小儿支原体肺炎血Th17/Treg细胞失衡与心肌损害发生的相关性

目的探讨小儿支原体肺炎血Th17/调节性T细胞(Treg)失衡与心肌损害发生的相关性。方法选择2020年3月—2022年3月于邢台市人民医院就诊的支原体肺炎患儿137例作为观察对象,通过肌酸激酶同工酶(CK-MB)水平,影像学检查及心电图表现等判定心肌损害,并根据是否发生心肌损害将患儿分为心肌损害组和无心肌损害组。另选择同期健康体检儿童96例作为对照组。采用流式细胞仪测定Th17细胞和Treg细胞占CD4^(+)T细胞比例;采用全自动生化分析仪测定乳酸脱氢酶(LDH)、肌酸激酶(CK)和CK-MB水平。比较各组Th17细胞占CD4^(+)T细胞比例、Treg细胞占CD4^(+)T细胞比例、Th17/Treg和心肌酶水平变化。采用Pearson相关性分析Th17/Treg与心肌酶相关性。结果137例支原体肺炎患儿中,发生心肌损害72例(52.55%)。心肌损害组血清LDH、CK和CK-MB水平高于无心肌损害组和对照组,且无心肌损害组血清LDH、CK和CK-MB水平高于对照组(P<0.05)。心肌损害组Th17细胞占CD4^(+)T细胞比例和Th17/Treg高于无心肌损害组和对照组,且Treg细胞占CD4^(+)T细胞比例低于无心肌损害组和对照组(P<0.05)。Pearson相关性分析结果显示,Th17/Treg与LDH、CK和CK-MB呈正相关(P<0.05)。结论小儿支原体肺炎并发心肌损害患儿心肌酶谱LDH、CK和CK-MB水平明显升高,Th17/Treg细胞比例失衡,且Th17/Treg与LDH、CK和CK-MB呈正相关。

miR-155对支气管哮喘患儿Th1/Th2细胞失衡的影响及机制研究

目的探讨miR-155对支气管哮喘患儿Th1/Th2细胞失衡的影响及致病机制。方法选取2018年7月至2022年6月在深圳市前海蛇口自贸区医院就诊的40例支气管哮喘发作期患儿为哮喘组,同期本院健康体检的30名儿童为对照组,测定并比较两组对象外周血Th1和Th2细胞亚群以及细胞因子(包括IL-4、IL-5、IFN-γ、IL-1、IL-17)水平。分离哮喘组、对照组外周血CD4^(+)T细胞,设为哮喘(细胞)组、对照(细胞)组;另用miR-155模拟物处理对照组分离获得的CD4^(+)T细胞,设为miR-155高表达组。检测并比较3组CD4^(+)T细胞miR-155、GATA结合蛋白3(GATA-3)、IL-4、IL-5表达水平。结果哮喘组外周血Th1比例、Th1/Th2以及IFN-γ水平均明显低于对照组(均P<0.05),Th2比例以及IL-4、IL-5、IL-1、IL-17水平均明显高于对照组(均P<0.05)。3组CD4^(+)T细胞miR-155、GATA-3、IL-4、IL-5表达水平比较差异均有统计学意义(均P<0.05),其中哮喘(细胞)组、miR-155高表达组CD4^(+)T细胞miR-155、GATA-3、IL-4、IL-5表达水平均明显高于对照(细胞)组(均P<0.05)。结论miR-155异常高表达在儿童支气管哮喘发病中发挥重要作用,其机制可能与上调GATA-3表达进而造成Th1/Th2细胞失衡有关。

