增强UV-B辐射对小麦叶肉细胞核内F-actin的影响

以增强紫外线B(UV-B)处理的小麦幼苗叶肉细胞核为材料,以异硫氰酸荧光素标记鬼笔环肽(FITC-Ph)荧光标记后,利用流式细胞仪以及激光共聚焦显微镜,对核内肌动蛋白丝(F-actin)进行研究。结果表明:小麦细胞核内确实存在F-actin;以FITC-Ph标记后用流式细胞仪检测显示,以10.08kJ·m-2·d-1增强的UV-B处理后的小麦叶片细胞核内F-actin的含量升高;激光共聚焦技术显示细胞核内Factin的分布,发现小麦叶肉细胞核核仁处F-actin含量较高。推测可能是增强UV-B辐射导致细胞质内Factin骨架断裂进入细胞核。究其具体作用还待进一步研究,该研究推测其与"分束分裂"有关。

细胞核内反义RNA和反义ribozyme——基因表达抑制新途径

近年来,新采用的反义技术已有细胞核内反义RNA和Antizyme。前者是指将反义RNA限制于细胞核内抑制靶基因原始转录子,以避免在细胞浆需抑制极其巨大数量的靶RNA,而起到把问题解决在萌芽状态的独特作用,这种模拟真核生物天然存在反义RNA封闭基因表达机制的高效方法,无疑开辟了一条抑制基因表达的新途径。后者是反义ribozyme,即ribozyme基因与反义RNA基因相连接,转录成具有ribozyme和反义RAN双重功能的一类RNA分子,实际上是基因剪刀和基因表达封条的联合体。目前,它在转基因植物研究方面,应用比较广泛。从研究进展、存在问题、发展对策和应用前景四方面评述细胞核内反义RNA和反义ribozyme是抑制基因表达的新途径。

活化的T细胞核内因子(NFAT)的调节及其在神经系统中的功能

活化的T细胞核内因子(nuclear factor of activated T-cells,NFAT)作为细胞信号转导通路中的一类重要的转录因子参与细胞功能的调节.NFAT的活化主要是通过细胞内钙/钙调神经磷酸酶(Ca2+/calcineurin)的刺激启动,它脱磷酸后发生核转位并与DNA的特定序列结合,同时通过与其它转录因子的协同作用,调节目的基因的特定表达.NFAT在免疫系统中所调节的基因表达已经得到了充分的研究.近年实验研究发现,NFAT的转录因子家族在脊椎动物的神经系统中也发挥着非常重要的作用.本文综述了NFAT家族蛋白的分类、结构、磷酸酶与激酶对其出入核的调节及在神经系统中的研究进展,使得能够更加全面地认识calcineurin/NFAT信号通路的作用.此外,由于环孢菌素A(cyclosporin A)等药物在神经系统应用的局限性,对于NFAT调节深入研究,也将为筛选或者开发更为高效、低毒药物提供新的思路.

热休克同源蛋白73与CXCR4在肾癌A498细胞核内相互作用

目的研究热休克同源蛋白73(heat shock cognate protein73000,Hsc73)在基质细胞衍生因子1(SDF-1)/趋化因子CXC受体4(CXCR4)轴促进肾癌转移中的作用,确定Hsc73是否参与了CXCR4的核定位。方法通过蛋白电泳观察CXCR4高表达后Hsc73在A498细胞中的表达情况。通过免疫染色、核蛋白免疫共沉淀等方法观察A498细胞在经过SDF-1刺激后Hsc73在细胞内表达情况,以及Hsc73与CXCR4结合情况。结果 CXCR4高表达后,A498细胞中Hsc73表达明显增高。Hsc73主要表达在A498细胞胞质中,在SDF-1刺激后出现部分转移至细胞核。提取SDF-1刺激后的A498细胞核蛋白进行CXCR4免疫共沉淀,其中发现了Hsc73。结论 Hsc73作为细胞内常见的分子伴侣蛋白,参与了CXCR4在细胞中的转运。对于SDF-1/CXCR4信号通路激活的部分环节起到了关键作用,并可能参与了CXCR4核转位的过程。

多柔比星对乳腺癌细胞核内丝切蛋白相互作用蛋白影响的比较蛋白质组学研究

目的采用比较蛋白质组学的方法,检测多柔比星对乳腺癌细胞核内丝切蛋白(cofilin)相互作用蛋白的影响。方法采用Western blot检测多柔比星对细胞核内cofilin表达的影响;免疫共沉淀后,采用比较蛋白质组学方法,检测对照组与多柔比星处理组细胞核内cofilin相互作用蛋白的差异;采用流式细胞仪检测多柔比星对细胞周期的影响。结果多柔比星处理MDA-MB-231细胞后,细胞核内cofilin表达增加,呈明显量效和时效关系;与对照组比较,多柔比星处理组核内与cofilin相互作用的蛋白结合蛋白、结构分子激活蛋白、细胞骨架蛋白、核酸结合蛋白、核糖体蛋白的种类明显减少(109、60、45、76、34 vs 79、32、20、56、16);多柔比星处理细胞后,可引起细胞周期阻滞在S/G2期,并呈明显量效关系,G1期细胞由(45.92±4.57)%降至(10.50±0.83)%(P<0.01)。结论多柔比星处理细胞后可增加cofilin核聚集,减少细胞核内与cofilin相互作用蛋白的种类,最终使细胞周期阻滞在S/G2期。

