人参皂苷CK对胃癌细胞株SGC-7901及其内源性VEGF的影响

目的研究人参皂苷CK对胃癌SGC-7901细胞增殖、细胞周期的影响及其对内源性分泌的血管内皮细胞生长因子(VEGF)的作用。方法以50、25、12.5、6.25、3.125、1.5625μg/ml的人参皂苷CK作用于胃癌细胞株SGC-7901,通过MTT法检测人参皂苷CK对细胞的抑制作用;采用流式细胞术检测细胞周期和细胞凋亡;ELISA定量检测细胞培养液中内源性VEGF的含量变化。结果 MTT法显示人参皂苷CK对胃癌细胞株SGC-7901有抑制作用,并且呈浓度、时间依赖关系;SGC-7901细胞经人参皂苷作用后出现明显凋亡峰,且细胞周期被阻滞在G0/G1期;人参皂苷CK处理组VEGF含量低于对照组(P<0.05),高浓度组低于低浓度组(P<0.05),且随着作用时间延长,VEGF含量降低。结论人参皂苷CK可通过诱导凋亡抑制胃癌细胞株SGC-7901生长,并可抑制SGC-7901细胞内源性分泌VEGF,人参皂苷CK可能成为一种潜在的抗胃癌药物。

川芎嗪对人胃癌细胞株SGC-7901/ADR增殖、凋亡和MDR1、GST-π表达的影响

目的：探讨川芎嗪诱导人胃癌细胞株SGC-7901/ADR凋亡及对MDR1、GST-π表达的调控作用。方法：不同剂量（0~120μM）川芎嗪内酯与人胃癌细胞株SGC-7901/ADR同培养不同时间（24、48及72 h）,50μM 5-氟尿嘧啶（5-FU）作为阳性对照组,采用CCK8法测定细胞的增殖,流式细胞术测定细胞凋亡率。用不同剂量的川芎嗪与细胞培养48 h后,采用Western blot测定MDR1、GST-π蛋白的表达情况,用半定量RT-PCR测定MDR1、GST-πmRNA表达。结果：不同浓度川芎嗪处理人胃癌细胞株SGC-7901,川芎嗪抑制SGC-7901细胞增殖呈浓度及作用时间依赖性且120μM川芎嗪的抑制率与阳性对照组相当;而且应用流式细胞仪检测发现川芎嗪作用于人胃癌细胞株SGC-7901 48 h后,细胞出现凋亡。Western blot及半定量RT-PCR检测细胞中MDR1、GST-π及其mRNA的表达,结果显示,川芎嗪可下调MDR1、GST-π表达,下调作用与TMZ相当甚至更具优势。结论：川芎嗪能够抑制人胃癌细胞株SGC-7901的增殖,诱导其凋亡,且能抑制细胞中MDR1、GST-π的表达,其表达量与川芎嗪剂量呈现明显的时间-浓度效应关系。

尼美舒利对人胃癌细胞株SGC-7901增殖和凋亡的影响

目的 :体外研究尼美舒利对人胃癌细胞株SGC - 790 1增殖的影响 ,并探讨其可能的作用机制。方法 :采用MTT法、流式细胞仪 (FCM)、电镜等技术 ,体外研究尼美舒利对人胃癌细胞株SGC - 790 1增殖和影响及可能的机制。结果 :MTT显示尼美舒利 (12 .5～ 4 0 0 μmol/L)呈时间—剂量依赖方式抑制人胃癌细胞株SGC - 790 1的增殖。FCM显示 ,DNA直方图上出现典型的亚二倍体“凋亡峰”。S期、G2 /M期细胞比例升高 ,G1期细胞比例下降 ,阻止细胞周期的进展。电镜下见典型的细胞凋亡形态特征 :细胞核染色质致密浓缩 ,凋亡小体形成等。结论 :尼美舒利体外能显著抑制人胃癌细胞株SGC - 790 1生长 ,可能与诱导细胞凋亡阻止细胞周期进展有关。

