细胞核因子κB与细胞周期蛋白D1在宫颈癌中的表达及相关性研究

目的:探讨细胞核因子κB(NFκB)p65与细胞周期蛋白D1(cyclinD1)在宫颈癌中的表达及其与肿瘤增殖的关系。方法:免疫组织化学方法检测NFκBp65,cyclinD1在32例宫颈组织及30例正常宫颈组织中的表达。结果:宫颈肿瘤中NFκBp65蛋白阳性表达率为68.75%(22/32),cyclinD178.5%;正常宫颈组织中NFκB无表达,cyclinD1表达率20.5%。结论:NFκBp65可能通过上调cyclinD1表达参与宫颈癌的发生与发展。

绝经后骨质疏松患者血清护骨素/细胞核因子κB受体活化因子配基水平与骨硬化蛋白的相关性

目的探讨绝经后骨质疏松患者血清护骨素(OPG)、细胞核因子κB受体活化因子配基(RANKL)及骨硬化蛋白(SOST)水平,评估SOST与OPG/RANKL通路的相关性。方法利用Real-time PCR的方法检测60例绝经后骨质疏松患者(PMOP组)及60例健康受试者(对照组)SOST基因的mRNA水平,ELISA法测定血清OPG、RANKL及SOST水平并做相关性分析。结果 PMOP组SOST基因的mRNA水平较对照组显著升高(P<0.01),患者血清中OPG含量升高,而RANKL水平明显下降。相关性结果显示,SOST与OPG及OPG/RANKL呈正相关(r=0.432、0.413);SOST与RANKL呈负相关(r=-0.370)。结论 PMOP患者血清OPG/RANKL通路的代偿性激活与SOST密切相关。

细胞核因子κB受体活化因子在宫颈鳞癌中的表达及其与临床病理因素和预后的关系

目的:探讨细胞核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factor-kappa B,RANK)在宫颈鳞癌中的表达及其与临床病理因素和预后的关系。方法:回顾性分析2012年11月至2015年5月在华中科技大学同济医学院附属协和医院西院妇产科行手术治疗的57例宫颈鳞癌患者,收集其病理及随访资料,采用免疫组织化学法检测宫颈鳞癌及癌旁组织中RANK的表达情况,分析RANK表达与临床病理因素的关系,采用单因素及多因素分析影响宫颈鳞癌患者总生存率及累计复发率的预后因素。结果:肿瘤组织中RANK表达较癌旁组织高(7.263±2.349 vs 5.018±2.303,P<0.001),且RANK高表达与国际妇产科联合会(International Federation of Gynecology and Obstetrics,FIGO)分期(P=0.047)、淋巴结转移(P=0.011)、淋巴脉管浸润(lymph vascular space invasion,LVSI)(P=0.0 0 2)相关;与R N A K低表达组比,R N A K高表达组5年总生存率更低(3 2.1 4%v s 7 9.3 1%,P=0.036),术后5年累计复发率更高(64.29%v s 17.24%,P=0.032);单因素分析示FIG O分期、淋巴结转移及RANK高表达为影响患者总生存率和累计复发率的预后因素(P<0.05)。多因素分析示FIG O分期及R A NK高表达为影响总生存率和累计复发率的预后因素(P<0.05)。结论:R A NK在宫颈鳞癌中高表达,RANK高表达与宫颈癌恶性临床病理因素相关,RANK高表达提示宫颈癌预后不良。

