达量显著低于高级别导管内癌组织(P<0.05);癌旁组织与低级别导管内癌组织中EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的相对表达量比较差异无统计学意义(P>0.05)。EMMPRIN、KDM6B蛋白相对表达量与浸润性乳腺癌患者的年龄、肿瘤部位和肿瘤直径无关(P>0.05),MMP-9蛋白相对表达量与浸润性乳腺癌患者的年龄和肿瘤部位无关(P>0.05)。EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的相对表达量与浸润性乳腺癌的世界卫生组织(WHO)分级、淋巴结转移、TNM分期有关(P<0.05),MMP-9蛋白的相对表达量与浸润性乳腺癌的肿瘤直径有关(P<0.05)。浸润性乳腺癌WHO分级Ⅰ级、Ⅱ级、Ⅲ级中,EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量依次升高,KDM6B蛋白的相对表达量依次降低(P<0.05);浸润性乳腺癌淋巴结有转移组EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量显著高于无淋巴结转移组(P<0.05),KDM6B蛋白的相对表达量显著低于无淋巴结转移组(P<0.05);TNM分期Ⅲ~Ⅳ期组EMMPRIN、MMP-9蛋白的相对表达量显著高于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05),KDM6B蛋白的相对表达量显著低于Ⅰ~Ⅱ期组(P<0.05)。在浸润性乳腺癌肿瘤直径≤2 cm、2~5 cm、>5 cm组中MMP-9蛋白的相对表达量依次升高(P<0.05)。Spearman相关性分析显示,浸润性乳腺癌组织中EMMPRIN与MMP-9蛋白的表达呈显著正相关(r=0.990,P=0.000),EMMPRIN与KDM6B蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.606,P=0.000),MMP-9与KDM6B蛋白的表达呈显著负相关(r=-0.612,P=0.000)。ROC曲线分析显示,EMMPRIN蛋白诊断浸润性乳腺癌的曲线下面积(AUC)为0.875[95%置信区间(CI):0.823~0.926,P<0.05],最佳界值为10.043,敏感度为79.0%,特异度为76.8%;MMP-9蛋白诊断浸润性乳腺癌的AUC为0.863(95%CI:0.808~0.917,P<0.05),最佳界值为10.070,敏感度为74.2%,特异度为76.8%;KDM6B蛋白诊断浸润性乳腺癌的AUC为0.267(95%CI:0.196~0.338,P<0.05),最佳界值为11.003,敏感度为71.0%,特异度为98.6%。结论EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白与浸润性乳腺癌的发生发展有关,检测EMMPRIN、MMP-9和KDM6B蛋白的表达有助于浸润性乳腺癌的病理诊断及其浸润转移的临床判断。

细胞外基质金属蛋白酶诱导子突变的血管平滑肌细胞的构建及其功能研究

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导子(EMMPRIN)c.889C>A点突变对血管平滑肌细胞增殖、迁移及炎症反应等功能的影响。方法利用CRISPR/Cas9技术构建EMMPRIN c.889C>A点突变血管平滑肌细胞系;Real-time qPCR和Western blot实验检测EMMPRIN的表达水平;CCK-8实验检测细胞增殖活性;Transwell实验检测细胞迁移能力;酶联免疫吸附法检测白细胞介素6(IL-6)、巨噬细胞迁移因子1(MCP-1)及白细胞介素1β(IL-1β)的分泌。结果与野生型细胞相比,c.889C>A突变细胞中EMMPRIN的表达水平无统计学意义(t=0.732,P>0.05),细胞增殖活性差异无统计学意义(P>0.05),细胞迁移能力下降,差异有统计学意义(t=5.121,P<0.05),转化生长因子β(TGF-β)诱导的炎性细胞因子IL-6、MCP-1及IL-1β分泌能力下降,差异有统计学意义(t=9.371、5.690、6.192,P<0.05)。结论EMMPRIN c.889C>A突变不影响EMMPRIN蛋白表达及血管平滑肌细胞增殖,但可以抑制血管平滑肌细胞迁移及炎症细胞因子分泌。

