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冻融-超声联合细胞破碎法提取菊花黄色素工艺优化 被引量:4
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作者 柳滢春 《江苏农业科学》 CSCD 北大核心 2012年第8期255-256,257,共3页
研究了菊花黄色素的冻融-超声联合细胞破碎提取工艺,以黄色素提取率为考察指标,采用正交试验法对工艺条件进行了优选。确定优选工艺条件:乙醇浓度65%,料液比1 g∶20 mL,超声波功率225 W,超声提取时间10 min,此条件下菊花黄色素提取率为8... 研究了菊花黄色素的冻融-超声联合细胞破碎提取工艺,以黄色素提取率为考察指标,采用正交试验法对工艺条件进行了优选。确定优选工艺条件:乙醇浓度65%,料液比1 g∶20 mL,超声波功率225 W,超声提取时间10 min,此条件下菊花黄色素提取率为8.55%,显著高于传统工艺同条件下的提取率(5.82%),时间大大缩短。 展开更多
关键词 正交设计 菊花 黄色素 冻融-超声联合细胞破碎提取工艺
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氨基酸分析在细胞工艺研究中的应用
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作者 刘铁成 《生物技术世界》 2013年第9期6-6,共1页
在CHO细胞培养过程中,氨基酸的变化和消耗,是伴随CHO细胞所表达的抗体不同而发生变化。这就要求在细胞培养工艺的后期添加不同成分和比例的氨基酸进行补充,本文研究了用相同的CHO细胞为载体,表达不同抗体的细胞培养工艺后期氨基酸变化... 在CHO细胞培养过程中,氨基酸的变化和消耗,是伴随CHO细胞所表达的抗体不同而发生变化。这就要求在细胞培养工艺的后期添加不同成分和比例的氨基酸进行补充,本文研究了用相同的CHO细胞为载体,表达不同抗体的细胞培养工艺后期氨基酸变化情况。从而,为细胞培养工艺后期流加氨基酸提供依据。通过氨基酸的补充可以提高培养工艺中细胞的活率和维持的时间,从而提高单批产量。这在今后放大培养过程中,对工艺的优化有着重大的意义。 展开更多
关键词 氨基酸 细胞培养工艺
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乙型脑炎减毒活疫苗不同生产工艺硫酸庆大霉素残留量对比
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作者 郭红 江莉 +2 位作者 林松 金鹏 李俊明 《中国科技期刊数据库 医药》 2020年第11期199-200,共2页
目的对比乙型脑炎减毒活疫苗(乙脑活疫苗)在不同生产工艺下,产品硫酸庆大霉素残留量。方法采集不同生产工艺下乙脑活疫苗各阶段样品,检测硫酸庆大霉素残留量,并对结果进行统计分析对比。结果转瓶生产工艺中,病毒液硫酸庆大霉素残留量均... 目的对比乙型脑炎减毒活疫苗(乙脑活疫苗)在不同生产工艺下,产品硫酸庆大霉素残留量。方法采集不同生产工艺下乙脑活疫苗各阶段样品,检测硫酸庆大霉素残留量,并对结果进行统计分析对比。结果转瓶生产工艺中,病毒液硫酸庆大霉素残留量均在企业内控标准200ng/mL以下,成品硫酸庆大霉素残留量均低于法规要求50ng/剂;细胞工厂生产工艺中,病毒液硫酸庆大霉素残留量均在企业内控标准200ng/mL以下。结论在降低产品硫酸庆大霉素残留方面,细胞工厂生产工艺优于转瓶生产工艺。 展开更多
关键词 日本脑炎疫苗 转瓶生产工艺 细胞工厂生产工艺 硫酸庆大霉素残留量
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微生物细胞金属化工艺研究 被引量:9
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作者 黎向锋 蔡军 +1 位作者 张德远 李雅芹 《中国科学(E辑)》 CSCD 北大核心 2002年第3期338-342,共5页
为生物约束成形加工制备单体,对微生物材料固囊酵母菌和蜡状芽孢杆菌细胞的化学镀镍磷工艺、细胞形态、镀层成分和相结构进行了研究.结果表明细胞壁厚的固囊酵母菌金属化后不破裂、不变形;蜡状芽孢杆菌在适当镀层厚度下仍能保持原来形状... 为生物约束成形加工制备单体,对微生物材料固囊酵母菌和蜡状芽孢杆菌细胞的化学镀镍磷工艺、细胞形态、镀层成分和相结构进行了研究.结果表明细胞壁厚的固囊酵母菌金属化后不破裂、不变形;蜡状芽孢杆菌在适当镀层厚度下仍能保持原来形状;镍磷镀层成分及厚度均匀,为非晶态结构.还探讨了菌体金属化工艺过程的化学反应机理. 展开更多
关键词 微生物 细胞金属化工艺 生物加工 生物约束成形加工 菌体金属化 镍磷化学镀 单体形态 细胞固定
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减少病原体方法研制成功
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作者 文普 《国外药讯》 2003年第4期34-34,共1页
关键词 burgdorferi菌 包柔螺旋体属 血红细胞工艺 莱姆病 脑炎
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A RHOse by any other name:a comparative analysis of animal and plant Rho GTPases 被引量:6
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作者 Tore Brembu Per Winge +1 位作者 Atle Magnar Bones Zhenbiao Yang 《Cell Research》 SCIE CAS CSCD 2006年第5期435-445,共11页
Rho GTPases are molecular switches that act as key regulators of a many cellular processes, including cell movement, morphogenesis, host defense, cell division and gene expression. Rho GTPases are found in all eukaryo... Rho GTPases are molecular switches that act as key regulators of a many cellular processes, including cell movement, morphogenesis, host defense, cell division and gene expression. Rho GTPases are found in all eukaryotic kingdoms. Plants lack clear homologs to conventional Rho GTPases found in yeast and animals; instead, they have over time developed a unique subfamily, ROPs, also known as RAC. The origin of ROP-like proteins appears to precede the appearance of land plants. This review aims to discuss the evolution of ROP/RAC and to compare plant ROP and animal Rho GTPases, focusing on similarities and differences in regulation of the GTPases and their downstream effectors. 展开更多
