BMP15对绵羊卵丘细胞扩展相关基因及激素受体基因表达量的影响

为探究添加骨形态发生蛋白15(BMP15)对绵羊卵丘细胞体外培养扩展相关基因及激素受体表达量的影响,本实验采集健康绵羊离体卵巢,分离卵丘-卵母细胞复合体收集卵丘细胞进行体外培养,分别在培养液中添加终浓度0、25、50、100、200 ng/mL的BMP15,以0 ng/mL为对照组,采用Real-time PCR方法检测BMP15处理的卵丘细胞中扩展相关基因(HAS2、PTGS2、PTX3)及激素受体基因(FSHR、E2R、LHR)的表达水平。结果表明:相较于对照组及其他浓度处理组,添加100ng/mLBMP15极显著提高了HAS2、PTGS2、PTX3和FSHR、E2R、LHR表达量。推测BMP15能够促进绵羊卵母细胞体外培养过程中卵丘细胞扩展,添加BMP15不仅能够上调FSHR、E2R、LHR的表达,还能促进卵丘细胞激素分泌。

牙周病患牙根面的细胞附着和细胞扩展

目的 :研究人牙周膜成纤维细胞 (PDL)对牙周病患牙和健康牙牙根面的早期附着和扩展 ,以及脂多糖(LPS)对其的可能作用。方法 :收集和制备 2 2例牙周病患牙牙根组织切片 ,2 0例健康牙牙根组织切片。PDL取自健康的牙周膜。将培养的PDL接种于牙根组织切片 ,孵育 1h 37℃ ,作细胞计数 ,检测细胞的早期附着 ;接种培养的PDL于牙根组织切片 ,孵育 4 8h 37℃检测细胞扩展。用血细胞计数器计数扩展细胞。用涂布LPS的组织培养孔试验LPS对细胞附着、细胞扩展的影响。结果 :人牙周膜成纤维细胞在牙周病患牙和健康牙牙根表面的早期附着没有差异 ,而两者间细胞的扩展有显著差异 ,健康牙高于患牙。患牙根面的LPS可能是抑制根面细胞扩展的因素之一。结论 :牙周病患牙和健康牙的根面均可发生PDL的早期附着 ,但随着时间的推移 。

GM-CSF对猪卵丘细胞扩展相关基因表达的影响

试验旨在研究猪卵母细胞体外培养过程中粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)对卵丘细胞的影响。在成熟培养液不变的情况下添加10μg/L和100μg/L的GM-CSF,对卵丘卵母细胞复合体(COC)分别培养12、24、48 h,运用CCK8检测试剂盒检测卵丘细胞活性。收集培养48 h的COC,观察卵丘细胞扩展情况,统计卵母细胞极体排出率。结果显示,GM-CSF对卵母细胞极体排出率无显著影响,但有助于3~4级卵丘细胞的扩散。100μg/L的GM-CSF作用48 h,能够极显著提高卵丘细胞的细胞活性(P<0.01)。研究表明,100μg/L的GM-CSF可促进COC中3~4级卵丘细胞的扩展。