胃炎Ⅰ号含药血清对胃癌细胞株SGC-7901增殖及凋亡的作用

目的探讨胃炎Ⅰ号含药血清对人胃癌细胞株SGC-7901增殖及凋亡的作用。方法不同浓度胃炎Ⅰ号含药血清处理人胃癌细胞株SGC-7901后,MTT法检测细胞增殖变化,流式细胞术检测细胞凋亡变化。结果胃炎Ⅰ号含药血清呈剂量依赖性对SGC-7901细胞有生长抑制作用,低、中、高剂量组增殖抑制率分别为(30.33±1.79)%、(42.02±4.03)%、(60.67±2.75)%,差异有统计学意义(P<0.01)。胃炎Ⅰ号含药血清呈剂量依赖性对SGC-7901细胞有促凋亡作用,低、中、高剂量组凋亡率分别为(20.13±2.26)%、(26.61±4.41)%、(34.58±5.64)%,与空白血清组[(12.98±2.12)%]比较,差异有统计学意义(P<0.01)。结论胃炎Ⅰ号含药血清呈剂量依赖性对SGC-7901细胞有生长抑制和促凋亡作用。

L-精氨酸对人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的调控作用

目的:研究L-精氨酸(L-Arg)对人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的调控作用。方法:以胃癌细胞株SGC-7901为研究模型,采用流式细胞术和FITC-AnnexlnV/PI双染色检测L-Arg调控细胞凋亡的作用。借助western blot技术检测细胞凋亡分子的表达,利用RT-PCR方法检测等分子生物学技术对L-Arg胃癌细胞凋亡的调控作用进行研究。结果:L-Arg明显抑制抗凋亡蛋白Bcl-2和survivin的表达,明显上调p53蛋白的表达。结论:L-Arg通过下调抗凋亡蛋白Bcl-2和survivin的表达,上调促凋亡蛋白p53的表达,发挥对人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的调控作用。

积雪草苷抗人胃癌细胞株SGC-7901作用的研究

目的:观察积雪草苷对人胃癌细胞株SGC-7901的作用;初步探讨积雪草作用于胃癌SGC-7901细胞的机制。方法:采用MTT法观察积雪草对胃癌细胞增值抑制的作用,流式细胞术检测积雪草苷对胃癌细胞凋亡的诱导作用,透射电镜观察SGC-7901凋亡细胞的超微结构。结果:积雪草苷作用的胃癌细胞增值被抑制;促进了胃癌细胞株SGC-7901的凋亡,并存在量效关系。透射电镜观察显示胞质浓缩,核固缩,并可见凋亡小体。结论:积雪草苷可抑制人胃癌细胞SGC-7901的增值并诱导其凋亡。

附子生物碱对人胃癌细胞株SGC-7901凋亡及细胞周期的影响

目的:观察附子生物碱对人胃癌细胞株SGC-7901的增殖以及凋亡的影响。方法:运用MTT法,测定经附子生物碱处理后体外培养SGC-7901细胞的增殖活性。分别采用Annexin-V/PI双染法、流式细胞仪检测附子生物碱对细胞凋亡周期的影响。结果:①附子生物碱分别作用人胃癌细胞株SGC-7901 24 h、48 h、72 h后的IC50为0.231 8±0.002 2、0.160 1±0.022 7、0.103 1±0.023 1 mg·mL-1,与空白对照组比较有显著性差异(P<0.01)。②当附子生物碱浓度达到0.8 mg·mL-1时出现明显的凋亡,凋亡率为(59.38±5.05)%。③流式细胞仪检测发现,与空白对照组相比,给药组处于S期细胞的比例显著增多,并且G0/G1期前出现凋亡亚二倍体峰。结论:附子生物碱体外对人胃癌细胞SGC-7901具有增殖抑制作用,并促进其凋亡,还可使SGC-7901细胞阻滞于S期。

miR-93转染对胃癌细胞株SGC-7901侵袭迁移能力的影响及机制探讨

目的观察上调miR-93表达对人胃癌细胞株SGC-7901侵袭迁移能力的影响,并探讨其可能机制。方法将miR-93模拟物及其阴性对照物分别转染胃癌细胞株SGC-7901,qRT-PCR检测转染细胞的miR-93,细胞划痕实验及Transwell侵袭实验分别检测转染细胞的迁移及侵袭能力,qRT-PCR和Western blotting检测转染细胞的染色体质域解螺旋酶DNA结合蛋白5(CHD5)mRNA和蛋白。结果与转染阴性对照物的SGC-7901细胞相比,转染miR-93模拟物的SGC-7901细胞miR-93表达明显增加(P<0.01)、迁移和侵袭能力增强(P均<0.05)、CHD5mRNA及蛋白表达下调(P均<0.05)。结论过表达miR-93可促进SGC-7901细胞的迁移和侵袭,其机制可能与CHD5表达下调有关。