宫颈癌中细胞外基质金属蛋白酶诱导剂的表达及临床意义探讨

目的检测细胞外基质金属蛋白酶诱导剂(EMMPRIN)在宫颈癌中的表达及与金属蛋白酶-2(MMP-2),金属蛋白酶-9(MMP-9)的关系,以探讨EMMPRIN在宫颈癌浸润转移中的作用。方法应用免疫组化的方法检测110例早中期宫颈癌标本中EMMPRIN、MMP-2及MMP-9的表达,用卡方检验和相关分析了解其与临床病理参数的关系。结果 EMMPRIN、MMP-2及MMP-9表达于宫颈癌组织中。EMMPRIN、MMP-2及MMP-9在宫颈癌中的表达分别为70.9%(78例)、62.7%(69例)、及52.7%(58例)。EMMPRIN的阳性表达分别和世界妇产科联盟(FIGO)分期(P=0.001),病理学类型(P<0.001)、分化程度相关(P<0.001),呈现显著性相关;但与年龄、肿瘤大小、宫旁浸润、淋巴结转移、肿瘤复发以及生存率无显著性相关。EMMPRIN在宫颈癌中分布表达和MMP-2(P<0.001,相关系数r=0.583)及MMP-9(P<0.001,相关系数r=0.556)呈现正相关性。结论宫颈癌EMMPRIN的表达和MMP-2及MMP-9呈相关性,提示EMMPRIN在肿瘤的局部转移浸润及预后的相关性中起着举足轻重的作用。

姜黄素对人视网膜色素上皮细胞中基质金属蛋白酶、纤维粘连蛋白1表达的影响观察

目的观察姜黄素对人视网膜色素上皮(RPE)细胞中基质金属蛋白酶(MMP)、纤维粘连蛋白1(FN1)表达的影响。方法将人RPE细胞分成2组,姜黄素组加入0.5×10^(-5)mol/L的姜黄素,对照组不加姜黄素,两组细胞继续孵育48 h后,采用实时荧光定量PCR法检测细胞中MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、FN1 mRNA,采用Western blotting法检测细胞中MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、FN1蛋白。结果姜黄素组细胞中MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、FN1 mRNA相对表达量分别为0.41±0.14、5.02±0.22、1.09±0.21、0.47±0.28、2.50±0.21,对照组分别为5.10±0.38、6.43±0.15、0.27±0.19、1.82±0.12、6.83±0.18,两组相比,P均<0.05。姜黄素组细胞中MMP1、MMP2、MMP3、MMP9、FN1蛋白相对表达量分别为6155.33±124.01、6208.00±157.33、8126.33±235.78、3541.67±130.16、3684.33±90.22,对照组分别为16207.33±210.19、8053.33±61.98、2543.67±122.20、9477.33±108.68、8218.00±239.86,两组相比,P均<0.05。结论姜黄素可上调人RPE细胞中MMP1、MMP2、MMP9、FN1的表达,下调MMP3的表达。

铁离子螯合剂去铁胺对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达的影响

目的:观察铁负荷过低对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)表达的影响。方法:体外诱导THP-1单核细胞转化为巨噬细胞、泡沫细胞。实验细胞分为3组:对照组(正常巨噬细胞、泡沫细胞)、铁离子螯合剂去铁胺(DFO)刺激组、柠檬酸铁和DFO共刺激组。应用RT-PCR和Western blot测定巨噬细胞、泡沫细胞中EMMPRIN基因和蛋白的表达。用Western blot测定MMP-9蛋白的表达。用明胶酶谱法测定MMP-9的活性。结果:DFO刺激组中EMMPRIN基因及蛋白的水平、MMP-9蛋白表达的水平及活性均明显高于对照组(P<0.05,P<0.01)。柠檬酸铁逆转了DFO对EMMPRIN表达的上调作用。结论:铁负荷过低可增加巨噬细胞及泡沫细胞中炎症因子的表达及活性,可能会促进心血管事件的发生。

