人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2和线粒体转录因子A在前列腺癌中的表达及意义

目的检测前列腺癌组织标本中人类核转录因子红细胞系2p45相关因子2(Nrf2)、人类线粒体转录因子A(TFAM)的表达,并分析其表达与Gleason评分的关系。方法用免疫组织化学S-P法检测40例前列腺癌组织标本中Nrf2与TFAM的表达,应用Spearman相关分析Gleason评分与Nrf2、TFAM表达强度的关系。结果 Nrf2和TFAM的表达与Gleason评分正相关(P值为0.0052,0.0003);Nrf2与TFAM的表达也有相关性(P=0.006)。结论 Nrf2与TFAM是前列腺癌恶性程度的相关因素之一,Nrf2与TFAM很可能通过同一机制参与前列腺癌的发生发展过程。

神经干细胞衰老与核因子E2相关因子2/抗氧化反应元件信号通路的关系

目的建立D-半乳糖(D-gal)诱导小鼠神经干细胞(NSCs)体外衰老模型,探讨NSCs衰老与细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)/抗氧化反应元件(ARE)信号通路的关系。方法取新生C57BL/6J小鼠全脑,分离、鉴定NSCs,培养至第3代,随机分为对照组和衰老组。对照组细胞在NSCs培养基中常规培养48 h,衰老组细胞在对照组基础上加入D-gal(终浓度为10 g/L)。细胞计数试剂盒8(CCK-8)法检测NSCs增殖活力;衰老相关β-半乳糖苷酶(SA-β-gal)染色检测衰老阳性神经球百分率;锥虫蓝染色检测细胞存活率;酶标比色法检测细胞培养上清液中超氧化物歧化酶(SOD)与过氧化氢酶(CAT)活性和丙二醛(MDA)含量;Western boltting检测NSCs中Nrf2和血红素加氧酶1(HO-1)蛋白表达水平;Real-time PCR检测GCLC和GCLM基因表达水平。结果与对照组相比,衰老组NSCs增殖活力明显下降,锥虫蓝染色显示,NSCs存活率下降明显,SA-β-gal染色阳性神经球百分率显著上升,SOD活性与CAT活性均显著降低,MDA含量显著升高,NSCs中Nrf2/ARE信号通路相关蛋白Nrf2和HO-1表达水平显著下调,通路相关GCLC和GCLM基因表达下调。结论采用D-gal可以构建NSCs体外衰老模型,其氧化损伤机制可能与抑制Nrf2/ARE抗氧化信号通路有关。

核转录因子红细胞系相关因子-2干扰质粒构建及鉴定

目的设计及构建小鼠核转录因子红细胞系相关因子-2(Nrf2)基因的干扰质粒,并筛选出效果最好的干扰质粒。方法设计3组针对Nrf2基因的核糖核酸干扰(RNAi)序列,应用基因重组技术克隆入载体中构建短发夹RNA(shRNA),分别为shRNA1、shRNA2及shRNA3,通过基因测序鉴定,经Lipofectamine2000转染至BV2细胞,实时PCR检测Nrf2 mRNA的表达,Western Blot法检测Nrf2蛋白的表达。结果测序表明,克隆入载体中的Nrf2干扰序列及读码框完全正确,实时PCR及Western Blot显示shRNA3干扰效果最强。结论成功构建小鼠Nrf2的有效干扰质粒,为Nrf2信号通路在脑卒中领域的功能研究奠定了基础。

