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细胞骨架蛋白tubulin α、β在不同级别胶质瘤中的表达及其与预后的相关性 被引量:6
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作者 曾敬 饶慧兰 +3 位作者 张惠忠 侯景辉 吴惠茜 赵美卿 《实用肿瘤杂志》 CAS 2005年第6期497-499,共3页
目的探讨不同病理学分级胶质瘤中细胞骨架蛋白tubu linα、β的表达,评估tubu linα、β表达水平与胶质瘤的恶性程度及其与预后的相关性。方法应用免疫组化方法检测57例不同病理级别人胶质瘤组织中tubu linα、β表达情况,并分析tubu li... 目的探讨不同病理学分级胶质瘤中细胞骨架蛋白tubu linα、β的表达,评估tubu linα、β表达水平与胶质瘤的恶性程度及其与预后的相关性。方法应用免疫组化方法检测57例不同病理级别人胶质瘤组织中tubu linα、β表达情况,并分析tubu linα、β表达水平与病理分级及患者术后生存时间的相关性。结果不同级别胶质瘤tubu linα、β表达水平不同,高级别(Ⅲ、Ⅳ级)与低级别(Ⅰ、Ⅱ级)胶质瘤tubu linα、β表达水平的差异有显著性(P<0.05),且tubu linα、β表达水平与患者术后生存时间呈正相关性。结论tubu linα、β在胶质瘤恶性进展方面可能具有重要意义,对指导胶质瘤的分期、组织学分级和判断患者的预后有一定参考价值。 展开更多
关键词 微管蛋白 细胞支架蛋白质类/代谢 预后 免疫组织化学 脑肿瘤/病理学 神经胶质瘤/病理学
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8-甲氧沙林对黑素细胞内游离钙浓度及细胞骨架蛋白形成的影响 被引量:2
2
作者 张宪旗 郑敏 +1 位作者 牟宽厚 冯捷 《浙江大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2009年第4期348-351,共4页
目的:观察8-甲氧沙林对体外培养黑素细胞内游离钙浓度、细胞骨架蛋白形成的影响。方法:正常人黑素细胞取自包皮环切术切取的包皮,用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内游离钙浓度,用罗丹明结合毒伞素对细胞骨架蛋白进行特异性染色。结果:8... 目的:观察8-甲氧沙林对体外培养黑素细胞内游离钙浓度、细胞骨架蛋白形成的影响。方法:正常人黑素细胞取自包皮环切术切取的包皮,用激光共聚焦扫描显微镜检测细胞内游离钙浓度,用罗丹明结合毒伞素对细胞骨架蛋白进行特异性染色。结果:8-甲氧沙林可使细胞内游离钙离子浓度升高,促进黑素细胞骨架蛋白合成。结论:8-甲氧沙林可能通过诱导黑素细胞内钙离子浓度升高和细胞骨架actin蛋白生成,从而影响黑素细胞的迁移。 展开更多
关键词 黑素细胞/药物作用 甲氧西林/药理学 钙/代谢 细胞骨架 细胞支架蛋白质类/代谢 细胞 培养的
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β-连环蛋白与皮肤干细胞选择性分化 被引量:1
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作者 杨莉 刘杰 王德文 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第33期122-124,共3页
目的:β-连环蛋白是一种多功能、广泛分布的蛋白,参与了包括胚胎形成及个体发育等许多生物过程,近年来在生物及医学领域受到广泛关注。本文就β-连环蛋白在皮肤干细胞选择性分化的作用进行综述。资料来源:应用计算机检索PUBMED1996-01/2... 目的:β-连环蛋白是一种多功能、广泛分布的蛋白,参与了包括胚胎形成及个体发育等许多生物过程,近年来在生物及医学领域受到广泛关注。本文就β-连环蛋白在皮肤干细胞选择性分化的作用进行综述。资料来源:应用计算机检索PUBMED1996-01/2005-01期间的相关文章,检索词为“beta-catenin,epidermalstemcell,differentiation”,并限定文章语言种类为English。同时计算机检索万方数据库1996-01/2005-01期间的相关文章,检索词为“β-连环蛋白,皮肤干细胞,分化”,并限定文章语言种类为中文。资料选择:对资料进行初审,并查看每篇文献后的引文。纳入标准:文章所述内容应与β-连环蛋白在皮肤干细胞选择性分化研究相关。排除标准:重复研究或Meta分析类文章。资料提炼:共收集到22篇符合纳入标准的文献,涉及β-连环蛋白的生物学特性、皮肤干细胞的分布、表皮干细胞的分化调控、β-连环蛋白与皮肤干细胞的定向分化、β-连环蛋白功能的可能作用机制等方面。资料综合:β-连环蛋白的生物学功能包括粘合连接与信号传导。