左归丸对去势骨质疏松大鼠钙磷代谢和细胞核因子κB受体活化因子配体/骨保护素的影响

目的探讨左归丸对卵巢摘除大鼠钙磷代谢和细胞核因子κB受体活化因子配体(receptor activator of nuclear factorκB ligand,RANKL)/骨保护素(osteoprotegerin,OPG)的影响。方法 SD雌性大鼠60只,采用去卵巢法制备骨质疏松症大鼠模型,将大鼠分为假手术组,切除卵巢组,左归丸低、中、高剂量组,西药对照组(戊酸雌二醇片),每组10只。造模成功12周后给予药物干预,西药对照组给予戊酸雌二醇片0.09 mg/kg灌胃治疗,左归丸低、中、高剂量组按4.75、9.5、19 g/kg灌胃治疗,假手术组和切除卵巢组大鼠给予等体积蒸馏水灌胃,干预4周后股动脉采血处死大鼠。比色分析法检测血清钙(calcium,Ca)、磷(phosphorus,P)含量;ELISA法检测骨保护素(osteoprotegerin,OPG)、细胞核因子κB受体活化因子(receptor activator of nuclear factorκB,RANK)和RANKL含量;双能X骨密度仪分析测定大鼠股骨的骨密度(bone mineral density,BMD);AG-IX生物力学万能实验机检测最大载荷和弹性模量,比较各组间差异。结果假手术组,切除卵巢组,西药对照组,左归丸高、中、低剂量组的BMD分别为(0.145±0.004)、(0.116±0.007)、(0.146±0.006)、(0.142±0.004)、(0.134±0.002)、(0.129±0.001)g/cm2;这6组的体质量分别为(173.20±13.92)、(264.10±28.61)、(249.44±26.64)、(243.00±10.25)、(253.45±18.19)、(268.50±22.39)g;这6组的子宫指数分别为(1.62±0.34)、(0.45±0.09)、(0.89±0.22)、(1.03±0.23)、(0.91±0.13)、(0.46±0.07)mg/g;这6组Ca、P含量分别为(2.07±0.07/0.30±0.02)、(0.92±0.08/0.10±0.03)、(1.89±0.11/0.22±0.03)、(1.95±0.13/0.27±0.02)、(1.67±0.10/0.19±0.06)、(1.59±0.15/0.12±0.02)mmol/L;这6组OPG、RANKL和RANK含量分别为(755.00±58.05/5.73±0.27/10.68±0.69)、(493.67±36.77/10.24±0.33/18.62±0.74)、(653.00±56.93/7.37±0.19/12.23±0.76)、(731.00±38.49/6.77±0.65/11.52±0.39)、(704.33±62.92/7.97±0.41/14.69±0.86)、(555.00±97.09/9.31±0.75/15.04±0.52)pg/m L;这6组的最大载荷分别为(142.16±0.10)、(86.26±0.13)、(126.43±0.31)、(119.77±0.74)、(111.96±1.57)、(98.92±1.44)N;这6组弹性模量分别为(19.48±0.24)、(13.10±0.43)、(16.70±0.37)、(16.17±0.15)、(15.99±0.22)、(14.98±0.15)MPa。与假手术组比较,切除卵巢组大鼠的BMD、Ca、P、OPG、最大载荷和弹性模量水平均显著降低,而RANK和RANKL含量均明显升高,差异有统计学意义(P<0.05);与切除卵巢组相比,左归丸各剂量干预组和西药对照组大鼠BMD和弹性模量均显著升高,RANK和RANKL含量明显降低,左归丸中、高剂量组和切除卵巢+西药对照组Ca、P、OPG含量和最大载荷显著升高,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论左归丸能升高去卵巢大鼠的骨密度,提高骨强度,并改善其力学性能,其机制可能与调节RANKL/OPG水平和Ca、P代谢有关。

免疫化学染色图像分析法检测细胞核因子κB

目的探讨一种简便、安全、可定量的细胞核因子κB(NF-κB)活性的检测方法。方法以晚期糖基化终产物修饰的人血清白蛋白(HSA-AGE)刺激人脐静脉内皮细胞(HUVEC),NF-κB/p65免疫化学染色后,分析细胞NF-κB/p65核/浆的阳性染色比,以经典的凝胶迁徙率泳动分析法作对照。结果HSA-AGE可激活HUVECNF-κB,呈时间、剂量依赖关系,两种方法检测的趋势一致。结论免疫化学染色的图像分析法可用于定量检测NF-κB的活性。

