大肠癌细胞线粒体DNA与NIH3T3细胞核基因组整合的荧光原位杂交分析

目的:观察大肠癌细胞突变的线粒体DNA(mtDNA)转染小鼠胚胎成纤维细胞NIH3T3后,mtDNA与转染细胞核内基因组的整合情况。方法:将携带大肠癌细胞突变mtDNA的重组质粒pcDNA3.1(+)-Sw480 mtDNA、pcDNA3.1(+)-NHWBC mtDNA及空质粒pcDNA3.1(+)通过脂质体法转染NIH3T3细胞。同时用PCR法制备3条相应的绿色荧光蛋白标记的mtDNA探针。分离转染的NIH3T3细胞核内染色体,用荧光原位杂交(FISH)法检测mtDNA探针与核内基因组的整合情况。结果与结论:瞬时转染的NIH3T3细胞核基因组上存在mtDNA的同源序列。外源肿瘤细胞mtDNA与NIH3T3细胞核内基因组发生整合。

植物细胞核基因和细胞质基因

植物细胞不同于动物细胞,前者有三大遗传系统,即细胞核、叶绿体和线粒体遗传系统,后者只有细胞核和线粒体遗传系统。所谓细胞质基因,即为叶绿体和线粒体基因。在这三个遗传系统中,各有自己的DNA复制、转录和转译自主性,但叶绿体、线粒体遗传系统又受到核遗传系统的部分控制,所以它们的自主性又不是完全的。当前植物分子遗传学的研究,不仅是分析三个遗传系统基因组的结构和基因表达,而且要研究之间的相互作用和基因的协同表达及其调控机制,才能对生产实践中提出的问题提供理论依据和解决途径。

大白菜细胞核基因互作雄性不育系选育及应用模式

从大白菜农家品种‘万泉青邦’中发现了显性不育基因Sp及其与显性上位可育基因Ms的互作规律,概括出大白菜细胞核基因互作雄性不育系应用模式。育成Sp、Ms基因互作甲型两用系AB158及乙型可育株系AB8102-1-7-1,并用其配制成功大白菜细胞核基因互作雄性不育系88-1A。88-1A具有稳定的100％不育株率和不育度,结实正常,其优良杂交种F_18801已大面积制种应用。

玉米细胞核雄性不育基因利用新途径

通过对作物雄性不育的细胞质和细胞核基因利用对比分析，研究雄花小穗退化型玉米温光敏核不育两用系雄花小穗退化现象表现的新特征特性，以及其与有小穗型不育系比较的各种优点，认为雄花小穗退化型玉米温光敏核不育系的选育为玉米细胞核雄性不育基因的利用开辟了新的途径，其有关遗传研究将为玉米由三系法育种向二系法育种过度奠定了理论基础。

甘蓝型油菜分子标记连锁图谱的构建及显性细胞核雄性不育基因的图谱定位

在显性细胞核雄性不育系Rs10 4 6A和双低油菜品种Samourai构建的回交分离群体中 ,运用AFLP和SSR两种标记技术构建了一个甘蓝型油菜 (BrassicanapusL .)的分子标记遗传连锁图谱。该图谱共包含 138个AFLP标记、83个SSR标记和 1个形态标记 ,分布于 18个主要连锁群、2个三联体和 1个连锁对上 ,图谱总长度为 2 6 4 6cM ,偏分离标记的比例为 11 7%。显性细胞核雄性不育基因Ms被定位到第 10连锁群 (LG10 )上。同时 ,偏分离标记聚集于第 8连锁群 (LG8)和第 16连锁群 (LG16 )的末端 ,形成了十分明显的偏分离标记密集区域。研究结果对于油菜核不育两型系的分子标记辅助选择育种具有重要意义 。

白菜细胞核雄性不育基因向菜心品种早-49的转育研究

根据大白菜复等位基因遗传假说,利用现有白菜雄性不育系(99029-2)作为不育源,以早-49菜心品种为目标亲本,经过杂交、自交、测交、兄妹交等转育方法,将核不育基因向菜心品种转育,得到了含有早-49遗传基因的新甲型两用系、临时保持系和雄性不育系。