粘合连接是指细胞膜上的钙黏蛋白依次与细胞膜中的β-连环蛋白、α-连环蛋白及肌动蛋白相连形成的特殊结构以完成细胞-细胞、细胞-细胞外基质之间的黏附和相互作用。信号传导指的是β-连环蛋白在Wnt信号通路中的核心作用。β-连环蛋白的这两种功能相互依赖、相互影响,对于皮肤干细胞的分化有着特殊的意义:干细胞对基底膜的黏附是干细胞维持其特性的基本条件,对基底膜的脱黏附是诱导干细胞脱离干细胞群落,进入分化周期的重要调控机制之一。表皮干细胞的分化受内源性和外源性调控,整合素在表皮基底层干细胞与基底膜的信息调控和黏附中起重要作用。β-连环蛋白作为一种细胞因子,存在于表皮干细胞膜表面,在皮肤干细胞分化途径的选择及定向迁移中发挥着重要作用。结论:β-连环蛋白近年来在生物及医学领域受到广泛关注的原因主要与其粘合连接、信号传导两大功能有关。体内参与调控表皮干细胞与毛囊干细胞分化的因子有多种,β-连环蛋白与它们共同形成一个复杂的网络,为表皮细胞的分化提供了重要的微环境。 展开更多
关键词 细胞支架蛋白质类 皮肤 细胞 细胞分化 综述文献
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凋亡时细胞骨架蛋白结构的改变 被引量:11
4
作者 蔡军 《国外医学(生理病理科学与临床分册)》 2001年第4期276-278,共3页
细胞骨架是细胞重要的组成成分 ,维持着细胞正常形态和功能。凋亡时多种细胞骨架蛋白 (如actin ,myosin等 )由于受凋亡因素作用 ,蛋白结构发生改变 ,进而引起凋亡细胞的形态改变。因而细胞骨架的改变在细胞凋亡发生过程中具有重要作用。
关键词 脱噬作用 细胞支架蛋白质类 肌动蛋白
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电场干预对血管平滑肌细胞形态和细胞骨架的影响 被引量:4
5
作者 唐波 何国祥 +1 位作者 刘建平 李德 《中国临床康复》 CSCD 北大核心 2006年第21期70-72,i0004,共4页
目的:探讨生理电场干预对大鼠主动脉血管平滑肌细胞形态和细胞骨架蛋白F-actin表达的影响。方法:实验于2002-07/2003-12在解放军第三军医大学西南医院中心实验室进行。取清洁级Wistar大鼠47只,颈离断法处死大鼠,体外培养其主动脉血管平... 目的:探讨生理电场干预对大鼠主动脉血管平滑肌细胞形态和细胞骨架蛋白F-actin表达的影响。方法:实验于2002-07/2003-12在解放军第三军医大学西南医院中心实验室进行。取清洁级Wistar大鼠47只,颈离断法处死大鼠,体外培养其主动脉血管平滑肌细胞。①分别给予0,50,100,150,200,250mV/mm生理电场干预,显微成像及图像分析技术记录分析血管平滑肌细胞形态变化。②150mV/mm生理电场干预的血管平滑肌细胞在无生理电场(0)和生理电场作用5,10,30min、1,3,6h各时间点,用激光共聚焦显微镜检测细胞骨架蛋白F-actin的变化。结果:①血管平滑肌细胞在100~250mV/mm生理电场作用下显示明显的趋化反应,部分细胞的板状突起向阴极面伸展。②激光共聚焦显微镜显示150mV/mm生理电场作用5min,细胞内F-actin表达增加,30~60min达到高峰,以后仍然高于无电场干预的血管平滑肌细胞;F-actin逐渐呈平行排列,形成整齐的应力纤维丝。结论:生理电场干预下血管平滑肌细胞细胞膜向阴极伸展,血管平滑肌细胞F-actin合成和重新分布,发生结构改变,可能参与血管平滑肌细胞定向迁移的调控。 展开更多
关键词 电生理学 细胞 平滑肌 血管 细胞 细胞支架蛋白质类
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膝关节腔内培养骨髓间充质干细胞复合脱钙骨的组织工程软骨 被引量:2
6
作者 徐斌 王英明 +1 位作者 徐洪港 王瑞 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2013年第24期4371-4379,共9页
背景:如何更好地以组织工程学方法修复关节软骨缺损并达到良好的远期疗效目前尚无公识。目的:创新性地在膝关节腔内培养兔骨髓间充质干细胞复合同种异体脱钙骨的组织工程软骨。方法:采用全骨髓贴壁筛选法分离培养兔骨髓间充质干细胞,DME... 背景:如何更好地以组织工程学方法修复关节软骨缺损并达到良好的远期疗效目前尚无公识。目的:创新性地在膝关节腔内培养兔骨髓间充质干细胞复合同种异体脱钙骨的组织工程软骨。方法:采用全骨髓贴壁筛选法分离培养兔骨髓间充质干细胞,DMEM/F12完全培养基培养,成软骨诱导条件培养基诱导分化。取同种异体兔的髂骨和椎体骨制作成脱钙骨支架,诱导后的骨髓间充质干细胞种植于脱钙骨支架上,培养1d后将细胞-支架复合物用筋膜包裹置于兔左膝关节腔内培养,单纯脱钙骨支架筋膜包裹置入右膝关节腔。于培养第4,8,12周分别取材,行大体观察并制成石蜡切片,采用苏木精-伊红染色、甲苯胺蓝染色,Ⅱ型胶原免疫组化染色方法进行组织学观察。结果与结论:培养4,8周,细胞-支架组标本Ⅱ型胶原免疫组化的平均吸光度值(A)分别为0.263±0.031,0.340±0.052,单纯支架组标本分别为0.147±0.027,0.165±0.030,两组比较差异有显著性意义(P<0.05);培养12周细胞-支架组标本Ⅱ型胶原免疫组化A值平均为0.362±0.037,标本类似正常软骨外观,Ⅱ型胶原免疫组化反应呈阳性;而单纯支架组脱钙骨支架降解。培养12周细胞-支架组苏木精-伊红染色结果显示细胞数量多,脱钙骨支架基本被吸收;而甲苯胺蓝染色结果显示有被染成紫红色的异染性基质形成。结果提示兔骨髓间充质干细胞复合同种异体脱钙骨可在兔膝关节腔内培养出组织工程软骨。 展开更多