乳腺癌MRI征象及与人类表皮生长因子受体2和增值细胞核抗原表达的相关性分析

目的分析乳腺癌MRI征象及与人类表皮生长因子受体2(CerbB-2)、增值细胞核抗原(Ki-67)表达的相关性。方法选取2018年1月至2020年12月于本院治疗的62例乳腺癌患者作为研究对象,所有患者均进行MRI检查,采用免疫组化检查患者的CerbB-2、Ki-67阳性表达,分析乳腺癌患者的MRI征象及与CerbB-2、Ki-67表达的相关性。结果62例乳腺癌患者中,患者病灶类型均为肿块;肿瘤直径>2 cm患者23例,直径≤2 cm患者39例;分叶状肿瘤患者14例,类圆形肿瘤患者15例,不规则形肿瘤患者33例;肿瘤边缘光滑患者8例,不规则形患者27例,毛刺状患者27例;强化均匀患者15例,不均匀患者34例,环形强化患者13例;淋巴结出现转移患者23例,未出现转移患者39例;强化曲线Ⅰ型患者7例,Ⅱ型患者15例,Ⅲ型患者40例;早期强化率>100%患者41例,50%~100%患者15例,<50%患者6例;21例CerbB-2阳性表达患者中,内部强化和淋巴结转移比较差异有统计学意义(P<0.05),50例Ki-67阳性表达患者中,肿瘤形态、肿瘤边缘、内部强化、淋巴结转移比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论MRI征象与CerbB-2、Ki-67的阳性表达存在一定的相关性,可根据肿瘤形态、肿瘤边缘、内部强化、淋巴结转移征象对乳腺癌患者的预后情况进行评估。

基于调控核因子E2相关因子2探讨蟾酥对脑缺血再灌注损伤小鼠星形胶质细胞的影响

目的研究蟾酥预处理通过调控星形胶质细胞核因子E2相关因子2(Nrf2)表达对脑缺血再灌注损伤小鼠的保护作用。方法将60只C57小鼠随机分为假手术组、模型组和蟾酥注射液低、中、高剂量组,每组12只。模型组采用线栓法制备脑缺血再灌注模型;假手术组血管分离后不插入线栓,结扎消毒后缝合皮下组织及皮肤即可,其余操作同模型组;蟾酥注射液低、中、高剂量组分别于缺血前30 min经腹腔注射蟾酥注射液1.6、3.2、6.4 mL/kg,其余操作同模型组。再灌注后24 h,采用Longa’s评分法评定各组小鼠神经功能。再灌注后72 h以2,3,5-氯化三苯基四氮唑(TTC)染色法检测小鼠脑梗死体积百分比,蛋白免疫印迹法检测小鼠脑组织胶质纤维酸性蛋白(GFAP)和Nrf2蛋白表达水平,免疫荧光法检测小鼠脑组织GFAP和Nrf2阳性表达数。结果与假手术组比较,模型组小鼠Longa’s评分、脑梗死体积百分比、GFAP蛋白表达和阳性细胞数均显著提高(P<0.05),Nrf2蛋白表达和阳性细胞数均降低(P<0.05);与模型组比较,蟾酥注射液低、中、高剂量组小鼠Longa’s评分、脑梗死体积百分比、GFAP蛋白表达和阳性细胞数均降低(P<0.05),Nrf2蛋白表达和阳性细胞数均升高(P<0.05)。结论蟾酥预处理对脑缺血再灌注损伤小鼠具有保护作用,其保护机制可能是通过抑制脑组织星形胶质细胞GFAP和促进Nrf2的表达来实现的。

硫氢化钠增加高糖高脂条件下小鼠心房肌细胞系HL-1谷胱甘肽合成

目的研究硫氢化钠(NaHS)是否通过调节谷胱甘肽(GSH)的合成,降低活性氧自由基(ROS)产生,改善小鼠2型糖尿病心肌病(DCM)。方法将小鼠心房肌细胞系HL-1分为对照组、高葡萄糖(HG:40 mmol/L)和棕榈酸(Pal:500μmol/L)处理组;以及硫氢化钠(NaHS,100μmol/L)、DL-炔丙基甘氨酸[PPG,胱硫醚γ裂解酶(CSE)抑制剂,1 mmol/L]和N-乙酰-L-半胱氨酸(NAC,ROS抑制剂,5 mmol/L)处理72 h组。Western blot检测CSE和谷胱甘肽合成酶(GSS)的表达;二氢乙锭(DHE)和二氯氟甲烷(DCFH)检测ROS含量;免疫共沉淀检测核因子红细胞系2相关因子2(Nrf2)泛素化水平及Nrf2与肌肉特异性环指蛋白1(Murf1)的相互作用。结果与对照组比高糖高脂处理HL-1细胞后CSE、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、谷氨酸半胱氨酸连接酶催化亚基C(GCLC)、谷氨酸半胱氨酸连接酶修饰亚基M(GCLM)、谷胱甘肽合成酶(GSS)的表达水平下降,而NaHS能恢复其表达。高糖高脂组ROS含量高于NaHS组。与NaSH组比高糖高脂条件下Murf1与Nrf2的相互作用增加,Nrf2泛素化水平明显增加。结论硫氢化钠减轻Nrf2的泛素化,增加GSH合成关键酶的表达。