弓形虫细胞核因子3基因的克隆及序列分析

为预测弓形虫细胞核因子3(TgNF3)基因作为抗弓形虫疫苗候选抗原的可能性,本试验以弓形虫RH株的总RNA为模板,应用逆转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增TgNF3基因并连接至pMD18-T载体。筛选阳性克隆后,测序鉴定。将测序结果正确的核苷酸序列翻译成氨基酸序列,运用生物信息学软件分析TgNF3蛋白的结构,预测抗原表位。结果显示,TgNF3基因长约950bp。TgNF3蛋白中包含1个跨膜结构域,9个α-螺旋区,4个β-折叠区,8个亲水区域和10个柔性区域,并预测含有9个线性B细胞抗原表位。结果表明,TgNF3蛋白可能具有良好的免疫原性,为研制以TgNF3为抗原的弓形虫亚单位疫苗及表位疫苗奠定了基础。

妊娠期糖尿病肝细胞核因子1a外显子7基因多态性与血浆胰岛素水平的相关性

目的了解妊娠期糖尿病孕妇肝细胞核因子1a外显子7基因变异与血浆胰岛素水平的相关性。方法分析妊娠期糖尿病与正常人的肝细胞核因子1a外显子7基因变异,测定相应血浆胰岛素水平,统计分析它们之间的关系。结果妊娠期糖尿病孕妇肝细胞核因子1a第7号外显子中密码子459的CTG变为CTA,CTG变为TTG,密码子487位AGC变为AAC。这变化为一种多态性。多态性纯合子的血浆胰岛素水平偏低。结论肝细胞核因子1a外显子7基因多态性纯合子孕妇胰岛素分泌水平偏低,提示HNF-1a外显子7基因的多态性改变可能与妊娠期糖尿病的发病有关系。

妊娠期糖尿病与肝细胞核因子-1aI27L基因多态性关系的研究

目的了解妊娠期糖尿病遗传易感性与HNF-la I27L单核苷酸多态性的关系。方法采用病例对照及单核苷酸多态性分析192例妊娠期糖尿病,198例对照组,并对其HNF-la I27L多态性位点进行基因分型。结果①HNF-la I27L基因型频率经Hardy-Weinberg平衡定律检验,符合遗传平衡法则,表明各基因频率满足遗传平衡(p>0.05),基因型频率分布具有群体代表性。②GDM和对照组孕妇的HNF-1aI27L II,IL基因型频率分别为38.6,48.9%和51.1,37.8%,差异有统计学意义(p<0.05)。③HNF-la I27L基因中L等位基因的频率在GDM组轻度升高(OR 1.37,95%CI 1.02～1.84)。结论 HNF-la I27L单核苷酸多态性可能与GDM遗传易感性有关;HNF-la I27L位点L等位基因可能与GDM的发生有关。

肝细胞核因子-1α基因A1a98 Val变异与中国汉族迟发型2型糖尿病的关系

目的 :探讨肝细胞核因子 1α(HNF 1α)基因外显子 1Ala98Val变异是否与中国汉族迟发型 2型糖尿病相关。方法 :选择中国汉族 15 0例迟发型 2型糖尿病患者及 15 5例正常对照者 ,应用聚合酶链反应———限制性片段长度多态 (PCR SSCP)及直接测序法检测Ala98Val变异。结果 :受检者均不存在Ala98Val变异。结论 :Ala98Val变异不是引起中国汉族迟发型 2型糖尿病的重要遗传因素。