关键词 Rho GTPase RHOGAP RHOGEF RHOGDI CYTOSKELETON NADPH oxidase RIC
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确定性筛选设计优化双特异性抗体细胞培养工艺 被引量:1
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作者 张轩 吕明 +2 位作者 丁晓然 谈彬 缪仕伟 《生物技术》 CAS 2021年第5期493-502,487,共11页
[目的]旨在快速优化双特异性抗体细胞培养工艺参数,提高蛋白表达量,改善产品关键质量属性。[方法]应用确定性筛选实验设计研究工艺参数(接种密度、培养温度和流加策略)对细胞生长、蛋白表达及关键质量属性(电荷异质性、聚体和高甘露糖型... [目的]旨在快速优化双特异性抗体细胞培养工艺参数,提高蛋白表达量,改善产品关键质量属性。[方法]应用确定性筛选实验设计研究工艺参数(接种密度、培养温度和流加策略)对细胞生长、蛋白表达及关键质量属性(电荷异质性、聚体和高甘露糖型)的影响,利用一步法找出最佳工艺条件,然后放大至2L生物反应器进行工艺验证。[结果]应用JMP软件对实验数据拟合分析找出了最佳工艺条件,接种密度:(1.3±0.2)×10^(6)cells/m L,培养温度:36.5±0.5℃,补料策略:第3 d、13 d流加初始培养体积3%,第5 d、7 d、9 d、11 d流加初始培养体积3.5%。通过2L生物反应器进行了工艺验证。活细胞密度峰值提高了11%,蛋白表达量提高了15%,质量合格。[结论]通过确定性筛选实验设计一步法快速找出了表达双特异性抗体的最佳细胞培养工艺条件,并且能在生物反应器中得到重复和验证。 展开更多
关键词 CHO细胞 双特异性抗体 细胞培养工艺 确定性筛选设计 关键质量属性 设计空间
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基于试验设计与响应面分析法的重组贝伐珠单抗细胞培养工艺优化
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作者 丁钰 杨倩倩 +2 位作者 沈智勇 赵瑾 邱树毅 《中国医药工业杂志》 CAS CSCD 北大核心 2020年第6期721-728,共8页
本研究采用多因素试验设计结合响应面分析法,通过对初始活细胞密度、变温时活细胞密度、培养时间、基础培养基混合比例和五水合硫酸铜添加浓度的研究,优化了以中国仓鼠卵巢细胞培养重组贝伐珠单抗的细胞培养工艺。采用全因子试验设计和... 本研究采用多因素试验设计结合响应面分析法,通过对初始活细胞密度、变温时活细胞密度、培养时间、基础培养基混合比例和五水合硫酸铜添加浓度的研究,优化了以中国仓鼠卵巢细胞培养重组贝伐珠单抗的细胞培养工艺。采用全因子试验设计和中心复合设计,以抗体产量和乳酸浓度作为响应值进行模型拟合,应用MODDE软件对工艺参数模型进行预测,并对最佳工艺参数进行验证,得到的最优工艺参数为:初始时每1 ml含活细胞数(0.9±0.1)×10~6个、变温时每1 ml含活细胞数(20±2)×10~6个、BM01基础培养基占比75%、五水合硫酸铜浓度140μg/L、培养时间14 d,最终抗体产量高达5.3 g/L,同时收获时乳酸水平显著降低至0.4 g/L,降低了工艺失败的风险,提高了培养过程的耐受性。本研究为日后同类细胞培养工艺的开发或研究提供了参考。 展开更多
关键词 贝伐珠单抗 中国仓鼠卵巢细胞 试验设计 响应面分析 细胞培养工艺
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Reconstruction of 3D Skin Model and Its Application in Evaluation the Efficacy of Cosmetic Raw Materials and Active Intredients
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作者 Song Xiaojie Zhou Chunxia +1 位作者 Yao Qifeng Wu Yue 《China Detergent & Cosmetics》 2018年第1期74-79,共6页
Via the use of Mimedisc~? as a scaffold, the normal human dermal fibroblasts were first seeding into the scaffold to form a dermal equivalent after three weeks, and then seeding normal human epidermal keratinocytes on... Via the use of Mimedisc~? as a scaffold, the normal human dermal fibroblasts were first seeding into the scaffold to form a dermal equivalent after three weeks, and then seeding normal human epidermal keratinocytes on it, followed by immersion and air-liquid interphase culture stage, to finally form a 3 D sponge matrix skin model which has a very similar structure of normal human skin(NHS). The results of Masson staining, and immunohistochemistry(IHC), immunofluorescence(IF) staininccg show that this skin model has a very similar structure and key protein expression of NHS. Meanwhile, this model was used as a tool to investigate the effect of Himalaya cedar extract on Dermal-Epidermal Junction(DEJ) in vitro. Results show that the Himalayan cedar extract can significantly increase the thickness of the epidermis, thus increase the barrier capacity of the skin to resist external environment. Further, this Himalaya cedar extract can promote the expressions of Laminin 5 and Collagen VII of DEJ. The expressions of the Laminin 5 and Collagen VII increased 20% and 47% respectively.So the Himalaya cedar extract displays the potential to be applied in development of anti-aging cosmetics. 展开更多