CIK细胞及上清液抗胃癌细胞株SGC-7901活性的研究

目的:探讨由多种细胞因子诱导的杀伤细胞(CIK)在体外的增殖情况,分析体外CIK细胞对胃癌细胞株SGC-7901的杀伤作用。方法:健康人外周血单核细胞(PBMC)在体外诱导成CIK细胞,计数培养不同时间的CIK细胞,并用流式细胞术动态分析其表型特征。倒置显微镜下观察CIK细胞作用于SGC-7901胃癌细胞的形态学变化;流式细胞仪检测CIK细胞培养上清液对胃癌细胞的诱导凋亡作用;采用MTT法检测CIK细胞对SGC-7901胃癌细胞株的杀伤活性。结果:CIK细胞随体外培养时间的延长,数量及杀伤活性均增加。体外培养21d,细胞总数增殖倍数111.63±10.97,CD3+CD56+双阳性细胞数量亦增加,比例达(35.8±9.7)%,其后两者数量逐渐降低。CIK细胞上清液能够诱导胃癌细胞株凋亡;CIK细胞对胃癌SGC-7901细胞株有明显的杀伤作用,最高杀伤率为(74.91±2.71)%。结论:CIK细胞具有较强的抗胃癌细胞活性,体外培养14～21d时具有较强的抗瘤活性,其主要通过直接杀伤及释放细胞因子诱导凋亡的作用杀伤肿瘤细胞。

唑来膦酸对人末梢血γδT细胞杀伤胃癌细胞株SGC-7901作用的影响

目的:探讨唑来膦酸对人末梢血γδT细胞杀伤SGC-7901作用的影响.方法:异戊烯焦磷酸法体外扩增人外周血γδT细胞,用不同浓度的唑来膦酸诱导γδT细胞和SGC-7901细胞株24h,MTT法检测唑来膦酸对这两种细胞生长抑制率的影响和LDH法检测γδT细胞的杀伤活性,流式细胞术检测诱导前后的γδT细胞和SGC-7901的凋亡率.结果:γδT细胞培养10d时从扩增前4.21%增加到70.35%,CD44达94.0%.唑来膦酸各浓度对SGC-7901细胞株的抑制率均明显高于γδT细胞,当唑来膦酸的浓度在5-25μmol/L时γδT细胞负抑制率呈剂量依赖关系,且γδT细胞的杀伤活性也逐渐增强,且于25μmol/L时杀伤活性最强,唑来膦酸诱导γδT细胞和SGC-7901细胞株24h,γδT细胞凋亡率明显低于SGC-7901(3.57%vs56.70%,P<0.05).结论:唑来膦酸在临床常规使用浓度下,能够促进γδT细胞的增殖,同时能够抑制肿瘤细胞的生长,且能够增强γδT细胞的杀伤活性.

HSP90抑制剂17-DMAG对胃癌细胞株SGC-7901增殖及凋亡的影响

目的:探讨热休克蛋白90(HSP90)功能特异性抑制剂17-DMAG对胃癌细胞SGC-7901增殖及凋亡的影响.方法:体外培养人胃癌细胞SGC-7901,以不同浓度的17-DMAG处理后采用MTT法检测SGC-7901细胞的生长抑制情况,流式细胞仪碘化丙啶(PI)染色分析细胞周期分布,流式细胞仪及Annexin V-FITC试剂盒监测17-DMAG对胃癌细胞SGC-7901凋亡的影响.结果:不同浓度的17-DMAG对人胃癌细胞SGC-7901有明显的生长抑制作用,各组之间比较(P<0.01),且呈时效量效依赖关系(F=241.313,246.856,均P<0.001).17-DMAG作用24h后胃癌细胞株SGC-7901呈现G2/M期阻滞,试验组与对照组比较(F=231.991,P<0.001),呈浓度依赖关系.17-DMAG处理胃癌细胞SGC-790124h早期凋亡细胞增加,48h晚期凋亡细胞增加.结论:17-DMAG可明显抑制胃癌细胞SGC-7901的增殖,使胃癌细胞SGC-7901阻滞于G2/M期,诱导胃癌细胞SGC-7901凋亡.

