小鼠合体滋养细胞微绒毛膜制备方法的研究

目的建立一种制备小鼠合体滋养细胞微绒毛膜(STBM)的方法。方法收集足月孕小鼠的胎盘,利用机械分离法剪碎胎盘进行差速离心,分离小鼠STBM。用Lowry法测定制备的小鼠STBM蛋白水平,用组织多肽抗原作为小鼠STBM的标记物,采用酶联免疫吸附测定(ELISA)检测STBM的水平,利用电镜观察并分析小鼠STBM的形态结构。结果实验获得的小鼠STBM制剂的蛋白水平为(0.69±0.12)mg/mL,TPA水平为(61.49±9.78)ng/mL。电镜下小鼠STBM的直径为(228.52±90.06)nm的囊泡状结构。结论制备的小鼠STBM与人STBM高度相似,可为子痫前期致病机制的探索提供在体研究的实验基础。

合体滋养细胞微绒毛膜与子痫前期

子痫前期是严重危害母儿健康的产科常见病,是导致孕产妇和围生儿发病率和死亡率升高的主要原因之一,其病因至今未明。近年来合体滋养细胞微绒毛膜(STBM)与子痫前期发病密切相关得到重视,合体滋养细胞微绒毛膜是胎盘合体滋养细胞碎片脱落进入母体血循环后形成的,可经多种途径损害母体血管内皮细胞,影响母体自身免疫系统,从而在子痫前期的发病中起重要作用。就合体滋养细胞微绒毛膜与子痫前期的关系综述。

大黄致金黄地鼠脾虚造型及其小肠粘膜上皮细胞微绒毛的变化

在文献[1—3)中,我们为探讨脾虚实质提出了实验依据。本文报导以大黄水浸煎剂导致金黄地鼠脾虚及复健的过程,及其小肠粘膜上皮细胞微绒毛变化,并对此变化与脾虚关系进行了讨论。实验材料与方法实验按本科研究组对中医脾虚动物造型的常规方法,用叙利业金黄地鼠(Mesoericetusauratus) 121只,雄性,体重80—100克,分7批进行实验。

通过流动腔实验测量HL-60细胞微绒毛弹性

目的滤除平行平板流动腔实验数据中的噪声,以清晰观测细胞滚动黏附过程,并发展基于流动腔实验的细胞微绒毛弹性的测定方法。方法运用小波分析方法技术,分离从流动腔实验中得到的E-选择素介导的HL-60细胞滚动黏附实验数据的高频热噪声信号;利用能量均分定理和拴缚细胞的力平衡方程,构建细胞微绒毛的伸长与弹性间的关系。结果通过小波分析滤噪,可以清晰定位细胞滚动黏附的不同阶段:自由滚动-减速-停止-加速;在壁面剪切应力为0.01～0.06Pa的条件下,源于热噪声的细胞脉动能量约占总的脉动能的80%,测得HL-60细胞微绒毛的弹簧常数为(13.7±7.4)μN/m。结论小波分析技术可滤除流动腔细胞滚动黏附实验数据中的热噪声;细胞热脉动信号中含有细胞微绒毛弹性的信息,使得人们可以采用流动腔实验技术来测量细胞微绒毛的弹性。

重度子痫前期胎盘合体滋养细胞微绒毛膜脱落与Rho/ROCK分子表达的关系

目的探讨重度子痫前期(sPE)患者合体滋养细胞表面微绒毛膜(STBM)脱落水平与胎盘组织Rho/ROCK分子表达的关系。方法收集sPE产妇(sPE组)和正常产妇(对照组)胎盘组织各20例,透射电镜下观察胎盘合体滋养细胞表面微绒毛结构变化,应用体视学方法分析细胞表面微绒毛数密度(Nv)、表面积密度(Sv)和体积密度(Vv),通过Western blotting和免疫组化检测胎盘组织中Rho亚家族蛋白成员(RhoA、RhoB、RhoC)及Rho激酶(ROCKI、ROCKⅡ)的表达水平。应用Spearman等级相关分析法检验Rho、ROCK蛋白表达水平与STBM脱落水平的相关性。结果 sPE组患者胎盘合体滋养细胞表面微绒毛的Nv、Sv、Vv均显著小于对照组(P<0.05),胎盘组织中RhoA、RhoB、ROCKI、ROCKⅡ蛋白表达水平明显高于对照组(P<0.05)。sPE组患者胎盘组织中RhoB、ROCKI、ROCKⅡ的表达水平与STBM的脱落水平均呈正相关(r=0.631,r=0.826,r=0.865,P<0.05)。结论 RhoB及其与下游分子ROCKI、ROCKⅡ构成的信号通路可能在sPE时胎盘STBM脱落过程中发挥重要作用。