破骨细胞核因子κB受体活化因子配体和骨保护素在根尖周囊肿和肉芽肿中的表达及意义

目的检测破骨细胞核因子κB受体活化因子配体(RANKL)和骨保护素(OPG)在根尖周囊肿及根尖周肉芽肿中的表达水平,探讨RANKL和OPG在不同根尖周疾病周围骨质破坏机制中的作用。方法收集根尖周囊肿组织20例为囊肿组,根尖周肉芽肿组织20例为肉芽肿组,正常牙的牙周膜组织20例为对照组。采用免疫组织化学法检测RANKL和OPG在根尖周囊肿、根尖周肉芽肿和正常牙周膜组织中的阳性表达。结果在囊肿组、肉芽肿组、对照组中,RANKL的表达分别为75.00±7.54、68.40±6.74和29.40±2.46,OPG的表达分别为38.10±7.09、47.65±13.85和58.60±5.88,3组间的差异均有统计学意义(P<0.01)。相关性分析表明,囊肿组中RANKL与OPG呈负相关关系(r=-0.56,P=0.01),肉芽肿组和对照组中RANKL和OPG无相关关系(P>0.05)。结论 RANKL与OPG参与了根尖周病变引起的骨吸收过程。在根尖周病变中,RANKL和OPG的表达失调,RANKL增加而OPG减少,骨吸收活跃,导致溶骨性病变。根尖周囊肿的骨吸收活动较根尖周肉芽肿更活跃。

胆红素对急性肺损伤大鼠肺血管内皮细胞核因子κB,细胞间粘附分子1表达的影响

目的 探讨胆红素对急性肺损伤 (ALI)的对抗作用及其对肺血管内皮细胞核因子 κB和细胞间粘附分子 1表达的影响。方法 用雄性Wistar大鼠 (2 0 0 - 2 5 0g) 30只 ,随机分为正常对照组、ALI动物模型组 (用内毒素制造模型 )、胆红素干预组。采用原位杂交技术半定量法和免疫组织化学染色测定肺血管内皮细胞中细胞间粘附分子 1(ICAM 1)mRNA和核因子κB (NF κB)蛋白的表达。结果 (1)ALI模型组肺血管内皮细胞ICAM 1mRNA表达和NF$CκB核染色阳性细胞百分比与正常对照组比较显著升高 ,(P <0 0 0 1) ;(2 )胆红素干预组ICAM 1mRNA表达和NF$CκB染色阳性细胞百分比与模型组相比明显减低 ,(P <0 0 0 1、P <0 0 1) ,但与正常对照组比较仍较高 (P <0 0 5 )。结论 ICAM 1和NF κB在ALI显著增加 ,胆红素可以抑制ALI动物NF κB和ICAM 1mRNA的表达 ,可能是其对抗急性肺损伤的作用机制之一。

磁共振成像联合血清细胞核因子κB受体活化因子配体护骨素水平对类风湿关节炎诊断和治疗的有效性分析

类风湿关节炎(rheumatoid arthritis,RA)是以周围关节骨质损害为特征的全身性自身免疫疾病,其临床特征表现为对称性累及多个周围关节疼痛、肿胀和功能低下,其主要病理特征为慢性的关节滑膜炎症浸润软骨和骨组织,导致骨关节破坏[1]。调查发现,全球RA发病率约0.5%~1.2%,我国RA发病率约0.28%,致残率高达30%~50%,是导致人类劳动能力丧失和残疾的主要疾病[2,3]。

氯胺酮抑制内毒素诱导的细胞核因子κB表达

细胞核因子κB(NF-κB)是转录多种基因时所必需的诱导型转录因子,包括促炎细胞因子、肿瘤坏死因子α(TNF-α)以及白细胞介素6和8(IL-6,IL-8)的编码。大多数细胞质(包括脑细胞)含有潜伏性NF-κB蛋白并作为一种无活性的P50蛋白和P65蛋白异源体与抑制蛋白IκB相结合而共存。细胞与TNF-α或脂多糖(LPS,内毒素)接触引起包含体(IB)降解,则许可游离B蛋白易位进入细胞核并激活DNA链成为特殊基因编码,例如TNF-α基因。接着细胞内TNF-α基因增多,引起TNF-α mRNA转录.结果导致一系列细胞过程并释放TNF-α。