关键词 组织构建 软骨组织构建 骨髓间充质干细胞 细胞支架蛋白质类 同种异体 脱钙骨 组织工程软 细胞 省级基金
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埃兹蛋白在胃癌组织中的表达及其临床意义 被引量:2
7
作者 李国芳 冯茂辉 +2 位作者 谢伟 龚玲玲 程甜甜 《中国医药生物技术》 CSCD 2007年第6期441-444,共4页
目的探讨埃兹蛋白(ezrin)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法随机选择手术切除并经组织病理学检查确诊的胃癌组织标本40份和癌旁正常组织标本30份,应用免疫组织化学SP法检测ezrin的表达,并分析ezrin表达与胃癌患者年龄、性别、肿瘤... 目的探讨埃兹蛋白(ezrin)在胃癌组织中的表达及其临床意义。方法随机选择手术切除并经组织病理学检查确诊的胃癌组织标本40份和癌旁正常组织标本30份,应用免疫组织化学SP法检测ezrin的表达,并分析ezrin表达与胃癌患者年龄、性别、肿瘤直径、浸润和分化程度、有无淋巴结转移等临床病理因素的相关关系。结果ezrin阳性表达率在胃癌组织为55%(22/40),癌旁正常组织为0,两者间差异有统计学意义(χ2=18.07,P<0.05);在高、中、低分化胃癌组织分别为30%(3/10)、53%(10/19)、82%(9/11)(χ2=5.760,P<0.05);在有、无淋巴结转移胃癌组织分别为72.7%(16/22)、33.3%(6/18)(χ2=6.208,P<0.05)。ezrin表达与胃癌患者年龄、性别、肿块大小及浸润程度无明显相关(P>0.05)。结论ezrin在胃癌组织中呈高表达,并与胃癌的淋巴结转移及恶性程度呈负相关,是反映胃癌生物学行为的有价值指标。 展开更多
关键词 细胞支架蛋白质类 胃肿瘤 腺癌 免疫组织化学
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Talin1在原发性肝细胞癌组织中的表达 被引量:1
8
作者 张剑林 钱叶本 +1 位作者 朱立新 熊奇如 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2010年第3期386-389,共4页
目的探讨踝蛋白1(Talin1)在正常肝组织、原发性肝细胞癌(HCC)组织、癌旁组织中的表达情况;探讨Talin1表达与HCC发生及其预后的关系。方法采用免疫组织化学方法 (SP法)检测正常肝组织(10例)、HCC组织(32例)及其对应癌旁组织(32例)中的Tal... 目的探讨踝蛋白1(Talin1)在正常肝组织、原发性肝细胞癌(HCC)组织、癌旁组织中的表达情况;探讨Talin1表达与HCC发生及其预后的关系。方法采用免疫组织化学方法 (SP法)检测正常肝组织(10例)、HCC组织(32例)及其对应癌旁组织(32例)中的Talin1表达情况。结果正常肝组织、HCC组织及癌旁组织中均有Talin1表达,其阳性表达率分别为100%、62.5%和96.9%。Talin1表达于阳性细胞胞质及胞膜上;Talin1在HCC组织中的表达显著低于癌旁组织和正常肝组织(P<0.05);而正常肝组织与癌旁组织中的Talin1表达差异无统计学意义(P>0.05);Talin1的表达与肝癌患者性别、年龄、肿瘤个数、AFP表达水平及HB-sAg无关(P>0.05),与患者术后一年无瘤生存率无关(P>0.05);而与肝癌病理分化程度、包膜完整性、门脉癌栓形成及肿瘤大小相关(P<0.05)。结论 Talin1与HCC的癌变、浸润和转移有关;Talin1可作为HCC发生、发展的预测指标之一。 展开更多
关键词 肝肿瘤 细胞 细胞支架蛋白质类 免疫组织化学
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哮喘发作与细胞骨架重建相关基因的差异表达 被引量:1
9
作者 蔡绍曦 赵海金 +3 位作者 丁彦青 李文军 周斌 肖军 《第四军医大学学报》 北大核心 2006年第24期2226-2228,共3页
