化香果单宁/聚N,N-二甲基丙烯酰胺水凝胶的制备及细胞黏附性能

聚N,N-二甲基丙烯酰胺(PDMAA)水凝胶的孔结构过于致密且不可降解,限制了其在组织工程领域的应用。为解决这些问题,笔者利用半互穿聚合物网络(semi-IPN)技术,在PDMAA网络中加入化香果单宁(TA),设计并合成了一系列新型的TA/PDMAA semi-IPN水凝胶,将"细胞黏附及可降解特性"引入水凝胶体系中。结果表明:加入1 m L TA溶液(质量分数为3%)明显改善了凝胶的孔结构,TA/PDMAA semi-IPN水凝胶表现出连续均匀的多孔结构,孔径分布为37.7~87.1μm。在磷酸盐缓冲液(PBS)中,TA/PDMAA semi-IPN水凝胶可以降解,交联剂的含量可以调控降解速率。胞外毒性分析结果证明了TA/PDMAA semi-IPN水凝胶对COS-7细胞及CHO细胞完全无毒,细胞成活率均高于90%。引入TA显著改善了细胞黏附情况,COS-7细胞及CHO细胞可在TA/PDMAA semi-IPN水凝胶表面较好生长。TA/PDMAA semi-IPN水凝胶表现出较好的生物相容性,具有在组织工程领域应用的潜力。

血清对脐带间充质干细胞体外培养的影响

目的探讨血清对脐带间充质干细胞体外培养的影响。方法将人脐带间充质干细胞分别培养在不含血清、含灭活血清和含未灭活血清的低糖达尔伯克改良伊格尔培养基(L-DMEM)中。每天用显微镜观察脐带间充质干细胞在3种培养基中的生长情况,并计算细胞总数、统计细胞成活率。结果脐带间充质干细胞在含未灭活血清的L-DMEM中生长状况最好,在不含血清的L-DMEM中生长状况最差。结论含未灭活血清的L-DMEM是脐带间充质干细胞体外培养的最佳培养基。

不同条件下转化BHK-21细胞冻存复苏效果比较

为寻找出一种简单有效的转化BHK-21细胞冻存方法,对转化BHK-21细胞用2种冻存液和3种方法进行冻存,复苏后用台盼蓝拒染和生长曲线法检测细胞成活率。结果表明,采用2种冻存液,细胞复苏成活率无明显的差别,方法1为90%以上,方法2和3均为90%以下。方法1可用于转化BHK-21细胞冻存。

玉米单细胞培养的研究

将类型Ⅱ愈伤组织从固体培养基转入悬浮培养 ,发现在改良 1 / 2MN培养基 ,1 .0 -2 .0mg/L的2 ,4 -D浓度及 1 0 0 0mg/L肌醇存在下 ,适合所有不同基因型玉米自交系悬浮细胞的生长和细胞成活率的提高 .悬浮培养 5-6天继代 1次是适宜的 .大量元素减半和 0 .5-1 .0mg/L的 2 ,4 -D浓度用于玉米单细胞培养 ,能获得良好的细胞分裂和生长 .

改良型PRF与普通型PRF在脂肪移植应用中的实验对比研究

目的:探索改良型富血小板纤维蛋白(advance platetel-rich fribin,A-PRF)与普通型富血小板纤维蛋白(platetel-rich fribin,PRF)在脂肪移植中的应用效果,进而为临床应用提供指导。方法:将18只实验兔随机分成三组,实验组(A-PRF组):取兔背部脂肪组织,将2ml A-PRF+1ml颗粒脂肪移植到兔耳分离好的区域;阳性对照组(PRF组):兔耳移植区移入2ml PRF+1ml颗粒脂肪;阴性对照组(NS组):兔耳移植区移入2ml生理盐水+1ml颗粒脂肪。分别于4周、8周、12周取材进行大体观察、称重、HE染色与免疫染色来比较三组间脂肪成活差异。结果:各时间点,A-PRF组的脂肪存活率及新生毛细血管密度明显优于其他两组,PRF组结果优于NS组,且三组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论:A-PRF在增加脂肪细胞成活率、减轻炎症反应及促进毛细血管新生方面优于普通型PRF,这为A-PRF的临床使用提供参考。

异体软骨组织移植物的体外液体保存

背景:由于关节软骨无神经和血管,其营养主要来源于滑液和滑膜血管的渗透作用,自身修复能力有限,因而如何更好的修复关节软骨损伤成为亟待解决的医学难题。目的:回顾近年来关于软骨损伤修复方法以及异体软骨体外保存方法的文献研究,找到适合异体软骨组织体外保存的最佳保存条件以及培养液介质成分,从而提高异体软骨组织体外保存效果。方法:计算机检索PubMed数据库和中国期刊全文数据库(CNKI)于1990年1月至2013年2月有关异体软骨组织移植物体外液体保存方法的研究,检索关键词分别为"Osteochondral allograft;tissue culture;chondrocyte survival rate;in vitro"和"关节软骨;异体移植;液体保存",排除发表时间较早或重复研究。结果与结论:目前主要有2种方法体外保存异体骨软骨。低温冷冻保存法保存后的软骨细胞存活率降低明显,影响移植效果,因此临床应用较少。液体保存法能够提高细胞成活率,保持组织活性,但保存时间不长,不能广泛应用。学者们又进一步改良液体培养环境以及培养液成分,延长了软骨组织体外保存时间,提高了软骨组织保存效果。

探究不同浓度的酒精对细胞的毒害作用——“探究植物细胞的吸水和失水”实验的拓展

对教材进行了二次开发,将"植物细胞的无氧呼吸过程"等知识目标和"观察根尖分生组织细胞的有丝分裂"实验中细胞计数、表格设计等能力目标进行整合,引导学生应用"植物细胞的吸水和失水"实验中获得的"利用质壁分离鉴定细胞的死活"的技能来探究酒精浓度对植物细胞毒害作用影响的一般规律。

改良推注方法制备脂肪移植SVF胶的实验研究

目的探讨改良推注法与常规推注法制备基质血管成分(stromal vascular fraction, SVF)胶的效果。方法分别采用改良推注法和常规推注法从抽吸获取的脂肪组织中分离制备SVF胶,并对所获取的SVF胶进行细胞计数、增殖率、细胞成活率、细胞碎片率等生物学特性进行检测。结果改良推注法获取的SVF胶的细胞成活率较高(P<0.05),细胞凋亡、细胞碎片率显著低于常规推注法(P<0.05)。结论采用改良推注法制备脂肪移植SVF胶更加快捷、方便,并且可提高移植细胞的成活率、降低细胞碎片率,在疾病治疗及创伤修复中有较好的应用前景。