IL-35、Th17/Treg细胞失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义

目的研究IL-35、Th17/Treg失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义。方法随机将60只健康雌雄各半Wistar大鼠分为两组:对照组30只(生理盐水组)、肺纤维化组30只(博来霉素组),分别于实验第7天、第14天、第28天处死对照组、模型组各10只大鼠,留取各组大鼠肺组织、肺泡灌洗液,观察大鼠肺组织形态病理学变化(HE染色和Masson三色染色);测定支气管冲洗液及肺组织中Treg、Th17细胞,IL-35、IL-17表达水平,并分析IL-35与Th17/Treg的相互关系。结果 1.肺纤维化组与对照组相比,肺组织炎症程度、肺纤维化程度显著,肺部炎症以造模第7d最明显。2.两组相比,肺纤维化组IL-35、Treg细胞表达水平显著低于对照组,IL-17、Th17细胞表达显著高于对照组,差异均具有统计学意义。3.肺纤维化组IL-35与IL-17表达水平呈明显的负相关(r=-0.378,P<0.01),IL-35与Treg细胞表达水平呈正相关(r=0.461,P<0.01),IL-35与Th17/Treg细胞表达水平呈负相关(r=-0.386,P<0.01)。结论本研究通过对大鼠肺纤维化组、对照组IL-35、IL-17、Th17/Treg细胞表达水平与相关性分析;提示IL-35可能参与肺纤维化Th17/Treg细胞平衡的调节,对IL-35的调控有可能成为肺纤维化治疗的新的靶点。

CCR6、Th9细胞、Th17/Treg细胞失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义

目的研究CCR6、Th9细胞、Th17/Treg失衡在大鼠肺纤维化中的表达及意义。方法采取随机分组原则将63只雄性SD大鼠分为三组:生理盐水对照组(N组)、肺纤维化模型组(F组)、地塞米松治疗组(D组),经气管内注入博来霉素制作大鼠肺纤维化模型,分别于第7d、第14d、第28d留取各组大鼠肺组织、肺泡灌洗液,应用HE染色观察大鼠模型肺组织病理改变;免疫组化法评价三组肺组织中CCR6、IL-9表达情况;荧光PCR法检测肺泡灌洗液PU.1mRNA水平,流式细胞术检测Th17、Treg的表达;并分析CCR6、Th9细胞与Th17/Treg的相互关系。结果1.F组、D组与N组相比,肺组织炎症程度、肺纤维化程度显著,肺部炎症以造模第7d最明显。2.对于CCR6、PU.1mRNA、IL-9、Th17,与N组相比较,F、D组大鼠不同时间点表达均明显增高(P<0.05),以造模第7d最明显;F、D组大鼠Treg细胞表达水平较对照组降低(P<0.05)。3.CCR6、Th9、PU.1mRNA表达水平与Th17有显著正相关性,与Treg有显著负相关(P均<0.01)。结论本研究大鼠肺纤维化模型CCR6、Th9细胞与Th17/Treg比值各时间点表达水平较对照组均升高;推断CCR6、Th9细胞可能参与Th17/Treg失衡在肺纤维化免疫炎症的发生过程,进而促进肺组织纤维细胞增殖,在肺纤维化的发生机制中起到重要作用。

Th1/Treg细胞失衡对宫颈癌临床分期的作用

目的:探讨Th细胞和Treg细胞及其高表达的细胞因子构成的免疫调节网络,对宫颈癌不同分期的调控作用。方法:对82例不同临床分期的宫颈癌患者采用流式细胞小球微阵列术(CBA)检测IFN-γ、TNF-α、IL-10、IL-5、IL-4、IL-2水平,应用流式细胞仪CD_4^+CD_(25)^+Fox P3^+设门方法检测CD_4^+CD_(25)^+Treg细胞,采用方差分析和多元线性回归方法,分析宫颈癌患者细胞因子水平和Treg细胞数量变化,及其对临床分期的影响。结果:宫颈癌患者的Th1/Th2失衡状态在期别低者,表现为Th1优势,IL-2升高为著,期别高者,表现为Th2优势,IL-10为著。Treg细胞数量随宫颈癌临床分期的升高而增加;将与宫颈癌不同期别的相关因素进行多元回归比较,其密切程度依次为:Treg细胞>IL-10>IL-2>IL-4>INF-γ。结论:不同临床分期的宫颈癌患者有Th1/Th2失衡,Treg细胞通过负向免疫调控,介导Th细胞之间的漂移,就整个T细胞调控网络而言,Th1/Treg细胞平衡较Th1/Th2细胞平衡更能反应机体抗宫颈癌免疫应答的调控全貌。

辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡在儿童激素敏感型原发性肾病综合征发病机制中的研究

原发性肾病综合征(primary nephrotic syndrome,PNS)约占小儿时期NS总数的90%[1],临床上≥85%PNS患儿的肾脏病理改变为微小病变,对糖皮质激素治疗敏感.现阶段对儿童激素敏感型原发性肾病综合征(steroid-sensitive nephrotic syndrome,SSNS)的病因和发病机制尚不明确.有学者认为,可能与淋巴细胞免疫功能紊乱有关[2],主要表现为T细胞数目异常和各亚群间的比例失衡[3].因此,本研究通过检测SSNS患儿在激素治疗前后与健康对照者外周血的辅助性T细胞(Th/17)调节性T细胞(Treg)水平,旨在研究Th17/Treg细胞失衡在儿童SSNS发病过程中的作用机制以及糖皮质激素对Th17/Treg细胞免疫平衡的影响.