铁离子螯合剂去铁胺上调巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达的机制探讨

目的:探讨铁负荷过低上调巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)表达的机制。研究促分裂原活化的蛋白激酶(MAPK)信号通路、视黄醛x受体(RXR)及过氧化物酶体增殖剂活化受体γ(PPARγ)在此过程中的作用。方法:将巨噬细胞和泡沫细胞给予MAPK(p38,ERK1/2)信号通路抑制剂及RXR的天然配体预处理,加入或不加入去铁胺继续培养24 h,用Western blot测定细胞中EMMPRIN蛋白的表达。于巨噬细胞和泡沫细胞中加入铁离子鳌合剂去铁胺刺激,用Western blot检测MAPK(p38,ERK1/2)的磷酸化及PPARγ的水平。结果:p38 MAPK通路抑制剂及RXR和配体在本身不影响EMMPRIN表达的同时,可抑制去铁胺对EMM-PRIN表达的上调。去铁胺可促进p38 MAPK磷酸化,但不影响PPARγ蛋白表达。结论:p38 MAPK参与了铁负荷过低上调巨噬细胞和泡沫细胞中EMMPRIN表达的过程;RXR可能参与了该过程。

骨髓增殖性肿瘤患者血清金属蛋白酶抑制剂-1、基质金属蛋白酶-9、血管内皮生长因子与骨髓纤维化程度的相关性

目的探讨骨髓增殖性肿瘤(MPN)患者血清血管内皮生长因子(VEGF)、基质金属蛋白酶-9(MMP-9)及金属蛋白酶抑制剂-1(TIMP-1)与骨髓纤维化(MF)分级的关系。方法选择90例费城染色体阴性(Ph-)MPN初诊患者为MPN组。根据世界卫生组织(WHO)2016年骨髓纤维化分级标准将MPN患者分为纤维化前期或早期组54例和明显纤维化期组36例;另选取健康志愿者50例作为对照组。采用酶联免疫吸附实验检测血清VEGF、MMP-9、TIMP-1水平并计算TIMP-1与MMP-9比值(TIMP-1/MMP-9)。采用Spearman秩相关检验分析VEGF、MMP-9、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9与MF分级的相关性。绘制受试者工作特征(ROC)曲线分析各指标单独或联合诊断MPN或区分MF分级的预测价值。结果与对照组相比,MPN组血清VEGF、MMP-9和TIMP-1均升高,差异有统计学意义(P<0,05)。VEGF、MMP-9、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9诊断MPN的曲线下面积(AUC)分别为0.834、0.745、0.923、0.618;VEGF、MMP-9和TIMP-1联合诊断MPN的AUC为0.960;当最佳截断值为0.627时,敏感度为85.56%,特异度为92.00%。与纤维化前期或早期组相比,明显纤维化期组患者血清VEGF、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9均升高,差异有统计学意义(P<0.05)。Spearman相关性分析结果显示,VEGF(r=0.378,P=0.001)、TIMP-1(r=0.512,P<0.001)、TIMP-1/MMP-9(r=0.353,P=0.001)与MPN患者MF分级呈正相关(P<0.05)。ROC曲线分析显示,VEGF、MMP-9、TIMP-1、TIMP-1/MMP-9区分纤维化前期或早期患者和明显纤维化期患者的AUC分别为0.723、0.523、0.802、0.708;VEGF、TIMP-1和TIMP-1/MMP-9联合区分纤维化前期或早期患者和明显纤维化期患者的AUC为0.838;当最佳截断值为0.530时,敏感度为72.22%,特异度为85.19%。结论血清VEGF、TIMP-1和TIMP-1/MMP-9均可反映MPN患者MF进展,各指标联合检测可预测MPN患者MF程度。

牵张应力对人牙周膜成纤维细胞细胞外金属基质蛋白酶诱导剂表达的影响及相关信号通路的研究

目的研究人牙周膜成纤维细胞(PDLFs)在循环牵张力下细胞外金属基质蛋白酶诱导剂(EMMPRIN)(CD147/basgin)的表达变化以及对血管内皮生长因子(VEGF)表达的影响,推测EMMPRIN在应力作用下牙周组织改建过程中的可能作用。方法采用荧光免疫组织化学法检测EMMPRIN和VEGF在PDLFs中的表达定位;使用Flexcell System对PDLFs加载6%、12%、20%的循环牵张力0.5、2、6、12、24、36、48及72 h后,采用实时PCR和Western blotting的方法分别观察PDLFs内EMMPRIN及VEGF的基因及蛋白的表达变化;在PDLFs培养液中加入外源性EMMPRIN蛋白6、12、24 h后,分别观察PDLFs内VEGF的基因及蛋白的表达变化。结果 EMMPRIN蛋白主要表达于PDLFs的细胞膜和细胞质,而VEGF则在PDLFs的细胞核和细胞质中有较强表达。对PDLFs分别施加6%、12%及20%的机械牵张力后,细胞内EMMPRIN与VEGF的基因和蛋白表达均特异性上调;外源性的EMMPRIN蛋白可以促进PDLFs中VEGF mRNA的表达。结论机械牵张力可特异性上调PDLFs中EMMPRIN和VEGF的表达;EMMPRIN可能调控VEGF的表达并与之共同参与应力作用下的牙周组织改建的过程。