慢性氟中毒大鼠脑组织海马中晚期糖基化终末产物受体和细胞核因子κB的改变

目的研究慢性氟中毒大鼠脑组织海马中晚期糖基化终末产物受体（receptor for advanced glycation endproducts，RAGE）和细胞核因子KB（nuclearfactorKB，NF—κB）的表达变化，探讨氟中毒神经损害的发病机制。方法SD清洁级大鼠60只，体质量为100—120g；按体质量分为3组（每组20只，雌雄各半），分别为对照组、小剂量染氟组、大剂量染氟组，饮水含氟（氟化钠，NaF）量分别为〈0．5、10、50mg／L；染氟6个月后，经股动脉放血处死大鼠，取大鼠脑组织海马，采用蛋白印迹方法和实时荧光定量PCR方法检测RAGE和NF—κB蛋白、mRNA表达。结果与对照组[（100．00±2．60）％、（100．00±7．80）％]比较，小剂量染氟组、大剂量染氟组大鼠脑组织海马中RAGE[（205．00±15．30）％、（232．00±10．90）％]和NF—κB[（156．00±12．20）％、（162．00±9．80）％]蛋白表达均明显升高（P均〈0．05）；小剂量染氟组、大剂量染氟组大鼠脑组织海马中RAGE（1．27±0．09、2．60±0．19）和NF—κB（0．83±0．15、1．27±0．19）mRNA表达均高于对照组（0．66±0．18、0．32±O．08．P均〈0．05）。结论慢性氟中毒引起大鼠脑组织海马中RAGE和NF—κB表达明显升高，这些改变可能与氟中毒性神经损伤发生机制有一定的关系。

大鼠脑挫伤后细胞核因子кB的表达

细胞核因子кB(Neucler Factor-кB，NF-кB)是一类普遍存在机体中的细胞转录因子，在许多细胞中均有表达。功能性NF-кB复合物存在于神经系统中的各种类型的功能性细胞中，如神经元、星形胶质细胞、小胶质细胞、少突胶质细胞中[2]。……

低钙高氟对大鼠脾组织细胞核因子κB受体活化因子配体mRNA表达的影响

目的探讨低钙高氟对大鼠脾组织细胞核因子KB受体活化因子配体（RANKL）mRNA表达的影响。方法Wistar大鼠40只，体质量（118．9±13．5）g。采用2×2×2析因设计，将大鼠按体质量随机分为4组：对照组（常规饲料）、低钙组（低钙饲料）、高氟组（常规饲料＋高氟饮水100mg／L）和低钙高氟组（低钙饲料＋高氟饮水100mg／L），每组10只。在喂养4和8个月时各处死5只大鼠，取大鼠脾脏，抽提脾组织中的总RNA，采用RT-PCR方法分析RANKL mRNA的表达。结果4个月时对照组、低钙组、高氟组、低钙高氟组RANKL mRNA表达分别为0．13±0．05、0．13±0．03、0．17±0．02、0．27±0．05；8个月时分别为0．11±0．01、0．16±0．02、0．16±0．03、0．36±0．07。析因分析显示。低钙、高氟对RANKL mRNA表达有影响（F值分别为40．224、56．679，P均〈0．05），作用时间对RANKL mRNA表达无影响（F=2．850，P〉0．05）；低钙高氟、低钙与作用时间对RANKL mRNA表达存在交互作用（F值分别为7．247、18．789，P均〈0．05），高氟与作用时间对RANKL mRNA表达无交互作用（F=1．751．P〉0．05）。结论低钙或高氟单独作用或低钙和高氟协同作用促进大鼠脾组织RANKL mRNA表达；低钙促进RANKL mRNA表达与作用时间有关，高氟促进RANKL mRNA表达不受作用时间影响。