哺乳动物多能干细胞:在创建疾病模型、发病机制、药物发现和个性化治疗中的作用

背景:多能干细胞的自我更新和多向分化的特征有可能彻底改变人们对生物学、医学、发育和疾病的理解。干细胞在胚胎发育的早期发挥着重要作用,研究干细胞可以深入理解生物体发育和组织器官形成的基本原理,探索各种疾病的潜在机制,研究受损组织和器官的修复和再生,以及推动药物发现和个性化治疗。目的:回顾多能干细胞的研究历程,并对多能干细胞的基本类别进行归纳总结,同时阐述常见哺乳动物中各类多能干细胞的建系情况。方法:应用计算机检索PubMed、Web of Science、中国知网和万方数据库,检索词为“多能干细胞,胚胎干细胞,诱导多能干细胞,扩展多能干细胞,家畜多能干细胞,Pluripotent stem cells,Embryonic stem cells,Induced pluripotent stem cells,Expanded potential stem cells,Livestock pluripotent stem cells等”,根据纳入标准和排除标准系统地筛选与哺乳动物多能干细胞相关的文献99篇进行综述分析。结果与结论:(1)小鼠胚胎干细胞经典理论认为,干细胞的多能态分为“初始”(na?ve)态和“始发”(primed)态两种,na?ve态对应于早期胚胎未植入子宫壁前的囊胚内细胞团;primed态对应于植入后的上胚层,二者在表观遗传特征、转录活性、外部信号依赖性和代谢表型等方面存在显著的特征差异;后来研究发现在初始态和始发态之间,还存在一个过渡状态——“形成态”(formative态);事实上,胚胎干细胞的多能性属于连续阶段的发展进程,而不是某种独立的细胞状态。(2)除了从囊胚内细胞团获得多能干细胞之外,还有多种多能干细胞获得方式和建系方法:如利用来源于小鼠胎儿原始生殖细胞所建立的胚胎生殖干细胞;利用Oct3/4,Sox2,c-Myc和Klf4因子诱导成年小鼠和人的成纤维细胞去分化所建立的诱导多能干细胞;体细胞核移植,孤雌激活,以及从新生或成体睾丸组织或卵巢组织中分离并进行类胚胎干细胞培养所建立的胚胎干细胞样细胞系;来源于多种成体组织的极小胚胎样干细胞和来源于前囊胚期的扩展多能干细胞,这些多能干细胞的共同特征为不断自我更新,表达核心多能因子,并具备原始三胚层分化能力。(3)目前,多能干细胞正在被用于疾病建模,以便研究不同疾病的机制并开发新的药物。同时,科学家正在尝试用多能干细胞培养各种组织和器官,为再生医学和移植提供新的可能性。然而,多能干细胞的临床应用面临着安全性挑战,包括细胞畸变和免疫排斥问题。不断改进多能干细胞的产生方法,将使其更安全、高效地适用于临床。(4)借鉴小鼠和人多能干细胞的获得方式和建系方法,研究者们已经在家畜中建立了各类多能干细胞,包括胚胎干细胞、诱导性多能干细胞、生殖细胞谱系的多能干细胞和扩展多能干细胞,这将为动物繁殖育种、基因工程、疾病模型、新药筛选和野生濒危动物保护提供新的途径。

持续病毒感染引起患者高频低亲和性T细胞扩展

通过巨细胞病毒（CMV）编码肽识别CD8T细胞是很方便通过人类白细胞抗原（nLA）染色检测出来。这些细胞常分化成有高度亲和力T细胞受体的不同效应器记忆细胞。英国利物浦大学的科研人员发现HLA-AX0201限制CMV特异性T细胞亚群的反应。这表明部分CD8T细胞亚群无法捆绑四聚体的主要组织相容性复合物（MHc）配体，

牛多能干细胞研究进展

多能干细胞(PSCs)是一类能够无限自我更新的细胞,能够分化成各种类型的组织,促进基因编辑和再生领域发展。牛作为最常见的家养有蹄类动物之一,具有很高的经济价值和遗传潜力,因此衍生稳定的牛多能干细胞对理解牛胚胎发育分子机制有着积极作用。目前,人们已在牛胚胎干细胞(bESCs)和诱导多能干细胞(biPSCs)方面做了诸多研究,但建立与小鼠和人类相当的bESC仍具有挑战性。文章重点综述了牛胚胎干细胞的各种衍生方式以及多能性维持的内部信号通路和外部微环境的相互作用,并介绍了诱导多能干细胞、扩展潜能干细胞的特点,以期为牛干细胞的相关领域提供参考。