目的:研究外周血嗜酸性粒细胞(EOS)在哮喘发作时与细胞骨架相关基因的差异表达.方法:应用SuperSMARTcDNAsynthesis技术从总RNA合成足量的双链cD-NA.经液相杂交消减两组共同序列,以抑制性PCR方式扩增差异表达序列.构建上调与下调cDNA文库... 目的:研究外周血嗜酸性粒细胞(EOS)在哮喘发作时与细胞骨架相关基因的差异表达.方法:应用SuperSMARTcDNAsynthesis技术从总RNA合成足量的双链cD-NA.经液相杂交消减两组共同序列,以抑制性PCR方式扩增差异表达序列.构建上调与下调cDNA文库,菌落PCR扩增差异片段,应用差异筛选技术进一步鉴定差异表达基因并测序,结果通过核酸数据库进行同源性比较.结果:构建了高效的上调与下调消减cDNA文库,经鉴定及同源性分析有6个与细胞骨架重建有关,包括上调基因slingshot磷酸酶(SSH-2L),蛋白磷酸酶1β亚型(PP1Cβ),无功能糖基转移酶样蛋白(DOCK-8),蛋白酪氨酸磷酸酶非受体型6(PTPN6)与非受体型12(PTPN12);下调基因,肌凝蛋白调节轻链结合蛋白(MIR).结论:这些骨架重建相关基因的差异表达可能参与了哮喘发作,进一步进行功能研究可能为哮喘治疗提供新的作用靶点. 展开更多
关键词 抑制性消减杂交技术 哮喘 嗜酸细胞 细胞支架蛋白质类
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Ezrin的原核表达及与其相互作用蛋白的研究 被引量:1
10
作者 周小艳 韩金祥 +3 位作者 崔亚洲 张松涛 钟宁 宋冠华 《中国医药生物技术》 CSCD 2009年第2期102-108,共7页
目的体外筛选人胰腺癌细胞中与Ezrin蛋白相互作用的蛋白。方法提取人胰腺癌Panc-1细胞总RNA,RT-PCR法扩增Ezrin基因。将扩增得到的Ezrin基因片段和pET15b质粒转化E.coli DH5α,获得pET15b-Ezrin重组质粒,双酶切后测序鉴定。将测序正确... 目的体外筛选人胰腺癌细胞中与Ezrin蛋白相互作用的蛋白。方法提取人胰腺癌Panc-1细胞总RNA,RT-PCR法扩增Ezrin基因。将扩增得到的Ezrin基因片段和pET15b质粒转化E.coli DH5α,获得pET15b-Ezrin重组质粒,双酶切后测序鉴定。将测序正确的重组质粒转化至E.coli BL21-CodonPlus(DE3)-RIL,以异丙基硫代-β-D-半乳糖苷(IPTG)诱导表达,对表达产物进行Ni2+-NTA亲和层析和分子筛纯化后,行SDS-PAGE、MALDI-TOF-MS/MS质谱分析和蛋白质印迹鉴定。裂解Panc-1细胞,获得总蛋白提取液,采用Pull-down方法体外筛选与Ezrin重组蛋白相互作用的蛋白,并对筛选出的目的蛋白进行双向凝胶电泳和MALDI-TOF-MS/MS质谱鉴定。结果RT-PCR扩增出的Ezrin基因片段(1761bp)与理论DNA表达片段大小一致,测序鉴定显示克隆的Ezrin基因序列与GenBank报道序列相符。SDS-PAGE、质谱分析和蛋白质印迹分析显示纯化后Ezrin重组蛋白相对分子质量为69400,与质谱分析的相对分子质量结果相符,为带有His-6标签的特异蛋白。双向凝胶电泳和质谱鉴定结果共筛选出可与Ezrin重组蛋白相互作用的7种蛋白,其分别为RNA-binding motif protein39(RBM39)、Transgelin(TAGLN)、Albumin(ALBU)、Formin-1(FMN1)、Rho GTPases(RHGBA)、Tetratricopeptide repeat protein16 (TTC16)、Syntaxin-binding protein1(STXBP1)。结论在大肠杆菌中成功表达、纯化了Ezrin蛋白,并在体外成功筛选出可信的与Ezrin蛋白相互作用的蛋白。 展开更多
关键词 细胞支架蛋白质类 胰腺肿瘤 蛋白质相互作用域和基序 电泳 凝胶 双向
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β-arrestin 2 siRNA对人乳腺癌Bcap37细胞的增殖影响 被引量:1
11
作者 胡美琴 高琨 《实用肿瘤杂志》 CAS 2017年第4期308-311,共4页
目的探讨β-arrestin 2的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人乳腺癌Bcap37细胞增殖的影响。方法在脂质体Lipofectamine^(TM) 2000的介导下用β-arrestin 2 siRNA转染Bcap37细胞,同时设置空白对照组(不作任何处理)及阴性对... 目的探讨β-arrestin 2的小分子干扰RNA(small interfering RNA,siRNA)对人乳腺癌Bcap37细胞增殖的影响。方法在脂质体Lipofectamine^(TM) 2000的介导下用β-arrestin 2 siRNA转染Bcap37细胞,同时设置空白对照组(不作任何处理)及阴性对照组(转染p GPU6/GFP/Neo SHNC)。转染后用实时荧光定量PCR(quantitative realtime polymerase chain reaction,qRT-PCR)及Western blot法检测Bcap37细胞β-arrestin 2基因及蛋白的表达情况,MTT法检测Bcap37细胞的增殖。结果转染96 h后β-arrestin 2 siRNA转染的Bcap37细胞中β-arrestin 2的基因及蛋白表达低于空白及阴性对照组(均P<0.05),并且转染96 h后β-arrestin 2 siRNA转染的细胞增殖速度低于空白及阴性对照组(均P<0.05)。结论β-arrestin 2 siRNA降低Bcap37细胞β-arrestin 2的表达并抑制细胞增殖。 展开更多