2型糖尿病与肝细胞核因子-4alpha相关基因的研究

目的:探讨中国河南汉族２型糖尿病(ＤＭ２)家系患者与 ＨＮＦ—４α基因ｅｘｏｎ ４、ｅｘｏｎ ７是否关联。方法:选择１２个ＤＭ２家系(５１份标本);１１１例 ＤＭ２患者;１０２例健康献血者作对照,进行ＰＣＲ—ＳＳＣＰ分析。结果:５１例ＤＭ２家系成员中４例 ＨＮＦ—４ａ基因ｅｘｏｎ ４出现异常条带,其中１例ＯＧＴＴ正常,而ＨＮＦ—４ａ基图ｅｘｏｎ ７ ｋ见异常条带。给论:ＨＮＦ—４α基因ｅｘｏｎ ４可能是中国河南汉族ＤＭ２家系—ＭＯＤＹ１的主要致病基因片段,ｅｘｏｎ ７片段与 ＭＯＤＹ可能无关联。

河南省汉族糖尿病肾病患者肝细胞核因子-1β基因exon2测定

目的 :探讨河南省汉族人群中家族性糖尿病肾病与肝细胞核因子 - 1β(HNF - 1β)基因exon2是否关联。方法 :运用聚合酶链反应 -单链构象多态性技术 (PCR -SSCP)检测 2型糖尿病患者 6 2例 ,健康献血者 82例 ,11个糖尿病家系中 5 6例糖尿病肾病患者的HNF - 1β基因exon2片段。 结果 :糖尿病肾病患者、2型糖尿病患者、健康献血者均未发现有HNF - 1β基因exon2异常条带。 结论 :HNF -

糖尿病肾病与肝细胞核因子-1β相关基因研究

目的 :探讨河南省汉族人群中糖尿病肾病患者与肝细胞核因子 1β基因exon2、exon3是否关联。 方法 :运用聚合酶链反应 单链构像多态性技术对 9个糖尿病家系中 42例糖尿病肾病患者 ;82例 2型糖尿病患者 ;90例健康献血者进行分析。结果 :42例糖尿病肾病患者肝细胞核因子 1β基因exon2、exon3未发现异常条带。 结论 :肝细胞核因子 1β基因exon2、exon3可能不是河南省汉族人群中糖尿病肾病患者的主要致病基因片段。

肝细胞核因子-1α基因多态性与血浆胰岛素水平的变化

目的 了解２型糖尿病中肝细胞核因子（ＨＮＦ）－１α基因的变化与其对血浆胰岛素水平的影响。方法 用梯度变性胶电泳分析２型糖尿病与正常人的ＨＮＦ－１α基因改变，测定相应血浆胰岛素水平，统计分析它们之间的关系。结果 发现该基因三处多态性改变；第７号外显子中密码子４５９的ＣＴＧ变为ＴＴＧ，密码子４８９的ＡＧＣ变为ＡＡＣ，第７号内含子第７位碱基Ｇ变为Ａ，这三处变化为一种多态性。多态性纯合子的血浆胰岛素水平偏低，在７５ｇ葡萄糖负荷后血浆胰岛素水平与正常基因型的进行ｔ检验，Ｐ＜０．０５。结论 携带上述多态性改变者胰岛素分泌水平偏低，提示ＨＮＦ－１α的这一多态性改变可能在２型糖尿病发病中起一定的作用。

妊娠期糖尿病与肝细胞核因子1a 127L基因多态性关系的研究

目的了解妊娠期糖尿病遗传易感性与HNF-1a127L单核苷酸多态性的关系。方法采用病例对照研究方法及单核苷酸多态性分析妊娠期糖尿病192例，对照组198例，对HNF-1a127L多态性位点进行基因分型。结果①HNF—la127L基因型频率经Haray—Weinberg平衡定律检验，符合遗传平衡法则，表明各基因频率满足遗传平衡（P〉0．05），基因型频率分布具有群体代表性。②GDM和对照组孕妇的HNF1A127LII，IL基因型频率分别为38．6，48．9％和51．1，37．8％，差异有统计学意义（P〈O．05）。③HNF-1al27L基因中L等位基因的频率在GDM组轻度升高（OR1．37，95％C11．02—1．84）。结论HNF-1a127L单核苷酸多态性可能与GDM遗传易感性有关；HNF-1a127L位点L等位基因可能与GDM的发生有美．