猪不同直径卵泡内卵母细胞胞质成熟及体外发育潜力差异原因的初探

试验根据直径将猪卵泡分为2组：G1组（4~7mm）和G2组（2~4mm）,对2组卵泡内获取的卵母细胞体外成熟率和发育潜能进行了比较,利用相对定量PCR检测了卵丘细胞中卵丘扩展相关基因Has2、Ptgs2、Ptx31及Pgr的表达水平,应用绝对定量PCR检测了成熟培养前后卵母细胞线粒体拷贝数,并利用5,5′-二巯基-2-硝基苯酸（DTNB）酶循环法检测了体外成熟培养过程中卵母细胞谷胱甘肽（GSH）的含量。结果显示,G1组和G2组卵母细胞体外成熟率分别为95.06%和68.19%,G1和G2组排出第一极体的成熟卵母细胞孤雌激活后的囊胚率分别为51.47%和29.44%,2组卵母细胞在体外成熟率和孤雌发育率上均差异显著（P〈0.05）。G1组卵丘细胞在体外成熟培养过程中的扩展程度明显高于G2组,G1组卵母细胞对应的卵丘细胞扩展相关基因Has2、Ptgs2、Ptx31、Pgr的表达水平高于G2组（Has2基因在卵母细胞成熟培养0、24h除外）;G1组卵母细胞线粒体数、谷胱甘肽含量均高于G2组。以上结果表明,大卵泡来源的卵母细胞体外成熟能力和发育潜力优于小卵泡来源的卵母细胞,这可能与卵母细胞成熟过程中卵丘扩展程度、卵丘扩展相关基因表达激活情况、卵胞质内谷胱甘肽含量和线粒体拷贝数有关。

C型钠肽预处理对绵羊卵母细胞体外成熟及相关基因表达的影响

本实验旨在研究C型钠肽(CNP)预处理对绵羊卵母细胞体外成熟(IVM)及相关基因(Dnmt1、Zar1、Mater、HAS2、PTX3和PTGS2)表达的影响。以体外成熟24 h为对照组,研究CNP预处理组(200nmol/L CNP预处理4 h然后体外成熟24 h)中卵母细胞经孤雌激活(PA)后的发育情况,并通过RT-q PCR检测CNP预处理对成熟相关基因表达的影响。结果表明:200 nmol/L CNP可在4 h内有效抑制卵母细胞减数分裂进程。CNP预处理组中孤雌胚胎囊胚率显著高于对照组(P<0.05);绵羊卵母细胞成熟培养前,CNP预处理组中卵丘细胞扩展相关基因HAS2、PTGS2和PTX3表达量较对照组极显著上调(P<0.01);CNP预处理组中母源基因Dnmt1、Zar1和Mater表达量与对照组均无显著差异(P>0.05)。绵羊卵母细胞成熟培养后,CNP预处理组中PTX3表达量极显著高于对照组(P<0.01),而CNP预处理组中HAS2表达量较对照组极显著下调(P<0.01);CNP预处理组中母源基因Dnmt1、Zar1和Mater表达量均显著高于对照组(P<0.05)。综上表明,CNP预处理可影响绵羊卵丘细胞扩展相关基因HAS2、PTGS2、PTX3和母源基因Dnmt1、Zar1、Mater的表达,并提高绵羊卵母细胞成熟质量及早期胚胎发育能力。

地被菊开花过程中花瓣表面形态和细胞学变化

为促进地被菊花型育种,以地被菊白鹭不同开花过程中的花瓣为试材,采用扫描电子显微镜和常规石蜡切片的方法,通过测定不同开花阶段花瓣的花序直径、舌状花面积、鲜重和干重以及细胞类型,比较地被菊不同开花阶段花瓣表面形态和细胞扩展的动态变化。结果表明:随着开花过程的进行,地被菊白鹭花序直径、舌状花面积、鲜重和干重均呈现逐渐增大的趋势,地被菊开花过程的完成是伴随着舌状花逐渐增大的结果;舌状花近轴面和远轴面扫描电子显微结果显示,不同开花阶段近轴面和远轴面舌状花细胞排列较为一致,同一阶段细胞类型各不相同;随着开花过程的进行,近轴面菱形细胞和长方形细胞呈现先增加后降低的趋势,远轴面条形细胞呈现逐渐增加的趋势,近轴面和远轴面细胞扩展速率均呈现先上升后降低的趋势,S3的细胞扩展速率显著高于其它开花阶段;地被菊舌状花细胞均由上表皮细胞、中层z组织和下表皮细胞组成,S1、S2时细胞形状规则,排列整齐,S3、S4时细胞呈现横向生长,不同细胞间隙疏松。