白藜芦醇抑制巨噬细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导物的表达

目的探讨白藜芦醇对细胞外基质金属蛋白酶诱导物(EMMPR IN)表达的影响。方法将人类单核细胞系THP-1和MCF-7细胞共培养,测定上清液中MMP-9活性。用PMA诱导THP-1为巨噬细胞,加入白藜芦醇,观察EMMPR IN表达和MMP-9活性变化。细胞共转染实验测定白藜芦醇对PPARγ的激动作用。用PPARγ的拮抗剂GW 9662预处理细胞后,测定白藜芦醇对EMMPR IN表达的影响。结果PMA诱导使单核细胞EMMPR IN表达明显增强,与EMMPR IN高表达的MCF-7细胞共培养显著增加单核细胞表达MMP-9。白藜芦醇显著抑制EMMPR IN和MMP-9生成。白藜芦醇明显激动PPAR,γGW 9662大幅减弱白藜芦醇对EMMPR IN和MMP-9的作用。结论单核细胞向巨噬细胞分化过程中表达明显增强的EMMPR IN可能是促进MMPs表达的主要因子。白藜芦醇通过激动PPARγ抑制EMMPR IN的表达,可能是其抑制巨噬细胞MMPs产生的机制。

细胞外基质及基质金属蛋白酶在糖尿病足溃疡愈合中的研究进展

糖尿病足溃疡(DFU)是糖尿病的严重并发症之一,发病率和病死率均较高,严重危害患者健康。细胞外基质(ECM)组成成分具有止血、抑炎、促增殖、增加弹力等生物学作用,在创面修复过程中发挥强大的支撑和调控效应,是DFU治疗的关键。基质金属蛋白酶(MMP)作为ECM的衍生物质,种类繁多、分工复杂,主要通过降解和重塑ECM调控创面愈合进程,其中MMP-1、MMP-2和MMP-9在DFU中大量表达,导致ECM被过度降解,引发DFU愈合困难,而MMP-8可通过重塑ECM促进DFU愈合。因此,合理调控ECM/MMP平衡可以为DFU的治疗提供新思路。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子在巨噬和泡沫细胞中的表达

目的观察细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)在单核向巨噬和泡沫细胞分化过程中的表达变化。方法体外诱导THP-1单核细胞分化为巨噬和泡沫细胞,应用Real-time RT-PCR和Western blot测定EMMPRIN基因和蛋白表达。结果单核细胞分化为巨噬细胞后EMMPRIN mRNA和蛋白表达均显著增加,当进一步分化为泡沫细胞时,EMMPRIN的表达与巨噬细胞比较无显著性差异。结论单核细胞向巨噬细胞的分化诱导EMMPRIN表达,而进一步向泡沫细胞分化对其表达无影响。

人膀胱癌组织中细胞外基质金属蛋白酶诱导因子的表达

背景与目的:基质金属蛋白酶(matrix metalloproteinases,MMPs)在恶性肿瘤的发生、浸润和转移中发挥关键作用,肿瘤细胞表达的细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN)司以诱导间质成纤维细胞合成MMPs,从而促进肿瘤的浸润和转移。本研究拟通过检测EMMPRIN在人膀胱癌组织和正常膀胱粘膜中的表达,探讨EMMPRIN在膀胱癌发生、浸润和转移中的作用。方法:应用免疫组化SP方法检测EMMPRIN在45例膀胱癌组织和9例正常膀胱粘膜中的表达,并与临床病理指标结合起来分析。结果;EMMPRIN蛋白定位于癌细胞的胞膜和胞浆,阳性率为73.3％,正常膀胱粘膜和肿瘤间质均为阴性表达。EMMPRIN在Ⅱ、Ⅲ级和术后复发组的阳性表达率分别为84.0％、84.6％和100％,高于Ⅰ级和无复发组(分别为14.3％和55.6％)(P<0.05);在淋巴结转移组的强阳性表达率(85.7％)高于无淋巴结转移组(23.7％)(P<0.05)。结论:EMMPRIN在人膀胱癌组织中过度表达,与膀胱癌的恶性程度有关,可作为判断膀胱 癌是否具备高侵袭转移潜能的指标。