一氧化氮对食管癌细胞核DNA的损伤作用

以硝普钠 ( Sodium Nitroprusside,SNP)作为 NO( Nitric oxide)的体外供体 ,以食管癌细胞系 EC1 0 9作为细胞模型 ,采用单细胞凝胶电泳法检测不同浓度的 NO作用不同时间后 ,食管癌细胞核 DNA被损伤的情况 .检测结果表明 ,在一定的条件下 ,NO对食管癌细胞核 DNA的损伤作用具有明显的浓度和作用时间依赖性特征 ,总的来讲 ,NO的浓度越大 ,NO对细胞作用的时间越长 ,细胞核 DNA所遭受的损伤越重 .

油菜品种资源细胞质育性类型及核不育基因型鉴定

利用郑32A作母本和郑32B作父本分别与来自国内外的49个甘蓝型油菜品种(系)进行测交,根据F1及F2代育性分离结果鉴定细胞质育性类型及细胞核育性基因型。结果表明:17个品种(系)为纯合恢复基因型(RR),占供试品种总数的34.69%,其中13个品种(系)的细胞质类型为S,4个品种为N。24个品种(系)为纯合不育基因型(rr),占总数的48.98%,说明现有国内外甘蓝型油菜种质资源材料中恢复材料少于保持材料,油菜杂种优势利用必须加强新恢复系的选育。8个品种(系)的育性为杂合基因型(Rr),其中5个品种具有S细胞质,3个品种为N细胞质。认为用不育系和保持系同时鉴定油菜品种细胞质育性类型和细胞核育性基因型比只用保持系鉴定的效率更高。

灯盏花素干预糖尿病模型大鼠睾丸组织增殖细胞核抗原和c-fos的表达

背景:有研究表明灯盏花素可影响2型糖尿病大鼠的生殖能力,但其作用机制少有报道。目的:探讨灯盏花素对2型糖尿病大鼠睾丸增殖细胞核抗原和原癌基因c-fos表达的影响作用。方法:选取36只健康雄性大鼠随机分为对照组、模型组和灯盏花素组各12只。模型组和灯盏花素组采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,大鼠血糖监测达到16.7 mmol/L作为建模标准,对照组大鼠予以同等容积的柠檬酸缓冲液单次腹腔注射。灯盏花素组采用灯盏花素注射液10 mg/(kg·d)连续4周腹腔注射,其他2组在相同时间注入等量生理盐水。结果与结论:干预4周后,血清睾酮检测、免疫组织化学染色和PCR检测结果显示,血清睾酮水平、增殖细胞核抗原、c-Fos蛋白及mR NA表达:对照组>灯盏花素组>模型组(P<0.05);血糖水平:对照组<灯盏花素组<模型组(P<0.05)。结果证实,灯盏花素可以通过增强增殖细胞核抗原和c-fos的表达,保护2型糖尿病大鼠的生殖功能。

异源细胞质对香菇栽培菌株L808农艺性状的影响

采用单单杂交和原生质体单核化技术将香菇(Lentinula edodes)栽培菌株L808的原生质体单核体的细胞核分别导入含有基因型A2和B的原生质体单核体细胞质中,构建了L808-A2和L808-B菌株,以探讨异源细胞质对香菇栽培菌株L808农艺性状的影响。结果表明:L808-B在PDA培养基平板上的菌丝生长速度较慢,与L808和L808-A2相比,组间差异均存在统计学意义;与L808的子实体相比,L808-A2和L808-B的菌盖和菌柄直径、菌盖厚度以及菌盖和菌柄重量组间差异均存在统计学意义,但菌褶宽度以及菌盖和菌柄硬度组间差异无统计学意义;L808两潮子实体的总产量为18112.72 g,L808-A2为17180.10 g,L808-B为22882.77 g。