组织因子促进人类大肠癌细胞的侵袭及与基质金属蛋白酶类的相关性研究

目的:探讨组织因子促进人类大肠癌细胞侵袭的机制,研究其与MMP 2和MMP 9的相关性。方法:获取转染正义/反义TFcDNA的人类大肠癌HT 29细胞系/LoVo细胞系裸鼠皮下种植瘤标本,应用Westernblot和RT PCR技术,检测转染组和对照组肿瘤组织中MMP 2和MMP 9的蛋白和mRNA表达水平;同时采用明胶酶谱法检测转染反义LoVo细胞系培养上清中的MMP 2和MMP 9活性的变化。结果:与对照组相比较,转染正义TFcDNA的HT 29细胞系成瘤标本TF表达升高,其所对应的MMP 9和MMP 2蛋白水平和mRNA水平表达也明显升高; 转染反义TFcDNA的LoVo细胞系成瘤标本中的TF,MMP 9和MMP 2蛋白和mRNA水平表达明显低于对照组,转染反义TFcDNA的LoVo细胞系培养上清液中的MMP 9和MMP 2活性较对照组低;MMP 9和MMP 2表达与组织因子表达具有相关性。结论:组织因子促进人类大肠癌细胞的侵袭,其部分机制可能与组织因子上调MMP 9和MMP 2的表达有关,组织因子可能是大肠癌细胞分泌MMPs的内在激动剂。

幽门螺杆菌改变人肝细胞系HepG2蛋白质表达谱

目的研究H.pylori作用后肝细胞系HepG2蛋白质表达谱的改变,通过对差异蛋白质点的鉴定与分析,以探讨H.pylori对肝细胞的病理作用。方法采用体外肝细胞和H.pylori共培养,应用双向凝胶电泳分离H.pylori处理前后细胞总蛋白,筛选出差异表达的蛋白质点,并进行质谱分析鉴定。结果鉴定出7种表达上调的蛋白质点,包括整合素-β1、蛋白激酶C-α、LIM同源盒蛋白Lhx1、真核翻译起始因子2-β亚单位、PINCH蛋白、MAPK激酶3、Ras相关蛋白Rab-37等。这些蛋白质参与了基因表达调控、细胞免疫、细胞生长、信号传导等众多事件。结论H.pylori可能通过介导这些蛋白质的上调而发挥对HepG2细胞的病理作用。这种蛋白质组的差异分析有助于进一步研究H.pylori与人类肝胆疾病的关系。

Nrf2、TET2蛋白表达与非小细胞肺癌病理特征及预后的关系

目的 探究细胞核细胞系相关因子2(Nrf2)、十十一易位酶2(TET2)蛋白表达与非小细胞肺癌病理特征及预后的关系。方法 选择2021年1月—2022年1月本院收治的82例非小细胞肺癌患者作为研究对象,按照12个月内治疗情况分为预后良好组(62例)和预后不良组(20例)两组。取早期患者术中的组织标本,晚期活检取的组织,于患者入院24小时内收集并整理所有受试者的临床资料,完成血肌酐(Scr)水平、糖蛋白抗原15-3(CA15-3)及癌胚抗原(CEA)、TET2及Nrf2检测。采用Logistic多因素回归分析非小细胞肺癌发病的影响因素,观察非小细胞肺癌患者的TET2及Nrf2蛋白阳性表达以及分析Nrf2、TET2蛋白表达与非小细胞肺癌病理特征及预后的关系。结果 术后随访12个月,非小细胞肺癌患者预后不良发生20例,发生率为24.39%。预后不良患者CEA、CA15-3、TET2蛋白表达高于预后良好患者,Nrf2蛋白表达低于预后良好患者(P<0.05)。以非小细胞肺癌患者预后为因变量(赋值情况:预后良好患者=1,预后不良患者=0),将CEA水平、CA15-3水平、TET2、Nrf2设为自变量,并对其进行赋值。经多因素Logistic回归分析,CEA水平、CA15-3水平、TET2、Nrf2均是非小细胞肺癌预后不良患者的危险因素(P<0.05)。结论 非小细胞肺癌患者TET2水平高于正常肺组织,Nrf2水平低于正常肺组织,TET2、Nrf2均是非小细胞肺癌预后不良患者的危险因素。

