供体细胞嵌合率的动态定量检测在供体淋巴细胞回输中的应用

为了探究供体细胞嵌合率 (DC)的动态定量检测在确定供体淋巴细胞回输 (DLI)时机和预测DLI疗效中的作用 ,应用复合扩增荧光标记STR PCR结合毛细管电泳方法 ,对 6例接受异基因造血干细胞移植后早期复发或移植物被排斥并接受DLI治疗的白血病患者 ,进行了DC的动态定量检测。结果发现 ,复发或排斥发生时 6位患者DC均出现大幅度下降 ,介于 2 7.3% - 85 .7% ,4位患者从DC下降 (<90 % )到出现临床复发或排斥的中位时间为2 6天 ,提示DC进行性下降的患者为复发或排斥的高危患者 ,可早期实施DLI干预治疗。 2例患者出现治疗反应 ,治疗有效患者在DLI后短期内出现DC回升 ,供体细胞占优势 ,并转化为稳定的完全供体细胞嵌合状态 (FDC) ,临床上出现移植物抗宿主病 (GVHD)表现。无效患者DLI后DC均无稳定回升现象 ,并对 3例DLI无效患者进行了第二次DLI治疗。结论 :嵌合体检测可指导DLI的实施时机 ,预测DLI的临床疗效 ,而且对首次DLI治疗无效的患者的后继强化治疗提供重要的参考依据。

建立检测大鼠原位腹主动脉移植细胞嵌合的直接原位法探讨

目的 :建立直接原位PCR法检测受者细胞迁移于移植腹主动脉形成的细胞嵌合。方法 :采用异性别大鼠腹主动脉原位移植模型 ,收集术后 1天、 7天、 2周、 3周、 4周、 2月的腹主动脉 ,建立Digoxigenin - 11-dUTP直接掺入法检测雄性受者来源细胞。结果 :在 7天、 2周、 3周、 4周、 2月移植腹主动脉增殖的内膜中检测到受者来源细胞 ,并与阴性和阳性对照相比有显著意义。结论 :直接原位PCR法可用于移植后受者细胞嵌合的检测。

异基因外周血造血干细胞移植后造血细胞嵌合状态的分析

为评估异基因外周血造血干细胞移植 (ALLO PBSCT)后的植入状况 ,采用细胞遗传学分析结合短串联重复序列 聚合酶链反应 (STR PCR) ,对 3 0例Allo PBSCT病人进行了 1～ 2 5个月的随访观察。结果表明 ,不同性别移植的 2 3例 ,2 1例完全嵌合 (CC) ,1例混合嵌合 (MC) ,1例为完全受者核型 ;相同性别移植的慢性髓性白血病 (CML) 7例 ,除 2例外 ,其余均未检测到Ph染色体 ;STR PCR检测结果与染色体分析结果完全一致。说明两种方法具有互补性 。

嵌合抗原受体T细胞治疗对心脏的影响

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗是一种通过体外基因工程改造自身T细胞,使其表达靶向癌细胞受体的肿瘤免疫治疗手段,但此方法具有心脏毒性。近期研究表明使用含有编码成纤维细胞激活蛋白受体的信使RNA的脂质纳米颗粒可在体内产生CAR-T细胞,这种细胞具有瞬时抗纤维化作用,为心肌纤维化的治疗迎来了突破性进展。该文介绍CAR-T细胞治疗相关心脏毒性的机制、临床表现、治疗现状和抗心肌纤维化作用,为预防、监测和治疗提供建议。

淋巴瘤患者行干细胞移植联合CD30嵌合抗原受体T细胞输注治疗的护理

目的 总结6例复发/难治性CD30阳性淋巴瘤患者进行自体干细胞移植联合抗CD30嵌合抗原受体T细胞输注治疗的护理经验。方法 对6例复发/难治性CD30阳性淋巴瘤患者,完善治疗前的护理评估,重点落实预处理毒性、细胞因子释放综合征以及植入综合征的护理,并将心理支持及健康教育纳入整个治疗过程。结果 6例患者均成功植入造血干细胞,外周血中检测到持续性CAR30转基因,其中5例完全缓解,1例部分缓解。5例出现细胞因子释放综合征,均为Ⅰ级,未观察到神经毒性。随访20.4(12.1,34.4)个月,患者均存活并保持其反应性。结论 自体干细胞移植联合抗CD30嵌合抗原受体T细胞输注治疗具有良好的耐受性和高度活性,护理在治疗各阶段以及毒副反应管理中发挥重要作用。