苯丁酸钠对胃癌细胞株SGC-7901的增殖抑制作用

目的研究苯丁酸钠(SPB)在体外对胃癌细胞株SGC-7901生长、分化的影响。方法应用MTT分析法、流式细胞仪、形态学观察法对在体外经不同浓度的SPB处理过的SGC-7901细胞进行检测。结果 SPB能抑制SGC-7901细胞的生长,并且有时间依赖关系及剂量依赖关系;应用流式细胞仪测定发现,经SPB处理的细胞其S期在16.48%,而未经处理的细胞其S期在31.07%;电子显微镜观察,细胞形态发生改变。结论SPB在体外抑制胃癌细胞株SGC-7901的生长,为SPB治疗胃肿瘤提供了实验依据。

全反式维甲酸对人胃腺癌细胞株SGC-7901凋亡的影响

目的研究全反式维甲酸(ATRA)对胃腺癌细胞系SGC-7901凋亡的影响,并初步探讨其可能的分子机制。方法 ATRA处理SGC-7901细胞,Hoechst染色检测ATRA对SGC-7901细胞凋亡的影响,Western blot法检测ATRA对凋亡相关蛋白表达情况的影响。结果 ATRA可诱导SGC-7901细胞的凋亡,且下调凋亡抑制蛋白Bcl-2的表达,对促凋亡蛋白Bax的表达和酶原形式的Caspase-3的表达没有影响。结论 ATRA促进SGC-7901细胞的凋亡,其分子机制可能是下调Bcl-2的表达,使Bcl-2/Bax的值降低进而促进细胞凋亡。

性激素对胃癌细胞株SGC-7901体外培养的影响

目的：探讨性激素在体外对胃癌细胞生长的影响。方法：选对数生长期细胞，加入不同浓度的雌二醇和睾酮，７ｄ后显微镜下计数，观察生长情况。结果：生理浓度的雌二醇和睾酮均促进胃癌细胞生长（Ｐ＜０．０１），高浓度睾酮抑制胃癌细胞生长；睾酮能拮抗雌二醇作用。

大黄素对人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的影响与初步机制

目的:探讨大黄素诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡及其相关机制.方法:采用CCK-8法和Tunel染色法检测不同浓度大黄素处理后,SGC-7901细胞凋亡的变化;免疫印迹法检测Bcl-2、Bax、cleavedCaspase3、cleaved-PARP、pre Caspase3、PARP的蛋白表达水平;JC-1染色荧光显微观察线粒体膜电位的变化.结果:CCK-8法和Tunel染色法显示大黄素呈浓度依赖性促进SGC-7901细胞的凋亡(存活率100.73%±8.97%vs 45.27%±3.75%,P<0.05);免疫印迹法显示给予60μm o l/L大黄素处理后,与空白对照组相比,细胞中B c l-2的蛋白表达显著降低(0.31±0.02 v s1.01±0.06,P<0.05),而B a x的表达显著增加(1.98±0.12 vs 1.00±0.08,P<0.05),导致Bcl-2/Bax比值显著降低(0.14±0.01 vs 1.02±0.13,P<0.05);再者,JC-1染色显示线粒体膜电位降低;活性的cleaved-Caspase3(1.73±0.13 vs 0.98±0.06,P<0.05)、cleavedPARP(2.29±0.17 vs 1.01±0.08,P<0.05)表达增加.结论:大黄素呈浓度依赖性促进SGC-7901细胞的凋亡,其作用机制可能与线粒体途径凋亡有关.

姜黄素联合木黄酮对人胃癌细胞株SGC-7901的作用

目的 :体外观察姜黄素及木黄酮对人胃癌细胞株 (SGC - 790 1)的联合作用。方法 :采用四甲基偶氮唑盐(MTT)法检测药物效应 ,利用中效原理判定两药合用的效果。结果 :两药单独应用时随着药物剂量增加 ,其效应也增加 ,呈剂量 -效应关系 ;两药合用时合用指数CI<1。结论 :姜黄素联合木黄酮对人胃癌细胞株SGC - 790 1的作用是协同作用。