Th17/CD4^+ CD25^+ Treg细胞失衡与儿童急性再生障碍性贫血免疫发病机制的关系

我国是儿童急性再生障碍性贫血（aplastic anemia,AA）的高发国家。然而急性AA的发病机制尚不明确,治疗措施针对性不强,导致其治疗效果不佳,病死率极高。Th17细胞及其分泌的细胞因子介导炎症反应,能诱导严重自身免疫性疾病;

养阴清热解毒方对系统性红斑狼疮阴虚内热证患者Th1/Th2细胞失衡的影响

目的研究养阴清热解毒方对系统性红斑狼疮(Systemic Lupus Erythematosus,SLE)阴虚内热证患者Th1、Th2细胞失衡的影响。方法选取2014年10月至2016年10月期间在我院接受诊治的80例系统性红斑狼疮阴虚内热证患者作为研究对象,根据随机数表法分为对照组40例,接受常规西医治疗;治疗组40例,接受养阴清热解毒方治疗。治疗3个月后,比较两组患者治疗前后外周Th1型细胞因子[γ-干扰素(Interferon-γ,IFN-γ)、白细胞介素-12(interleukin-12,IL-12)]、Th2型细胞因子[白细胞介素-4(interleukin 4,IL-4)、白细胞介素-10(interleukin-10,IL-10)]表达,并比较两组患者治疗前后系统性狼疮疾病活动性指数(Systemiclupus Erythematosus Disease Activity Index,SLEDAI)、中医证候积分变化及临床疗效、不良反应发生率。结果治疗后两组患者IFN-γ、IL-4、IL-12、IL-10水平均低于治疗前,且治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组患者IFN-γ/IL-4、IL-12/IL-10水平均高于治疗前,且治疗组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后两组患者SLEDAI评分、中医证候积分均低于治疗前,且治疗组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗组患者治疗总有效率(90.0%)高于对照组(67.5%),差异有统计学意义(P<0.05);两组患者均无药物不良反应发生。结论采用养阴清热解毒方治疗阴虚内热证SLE效果显著,安全性高,能有效调节Th1/Th2细胞平衡,缓解临床症状。

脓毒症患者Th1/Th2细胞失衡与疾病严重程度、肺损伤的关系

目的探讨脓毒症患者Th1/Th2细胞失衡与疾病严重程度、肺损伤的关系。方法将2017年10月至2019年10月于本院ICU接受治疗的62例脓毒症患者根据治疗28 d后临床结局的不同分为死亡组(20例)和生存组(42例),分别于入ICU治疗前1 d,入ICU治疗后1、7、14 d通过流式细胞术检测两组外周静脉血中Th1细胞(IFN-γ^+CD3^+CD4^+T淋巴细胞)及Th2细胞(IL-4^+CD3^+CD4^+T淋巴细胞)的含量,并计算Th1/Th2值,分析比较两组Th1、Th2细胞含量及Th1/Th2值。根据脓毒症患者是否合并肺损伤分别肺损伤组(24例)和非肺损伤组(38例),分析比较两组Th1、Th2细胞含量及Th1/Th2值。结果治疗后1、7、14 d,生存组Th1细胞含量及Th1/Th2值均明显高于死亡组,差异具有统计学意义(P<0.05),而Th2细胞含量与死亡组比较差异无统计学意义(P>0.05)。肺损伤组Th1细胞含量及Th1/Th2值均明显高于非肺损伤组,差异具有统计学意义(P<0.05),而Th2细胞含量与非肺损伤组比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论Th1/Th2值的降低预示着疾病严重程度的加大,预后不良,同时脓毒症合并肺损伤患者促炎Th1细胞增高,Th1/Th2平衡向Th1方向漂移。