嵌合抗原受体T细胞的肿瘤杀伤作用

近年来,嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞免疫疗法在血液恶性肿瘤的治疗中取得了重要进展,但在实体瘤方面的应用并不理想。本文对CAR-T细胞的结构、杀伤功能进行了介绍,包括非经典免疫突触的形成、分泌细胞因子、分泌穿孔素和颗粒酶、Fas-FasL(factor associated suicide-Fas ligand)途径以及组成CAR结构成分的改变等杀伤肿瘤的主要机制,比较三种CAR细胞的特点,结合CAR-T细胞治疗实体瘤的挑战,对CAR-T细胞在肿瘤免疫治疗领域未来的研究方向进行了分析。

基于“壮火”理论辨治嵌合抗原受体T细胞治疗相关细胞因子释放综合征的经验

细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)是嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)治疗引起的最常见的不良反应,往往以发热为突出表现。基于《黄帝内经》“壮火”理论,以发热为切入点,认为CAR-T治疗相关CRS的主要病机在于阳气亢极而阴相对不足,从而表现出燔灼炎热、食气伤阴的致病特点。中医辨治以调整阴阳、分期论治为治疗原则,解毒透邪兼以扶正固本,旨在恢复机体稳态以重新达到动态平衡,从而治疗CAR-T疗法引起的免疫毒性反应。

嵌合抗原受体T细胞治疗在心肌纤维化中的研究进展

嵌合抗原受体T(CAR-T)细胞治疗是目前细胞免疫治疗中最热门的研究领域,在肿瘤治疗中有着辉煌的成就。随着研究的深入,CAR-T细胞治疗在非肿瘤疾病中也有着重大的突破。CAR-T细胞作为过继性T细胞的一种,结合了抗体的抗原结合特性和T细胞的效应功能,能靶向消除特定的细胞。对于尚无有效治疗措施的心肌纤维化,CAR-T细胞治疗可能是一个新的治疗思路与方向。现就目前CAR-T细胞治疗在心肌纤维化中的研究进展做一综述。

基于Donabedian三维质量理论构建嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病护理质量评价指标体系的研究

目的构建嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病患者护理质量评价指标体系,为临床系统且科学地管理护理工作及评价其护理质量提供可靠依据。方法以Donabedian三维质量理论模式为框架,通过文献法、访谈法及专家论证法制定评价指标体系初稿,采用Delphi专家函询法及层次分析法确定各指标及权重。结果两轮Delphi专家函询的有效回收率分别为96.15%和100%,专家权威系数为0.862和0.901,Kendall's和谐系数为0.345和0.201。最终确立一个包含3个一级指标、12个二级指标及54个三级指标的嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病患者护理质量评价指标体系。结论基于多种研究方法构建的嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病护理质量评价指标体系具有科学性及可靠性,能较为全面地衡量嵌合抗原受体T细胞治疗恶性血液病护理质量,为评价、改善其护理质量提供依据。

复发难治弥漫大B细胞淋巴瘤的二线治疗:自体造血干细胞移植或嵌合抗原受体T细胞治疗?

弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是最常见的侵袭性淋巴瘤亚型。一线规范的治疗后,60%的患者可以实现治愈,但是仍有40%的患者复发或者难治,预后不佳。挽救性化疗联合自体造血干细胞移植(ASCT)是化疗敏感患者的标准二线治疗方案。然而,伴随着新的治疗方式,如嵌合抗原受体T细胞疗法、双特异性抗体、靶向药物等的出现,标准二线治疗方案受到一定的挑战,尤其对于挽救性化疗不够敏感的患者。本文对目前复发难治DLBCL的二线治疗的安全性和疗效及适应证进行综述,以探讨复发难治DLBCL的最佳治疗选择。

嵌合型抗原受体T细胞在恶性黑色素瘤中应用进展

恶性黑素瘤细胞膜表达有多种生物标志物,可作为治疗靶点开发针对性的嵌合型抗原受体T细胞(CAR-T),CAR-T目前对恶性黑素瘤中GD2、HER2、CD70、Gp100、NYESO-1等靶点已表现出良好的疗效。本文旨在梳理恶性黑素瘤CAR-T靶点及临床进展,分析工程化T细胞的挑战与应对之策,以期CAR-T应用于恶性黑素瘤临床实践。