关键词 cosmetic raw materials active ingredient 3D skin model (3D skin equivalent) cedar Dermal-Epidermal Junction (DE J) ANTI-AGING
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大规模哺乳动物细胞培养中pCO2的控制策略 被引量:1
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作者 刘小双 陈飞 +2 位作者 赵孟江 洪巧巧 徐寒梅 《药物生物技术》 CAS 2019年第2期172-177,共6页
细胞培养工艺放大是生物抗体药物从实验室工艺走向临床和商业生产的必经之路,基于生物反应器的大规模细胞培养技术是制药企业的核心竞争力。哺乳动物细胞对环境变化高度敏感,大小规模反应器中工艺表现不一致成为放大的主要挑战,其中高... 细胞培养工艺放大是生物抗体药物从实验室工艺走向临床和商业生产的必经之路,基于生物反应器的大规模细胞培养技术是制药企业的核心竞争力。哺乳动物细胞对环境变化高度敏感,大小规模反应器中工艺表现不一致成为放大的主要挑战,其中高二氧化碳分压(pCO2)问题给大规模反应器中细胞生长、代谢和蛋白产量与质量带来严重影响。二氧化碳(CO2)积累主要来自于细胞代谢产生CO2与反应器传质水平的失衡。通过分析CO2积累的原因,从培养工艺的优化和放大参数的合理设计两方面总结了降低大规模CO2积累的方法,最后结合新型大规模反应器pCO2预测模型,为工艺放大过程中pCO2的有效控制提供参考。 展开更多
关键词 细胞培养工艺放大 哺乳动物细胞 二氧化碳积累 pCO2控制
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In vitro comparative evaluation of three CLD/siRNA nanoplexes prepared by different processes 被引量:2
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作者 Chong Qiu Shihe Cui +1 位作者 Jing Sun Jiancheng Wang 《Journal of Chinese Pharmaceutical Sciences》 CAS CSCD 2016年第9期660-668,共9页
In this study, a gemini-like cationic lipid (CLD) was used as the carrier to study the complexation features of CLD/ siRNA nanoplexes (CLD/siRNA NPs). Three types of CLD/siRNA nanoplexes (named as AT NPs, HT NPs ... In this study, a gemini-like cationic lipid (CLD) was used as the carrier to study the complexation features of CLD/ siRNA nanoplexes (CLD/siRNA NPs). Three types of CLD/siRNA nanoplexes (named as AT NPs, HT NPs and MT NPs) were prepared by different processes: AT method (mixing siRNA solution with preformed CLD nanoparticles), HT method (hydrating a CLD thin film with siRNA solution), and MT method (dropping an ethanolic solution of CLD into siRNA solution under sonication). The particle size, zeta potential, morphology, siRNA protection, cytotoxicity, cellular uptake, and targeted mRNA downregulation were studied. At the optimal N/P ratio of 10, the sizes of the three CLD/siRNA NPs were MT NPs ((222.3±19.1) nm)〉 HT NPs ((105.7±1.31) nm)〉AT NPs ((91.8±1.75) nm). Different nanostructures were formed despite the fact that they were composed of the same components. Furthermore, the TEM images indicated that different morphologies were found in the three NPs, indicating that the nanoplexes were assembled by different mechanisms. Among the three NPs, the cell uptake capacity were as follows: AT NPs〉MT NPs〉HT NPs, whereas the silencing levels on epidermal growth factor receptor (EGFR) in HeLa cells were MT NPs〉AT NPs〉HT NPs. Based on the above results, we hypothesized that the different preparation processes resulted in nanostructures with varying biological effects. Therefore, we believe that structural optimization of siRNA nanoplexes is essential in achieving better siRNA encapsulation, protection, and gene silencing efficiency. 展开更多
关键词 SIRNA Delivery NANOPARTICLES Preparation Cellular uptake
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