NRF2、Keap1基因及蛋白在非小细胞肺癌肿瘤组织中的表达

目的探讨非小细胞肺癌(NSCLC)细胞核细胞系相关因子2(NRF2)和胞质蛋白伴侣分子(Keap1)的基因和蛋白表达与临床特点的关系。方法应用逆转录PCR和免疫组化技术检测34例NSCLC组织NRF2和Keap1mRNA和蛋白的表达。结果NSCLC早期(Ⅰ+Ⅱ期)和晚期(Ⅲ+Ⅳ期)患者的Keap1 mRNA相对定量表达有统计学差异(P=0.039),NRF2 mRNA相对定量在不同性别患者中表达有统计学差异(P=0.034)。结论晚期NSCLC患者肿瘤组织Keap1 mRNA表达升高,女性患者NRF2 mRNA表达较男性降低。

灯盏花素干预糖尿病模型大鼠睾丸组织增殖细胞核抗原和c-fos的表达

背景:有研究表明灯盏花素可影响2型糖尿病大鼠的生殖能力,但其作用机制少有报道。目的:探讨灯盏花素对2型糖尿病大鼠睾丸增殖细胞核抗原和原癌基因c-fos表达的影响作用。方法:选取36只健康雄性大鼠随机分为对照组、模型组和灯盏花素组各12只。模型组和灯盏花素组采用链脲佐菌素连续腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,大鼠血糖监测达到16.7 mmol/L作为建模标准,对照组大鼠予以同等容积的柠檬酸缓冲液单次腹腔注射。灯盏花素组采用灯盏花素注射液10 mg/(kg·d)连续4周腹腔注射,其他2组在相同时间注入等量生理盐水。结果与结论:干预4周后,血清睾酮检测、免疫组织化学染色和PCR检测结果显示,血清睾酮水平、增殖细胞核抗原、c-Fos蛋白及mR NA表达:对照组>灯盏花素组>模型组(P<0.05);血糖水平:对照组<灯盏花素组<模型组(P<0.05)。结果证实,灯盏花素可以通过增强增殖细胞核抗原和c-fos的表达,保护2型糖尿病大鼠的生殖功能。

四种人子宫内膜癌细胞系中IGFBP-rP1的定位及表达

目的:检测不同子宫内膜癌细胞系中胰岛素样生长因子结合蛋白相关蛋白1(IGFBP-r P1)的定位及表达情况。方法:体外培养子宫内膜癌细胞Ishikawa、RL95-2、HEC-1B和HEC-1A,细胞免疫荧光法检测IGFBP-r P1在4种子宫内膜癌细胞中的定位;实时荧光定量PCR法与Western blot法检测4种子宫内膜癌细胞中IGFBP-r P1 mRNA及蛋白的表达水平。结果:细胞免疫荧光染色示IGFBP-r P1主要定位于4种子宫内膜癌细胞的胞浆。子宫内膜癌Ishikawa、RL95-2细胞中IGFBP-r P1 mRNA及蛋白表达水平明显高于HEC-1A、HEC-1B细胞(P<0.001)。HEC-1A细胞中IGFBP-r P1 mRNA及蛋白表达量最低,Ishikawa细胞中表达量最高(P均<0.05)。结论:4种子宫内膜癌细胞系中均表达IGFBP-r P1。