急性冠状动脉综合征患者血小板表面细胞外基质金属蛋白酶诱导因子、糖蛋白Ⅵ水平与动脉粥样硬化斑块稳定性的关系

目的:探讨急性冠状动脉(冠脉)综合征患者血小板表面细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)、糖蛋白Ⅵ(GPⅥ)的水平与动脉粥样硬化斑块稳定性的关系。方法:顺序选取138例冠心病患者,分为急性冠脉综合征组86例,稳定性心绞痛组52例,另选40例冠脉造影结果正常者为对照组。采用二次离心法提取血小板,流式细胞仪检测外周血血小板表面EMMPRIN和GPⅥ表达水平。为进一步研究,根据冠脉造影斑块形态特征分为Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ型;并接受64层螺旋计算机断层摄影术(CT)冠脉成像检查,根据冠脉粥样斑块CT值分为软斑块、纤维斑块、钙化斑块,比较不同斑块形态及类型间EMMPRIN及GPⅥ表达水平变化。结果:(1)急性冠脉综合征组、稳定性心绞痛组血小板表面EMMPRIN、GPⅥ表达水平较对照组升高(EMMPRIN MFI:5.82±0.81、3.45±0.48 vs 1.35±0.15)、(GPⅥMFI:16.22±5.27、8.20±2.87 vs 4.14±1.17);且急性冠脉综合征组较稳定性心绞痛组升高明显,差异均有统计学意义(P均<0.05)。(2)急性冠脉综合征组Ⅱ型斑块者、Ⅲ斑块者血小板表面EMMPRIN、GPⅥ表达水平较I型斑块者升高(EMMPRIN MFI:6.35±1.05、4.09±0.67 vs 2.45±0.27)、(GPⅥMFI:19.50±4.55、10.81±2.33 vs 5.89±1.28);Ⅱ型斑块者较Ⅲ型斑块者也有明显升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。(3)急性冠脉综合征组软斑块者、纤维斑块者血小板表面EMMPRIN、GPⅥ表达水平较钙化斑块者升高(EMMPRIN MFI:6.18±1.01、3.87±0.56 vs 2.43±0.25)、(GPⅥMFI:19.14±4.27、11.08±1.94 vs 5.96±0.99);软斑块者较纤维斑块者也有明显升高,差异均有统计学意义(P均<0.05)。(4)冠心病患者血小板表面EMMPRIN表达水平与斑块类型[95%可信区间(CI):-0.359^-0.206,标准化的回归系数(β):-0.211]呈负相关,与临床类型(95%CI0.893~1.034,β:0.893)呈正相关,血小板表面GPⅥ表达水平与斑块类型(95%CI-1.222^-0.586,β:-0.181)呈负相关,与临床类型(95%CI 3.576~4.164,β:0.960)呈正相关。结论:急性冠脉综合征组患者血小板表面EMMPRIN、GPⅥ表达水平与动脉硬化斑块的稳定性关系密切,两者是严重冠脉病变的相关危险因素,对于动脉硬化早期的诊断可能有一定预测价值。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与宫颈癌发生发展的关系