Th17/Treg细胞失衡与溃疡性结肠炎患者疾病活动度及炎症程度的关系

目的研究Th17/Treg细胞失衡与溃疡性结肠炎(UC)患者疾病活动度及炎症程度的关系。方法选择从2017年1月～2018年5月在云南省老年病医院(以下简称"我院")诊治的UC患者93例进行研究,UC活动期者56例为活动期组,UC缓解期者37例为缓解期组。根据改良Mayo评分将活动期组划分亚组:轻度组19例、中度组24例、重度组13例。另选取同期在我院进行健康体检的40名志愿者作为对照组。检测并比较各组Th17/Treg、C反应蛋白(CRP)、白细胞介素(IL)-10及IL-17水平,分析患者Th17、Treg细胞与疾病活动度及炎症程度的关系。结果活动期组及缓解期组的Th17细胞比例及Th17/Treg水平较对照组高,且活动期组较缓解期组高(P <0.05),活动期组的Treg细胞比例较对照组低(P <0.05)。重度组的Th17/Treg水平较轻度组和中度组高,且Th17细胞比例较轻度组高(P <0.05),Treg细胞比例较轻度组和中度组低(P <0.05)。活动期组及缓解期组的CRP及IL-17水平较对照组高,且活动期组较缓解期组高(P <0.05)。活动期组及缓解期组的IL-10水平较对照组低(P <0.05)。重度组的CRP及IL-17水平较轻度组高,IL-10水平较轻度组低(P <0.05),重度组的CRP水平较中度组高,且中度组较轻度组高(P <0.05)。Pearson相关性分析结果,Th17细胞及Th17/Treg与疾病活动度、CRP及IL-17均呈正相关,与IL-10呈负相关(P <0.05)。Treg细胞与疾病活动度、CRP及IL-17均呈负相关,与IL-10呈正相关(P <0.05)。结论 UC患者机体中Th17/Treg细胞失衡与其疾病活动度及炎症程度之间存在密切关系,临床上应尽可能地确保患者的Th17/Treg细胞平衡,从而有利于其病情防控。

乙型肝炎与Th1-Th2细胞失衡的研究进展

根据分泌细胞因子的不同将Th细胞分为Th0、Th1和Th2细胞。Th0细胞是Th前体细胞,Th1细胞促进细胞免疫应答,Th2细胞参与体液免疫应答。在感染性疾病中,Th1细胞应答抗御感染,Th2细胞应答则导致易感。慢性持续性乙型肝炎与Th2细胞亚群偏离有关。转基因鼠的研究表明:HBeAg可选择性诱导Th1细胞无反应性,Th1-Th2细胞亚群失衡受TCR-肽-MHC复合体及细胞因子环境等多种因素影响。