Nrf-2和Rsf-1在非小细胞肺癌中的表达及其临床意义

目的探讨细胞核相关因子2(Nrf-2)和染色质重塑因子1(Rsf-1)在非小细胞肺癌(NSCLC)中的表达及意义。方法选取72例NSCLC患者的癌组织为NSCLC组,同时选取同一患者癌旁组织(>5 cm)作为对照组,采用免疫组化法检测两组Nrf-2和Rsf-1蛋白表达。结果 NSCLC组Nrf-2蛋白阳性表达率为41.67%,明显低于对照组(P<0.05),而Rsf-2蛋白阳性表达为77.78%,明显高于对照组(P<0.05);Ⅲ~Ⅳ期、中低分化、有淋巴结转移患者的Nrf-2蛋白阳性表达率分别为21.43%、22.73%和25.71%,明显低于Ⅰ~Ⅱ期、高分化及无淋巴结转移患者(P<0.05),而Rsf-1蛋白阳性表达率为92.86%、90.91%和97.14%,明显高于Ⅰ~Ⅱ期、高分化及无淋巴结转移患者(P<0.05);Nrf-2与Rsf-1蛋白表达呈负相关(rs=-0.256,P<0.05)。结论肺癌组织中Nrf-2蛋白表达下调,而Rsf-1蛋白表达上调,可能在肺癌发生发展中有一定作用。

不同氧浓度下C2C12细胞的Nrf2抗氧化系统对H2O2刺激的反应

目的:探讨不同氧浓度下小鼠骨骼肌卫星细胞系(C2C12细胞)对H2O2刺激反应的变化及其机制。方法:小鼠骨骼肌卫星细胞系(C2C12细胞),经培养复苏后,将细胞分为7组,每组设8个复孔,各组分别加入浓度为0.1mmol/L、0.25mmol/L、0.5mmol/L、0.75mmol/L、1mmol/L、2mmol/L的H2O2,分别作用1h、2h后测细胞活力,选择细胞H2O2刺激的最佳作用时间和浓度;C2C12细胞分为不同氧浓度组:21%O2、12%O2、8%O2、5%O2每组设8个复孔,12h后,H2O2作用1h,收集细胞;检测细胞Nrf2蛋白荧光和蛋白表达量,测定Nrf2和抗氧化酶SOD1、SOD2、CAT、NQO-1、HO-1、GPX-1的mRNA表达量及细胞ROS水平。结果:选择H2O2作用时间相对较短的1h和浓度0.5mmol/L作为本实验的H2O2刺激条件。与21%O2组相比,12%O2组细胞Nrf2蛋白荧光增强,Nrf2的mRNA和蛋白表达以及抗氧化酶SOD1、SOD2、CAT、NQO-1、HO-1、GPX-1的mRNA表达均显著增加(P<0.05或P<0.01),细胞ROS水平明显降低(P<0.01);8%O2组仅GPX-1mRNA显著增加(P<0.05),其他指标变化不大;5%O2组细胞Nrf2mRNA和蛋白表达以及抗氧化酶SOD1、SOD2、NQO-1、GPX-1的mRNA表达均明显降低(P<0.05或P<0.01),细胞ROS水平则明显升高(P<0.01)。结论:不同氧浓度下C2C12细胞中Nrf2介导的抗氧化系统对H2O2刺激反应不同,12h的12%O2浓度可促进C2C12细胞Nrf2的抗氧化作用,而5%O2浓度的严重低氧则作用相反。

人参皂苷Rd通过下调Nrf2表达调控H460细胞的增殖和凋亡

核转录因子红细胞系-2p45相关因子-2(nuclear factor erythroid-2p45-related factor 2,Nrf2)是细胞应对外界应激的主要调控因子,通过调控一系列细胞保护酶,维持细胞稳态。然而,在许多肿瘤细胞中Nrf2过度激活,导致肿瘤细胞获得增殖优势并产生化疗耐药,因此,靶向抑制Nrf2是肿瘤增敏治疗的一种新思路。人参皂苷Rd是人参皂苷中的重要活性成分,具有显著的抗肿瘤作用。本研究以不同浓度的人参皂苷Rd处理人非小细胞肺癌(non-small cell lung cancer,NSCLC)H460细胞,利用CCK-8法检测细胞活力;倒置显微镜观察H460细胞的形态变化;流式细胞术检测细胞周期及凋亡率;RT-qPCR和Western印迹检测的Nrf2及其下游调控基因的表达情况;此外通过转染Nrf2-siRNA下调H460细胞中Nrf2的表达,观察其对人参皂苷Rd增敏的影响。结果显示,与对照组相比,人参皂苷Rd能够抑制H460细胞增殖活力,诱导细胞G0/G1期阻滞,促进细胞凋亡,具有剂量依赖性(P<0.05);此外,人参皂苷Rd能够下调Nrf2,醌氧化还原酶1[NAD(P)H:quinoneoxidoreductase,NQO1],谷氨酰半胱氨酸连接酶催化亚基(glutamate--cysteine ligase catalytic subunit,GCLC)和调节亚基(glutamate--cysteine ligase regulatory subunit,GCLM)的mRNA和蛋白质水平,同时增强H460细胞对化疗药的敏感性(P<0.05),而转染Nrf2-siRNA后,人参皂苷Rd的增敏作用减弱。表明人参皂苷Rd可以抑制非小细胞肺癌H460细胞活性并增敏化疗,其机制可能是通过抑制Nrf2信号通路来实现。