大豆异黄酮诱导人胃癌细胞株SGC-7901凋亡的研究

目的 :探讨大豆异黄酮对体外培养的人胃癌细胞SGC - 790 1生长的抑制和诱导细胞凋亡的作用。方法 :用MTT法检测药物效应 ,透射电镜及流式细胞仪观察大豆异黄酮处理SGC - 790 1细胞后细胞周期和细胞凋亡。结果 :( 1)MTT法证实大豆异黄酮对SGC - 790 1细胞生长有抑制作用 ,并呈剂量 -效应关系。 ( 2 )流式细胞仪分析大豆异黄酮处理SGC - 790 1细胞后细胞滞留于G2 /M期 ,并可见凋亡峰。 ( 3)透射电镜可见SGC - 790 1细胞出现典型的凋亡细胞形态学改变。结论 :大豆异黄酮对人胃癌细胞SGC - 790 1有抑制作用 ,抑制作用与诱导胃癌细胞凋亡、阻抑细胞周期进程有关 ,诱导胃癌细胞凋亡。

阿斯匹林对胃癌细胞株SGC-7901的细胞毒作用及体外增效作用

目的 观察阿斯匹林 (ASA)对胃癌细胞株SGC 790 1的细胞毒作用以及联用其它抗肿瘤药的增效作用。方法 应用流式细胞仪 (FCM )测定细胞周期 ,噻唑蓝 (MTT)法测定药物对细胞的抑制率。结果 MTT显示体外ASA对SGC 790 1有细胞毒作用 ,与ASA的浓度和作用时间有显著的相关性。同时可使SGC 790 1细胞周期中S期及G2 /M期比例升高 ,G1期比例下降 ,呈一定的剂量效应关系。低浓度ASA与 5 氟脲嘧啶 (5 Fu)、阿霉素 (DOX)和丝列霉素 (MMC)合用 ,可增强它们对SGC 790 1的杀伤作用 ,与各药物有相加或协同作用。结论 ASA体外对SGC 790 1有细胞毒作用 ,可明显阻断SGC 790 1细胞在S期和G2 /M期 ;增强上述药物对SGC 790 1的杀伤作用。鉴于所试药物对细胞周期的影响不同 。

运用产气袋法制造微缺氧培养人胃癌细胞株SGC-7901

目的:运用GasPaK产气袋法制造微缺氧条件培养人胃癌细胞株SGC-7901并观察该细胞在微缺氧条件下超微结构的变化。方法:运用产气袋法(GasPaK)制造微缺氧条件,血气分析监测1640培养液中PO2、PCO2和pH值变化。透射电镜观察微缺氧对SGC-7901细胞超微结构的改变。结果:(1)GasPaK产气袋法在0·5-48h内PO2、PCO2和pH稳定,并能达到微缺氧细胞培养的条件;(2)微缺氧导致部分SGC-7901细胞超微结构发生改变。结论:通过GasPaK产气袋法制造的微缺氧肿瘤细胞培养环境,具有条件稳定、重复性好的持点。

环孢素A、维拉帕米、川芎嗪对胃癌多药耐药细胞株SGC-7901/ADR逆转作用的研究

目的:探讨环孢素A(CsA)、维拉帕米(VP)、川芎嗪(TMP)对胃癌多药耐药细胞株SGC-7901/ADR耐药性的逆转作用。方法:采用四甲基偶氮唑盐(MTT)比色法观察SGC-7901/ADR对化疗药氟尿嘧啶(5-FU)的耐药性,选择CsA、VP、TMP的非细胞毒性剂量,并观察其与5-Fu联合对SGC-7901/ADR的逆转作用。结果:SGC-7901/ADR对化疗药5-FU具有耐药性,相对耐药性(RF)为97.49;CsA 3.0mg/L、VP 10.0mg/L、TMP 300.0mg/L以下为SGC-7901/ADR细胞的非细胞毒性剂量,除CsA外,VP和TMP对SGC-7901/ADR的逆转作用呈剂量依赖关系;300.0mg/LTMP较10.0mg/L VP逆转作用强(P<0.01),使SGC-7901/ADR相对耐药性降至12.89,将5-FU IC50由13.001mg/L下调到1.542mg/L,逆转倍数是8.43倍。结论:SGC-7901/ADR对5-FU具有耐药性,300.0mg/L TMP是SGC-7901/ADR细胞多药耐药性最有效的逆转剂。