关键词 乳腺肿瘤/病理学 RNA 小分子干扰 基因表达 细胞支架蛋白质类 细胞增殖 细胞 肿瘤 转染
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Ezrin、CD44v6在皮肤基底细胞癌和鳞状细胞癌组织中的表达及意义 被引量:2
12
作者 蒋苏 李东霞 《医学临床研究》 CAS 2015年第8期1483-1485,共3页
【目的】探讨埃兹蛋白(Ezrin)及变异型 CD44分子6(CD44v6)在皮肤基底细胞癌(BCC)和鳞状细胞癌(SCC)组织中的表达及意义。【方法】采用 SP 法检测 Ezrin、CD44v6在 BCC、SCC 及正常皮肤组织中的表达,并分析其与临床特征的相关性... 【目的】探讨埃兹蛋白(Ezrin)及变异型 CD44分子6(CD44v6)在皮肤基底细胞癌(BCC)和鳞状细胞癌(SCC)组织中的表达及意义。【方法】采用 SP 法检测 Ezrin、CD44v6在 BCC、SCC 及正常皮肤组织中的表达,并分析其与临床特征的相关性。【结果】Ezrin 在正常组、BCC 和 SCC 组织中的阳性表达率分别为10%、60.0%、84.4%,组间比较有显著性差异(P<0.05);CD44v6在正常皮肤和 BCC、SCC 组织中阳性表达率分别为100%、26.7%、59.4%,各组比较也有显著性差异(P <0.05)。Ezrin 的表达水平随着肿瘤分级程度增高而增高(P <0.05),有淋巴转移的比无淋巴转移的表达强(P <0.05);CD44v6的表达水平随病理分级的增加表达强度下降(P <0.05),且有淋巴转移的阳性率表达比无淋巴转移低(P <0.05),Spearman 相关性分析显示两者表达有相关性(P <0.05)。【结论】Ezrin、CD44v6可作为 BCC 发生、发展的分子生物学标志。联合检测可作为研究和判断皮肤 SCC 生物学行为和预后的重要指标。 展开更多
关键词 皮肤肿瘤/病理学 肿瘤 基底细胞/病理学 肿瘤 鳞状细胞/病理学 细胞支架蛋白质类/代谢 抗原 CD44/分析 预后
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箭头形平行平板流室下内皮细胞形态及功能的改变
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作者 舒强 王速 +1 位作者 金鑫 凌光烈 《中国病理生理杂志》 CAS CSCD 北大核心 2006年第1期202-204,共3页
目的:观察不同血流状态下培养内皮细胞的形态及功能。方法:制作一种新的箭头形平行平板流室,高速摄像微粒子示踪技术行流体分析,测量细胞形态指数和F-肌动蛋白的免疫荧光染色。结果:液体在入口与狭窄开始处中点的流速为249.8mm/s,剪切... 目的:观察不同血流状态下培养内皮细胞的形态及功能。方法:制作一种新的箭头形平行平板流室,高速摄像微粒子示踪技术行流体分析,测量细胞形态指数和F-肌动蛋白的免疫荧光染色。结果:液体在入口与狭窄开始处中点的流速为249.8mm/s,剪切应力为71.9dyn/cm2,进入狭窄段时的流速为316mm/s,剪切应力为88.5dyn/cm2,细胞形态呈长纺锤形,方向沿液体流向排列,F-肌动蛋白纤维表达明显增加,呈束状,增密,上述区域液体为定常流。液体进入宽广区域后液体流速明显减慢并在两侧形成涡流甚至停滞,流速为54.4-119.6mm/s,剪切应力为15.6-34.4dyn/cm2,细胞近似圆形、卵圆形、多边形,F-肌动蛋白纤维表达似对照组。结论:新的箭头形平行平板流室是研究在不同血流状态下内皮细胞功能的良好装置。 展开更多
关键词 内皮 细胞支架蛋白质类 血流动力学 细胞形态
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与ezrin基因表达相关的微小RNA的筛选及在肝细胞癌浸润转移中的作用 被引量:2
14
作者 刘碧英 李坚 《中国现代医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第36期5-10,共6页