续苓健骨方对骨质疏松症模型大鼠细胞核因子κB受体活化因子配体及骨保护素基因表达的影响

目的 研究续苓健骨方对骨质疏松症模型大鼠骨密度的影响及作用机制。方法 将50只SD雌性大鼠按随机数字表法分为假手术组，模型组，续苓健骨方低、中、高剂量组，每组10只。除假手术组外，其余各组大鼠行双侧卵巢切除术制备骨质疏松模型。造模后30 d开始灌胃给药，续苓健骨方低、中、高剂量组分别灌胃续苓健骨方药液7.5、15、30 g/kg；假手术组和模型组灌胃等体积生理盐水，1次/d。给药12周后取材。采用双能X射线检测左胫骨骨密度；ELISA法检测大鼠血清雌激素酮、骨钙素水平；荧光定量PCR法检测大鼠腰椎骨保护素（osteoprotegerin, OPG）及细胞核因子κB受体活化因子配体（receptor activator of nuclear factor κB ligand, RANKL）mRNA表达水平。结果 与模型组比较，续苓健骨方中、高剂量组骨密度[（0.215±0.010）g/cm2、（0.222±0.013）g/cm2比（0.196±0.016）g/cm2]增高（P＜0.05或P＜0.01）；续苓健骨方高剂量组骨钙素[（87.0±8.9）ng/L比（100.5±16.8）ng/L]降低（P＜0.05），OPG mRNA [（0.97±0.23）比（0.78±0.17）]表达升高（P＜0.05）；续苓健骨方低、中、高剂量组RNAKL mRNA [（1.12±0.17）、（0.97±0.38）、（1.04±0.29）比（1.31±0.18）]表达降低（P＜0.05）。结论 续苓健骨方可提高骨质疏松模型大鼠的骨密度，可能与上调OPG mRNA、降低RANKL mRNA表达有关。

MIMECAN基因、细胞核因子κB和白细胞介素24与子宫内膜癌的相关性研究

目的探讨MIMECAN基因、细胞核因子(NF)-κB和白细胞介素(IL)-24在子宫内膜癌中的表达及其关系。方法选择2008年1月至2013年1月于徐州医学院附属淮安医院妇产科住院治疗的120例子宫内膜癌患者为研究对象,将其纳入子宫内膜癌组(n=120),再按照国际妇产科联盟(FIGO)病理学分期标准将其进一步分为4个亚组,分别为Ⅰ期亚组(n=45)、Ⅱ期亚组(n=30)、Ⅲ期亚组(n=24例)和Ⅳ期亚组(n=21)。选择同期在本院行健康体检的40例正常妇女为对照组(n=40)。采用酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测各组血清MIMECAN基因、NF-κB和IL-24水平。本研究遵循的程序符合徐州医学院附属淮安医院妇产科人体试验委员会所制定的伦理学标准,得到该委员会批准,分组征得受试对象本人的知情同意,并与之签署临床研究知情同意书。结果 1子宫内膜癌组各亚组患者血清MIMECAN基因、NF-κB和IL-24水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05),且各亚组间两两比较,差异也有统计学意义(P<0.05)。2MIMECAN基因、NF-κB和IL-24与子宫内膜癌严重程度呈正相关关系(r=0.69,0.73,0.82;P<0.05)。3子宫内膜癌组MIMECAN基因和NF-κB呈正相关关系(r=0.76,P<0.05);NF-κB和IL-24也呈正相关关系(r=0.78,P<0.05)。结论 MIMECAN基因、NF-κB和IL-24相互作用可能促进子宫内膜癌的发生、发展。

他汀对不稳定型心绞痛外周血单个核细胞核因子κB的活性影响研究

目的:探讨他汀类药物对不稳定型心绞痛(UAP)患者外周血单个核细胞NF-κB的影响。方法:60例冠状动脉造影证实的UAP患者,依据服用他汀剂量随机分为病例组2组各30例(阿托伐他汀10 mg低剂量组和40 mg高剂量组),同时取同期该院健康体检者30例做对照组,通过流式细胞检测方法测定60例不稳定心绞痛患者服药前后及30例健康者外周血单核细胞NF-κB的活性。结果:(1)病例组外周血单核细胞NF-κB的活性显著高于对照组(P<0.01);(2)低剂量组降低NF-κB活性水平差异没有显著性意义(P>0.05),高剂量组显示出降低NF-κB活性水平的差异(P<0.01)。结论:UAP患者中存在着明显的NF-κB的激活,NF-κB可能参与了冠心病的发病过程,高剂量他汀可以显著降低NF-κB的活性水平,因此NF-κB活性可能会成为他汀药物治疗冠心病患者疗效的评判指标之一。