植物激素在植物细胞壁扩展中的作用

细胞壁不仅是植物细胞结构的重要组成部分,而且控制着细胞的大小、形状和生长。细胞经有丝分裂后,原生质体吸水膨胀,细胞壁重塑,新生壁物质合成,纤维素定向沉积等引发细胞壁生长。在这些过程中,乙烯(ethylene,ET)、生长素(auxin)、赤霉素(gibberellin,GA)、油菜素甾醇(brassinosteroids,BR)等植物激素调控细胞壁生长相关酶类如纤维素合酶复合体(cellulose synthase A,CESA)、扩展素(expansin,EXP)、木葡聚糖内糖基转移酶/水解酶(xyloglucan endotran glucosylase/hydrolase,XET/XTH)的表达活性,进而调控细胞壁扩展,促使细胞壁的生长。

经典彩色预测模型

针对印刷中原稿和复制品之间存在的色差这一事实,详细介绍了至今为止的几种经典彩色预测模型:如直接针对半色调印刷过程的Neugebauer方程,Yu le-N ielsen模型和基于减色原理的Kubelka-Munk理论。通过调节模型中的变量来达到控制色差的目的。

热转移印花剩墨配色系统的研究

介绍了热转移印花过程中产生剩墨的原因,并提出了解决办法:由于色料混合配色模型是影响计算机自动配色精度的主要原因之一,所以将色彩空间进行细胞扩展,可以使色料混合模型K-M理论更加细化地运用到其中,从而达到提高配色精度及配色效率的目的。

一个新的OsBRI1弱等位突变体的鉴定及其调控种子大小的功能研究

水稻(Oryza sativa)籽粒大小是影响其产量的关键农艺性状,克隆并研究水稻籽粒大小相关基因对于提高水稻产量具有重要意义。为深入探究水稻籽粒大小的调控机制,通过EMS诱变品种宽叶粳(KYJ),分离了一系列水稻籽粒大小改变的突变体,其中smg12表现为籽粒变小,株高变矮,一级枝梗数和二级枝梗数减少。遗传分析表明,该小粒突变体受隐性单基因控制。细胞学分析显示,该突变体颖壳纵向细胞长度显著变短,表明SMG12主要影响细胞扩展。利用Mutmap方法对候选基因进行克隆,筛选出SMG12的候选基因OsBRI1,该基因编码油菜素内酯受体激酶。OsBRI1外显子上的第2074个碱基发生了由C到T的置换,产生非同义突变,使得该位置编码的脯氨酸变为丝氨酸,从而影响OsBRI1的功能。综上,该研究鉴定了OsBRI1基因的1个新等位变异,揭示了油菜素内酯途径调控水稻籽粒大小的细胞和分子基础。

DUF640基因BEAK-SHAPED GRAIN1/TRIANGULAR HULL1影响水稻粒形和粒重

种粒的形状和大小都会影响其重量并最终影响产量,然而对于种粒形状和大小的分子调控机制仍然未被研究清楚.最近本研究组分离到一株粒形呈鸟嘴状的水稻突变体beak-shaped grain1(bsg1),其粒长、粒厚和粒重都有所减少,内外颖也发生弯曲而导致其无法完全闭合.与野生型相比,突变体种子的淀粉粒呈现不规则状.组织切片显示bsg1内外颖的外薄壁细胞层细胞变小且数目减少,与粒形的表型一致.图位克隆表明,BSG1基因编码一个DUF640蛋白TRIANGULAR HULL1(TH1).定量PCR和启动子活性分析表明,BSG1主要在幼穗和茎杆中表达.BSG1的突变影响细胞分裂相关基因以及粒宽基因GW2的表达.实验结果表明,BSG1可能通过调控细胞分裂和扩展来影响种粒形状及大小.