树突状细胞亚群介导系统性红斑狼疮和狼疮肾炎的程序性细胞死亡模式失衡

目的:免疫细胞的异常程序性死亡与自身免疫性疾病相关,但系统性红斑狼疮(systemic lupus erythematosus,SLE),尤其是狼疮肾炎(lupus nephritis,LN)的程序性死亡模式尚不清楚。本研究旨在探究SLE和LN与免疫细胞死亡模式的关联。方法:在高通量基因表达(Gene Expression Omnibus,GEO)数据库中下载批量RNA测序(bulk RNA sequencing,bulk RNA-seq)和单细胞RNA测序(single-cell RNA sequencing,scRNA-seq)数据,通过生物信息学分析探究SLE患者外周血单个核细胞中3种细胞死亡模式相关基因的表达水平;通过scRNA-seq确定参与细胞死亡模式失衡的关键细胞亚群;采用免疫荧光法检测树突状细胞(dendritic cell,DC)中受体相互作用丝氨酸/苏氨酸激酶3(receptor interacting serine/threonine kinase 3,RIPK3)、混合谱系激酶结构域样蛋白(mixed-lineage kinase domainlike protein、MLKL)、磷酸化MLKL(phosphorylated MLKL,pMLKL)、含半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶1(caspase1、CASP1)、CD1c分子(CD1cmolecule、CD1C)、含C型凝集素结构域9A(C-typelectindomaincontaining9A、CLEC9A)和X-C基序趋化因子受体1(X-C motif chemokine receptor 1,XCR1)的表达水平;对中南大学湘雅三医院收集的LN患者和健康对照者(healthy control,HC)的肾组织进行scRNA-seq,并通过生物信息学分析参与细胞死亡模式失衡的关键细胞亚群;采用拟时序分析和配受体分析探究不同DC亚群的分化方向和细胞通信。采用瞬时转染技术分别在RAW264.7细胞中转染空质粒、空质粒+dsDNA(HSV-DNA)、空质粒+200μmol/L叔丁基过氧化氢(tert-butylhydroperoxide,TBHP)、STING shRNA质粒、STING shRNA质粒+dsDNA(HSV-DNA)、STING shRNA质粒+200μmol/L TBHP;采用Annexin V-mCherry和SYTOX Green染色检测各组细胞死亡情况;蛋白质印迹法检测各组CASP1、消皮素D(gasdermin D,GSDMD)、RIPK3和MLKL的活化情况。结果:生物信息学分析显示SLE和LN患者存在3种细胞死亡模式的失衡:促炎型细胞焦亡和坏死性凋亡被激活,抗炎型细胞凋亡被抑制。其中的关键细胞亚群为DC亚群,并聚焦于CLEC9A+cDC1。免疫荧光法结果显示在外周血中SLE组DC中RIPK3、MLKL和CASP1表达水平较HC组DC升高;通过CLEC9A和XCR1标记肾组织中的c DC1,结果显示LN组cDC1的pMLKL和CASP1表达水平高于HC组。拟时序分析和配受体分析提示LN肾组织中CLEC9A+cDC1亚群存在外周循环起源。Annexin V-mCherry和SYTOX Green染色结果显示,在RAW264.7细胞中,与转染空质粒组相比,转染STING shRNA质粒组的死亡细胞数目减少;蛋白质印迹法结果显示与转染空质粒组相比,转染STING shRNA质粒组CASP1、GSDMD、RIPK3和MLKL的活化减少。结论:本研究为CLEC9A+cDC1在SLE和LN的细胞死亡模式失衡中的作用提供了新的思路。

益气温阳护卫汤含药血清对体外Th17/Treg细胞失衡与RORγ、Foxp3的影响

目的:研究益气温阳护卫汤含药血清对体外辅助性T淋巴细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞失衡与维甲酸相关孤核受体γ(RORγ)、特异性叉头状转录因子3(Foxp3)的影响。方法:制备益气温阳护卫汤含药血清,CD4+T细胞进行原代分离、培养、鉴定。构建体外Th17/Treg细胞失衡模型:将细胞分为对照组、模型组、益气温阳护卫组、地塞米松组,除对照组外,其余组中分别加入等量转化生长因子-β(TGF-β)、白细胞介素(IL)-6、IL-23溶液,诱导CD4+T细胞向Th17细胞分化。给予相应的含药血清干预处理48 h后,采用流式细胞术检测各组Th17和Treg细胞比例。RT-PCR、Western Blot分别检测RORγ、Foxp3 mRNA和蛋白表达水平。结果:与对照组比较,模型组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显著上升(P<0.01),Treg细胞比例显著下降(P<0.01);与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组Th17细胞比例、Th17/Treg比例均显著降低(P<0.01,P<0.05),Treg细胞比例显著上升(P<0.01,P<0.05)。与对照组比较,模型组RORγ mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.01),Foxp3 mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.01,P<0.05);与模型组比较,益气温阳护卫组及地塞米松组RORγ mRNA及蛋白表达均显著降低(P<0.05),Foxp3 mRNA及蛋白表达均显著升高(P<0.05,P<0.01)。结论:益气温阳护卫汤含药血清能有效改善Th17/Treg细胞体外失衡,其机制可能与调节特异性转录因子RORγ、Foxp3的表达相关。