基于LCK募集和活化的嵌合抗原受体T细胞的结构优化及其功能研究

目的 通过对二代嵌合抗原受体(CAR)进行淋巴细胞特异蛋白酪氨酸激酶(LCK)结构改造,探讨能否增强二代CD137 CAR-T细胞的活化水平及杀伤肿瘤细胞效率,为制备新型二代CAR-T细胞奠定基础。方法 利用基因工程技术,构建靶向人表皮生长因子受体-2(HER2)的CD137-LCK2 CAR和CD137-PYAP2 CAR的慢病毒载体,经慢病毒包装、感染活化T细胞后制备出CD137-LCK2和CD137-PYAP2 CAR-T细胞。采用流式细胞术、酶联免疫吸附实验、细胞毒性实验分别检测新构建的CAR-T细胞在活化分子CD137的表达水平、表型分布、分泌的细胞因子水平及对表达HER2的肿瘤细胞的杀伤效率。结果相较于二代CD137 CAR-T细胞,经过结构改造的靶向HER2的CD137-LCK2和CD137-PYAP2 CAR-T细胞能够上调活化分子CD137的表达、增加细胞因子IFN-γ的分泌、增强对靶细胞的杀伤能力,且均有统计学差异;同时能够维持在记忆状态、受抗原刺激后可迅速活化增殖分化。结论 靶向HER2的CD137-LCK2和CD137-PYAP2 CAR-T细胞有望比二代CD137 CAR-T细胞能更有效活化并发挥抗肿瘤效应。

嵌合抗原受体T细胞治疗过程中真菌感染的预防与治疗

嵌合抗原受体T细胞(chimeric antigen receptor T-cell,CAR-T)治疗是近几年在血液恶性肿瘤治疗领域新兴的一种治疗方法,CAR-T在体内扩增,激活后释放大量的细胞因子从而引发全身炎症反应,即细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)。此外,由于B细胞也会表达作为CAR-T对肿瘤细胞进行识别的CD19受体,因此接受CAR-T治疗的患者会出现B细胞发育不良的情况,导致免疫球蛋白(主要为IgG)的产生减少,IgG含量的降低,从而增加治疗过程中患者受到微生物感染的风险。

嵌合抗原受体T细胞治疗后并发心律失常患者的护理

总结1例嵌合抗原受体T细胞治疗弥漫大B细胞淋巴瘤合并冠心病患者的护理经验。主要内容包括:早期风险评估及处理、细胞因子释放综合征期间循环系统监测与容量管理、严重心血管并发症的预防及处理、组织局部症状护理、预防感染护理等。经过多学科治疗和护理,患者疾病得到缓解,顺利出院。

嵌合抗原受体T细胞治疗B细胞性急性淋巴细胞白血病的护理策略研究

探究嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T cell immuno-therapy,CAR-T)治疗B细胞性急性淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)的护理策略。急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是一种临床常见的异质性很高的恶性血液病。CAR-T作为一种新兴的治疗方法,已经在B-ALL患者的治疗中表现出显著疗效。通过分析广东省第二人民医院接受CAR-T治疗的复发/难治性B-ALL患者的临床资料,对比采用规范化医疗及护理体系干预前后CAR-T治疗B-ALL的疗效及不良反应差异。结果显示,规范化医疗及护理体系干预对CAR-T治疗B-ALL的疗效无显著影响,但能够降低细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)的严重程度。研究发现,CAR-T治疗复发/难治性B-ALL疗效显著,通过规范化医疗及护理体系建设,能够增强医护人员CAR-T治疗全程管理能力,尤其是CAR-T细胞回输后相关并发症的早期观察、早期预防及早期处理能力,保障患者的治疗效果,降低不良反应发生率。

1例嵌合抗原受体T细胞免疫疗法患者的护理

本研究对1例接受嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(CAR-T)治疗患者的护理体会进行概述。护理要点:CAR-T细胞成功采集、清淋化疗减轻化疗副反应、CAR-T细胞顺利输注、CAR-T细胞输注后血细胞减少预防感染,细胞因子释放综合征的观察、神经毒性的观察与护理,肠穿孔的观察与护理,心理护理,营养指导,出院宣教及延续性护理等。经过精心的护理,患者CAR-T细胞正常扩增,30 d后复查PET/CT显示肿瘤已经完全缓解,患者后期随访未出现不良反应。