背景与目的:细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,EMMPRIN,CD147)属于免疫球蛋白家族,在肿瘤细胞中表达增高。EMMPRIN表达增加与肿瘤浸润、转移、耐药以及某些肿瘤细胞的生存相关,但与宫颈癌的关系尚未阐明。本研究旨在确定EMMPRIN是否与宫颈癌发生、发展有关。方法:采用免疫组化法检测21例慢性宫颈炎、22例宫颈上皮内瘤变3级(cervical intraepithelial neoplasia,CIN3)、82例宫颈浸润癌原发灶和22例转移淋巴结中EMMPRIN的表达,并比较EMMPRIN在宫颈病变不同阶段的表达。结果:随着宫颈病变的发展,EMMPRIN过表达阳性率明显升高:宫颈浸润癌中过表达阳性率(52.4%)>CIN3(21.3%)>慢性宫颈炎(0%)(P=0.000)。宫颈原发灶EMMPRIN的过表达与盆腔淋巴结转移呈正相关,有转移组原发灶EMMPRIN过表达为72.7%,无转移组为45.0%,两组间差异有显著性(P=0.026)。在有淋巴结转移的患者中,原发灶和转移灶中EMMPRIN的过表达差异无显著性(72.7%vs54.5%,P=0.210)。EMMPRIN过表达与其他临床病理因素如临床分期、病理类型、组织学分级、脉管浸润、肿瘤大小、浸润深度等无明显相关性。采用Kaplan-Meier方法和Log-Rank检验,单因素分析生存率,宫颈癌EMMPRIN的过表达无任何预后价值,淋巴结转移、深肌层浸润和脉管侵犯提示生存预后差。所有上述因素进入COX比例风险模型多因素分析,采用BackwardLR方法,显示淋巴结转移与患者生存相关(P=0.006;HR=0.380;95%可信区间:0.190～0.763)。结论:EMMPRIN与宫颈癌侵袭转移相关,在宫颈癌的发生、发展中起着重要作用。

基质金属蛋白酶家族及细胞外基质金属蛋白酶诱导因子与常见眼内恶性肿瘤的关系

基质金属蛋白酶家族包括基质金属蛋白酶及其抑制剂。基质金属蛋白酶是一组Zn2+依赖性蛋白水解酶,能降解细胞外基质,基质金属蛋白酶抑制剂则能抑制其活性。细胞外基质金属蛋白酶诱导因子广泛地存在于人类各种肿瘤细胞,刺激与肿瘤有关的成纤维细胞和肿瘤细胞自身的基质金属蛋白酶合成增加。三者常在眼部肿瘤中异常表达,与眼肿瘤的发展及浸润转移关系密切。本文就其与眼部常见恶性肿瘤视网膜母细胞瘤及脉络膜黑色素瘤的关系作一综述。

PPARs配体对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子表达的影响

目的:观察PPARα、γ配体对巨噬细胞、泡沫细胞细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPR IN)表达的影响。方法:体外诱导THP-1单核细胞转化为巨噬细胞、泡沫细胞,分别加入PPARα配体氯贝特(c lofibrate)、PPARγ配体吡格列酮(p ioglitazone)共同培养,应用Real-tim e RT-PCR和W estern b lotting测定巨噬细胞、泡沫细胞中EMMPR IN基因和蛋白表达,ELISA测定细胞培养上清液MMP-9浓度,Zymgraphy法测定MMP-9活性。结果:氯贝特和吡格列酮均能显著抑制巨噬细胞和泡沫细胞EMMPR IN的表达,此抑制作用与PPARα、γ配体抑制MMP-9分泌及活性的趋势一致。结论:PPARα、γ配体均可抑制巨噬细胞、泡沫细胞EMMPR IN的表达,下调EMMPR IN可能是PPAR s配体抑制粥样斑块局部MMPs产生的机制之一。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子降解途径的初步研究

目的:观察蛋白酶体抑制剂MG-132对细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(extracellular matrix metalloproteinase inducer,CD147)表达的影响,探讨CD147的降解途径。方法:在SY5Y细胞中分别加入0,1,2.5和5μmol/L不同浓度剂量的蛋白酶体抑制剂MG-132作用24 h后,通过Western Blot和In-cell Western的方法检测CD147的相对含量;免疫荧光双标检测SY5Y细胞中CD147与泛素(ubiquitin)的表达及共定位情况。结果:在一定时间内,随着MG-132浓度的增大,CD147的含量相对增多;与0μmol/L组比较,5μmol/L组的CD147含量在两种实验方法中分别增加了约151.81%±36.26%(P<0.05)和76.43%±18.02%(P<0.05);CD147与泛素在细胞胞体中存在共定位的特征。结论:蛋白酶体抑制剂MG-132可增加CD147的含量;CD147可被泛素化。提示CD147可能通过泛素-蛋白酶体途径进行降解。