不同消化手段对体外培养癌细胞微绒毛的影响

本实验表明通常使用0.02%EDTA或0.25%Trypsin在常规条件下消化培养的细胞不会造成微绒毛的明显损伤,但要适当控制消化时间。消化时间过长能导致微绒毛的显著改变。经过EDTA处理细胞后必须用Hanks液清洗干净,否则残留于培养液中的EDTA对细胞可产生不良影响。用0.02%EDTA与0.25%Trypsin以1∶1等量混合制成的消化液对细胞的消化作用较好,对细胞膜微绒毛无损伤作用。

国人卵细胞的形态结构

本文对50例国人卵细胞进行了光镜和电镜观察。卵细胞为圆形,直径为50~100μm。核大,圆形,直径为15~20μm。外周为透明带和卵泡细胞。在卵泡细胞之间隙,可见Call-Exner小体。卵细胞表面有许多微绒毛。核膜的两层结构清楚可见,核孔多达4,000个/mm^(2),核孔复合物明显。细胞器极丰富,分布规律。线粒体嵴短而少,基质电子密度比较大。内质网多,囊腔膨大,高尔基复合体发达,多分布于外周。环层板是由长1.5~2.0μm、平行排列的扁囊组成。在扁囊上,可见到核孔样结构。卵细胞中成束的纤维样物质就是卵黄板,卵黄板上有明暗相间的横纹,其周期为20nm。皮层颗粒为圆形,直径0.2~0.4μm,外包一层膜,电子密度大。

胎盘及外周血中STBM与早发型重度子痫前期病因的研究

目的:测定孕妇胎盘组织和血清合体滋养细胞层微绒毛膜(STBM)在重度子痫前期的表达情况,揭示早发型与晚发型重度子痫前期可能具有不同的病因及发病机制。方法:收集在我院治疗的早发型与晚发型重度子痫前期患者各15例,及与两组孕周相匹配正常妊娠孕妇各10例。采用实时荧光定量PCR(Real-time RT-PCR)方法测重度子痫前期患者胎盘中STBM的标记物TPAmRNA水平,另用酶联免疫分析法(ELISA)测定血清和胎盘中STBM的标记物TPA蛋白表达水平。结果:①早发型组孕妇胎盘STBM的标记物TPA相对含量(2.04±0.32 ng/ml),高于晚发型组(1.75±0.31 ng/ml)(P<0.05),早发型组胎盘STBM的标记物TPA mRNA含量(0.0342±0.0021)高于晚发组(0.0222±0.0020)(P<0.05);②早发型组孕妇血清中STBM的标记物TPA水平(1.88±0.43 ng/ml)高于晚发型组(1.59±0.26 ng/ml)(P<0.05)。早发型组和晚发型组血清中STBM的标记物TPA水平均高于同期正常孕妇血清中的TPA水平(P均<0.05)。③早发型组孕妇胎盘组织中STBM的标记物TPA水平与血清尿素氮水平、血清肌酐水平、S/D比值之间均呈显著正相关。晚发型组中与血清肌酐水平之间呈显著正相关。④早发型组孕妇血清中STBM的标记物TPA水平与血清肌酐水平、收缩压、舒张压之间均呈显著正相关。晚发型组中与血清肌酐水平、S/D比值、收缩压之间均呈显著正相关。结论:早发型重度子痫前期胎盘的合体滋养细胞凋亡早且严重,早发型与晚发型重度子痫前期可能具有不同的病因及发病机制。

棉铃虫幼虫取食转HaHR3基因烟草后中肠组织的病理变化

通过植物介导的RNAi能够沉默棉铃虫蜕皮调节转录因子Ha HR3基因。棉铃虫取食含有dsRNAs的转基因烟草后,其Ha HR3基因的转录水平及蛋白表达水平均被有效抑制,导致棉铃虫幼虫生长发育畸形或死亡(尹富仕等,2010;Xiong et al.,2013)。本研究利用透射电镜观察棉铃虫取食转Ha