单核细胞核因子κB与老年冠心病患者临床类型及预后的关系

目的探讨单核细胞NF-κB水平与老年冠心病患者临床类型及预后的关系。方法老年冠心病患者依据临床特点分为稳定型心绞痛组(SAP组40例),不稳定型心绞痛组(UAP组40例),急性心肌梗死组(AMI组40例),同时设对照组。所有患者检测血脂、血糖、hs-CRP和NF-κB,综合治疗并随访1年,观察不良事件的发生情况(MACE)。结果(1)与对照组相比,病例组hs-CRP、NF-κB水平均明显升高,差异具有统计学意义(P<0.01);而AMI组、UAP组与SAP组相比hs-CRP、NF-κB水平差异也具有统计学意义(P<0.01)。AMI组该指标也较UAP组显著升高(P<0.01);(2)相关分析发现各病例组NF-κB与hs-CRP呈正相关。(3)与SAP组相比,AMI组、UAP组MACE发生率明显升高(P<0.01)。AMI组与UAP组MACE发生率也有明显差异(P<0.01)。结论 NF-κB可能参与了冠心病的发病。联合检测hs-CRP和NF-κB,有助于老年冠心病患者危险分层和评估预后。

乳腺癌细胞核因子κB活化及其在增殖与演化过程中的作用

目的探讨NF-κB、雌激素受体(ER)、人上皮细胞生长因子受体-2(HER2)和增殖细胞核抗原(PCNA)等在乳腺癌中的蛋白表达特征,以及NF-κB活化与乳腺癌的ER、HER2、PCNA表达水平以及肿瘤淋巴结转移、肿瘤大小和组织学分级等临床病理学指标之间的相关性。方法采用免疫组化方法对60例乳腺癌和对应的癌旁组织的NF-κB、ER、HER2和PCNA等分子标志物的表达情况进行检测分析,同时收集对应的临床病理学数据。结果60例乳腺癌和癌旁组织的NF-κB活化率分别为50.0%(30/60)和40.0%(24/60)。乳腺癌与对应的癌旁组织的NF-κB活化率差异无显著性(P>0.05)。乳腺癌组织中的NF-κB活化与HER2表达呈正相关,与ER表达呈负相关。ER阴性/HER2阳性组的乳腺癌组织的NF-κB活化率为77.8%(14/18),明显高于其他组(P<0.001)。组织学分化低级别的乳腺癌组织的NF-κB活化率分别为57.1%(Ⅲ级)和50.3%(Ⅱ级),明显高于高分化组35.7%(Ⅰ级)(P<0.05)。乳腺癌组织的NF-κB活化率也与其大小和淋巴结转移相关,同时也与乳腺癌细胞的PCNA表达水平相关。结论乳腺癌的演化过程中有不同程度的NF-κB活化,但与HER2表达呈正相关,与ER表达呈负相关。NF-κB具有促进增殖和迁移、抑制分化和凋亡的作用,是乳腺癌形成过程中的一个发生失调的分子,可能成为抗癌治疗的靶位。

慢性氟中毒大鼠肝脏中P-糖蛋白和细胞核因子-κB的表达水平

目的:研究慢性氟中毒大鼠肝脏中P-糖蛋白(P-glycoprotein,P-gp)和细胞核因子κB(Nuclear factorκB,NF-κB)的表达变化,探讨氟中毒肝脏损害的发病机理。方法:将60只SD大鼠随机分为3组,即对照组、小剂量染氟组和大剂量染氟组,分别给予自来水、加10 mg/L和50 mg/L氟(Na F)的的自来水喂养6个月观察3组大鼠氟斑牙程度及尿氟,同时取大鼠肝脏;采用蛋白印迹方法检测P-gp和NF-κB的蛋白表达水平,实时荧光定量PCR方法检测NF-κB mRNA表达水平。结果:6个月后,小剂量染氟组、大剂量染氟组大鼠氟斑牙程度及尿氟含量明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);小剂量染氟组、大剂量染氟组大鼠肝脏中P-gp和NF-κB蛋白和mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);小剂量染氟组、大剂量染氟组NF-κB mRNA表达高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论:慢性氟中毒引起大鼠肝脏中P-gp和NF-κB表达明显升高,这可能与氟中毒性肝脏损伤的发生机制有关。