晚期血吸虫病患者肝细胞核内嗜酸性包涵体的观察

对155例晚期血吸虫病病例肝脏活检组织进行病理观察,并检测肝内乙肝表面抗原(HBsAg)和乙肝核心抗原(HBcAg)。结果,88例(56.8％)乙肝抗原(HBAg)阳性;30例(19.4％)肝细胞核内存在嗜酸性包涵体,其中18例(60％)HBAg也阳性。这些包涵体可能是巨细胞病毒、单纯疱疹病毒等肝内感染的标志。肝内HBAg或包涵体阳性患者的肝实质病变显著加重。表明合并其它病毒的肝内感染也可加重晚期血吸虫病的肝脏病变,并可能是发生门脉性肝硬化的原因之一。

高效液相色谱法测定细胞核内多柔比星浓度

目的建立高效液相色谱-荧光测定法测定K562／DOX（doxorubicin—resistant K562 cells，耐多柔比星K562细胞）细胞核多柔比星浓度，方法分离K562／DOX细胞核，多柔比星浓度测定采用Diamond C18色谱柱，甲醇-水-醋酸（50：50：0．25）为流动相，流速1．0mL·min^-1，柱温35℃，荧光检测，激发波长497nm，发射波长555nm，以盐酸柔红霉素为内标、结果细胞核中多柔比星浓度在5．0～5000．0μg·L^-1内呈良好线性关系，r=0．99997加样回收率为98．55％～100．84％（RSD1．77％～3．27％），日内和日间精密度均〈15％，最低检测浓度为5．0μg·L^-1.结论该方法简单、方便，检测限低，精确度和回收率良好，可用于多药耐药肿瘤细胞内多柔比星浓度的胞内动力学研究．

肽基脯氨酰异构酶在细胞核内的功能

有许多酶具有调节转录因子的功能，例如蛋白激酶、磷酸酯酶和乙酰转移酶等。目前Ｌｅｖｅｒｓｏｎ等提出一种新的酶调节机制：肽基脯氨酰异构酶（Ｐｅｐｔｉｄｙｌ－ｐｒｏｌｙｌｉｓｏｍｅｒａｓｅｓ，ＰＰＩａｓｅ）参与调节转录因子的活性［１］。转录因子ｃ－Ｍｙｂ结...

心肌肥厚大鼠细胞核内蛋白激酶和蛋白磷酸酶的活性

探讨细胞核磷酸化和去磷酸化在心肌肥厚发生中的作用 ,制备腹主动脉缩窄大鼠心肌肥厚模型、差速离心和密度梯度离心提纯心肌细胞核 ,同位素3 2 P掺入法测激酶活性 ,无机磷生成显色法测定蛋白磷酸酶活性。结果发现 ,与对照组比较 ,腹主动脉缩窄组心肌细胞核丝裂素活化蛋白激酶活性增加 82 .0 3 %(P <0 .0 5) ,膜丝裂素活化蛋白激酶活性无显著变化 ,胞浆丝裂素活化蛋白激酶活性下降 53 .69%(P <0 .0 1 ) ;蛋白激酶A活性均无明显变化。细胞核磷酸酶 2A活性增加 44 .95 %(P <0 .0 5) ,膜磷酸酶 2A增加 36 .75 %(P <0 .0 5) ;细胞核磷酸酶 2B活性增加 43 .57%(P <0 .0 5) ,胞浆磷酸酶活性均无显著增加。正常组心肌细胞核丝裂素活化蛋白激酶活性与胞浆无显著差异 ,但腹主动脉缩窄组心肌丝裂素活化蛋白激酶活性为核 >膜 >胞浆 ,蛋白激酶A活性分布无显著差异 ;磷酸酶 2A、2B和 2C活性分布为核 <膜 <胞浆。结果提示 ,压力超负荷时细胞核内蛋白磷酸化和去磷酸化水平增高 ,可能在介导心肌肥厚的发生中起重要作用。

前环藻细胞核内骨架结构的电镜观察

对前环藻细胞直接进行戊二醛锇酸双固定后,在常规电镜切片上,不能分辨出核基质部分的细微结构;但采用特殊的DGD(Diethylene Glycol Distearate)包埋一切片去包埋电镜技术直接显示出前环藻的核基质是一个致密的纤维网状结构,染色体被紧紧地网络于其中。这一结果说明核基质不是核内无定形的凝胶状物质,而是一个复杂的网架,贯穿于整个核空间。

细胞核内反义RNA和反义ribozyme-基因表达抑制新途径

细胞核内反义ＲＮＡ和反义ｒｉｂｏｚｙｍｅ－基因表达抑制新途径张德礼高步先高显明邓柏林朱关福１北京军区后勤部卫生防疫队、北京军区兽医防治中心北京１０００７１；１中国军事医学科学院微生物流行病学研究所北京１００８５０关键词细胞核反义ＲＮＡ反义ｒｉｂｏｚｙ...