黄芩素通过Nrf2/NF-κB/NFATc1信号通路对牙周病大鼠破骨细胞形成和牙槽骨吸收的影响

目的探讨黄芩素通过核因子E2相关因子(Nrf2)/核因子κB(NF-κB)/活化T细胞核因子c1(NFATc1)信号通路对牙周病大鼠破骨细胞形成和牙槽骨吸收的影响。方法将40只SD雄性大鼠随机分为对照组、模型组、黄芩素低剂量组、黄芩素高剂量组,各10只。除对照组外,其他组制备牙周病大鼠模型。造模1周后,于黄芩素低剂量组、黄芩素高剂量组大鼠创伤处分别注射2.5 mg/(kg·d)、5.0 mg/(kg·d)的黄芩素,于模型组和对照组大鼠相同部位注射等量生理盐水。连续给药7 d后,检测大鼠牙槽骨吸收情况,观察大鼠牙周组织病理变化,计数大鼠牙周组织的破骨细胞数量,并检测大鼠血清白细胞介素(IL)-1β、IL-6、肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平、超氧化物歧化酶(SOD)和活性氧活性、谷胱甘肽和丙二醛水平,以及牙周组织Nrf2、NF-κB、NFATc1蛋白表达水平。结果与对照组相比,其他组大鼠牙周组织上皮增生,胶原纤维排列紊乱,有大量炎症细胞浸润,牙槽骨吸收度、牙周组织破骨细胞数、牙周组织NF-κB和NFATc1蛋白表达水平、血清IL-1β、TNF-α水平以及活性氧活性升高,血清谷胱甘肽水平及SOD活性、牙周组织Nrf2蛋白表达水平降低,模型组和黄芩素低剂量组大鼠血清IL-6、丙二醛水平升高(均P<0.05)。模型组、黄芩素低剂量组、黄芩素高剂量组牙槽骨吸收度、牙周组织破骨细胞数、牙周组织NF-κB和NFATc1蛋白表达水平、血清IL-1β、IL-6、TNF-α、丙二醛水平及活性氧活性依次降低,血清SOD活性、牙周组织Nrf2蛋白表达水平依次升高,且黄芩素低剂量组与黄芩素高剂量组的血清谷胱甘肽水平均高于模型组(均P<0.05)。结论黄芩素可能通过调节Nrf2/NF-κB/NFATc1信号通路抑制机体炎症和氧化应激反应,从而减少破骨细胞形成,进而减少牙槽骨吸收。

砷对人永生化角质形成细胞核转录因子红细胞系-2p45相关因子-2和Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1基因表达的影响