口腔扁平苔藓患者血清miR-155-5p、SOCS1 mRNA水平与病损程度及Th17/Treg失衡的关系

目的探讨口腔扁平苔藓(OLP)患者血清微小核糖核酸-155-5p(miR-155-5p)、细胞因子信号传导抑制蛋白1(SOCS1)mRNA水平与病损程度及辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)失衡的关系。方法选择OLP患者76例(观察组),其中非糜烂型28例、糜烂型48例(轻中度糜烂29例、重度糜烂19例),同期随机另选体检健康的志愿者50例(对照组),采集所有研究对象外周静脉血,采用实时荧光定量聚合酶链式反应检测血清miR-155-5p、SOCS1 mRNA,采用流式细胞术检测Th17、Treg比例并计算Th17/Treg。采用Pearson/Spearman相关分析法分析OLP患者血清miR-155-5p水平与SOCS1 mRNA水平的关系以及二者与外周血Th17、Treg比例和Th17/Treg的关系。结果与对照组比较,观察组血清miR-155-5p水平以及外周血Th17比例和Th17/Treg升高,血清SOCS1 mRNA水平和外周血Treg比例降低(P均<0.05)。非糜烂型OLP及糜烂型OLP轻中度糜烂、重度糜烂患者血清miR-155-5p水平以及外周血Th17比例和Th17/Treg逐渐升高,血清SOCS1 mRNA水平和外周血Treg比例逐渐降低(P均<0.05)。相关性分析显示,OLP患者血清miR-155-5p水平与血清SOCS1 mRNA水平呈负相关关系(r=-0.809,P<0.01);血清miR-155-5p水平与外周血Th17比例、Th17/Treg均呈正相关关系(r/rs分别为0.819、0.820,P均<0.05),与Treg比例呈负相关关系(r=-0.735,P<0.05);血清SOCS1 mRNA水平与外周血Th17比例、Th17/Treg均呈负相关关系(r/rs分别为-0.770、-0.790,P均<0.05),与Treg比例呈正相关关系(r=0.733,P<0.05)。结论OLP患者血清miR-155-5p水平升高、血清SOCS1 mRNA水平降低,二者水平变化与病损程度加重和Th17/Treg失衡密切相关。

维生素D通过调控Treg/Th17细胞功能失衡改善 肺炎 链球菌诱导的慢性鼻-鼻窦炎模型的作用研究

目的:探究外源性维生素D(VitD)对肺炎链球菌诱导的慢性鼻-鼻窦炎(CRS)小鼠中调节性T细胞/辅助性T细胞17(Treg/Th17)功能失衡的作用。方法:将40只雄性C57BL/6小鼠按随机数字表法分为对照组(Control组)、模型组(Model组)、维生素D组(VitD组)和克拉霉素组(CLR组),每组10只。除Control组外,其余各组小鼠均在鼻窦腔填充含肺炎链球菌菌液海绵以复制CRS模型,VitD组和CLR组小鼠分别以VitD 3溶液、克拉霉素溶液进行灌胃;21 d后,采用酶联免疫吸附试验检测小鼠血清白细胞介素(IL)6、IL-10、IL-17、IL-23及转化生长因子β(TGF-β)水平,苏木精-伊红染色和过碘酸雪夫染色观察小鼠鼻窦黏膜病理变化,实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测小鼠鼻窦黏膜内维甲酸相关孤儿受体γt(RORγt)和Forkhead家族转录因子3(Foxp3)的mRNA及蛋白表达水平,免疫组化染色检测小鼠鼻窦黏膜内IL-17和Foxp3阳性表达,流式细胞术分析外周血中CD4+IL-17A+和CD25+Foxp3+细胞比例分布。结果:与Control组比较,Model组小鼠血清中IL-6、IL-17及IL-23水平升高,IL-10、TGF-β水平降低(P<0.05);鼻窦黏膜内发生明显病变,有大量炎症细胞浸润,杯状细胞数目增加(P<0.05);RORγt mRNA和蛋白相对表达量上调,Foxp3 mRNA和蛋白相对表达量均下调(P<0.05);IL-17阳性表达率升高,Foxp3阳性表达率降低(P<0.05);外周血中CD4+IL-17A+细胞比例升高,CD25+Foxp3+细胞比例降低(P<0.05),差异均有统计学意义。与Model组比较,VitD组和CLR组小鼠血清中IL-6、IL-17和IL-23水平降低,IL-10、TGF-β水平升高(P<0.05);鼻窦黏膜内炎症细胞浸润减轻,杯状细胞数目减少(P<0.05);RORγt mRNA和蛋白相对表达量均下调,Foxp3 mRNA和蛋白相对表达量均上调(P<0.05);IL-17阳性表达率降低,Foxp3阳性表达率升高(P<0.05);外周血中CD4+IL-17A+细胞比例降低,CD25+Foxp3+细胞比例升高(P<0.05),差异均有统计学意义。结论:VitD能够改善CRS模型小鼠鼻窦黏膜的病理表现,减轻炎症细胞浸润,其机制可能与调控Treg/Th17细胞功能失衡相关。