目的筛选肝癌细胞中与ezrin基因表达相关的微小RNA(miRNA),并分析其在肝癌浸润转移中的作用。方法①实时逆转录(RT)PCR技术和蛋白印迹法分别检测两对具有不同侵袭转移能力的肝癌细胞系HepG2和HepG2-X细胞及SF7721和SMMC-7721细胞中ezrin... 目的筛选肝癌细胞中与ezrin基因表达相关的微小RNA(miRNA),并分析其在肝癌浸润转移中的作用。方法①实时逆转录(RT)PCR技术和蛋白印迹法分别检测两对具有不同侵袭转移能力的肝癌细胞系HepG2和HepG2-X细胞及SF7721和SMMC-7721细胞中ezrin mRNA和蛋白的表达差异,选取其中ezrin mRNA和蛋白表达差异相对较大的l对细胞系(即SF7721和SMMC-7721细胞)用于以下实验。②用miRNA芯片筛选SF7721和SMMC-7721细胞中差异表达miRNA,然后用生物信息学工具[三大数据库,即TARGETSCAN(http://www.targetscan.org)、MICROCOSM(http://www.ebi.ac.Uk/enright-srv/microcosm/htdocs/targets/vS/)和PICTAR(http://www.pictar.mdc-berlin.de)数据库]预测并比对miRNA芯片的筛选结果,筛选出与ezrin基因表达相关的miRNA,并采用实时RT-PCR技术验证。将筛选出来的miRNA转染SF7721细胞,用蛋白印迹法和实时RT-PCR技术检测其对SF7721细胞中ezrin mBNA和蛋白表达的调控作用,以未做任何处理者为空白对照。结果①SF7721细胞中ezrin mRNA的表达水平是SMMC-7721细胞的(62.53±4.37)倍,HepG2-X细胞中ezrin mRNA的表达水平是HepG2细胞的(2.61±0.23)倍,两者分别比较,差异均有显著性(P<0.01);蛋白印迹法检测显示,SF7721细胞中ezrin蛋白的表达强度明显高于SMMC-7721细胞,HepG2-X细胞中ezrin蛋白的表达强度明显高于HepG2细胞。选取其中ezrin mRNA和蛋白表达差异相对较大的l对细胞系,即SF7721和SMMC-7721细胞用于以下实验。②将miRNA芯片筛选结果与生物信息学工具预测结果对比分析,筛选出两个可能调控ezrin基因表达的特异miRNA,即miR-183和miR-22;实时RT-PCR技术检测显示,miR-183和miR-22在SF7721和SMMC-7721细胞中的表达差异,与miRNA芯片筛选结果致,SMMC-7721细胞中miR-183和miR-22的表达水平分别是SF7721细胞的(7.21±1.16)和(8.52±1.43)倍,两者分别比较,差异均有显著性(P<0.01)。miRNA转染SF7721细胞后,其ezrin mRNA的表达水平是空白对照的(1.27±0.26)倍,两者比较,差异无显著性(P>0.05);而ezrin蛋白的表达强度则明显低于空白对照。结论侵袭力强的肝癌细胞中ezrin mRNA和蛋白均高表达,与ezrin基因表达相关的miRNA-miR-183和miR-22的过度表达均能有效调节侵袭转移相关基因ezrin蛋白的表达水平,它们可能具有ezrin基因介导的抑制肝癌细胞浸润转移的潜在功能。 展开更多
关键词 肝癌 微RNAS 细胞支架蛋白质类 肿瘤转移
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上皮性钙黏附蛋白和β-连环素的表达与非小细胞肺癌预后的关系 被引量:24
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作者 邱雪杉 杨秀 +1 位作者 李庆昌 王恩华 《中华病理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2002年第4期318-321,共4页
目的 探讨上皮性钙黏附蛋白 (E cad)及 β 连环素 (β cat)在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达及其与分型、分化、转移和预后的关系。方法 免疫组织化学 (SP法 )和原位杂交法。结果 免疫组织化学 :10 1例NSCLC中E cad及 β cat的阳性率... 目的 探讨上皮性钙黏附蛋白 (E cad)及 β 连环素 (β cat)在非小细胞肺癌 (NSCLC)中的表达及其与分型、分化、转移和预后的关系。方法 免疫组织化学 (SP法 )和原位杂交法。结果 免疫组织化学 :10 1例NSCLC中E cad及 β cat的阳性率分别为 6 8 3%和 81 2 % ,异常表达率分别为6 1 4 %和 6 4 4 %。E cad和 β cat的异常表达率与组织类型无关 (P >0 0 5 ) ,而与分化程度有相关性 (P<0 0 5 ) ,在有淋巴结转移病例中E cad及 β cat的异常表达率明显高于无转移病例 (P <0 0 5 )。E cad和 β cat异常表达病例的平均生存时间和 5年生存率明显低于正常表达病例。原位杂交 :NSCLC中E cad和 β catmRNA的阳性率分别为 38 9%和 4 7 2 % ,与蛋白正常表达一致率分别为 78 6 %和 82 4 %。结论 检测β cat或E cad/ β cat的共同表达将是指导临床治疗及估计预后的有意义指标 ,可应用于临床预后的综合评估。 展开更多