目的探讨不同剂量亚砷酸钠对人永生化角质形成细胞(human keratinocytes cell,Ha Ca T)Kelch样环氧氯丙烷相关蛋白-1(Keap1)和核转录因了红细胞系-2 p45相关因子-2(Nrf2)基因表达的影响。方法将Ha Ca T细胞分别暴露于终浓度为0(对照)、1.30、3.25、6.50μmol/L的亚砷酸钠培养基中培养24、48、72 h。采用流式细胞仪检测Ha Ca T细胞凋亡率,采用实时荧光定量(real-time quantitative PCR)检测Ha Ca T细胞中Nrf2、Keap1 m RNA的表达水平。结果与对照组相比,1.30μmol/L亚砷酸钠染毒24 h后Ha Ca T细胞的凋亡率降低,而3.25、6.50μmol/L亚砷酸钠染毒48、72 h后Ha Ca T细胞的凋亡率升高,差异均有统计学意义(P<0.05);且随着亚砷酸钠染毒时间的延长和染毒剂量的升高,Ha Ca T细胞的凋亡率均呈上升趋势。与对照组相比,1.30μmol/L亚砷酸钠染毒24、48、72 h和3.25μmol/L亚砷酸钠染毒24 h后Ha Ca T细胞中Nrf2 m RNA的表达水平均增高,而3.25、6.50μmol/L亚砷酸钠染毒72 h后Ha Ca T细胞中Nrf2 m RNA的表达水平均下降,差异有统计学意义(P<0.05);且随着亚砷酸钠染毒时间的延长和染毒剂量的升高,Ha Ca T细胞Nrf2 m RNA的表达水平均呈下降趋势。与对照组相比,1.30、3.25μmol/L亚砷酸钠染毒72 h和3.25、6.50μmol/L亚砷酸钠染毒48 h后Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平均增高,差异有统计学意义(P<0.05)。随着亚砷酸钠染毒时间的延长,1.30μmol/L亚砷酸钠染毒组Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈波动性上升,3.25μmol/L亚砷酸钠染毒组Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈逐渐上升趋势,6.50μmol/L亚砷酸钠染毒组Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈先上升后下降;随着亚砷酸钠染毒剂量的升高,24、72 h时Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈下降趋势,而48 h时Ha Ca T细胞中Keap1 m RNA的表达水平呈上升趋势。结论亚砷酸钠可抑制Ha Ca T细胞的生长,诱导凋亡和角化的发生,其机制可能与Nrf2和Keap1基因的表达有关。

肿瘤相关巨噬细胞促进微囊化胃癌细胞增殖细胞核抗原、血管内皮生长因子、基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9表达

肿瘤组织中巨噬细胞的浸润与肿瘤患者的不良预后相关。我们通过巨噬细胞与微囊化胃癌细胞共培养，观察其对微囊化胃癌细胞表型的影响。

缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肾脏转录因子Nrf2表达的影响

目的:研究缺血后处理对缺血-再灌注大鼠肾脏转录因子红细胞系-2相关因子2(Nrf2)表达的影响,探讨Nrf2在缺血-再灌注中的作用及其意义。方法:SD大鼠30只分三组:假手术C组、缺血-再灌注(I-R)组、缺血后处理(IPO)组。于再灌注2h处死大鼠,取血检测血清肌酐(Cr)、尿素氮(BUN)及胱抑素C(Cys C)的水平,并测定血清超氧化物歧化酶(SOD)活性及丙二醛(MDA)含量。应用RT-PCR及Western-blot方法定量分析Nrf2,血红素氧合酶1(H0-1),y-谷氨酞半肤氨酸合成酶(-GCS)蛋白在肾组织中的表达。结果:IPO组肾组织Cr,BUN,Cys C及MDA水平显著低于缺血再灌注组,SOD活性显著高于缺血再灌注组,Nrf2,H0-1,γ-GCS蛋白在肾组织中的表达明显增多。结论:缺血后处理可能通过提高Nrf2在肾组织中的表达增多避免加重肾缺血再灌注损伤。

2型糖尿病相关基因的研究进展

随着分子生物新技术新方法的不断发展,近年来,人们发现了一些与2型糖尿病发病有关的基因,如:组织蛋白酶L基因(CathepsinL基因),胰岛素能上调该基因的表达,从而降低血糖,所以该基因可能是参与血糖调节的中间环节。CAPN10基因,该基因存在很多多态性位点,如:该基因SNP43、SNP19、SNP64等,都与糖尿病发病有一定关联。青少年起病的成人型糖尿病(MODY)是2型糖尿病的一种,其特点是早期发病(通常25岁以下),伴有胰岛素分泌功能障碍。肝细胞核因子4α(HNF4α)、葡萄糖激酶(GCK)、肝细胞因子1α(HNF1α)、胰岛素启动因子(IPF1)、肝细胞因子1β(HNF1β)和神经元分化因子/β细胞E框反式激活物2(NeuroD1/BETA2)是分别引起6种MODY的因素。这些基因的突变可导致代谢功能障碍,从而引发对β细胞的毒性作用,还可以引起胰腺发育不良。还有一些细胞因子基因,如:IL6基因,该基因的启动子的多态性也与2型糖尿病发病有很大关联。