静脉注射不同剂量丙种球蛋白联合阿司匹林对川崎病患儿辅助性T细胞17/调节性T细胞失衡的影响

目的对比不同剂量静脉注射用丙种球蛋白(intravenous immunoglobulin,IVIG)联合阿司匹林对川崎病(Kawasaki disease,KD)患儿辅助性T细胞17(helper T cell 17,Th17)/调节性T细胞(regulatory T cell,Treg)细胞失衡的影响。方法纳入2016年9月至2020年8月于我院儿科接受治疗的急性期KD患儿73例进行回顾性队列研究。按IVIG不同剂量方案分为对照组(n=35,IVIG 1 g/kg+阿司匹林)和观察组(n=38,IVIG 2 g/kg+阿司匹林)。在治疗前和完成IVIG治疗后3 d内采集外周血,检测Th17/Treg细胞比值及白介素(interleukin,IL)-17、IL-6、IL-23和转化生长因子(transforming growth factor,TGF)-β等水平。结果观察组退热时间和颈部非脓性淋巴结消肿时间短于对照组(P<0.05)。与治疗前相比,两组患儿治疗后Th17细胞比例、Th17/Treg细胞比值及血清IL-17、IL-6、IL-10水平均降低,TGF-β水平升高(P<0.05),且观察组Th17细胞比例、Th17/Treg细胞比值及血清IL-17、IL-10水平变化较对照组显著(P<0.05)。结论静脉注射大剂量IVIG联合阿司匹林对KD患儿疗效确切,能有效改善急性期KD患儿Th17/Treg细胞失衡及免疫功能紊乱,降低血清炎性因子水平,且安全性良好。

清热凉血方对咪喹莫特诱导银屑病样小鼠模型Th17/Treg细胞失衡的影响及miR-210激动剂的干预作用

目的观察清热凉血方对咪喹莫特诱导小鼠银屑病样皮损模型辅助性T细胞17(Th17)/调节性T细胞(Treg)细胞失衡的影响及miR-210激动剂(AgomiR-210)干预后的作用。方法将42只BALB/c雌性小鼠随机分为7组:正常组,模型组,清热凉血方高、中、低剂量组(30. 2、15. 1、7. 05mg/kg)、AgomiR-210高、低剂量组(8、4 nmol/L),采用银屑病皮损面积和严重程度指数(PASI)评分观察银屑病样小鼠模型皮损动态变化;光镜观察皮损组织病理变化。采用免疫组化法检测各组小鼠皮损中叉头样转录因子3(Foxp3)和孤独核受体(RORγt)的表达,采取荧光定量PCR法检测各组小鼠脾脏中miR-210的表达。结果清热凉血方对银屑病小鼠皮损、组织病理变化和PASI评分有明显改善作用,且呈现剂量依赖关系,其中高剂量组PASI评分改善最明显,与模型组相比差异有统计学意义(P <0. 001)。病理结果显示,AgomiR-210可降低清热凉血方的治疗作用,其中低剂量组作用更明显,与清热凉血方高剂量组相比差异有统计学意义(P <0. 01)。免疫组化检测发现清热凉血方可上调银屑病小鼠皮损中Foxp3的表达,下调RORγt的表达,而AgomiR-210可下调Foxp3的表达,上调RORγt的表达。qRT-PCR法检测发现清热凉血方可抑制银屑病小鼠脾脏中miR-210的mRNA表达,与模型组相比差异有统计学意义(P <0. 01),而AgomiR-210可上调小鼠脾脏中miR-210的mRNA表达,与清热凉血方高剂量组相比差异有统计学意义(P <0. 01)。结论清热凉血方可明显改善咪喹莫特诱导的银屑病样小鼠皮损,可能通过抑制miR-210、上调Foxp3、下调RORγt的表达、改善Th17/Treg细胞失衡而发挥治疗作用。