关键词 Β-连环素 非小细胞肺癌 预后 钙黏着糖蛋白 细胞支架蛋白质类 免疫组织化学 原位杂交 NSCLC
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Ezrin在涎腺腺样囊性癌组织中的表达 被引量:4
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作者 卿菁 张诠 +4 位作者 赖非云2 郭朱明 伍国号 吴秋良 曹云 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2007年第20期1542-1544,共3页
目的:探讨Ezrin在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及意义。方法:用免疫组织化学SP法检测Ezrin在涎腺腺样囊性癌组织和正常涎腺组织中的表达,分析其在涎腺腺样囊性癌组织中的表达与肿瘤的侵袭性、复发、转移和预后的关系。结果:Ezrin在涎腺... 目的:探讨Ezrin在涎腺腺样囊性癌组织中的表达及意义。方法:用免疫组织化学SP法检测Ezrin在涎腺腺样囊性癌组织和正常涎腺组织中的表达,分析其在涎腺腺样囊性癌组织中的表达与肿瘤的侵袭性、复发、转移和预后的关系。结果:Ezrin在涎腺腺样囊性癌和正常涎腺组织中的阳性率表达分别为44.68%和9.09%,P<0.05;在癌细胞中主要为胞质内表达,染色深,而在正常涎腺组织则主要为细胞膜表达,染色浅或阴性。Ezrin的表达强度与有无神经受侵、有无发生局部复发及远处转移相关,P<0.05。Ezrin表达阳性组和阴性组的5年累积生存率分别为66.70%和100.00%,10年累及生存率分别为27.83%和95.00%,阳性组较阴性组预后差,P<0.05。结论:Ezrin的表达强度与涎腺腺样囊性癌的发生、侵袭性、复发和转移性有关,且Ezrin阳性表达预示患者预后不良。 展开更多
关键词 腺样囊性/病理学 细胞支架蛋白质类 预后
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α-cat和β-cat及E-cad在食管癌组织中的表达及其临床意义 被引量:6
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作者 吴永廉 郑建盛 陈秀娇 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第10期752-755,共4页
目的:研究αcat、βcat和Ecad在食管癌组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测αcat、βcat和Ecad在100例食管癌组织中的表达。结果:αcat、βcat和Ecad的异常表达率分别为48%、51%和57%。αcat的表达与浸润深度、淋巴... 目的:研究αcat、βcat和Ecad在食管癌组织中的表达及临床意义。方法:应用免疫组织化学SP法检测αcat、βcat和Ecad在100例食管癌组织中的表达。结果:αcat、βcat和Ecad的异常表达率分别为48%、51%和57%。αcat的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和分化程度有关,u值分别为2.835、2.602、2.660和2.893,P值分别为0.005、0.009、0.008和0.004;βcat的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和分化程度有关,u值分别为4.566、3.095、2.484和3.578,P值分别为0.000、0.002、0.013和0.000;Ecad的表达与浸润深度、淋巴结转移、TNM分期和分化程度有关,u值分别为2.851、3.811、2.958和3.130,P值分别为0.004、0.000、0.003和0.002。αcat、βcat和Ecad正常表达患者的5年生存率高于异常表达者,χ2值分别为6.83、5.34和13.39,P值分别为0.009、0.021和0.000。食管癌组织中Ecad和αcat、βcat之间表达差异均无统计学意义,χ2值分别为2.37和1.25,P值分别为0.130和0.320。结论:αcat、βcat和Ecad的异常表达与食管癌发生发展有关,测定其表达情况可作为预测食管癌的生物学行为和预后的重要指标之一。 展开更多
关键词 食管肿瘤/病理学 细胞支架蛋白质类/生物合成 钙粘着糖蛋白/生物合成 免疫组织化学
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慢性应激及氟西汀治疗后大鼠海马细胞支架的改变 被引量:1
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作者 杨灿 王高华 +3 位作者 王惠玲 王晓萍 刘忠纯 朱志先 《中华精神科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2010年第4期241-245,共5页