^3H—TdR的单个细胞核内吸收剂量估算

３Ｈ－ＴｄＲ的单个细胞核内吸收剂量估算申本昌陈冠英（河南省红十字血液中心，郑州４５００５３）氚标记的胸腺嘧啶脱氧核苷（３Ｈ－ＴｄＲ）是一种极为重要的有机氚结合形式，它是ＤＮＡ合成的前体物，在基础医学研究中得到了广泛的应用。３Ｈ－ＴｄＲ发出的粒子是已...

补肾中药对老年大鼠肝细胞核内活性基因的影响

目的:观察老年、老年加补肾中药及青年组大鼠细胞核内活性基因的变化,探求补肾中药延缓衰老的分子生物学机理。方法:以脱氧核糖核酶Ⅰ(DNabe Ⅰ)为探针,脱氧核糖核酸Ⅱ(DNaseⅡ)为参照,分别切割老年、青年、老年加补肾药大剂量组、老年加补肾药小剂量组大鼠肝细胞核内染色质,研究4组大鼠肝细胞核活性基因的变化。酶切后进行琼脂糖电泳,并将胶板置于紫外灯下观察、摄影。结果:观察到在不同的时间内,对 DNaseⅠ的消化敏感性依次为青年组大于补肾组(大剂量组与小剂量组无显著差异),补肾组大于老年组,而4组对 DNaseⅡ敏感性无差异。结论:老年大鼠肝细胞核内染色质对 DNaseⅠ的敏感性下降。补肾中药延缓衰老的分子生物学基础可能与减缓细胞核内活性基因丢失有关。

细胞核内的一些重要物质及其功能

本文结合高中生物学知识,介绍细胞核内除蛋白质和核酸之外的一些重要的物质及其功能,并对基因表达调控、表观遗传学等进行概述。

光动力治疗促进反义bcr-abl寡核苷酸K562细胞核内转染的实验观察

目的:体外研究光动力治疗(photodynamictherapy,PDT)对b3a2型反义bcr-abl寡核苷酸(assntisenseoligonucleotides,ASO)慢性髓细胞性白血病(chronicmyelogenousleukemia,CML)细胞株K562转染的影响,为PDT合并反义技术应用于CML患者治疗以及体外骨髓净化提供实验基础。方法:半导体激光,波长650nm,剂量9J/cm2垂直照射。光敏剂为血卟啉单甲醚(hematoperphyrinmonomethylether,HMME),采用体外细胞培养技术,荧光显微镜检测荧光标记的反义bcr-abl寡核苷酸在K562细胞中的分布情况。结果:PDT6h后,细胞内荧光物质主要以明亮的点状聚集在胞核和部分胞浆中,而直接转染时,胞内荧光物质则弥散分布于胞浆中。结论:PDT可以使反义bcr-abl寡核苷酸K562细胞转染主要集中于细胞核内。

肺癌细胞核内AgNOR定量研究

应用AgNOR 染色方法对75例4种不同细胞类型肺癌和11例支气管粘膜慢性炎症活检标本细胞核内AgNOR 颗粒和形态进行定量研究,结果表明AgNOR 染色方法不仅能鉴别肺内良性与恶性病变,而且对肺癌的分型与分级的鉴别都具有重要价值。

豌豆间期细胞核内核仁组织者区排列的非放射性原位杂交定位

以异羟基洋地黄毒甙(digoxigenin)标记的rRNA为探针与多聚甲醛固定的植物根尖振动切片原位杂交。结合免疫荧光检测分析了豌豆(Pisum sativum)间期细胞核内核仁组织者区的数目、分布和排列。研究结果发现豌豆根尖分生组织间期细胞核内有1—6个被探针分子强烈标记的位点。这些位点呈大小不等(0.24-1.98μm^3)的斑点状,分布在核仁的周边,并且与核仁相连。探针标记位点在核仁周边的排列方式随标记位点的数目不同而异。在具有四个标记位点的细胞核内,它们呈四面体,梯形或平行四边形排列。在显示原位杂交阳性的细胞核中,59.5%显示4个标记位点,少于或多于4个标记位点的细胞分别占35.7%和4.76%。探针标记位点的数目与标记位点本身的大小无明显联系,而与核仁的体积大体上呈负相关趋势。文章讨论了这些被rRNA探针标记的位点与核仁组织区及核仁形成的关系。