自身免疫性甲状腺疾病患者甲状腺内Th_1/Th_2细胞失衡研究

目的 探讨甲状腺中Th1/Th2 细胞失衡在自身免疫性甲状腺疾病 (AITD)发病中的作用。方法 选取 13例Graves病 (GD)患者、12例桥本甲状腺炎 (HT)患者 ,并以 8例非毒性结节性甲状腺肿患者作为对照进行研究。采用免疫组化染色方法检测这些患者甲状腺内单个核细胞 (ITMC)的γ 干扰素(IFN γ)和白介素 4(IL 4)细胞因子抗原表达 (分别代表Th1,Th2 分泌的细胞因子 ) ,并与外周血甲状腺刺激性抗体 (TSAb)、甲状腺球蛋白抗体 (TGAb)、甲状腺微粒体抗体 (TMAb)等免疫学指标进行相关分析。结果 ( 1)GD、HT患者ITMC的IL 4、IFN γ阳性表达明显高于对照组 (均P <0 .0 1) ;GD患者ITMC的IL 4阳性表达明显高于IFN γ阳性表达 ;而HT患者ITMC的IFN γ阳性表达则明显高于IL 4阳性表达(均P <0 .0 5 ) ;( 2 )GD患者ITMC的IL 4阳性表达与TSAb显著正相关 (r =0 .67,P <0 .0 1) ,ITMC的IFN γ阳性表达与TSAb无相关性 ;HT患者ITMC的IFN γ阳性表达与TGAb、TMAb均呈显著正相关(分别为r =0 .65 ,r =0 .5 9,均P <0 .0 5 ) ,但ITMC的IL 4阳性表达与TGAb、TMAb均无相关性。结论 GD患者Th1/Th2 细胞平衡失衡偏向以Th2 占优势的免疫应答 ,而HT患者Th1/Th2 平衡失衡偏向以Th1占优势的免疫应答。

儿童原发性肾病综合征与Th1/Th2细胞失衡

目的 探讨Th1/Th2细胞失衡在原发性肾病综合征（PNS）患儿发病中的作用。方法运用三色荧光标记法流式细胞术检测21例初发和16例缓解期NS患儿外周血Th1和Th2细胞百分率（％）,并以10例正常儿童作对照。结果 正常儿童外周血Th1、Th2和Th0细胞百分率分别为（13.42±4.36）％,（2.53±1.97）％和（1.25±0.92）％。初发的PNS患儿均明显减低,分别为（2.34±2.09）％,（1.02±0.96）％和（0.40±0.38）％（P<0.05）。缓解期PNS患儿,分别为（11.96±4.75）％,（2.87±2.46）％和（1.31±0.87）％,与正常儿童比,差异均无显著性意义。由于初发的PNS患儿Th1细胞减低相对于Th2细胞而言更显著,因而导致Th1/Th2比值也较缓解期PNS患儿和正常儿童明显下降（2.43±2.65比4.17±2.32和5.41±2.77,P均<0.05）。结论 儿童PNS是一种以Th2细胞占优势的免疫介导的肾小球疾病,源于Th1细胞减低所致的Th1/Th2细胞失衡在原发性肾病综合征发病过程中可能起着重要作用。

辅助性T淋巴细胞失衡在各类非术后心房颤动中的作用

目的:探讨非术后心房颤动(房颤)患者外周血中辅助性T淋巴细胞(Th)失衡在不同阶段中的作用。方法:选择房性心律失常患者65例,其中非房颤性房性心律失常(包括房性心动过速、心房扑动、阵发性室性心动过速)22例(AA组)、阵发性房颤21例(Paro-Af组)、持续性房颤22例(Per-Af组);另取性别、年龄、基础疾病相匹配的窦性心律者15名作为对照组。ELISA法检测血清中的干扰素(IFN)-γ、白细胞介素(IL)-4浓度。结果:对照组、AA组、Paro-Af组、Per-Af组血清中IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4比值依次升高,而IL-4水平依次降低。对照组、AA组、Paro-Af组的IFN-γ水平、IFN-γ/IL-4比值和IL-4水平均差异无统计学意义,而Per-Af组的IFN-γ水平和IFN-γ/IL-4比值与其他3组比较均差异有统计学意义(均P<0.05)。同时,左房直径与IFN-γ/IL-4比值呈正相关(r=0.752,P<0.01),直线回归方程Y=0.473X+3.267。结论:房颤的病理过程中存在Th的失衡现象,主要见于持续性房颤;Th失衡造成的免疫损伤可能为持续性房颤的发病机制之一。由IFN-γ/IL-4比值与左房直径的关系,推测左房直径大小的改变为正常心肌细胞免疫损伤的结果。