目的 探讨慢性不可预见性应激及氟西汀治疗后大鼠细胞支架微管系统的动态性变化及其可能机制.方法 将24只大鼠按随机数字表法分为对照组(空白对照+生理盐水)、慢性不可预见性温和应激(CUMS)组(CUMS+生理盐水)和氟西汀组(CUMS... 目的 探讨慢性不可预见性应激及氟西汀治疗后大鼠细胞支架微管系统的动态性变化及其可能机制.方法 将24只大鼠按随机数字表法分为对照组(空白对照+生理盐水)、慢性不可预见性温和应激(CUMS)组(CUMS+生理盐水)和氟西汀组(CUMS+氟西汀),每组8只.对大鼠进行连续21 d CUMS后,氟西汀组给予氟西汀(10 mg/kg)治疗21 d,对照组和CUMS组给予生理盐水.实验结束后进行行为学观察,并使用免疫印迹法(western blot)检测大鼠海马乙酰化微管蛋白(Acet-Tub),酪氨酸化微管蛋白(Tyr-Tub),微管结合蛋白2(MAP-2)及磷酸化微管结合蛋白2(phospho-MAP-2).结果 (1)CUMS组糖水偏好[(55.13±11.80)%],总行程[(2736.59±511.20)cm],运动平均速度[(5.69±1.08)cm/s]及直立次数[(2.50±2.00)次]均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);氟西汀组上述指标与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05).(2)CUMS组与对照组相比,Acet-Tub表达升高[(171.84±10.34)%],Tyr-Tub[(62.06±9.24)%]和phospho-MAP-2[(68.81±8.93)%]的表达降低,差异有统计学意义(P均<0.01),MAP-2的表达与对照组比较无统计学意义(P>0.05);经氟西汀治疗后,Acet-Tub的表达降低为[(96.18±8.92)%],Tyr-Tub和phospho-MAP-2的表达分别升高为[(95.06±8.00)%]、[(100.60±7.30)%],与对照组比较均无统计学意义(P>0.05).结论 慢性应激后微管动态性减低,神经可塑性受损,氟西汀可以逆转海马的这些损伤,上述过程可能与微管相关蛋白磷酸化水平的变化有关. 展开更多
关键词 应激 细胞支架蛋白质类 微管 氟西汀
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E-cadherin与其相关因子β-catenin在肿瘤侵袭中的研究 被引量:1
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作者 曹健 魏盾 《中国误诊学杂志》 CAS 2008年第36期8833-8836,共4页
关键词 钙粘着糖蛋白/代谢 细胞支架蛋白质类/代谢 反式激活因子/代谢 肿瘤/代谢/病理学 综述[文献型]
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E-cad和β-cat在人结肠癌组织中的表达及相关性研究 被引量:1
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作者 沈金辉 吴璇 +3 位作者 曾绍文 王少洪 周厚强 方可君 《肿瘤防治杂志》 2004年第8期826-829,共4页
目的 :研究E cad和 β cat在结肠癌组织中的表达及意义。方法 :应用免疫组化SP法检测E cad和 β cat在 3 2例结肠黏膜、3 0例结肠腺瘤、96例结肠腺癌组织中的表达。结果 :E cad和 β cat在结肠腺癌病例中的异常表达显著高于结肠黏膜和... 目的 :研究E cad和 β cat在结肠癌组织中的表达及意义。方法 :应用免疫组化SP法检测E cad和 β cat在 3 2例结肠黏膜、3 0例结肠腺瘤、96例结肠腺癌组织中的表达。结果 :E cad和 β cat在结肠腺癌病例中的异常表达显著高于结肠黏膜和结肠腺瘤 ,P <0 0 1。E cad、β cat在低分化腺癌中的异常表达率显著高于高、中分化腺癌 ,P <0 0 1。结肠癌浸润肠壁全层病例的E cad异常表达率显著高于浸润肌层者 ,P <0 0 5。结肠癌伴有淋巴结转移者E cad、β cat的异常表达率显著高于无淋巴结转移者 ,P <0 0 5。E cad和 β cat异常表达率与结肠癌Duke’s分期密切相关 ,P <0 0 1,P <0 0 5。结肠癌E cad、β cat正常表达病例的 5年生存率远高于E cad、β cat异常表达者 ,P <0 0 1。 结论 :同时检测E cad和 β 展开更多
关键词 结肠肿瘤/病理学 钙黏着糖蛋白/分析 细胞支架蛋白质类/分析 免疫组织化学
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