2015—2022年我国嵌合抗原受体T细胞临床试验注册信息分析

目的探讨中国嵌合抗原受体T细胞(CAR-T)疗法相关临床试验研究现状及未来趋势,为CAR-T疗法的开发提供参考。方法检索2015—2022年中国临床试验注册中心与国家药品监督管理局药品审评中心药物临床试验登记与信息公示平台登记注册的所有CAR-T疗法相关临床项目信息,采用文献计量学方法,统计注册项目的注册题目、注册时间、注册类型、研究疾病、靶点、上市申请临床试验信息、已上市CAR-T疗法等信息,分析CAR-T疗法临床试验的特点与现状。结果共检索到注册研究277项,主要集中在江苏省、上海市、广东省、湖北省,其中干预性研究163项,观察性研究114项,100例以上的大样本研究仅5项;资金来源主要为企业赞助(50.5%);主要适应证为血液系统恶性肿瘤(203/277,73.3%);单靶点研究中,白细胞分化抗原19(CD19)占43%(79/183),B细胞成熟抗原(BCMA)占9%(17/183);平台登记的项目27项,14个品种,仅2个为已上市品种,26个项目的申办单位为国内企业;Ⅰ或Ⅱ期试验研究占比较大,为96%(26/27);中国目前已上市3种CAR-T疗法,其中2个原研单位为国内企业。结论中国CAR-T研究主要集中在医疗资源发达地区,由中国企业为主导开展,并主要集中在治疗血液系统恶性肿瘤。目前多数研究仍处于临床试验阶段,由于注册时间短,离完成研究到申请上市还需要一定时间。

C57BL/6J小鼠背景的CD19嵌合抗原受体T细胞的制备及优化

目的:探索C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞体外刺激条件、最佳培养和感染时间,以期提高CD19嵌合抗原受体T细胞(m CD19 CAR-T)的感染效率。方法:将纯化的C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞在包被CD3/CD28抗体(anti-CD3/CD28 coated)、包被CD3抗体+可溶性CD28抗体(anti-CD3 coated+soluble anti-CD28)和包被CD3抗体(anti-CD3 coated)3种不同条件下分别刺激12 h和24 h,后续培养24 h、48 h和72 h并记录细胞克隆数。在上述3种条件下分别刺激C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞12、24和36 h,然后加入白介素(IL)-2(100 U/ml),镜下记录培养24 h、48 h和72 h的细胞克隆数;此条件下取刺激24 h的CD3^(+)T细胞,感染m CD19 CAR-T逆转录病毒,制备m CD19 CAR-T细胞,流式检测48 h时3组中GFP+CAR-T细胞的百分率。结果:利用获得BALB/c小鼠m CD19 CAR-T细胞的最优化条件,制备C57BL/6J小鼠的m CD19 CAR-T细胞感染效率仅5.23%;anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated刺激C57BL/6J小鼠CD3^(+)T细胞24 h,终止刺激继续培养至48 h时细胞克隆数最高;在上述条件刺激24 h后加入IL-2培养48 h,anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated组T细胞增殖克隆数量显著增加,且CAR-T细胞感染效率为17.63%±4.17%。结论:C57BL/6J小鼠来源T细胞制备CAR-T细胞的最佳条件与BABL/c小鼠不同;anti-CD3^(+)soluble anti-CD28 coated+IL-2刺激条件下诱导的T细胞感染逆转录病毒后可获得最高效率的m CD19 CAR-T细胞。

嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)疗法在炎症相关抑郁症治疗中的应用

经典的嵌合抗原受体巨噬细胞(CAR-M)发挥促炎作用实现抗肿瘤免疫,但是通过改造CAR的结构设计也可以使其有类似M2的抗炎功能,从而治疗炎症性疾病。目前靶向M1型小胶质细胞的CAR-M疗法能够有效减少神经炎症,用于治疗炎症相关抑郁症。随着关于CAR-M抗炎作用的研究不断发展,CAR-M细胞疗法为治疗炎症相关疾病提供了新的思路。

嵌合抗原受体T细胞疗法治疗实体瘤的论述及其与中医药联合应用的展望

嵌合抗原受体T(chimeric antigen receptor T,CAR-T)细胞疗法在血液肿瘤的治疗中获得了巨大成功。目前,CAR-T细胞缺乏特异性抗原、其运输和浸润肿瘤组织困难、免疫抑制性肿瘤微环境耗竭CAR-T细胞、细胞因子释放综合征引发全身炎症反应等因素限制了该疗法在实体瘤中的应用。本文讨论并总结在实体瘤治疗中CAR-T细胞靶点的选择及应用的局限性,并从中医药改善肿瘤微环境的角度,提出CAR-T细胞疗法联合中医药治疗实体瘤的新策略。