基质金属蛋白酶组织抑制剂1对细胞因子诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用

目的探讨基质金属蛋白酶抑制剂1(TIMP-1)对细胞因子IL-1β、TNF-α和干扰素γ(IFN-γ)诱导的胰岛β细胞凋亡的保护作用及其可能机制。方法实验分TIMP-1干预组、细胞因子刺激组和对照组。细胞因子刺激组应用细胞因子(IL-1β 10μg/L,TNF-α 50μg/L,IFN-γ 50μg/L)诱导大鼠胰岛瘤细胞株RINm5F细胞凋亡;TIMP-1干预组在细胞因子刺激前予以TIMP-1(50μg/L)预处理1 h;对照组采用无血清培养基同步培养。应用四甲基偶氮唑盐比色法和Caspase-3分光光度法检测各组细胞活力和Caspase-3活性,采用DNALadder进行凋亡鉴定。结果与对照组比较,细胞因子IL-1β、TNF-α和IFN-γ联合刺激组细胞活力明显降低,并呈时间依赖性(Pa<0.05,0.001);TIMP-1干预组较细胞因子刺激组细胞活力上升约14%,Caspase-3活性下降约38%,二组比较差异有显著性意义(Pa<0.001)。DNA Ladder检测,细胞因子刺激组可见特征性的梯状条带,TIMP-1干预组梯状条带不明显,出现与对照组相似的2条基因组大分子条带。结论IL-1β、TNF-α和IFN-γ联合刺激可诱导RINm5F细胞凋亡,TIMP-1对细胞因子诱导的RINm5F细胞的凋亡有一定的保护作用,此作用可能与其抑制Caspase-3活性有关。

体外压力刺激对大鼠“足三里”穴筋膜组织成纤维细胞合成释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E_2和胰岛素样生长因子1的影响

背景:腧穴筋膜结缔组织成纤维细胞是针推治疗操作过程中的主要受力组织细胞之一,细胞生物学行为的调整对腧穴发挥治疗作用的功能关系密切。目的:通过体外实验观察压力刺激对大鼠"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞合成释放基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E2和胰岛素样生长因子1的影响。方法:体外培养大鼠"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞,随机分为空白对照组和压力刺激组。压力刺激组对细胞实施50kPa压力刺激,每次加力2h,每8h1次,共6次;空白对照组不加压。检测细胞外培养液中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1、前列腺素E2和胰岛素样生长因子1含量的变化,并计算基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值的变化。结果与结论:"足三里"穴筋膜组织成纤维细胞压力作用后,培养液中基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1和前列腺素E2含量均增加(P<0.05或0.01),基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值增大(P<0.05),胰岛素样生长因子1变化无显著性意义。结果证实,压力刺激对腧穴筋膜组织成纤维细胞基质金属蛋白酶1、基质金属蛋白酶抑制剂1和前列腺素E2合成释放的调节,以及对基质金属蛋白酶1与基质金属蛋白酶抑制剂1比值的提高,可能是腧穴接受针灸推拿治疗后发挥"疏经通脉"作用的细胞生物力学原理之一。

细胞外基质金属蛋白酶诱导因子和尿激酶型纤溶酶原激活物在载脂蛋白E基因敲除小鼠主动脉粥样硬化斑块中的表达

目的探讨细胞外基质金属蛋白酶诱导因子(EMMPRIN)与尿激酶型纤溶酶原激活物(uPA)在载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠主动脉粥样硬化斑块中的表达,并探讨两者的相互关系。方法研究对象采用ApoE-/-小鼠,共喂养18周,分别于6周、10周、14周和18周4个时间点处死小鼠行HE染色切片观察动脉粥样硬化斑块形态;并采用RT-PCR及Western blot检测主动脉粥样硬化斑块内EMMPRIN和uPA的表达。结果成功建立动脉粥样硬化模型;在主动脉粥样硬化斑块中检测到EMMPRIN和uPA表达均增高,与普通饮食组比较有统计学意义(P<0.05)。EMMPRIN和uPA表达随喂养时间延长而增高。结论 EMMPRIN和uPA在ApoE-/-小鼠主动脉粥样硬化斑块中随着斑块病变程度的严重性增加表达增高,两者可能共同参与粥样硬化斑块的发生发展过程。