生物大分子的细胞核质转运

生物大分子通过细胞核孔复合体的转运是真核细胞基因复制、转录和翻译的必要环节 ,也是联系细胞核内外信号转递与参与细胞内核反应 (即细胞增殖、分化、凋亡等核反应 )调控的重要环节。本文主要介绍细胞核孔复合体结构、出入细胞核的转运过程及核转运蛋白与亲核素方面的研究进展 ,细胞核转运过程的深入研究在医药学基础和临床实践都有十分重要的意义。

辐射对培养小鼠骨髓基质细胞核因子-κB的影响

目的 探讨辐射对培养小鼠骨髓基质细胞内核因子 κB(NF κB)的影响。方法 采用免疫组化法及凝胶电泳迁移率实验。结果 免疫组化方法显示正常骨髓基质细胞核的周围表达低水平的NF κB ,8.0Gy60 Co辐射损伤后 1h即见其表达较正常显著升高并出现明显的核移位 ,4h达高峰 ,6h有所回落 ,8h恢复正常 ;凝胶电泳迁移率实验发现正常骨髓基质细胞内存在低水平活性NF κB ,8.0Gy60 Co辐射损伤后 1h即见其活性明显升高 ,4h达高峰 ,8h恢复正常。结论 8.0Gy辐射损伤后培养骨髓基质细胞内NF κB的表达升高并激活 ,这可能与骨髓微环境内基质细胞的抗辐射能力及造血功能的恢复有关。

转录因子Krüppel样因子15通过下调活化T细胞核因子胞质1型保护足细胞

目的:探究转录因子Krüppel样因子15(Krüppel-Like Factor 15,KLF15)通过下调活化T细胞核因子胞质1型(Nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1,NFATc1)保护足细胞的作用机制。方法:通过免疫荧光染色观察在正常人及不同类型肾小球疾病患者足细胞KLF15的表达情况;通过实时荧光定量PCR(RT-PCR)、Western blot检测体外培养的永生化小鼠足细胞在高糖(HG)、脂多糖(LPS)处理48h及阿霉素(ADR)处理24h后KLF15的表达情况,足细胞感染腺病毒瞬时过表达KLF15后KLF15过表达效率、促凋亡蛋白BAX、抗凋亡蛋白BCL2及NFATc1的表达情况,足细胞给予地塞米松处理后NFATc1表达情况;通过流式细胞术检测在过表达KLF15的足细胞中给予损伤刺激(ADR、LPS、HG)后,足细胞的凋亡情况;通过免疫染色质共沉淀(CHIP)检测足细胞在正常情况下与LPS处理后转录因子KLF15与NFATc1启动子的结合情况;通过RT-PCR检测足细胞过表达KLF15后,NFATc1下游基因的表达情况;结果:KLF15在不同类型的肾小球疾病患者足细胞表达降低;体外培养的足细胞在损伤刺激的情况下KLF15的mRNA及蛋白水平表达均降低;足细胞过表达KLF15后,促凋亡蛋白BAX表达降低,抗凋亡蛋白BCL2表达升高,在给予损伤刺激的情况下,过表达KLF15组的足细胞凋亡率较对照组明显减少;足细胞过表达KLF15后,NFATc1在mRNA及蛋白水平的表达降低;NFATc1下游目的基因转录减少;在正常的足细胞中,转录因子KLF15与NFATc1启动子区域有结合,且在LPS损伤刺激下结合减弱,过表达足细胞中的KLF15,NFATc1的下游基因(Fzd9、Rcan1、Plaur)在mRNA水平表达降低;在体外培养的足细胞给予地塞米松处理后,转录因子KLF15表达明显增高, NFATc1表达降低。结论:转录因子KLF15通过下调NFATc1保护足细胞,地塞米松可通过升高KLF15抑制NFATc1保护足细胞。

NFATc4在舌鳞状细胞癌神经侵犯诊断中的作用

目的:通过比较活化T细胞核因子胞质4(NFATc4)与S100钙结合蛋白(S100)、p75神经营养素受体(p75)对舌鳞状细胞癌(TSCC)神经侵犯(PNI)的免疫组织化学染色特点,探索NFATc4在TSCC PNI诊断中的作用。方法:收集59例TSCC病理标本,10例癌前病变为对照组,每个标本连续切片后采用免疫组织化学染色,观察NFATc4对TSCC以及神经的染色情况,并与S100和p75进行比较。结果:59例TSCC病理标本中,NFATc4阳性率为47.5%(28/59),PNI发生率为35.6%(21/59),NFATc4阳性表达组的PNI发生率高于NFATc4阴性表达组(P<0.05),NFATc4染色可见神经内膜淡染色,TSCC细胞胞质可见染色,NFATc4对神经的鉴别效果与S100和p75比较,无统计学差异(P>0.05)。结论:NFATc4的表达与PNI的发生存在关联,NFATc4能在染色神经束的同时,将TSCC组织染色,可以在同一个视野内直观地观察肿瘤与神经的关系,有利于提高PNI判读准确率,有望成为一个判断PNI的指标。

细胞核基质研究进展

核基质是细胞核内一个精密的动态变化的蛋白网络结构 ,它不仅构成细胞核的支架结构 ,而且参与诸如DNA复制、基因表达调控、RNA加工装运等重要生命过程。核基质作为反式作用因子与MARs相互作用在各种层次上对基因表达进行调控 ,并通过许多途径参与细胞癌变过程。本文从核基质结构、DNA复制、基因调控。

异种动物细胞核移植研究现状及相关问题的探讨

随着体细胞核移植相继在多种动物中取得成功 ,异种细胞核移植技术在拯救濒危野生动物、人类干细胞克隆和细胞核质互作研究等方面具有特殊意义 ,受到广泛重视并取得了很大进展。文章对异种细胞核移植技术研究现状进行了综述 ,并对其应用前景和存在的问题进行了探讨。

鱼类细胞工程发展要点

细胞工程是一门新兴学科.本文概述了核质杂交技术、染色体工程(染色体移植、雌核发育、多倍体)和细胞融合技术要点,并介绍了国内外学者在鱼类中的研究状况.同时阐述了细胞工程在鱼类育种中的发展前景.

核基质研究现状

核基质研究现状关键词核基质当Ｍａｎｉｔｏｂａ大学的生物化学家ＪａｍｅｓＤａｖｉｅ在七十年代中期开始研究染色体内部活动时，他由细胞核抽提出极大部分ＤＮＡ和可溶蛋白，再按传统做法把不溶部分弃之于污水槽中。但自八十年代后期起，Ｄａｖｉｅ与许多想了解基因编码...

细胞核基质的功能与肿瘤发生

对肿瘤细胞的研究,大都对DNA或染色体感兴趣,因为它们携带着遗传信息,用DNA可以在玻管内做多种实验,还可将基因克隆出来进行编码分析。染色体亦有形态、区带可见。

细胞核质转运及其受体在植物抗病防御反应中的调控作用

植物病害严重威胁全球粮食生产,研究植物对病原菌防御机制和病原菌对寄主作物的侵染过程和分子机制,有助于改良植物种源使其获得持久抗性。近年来,日渐增多的研究表明,一些抗病蛋白需要转移到细胞核内才能启动免疫反应,进而发挥抗病防御作用,而细胞核质转运受体是实现这些抗病蛋白核质转运必不可少的"载体"。因此,细胞核质转运及转运受体在抗病防御中发挥重要作用。该文在介绍植物抗病防御反应机制的基础上,综述了细胞核质转运及核质转运受体在植物抗病防御反应中的作用研究进展,并对未来的研究方向进行了展望。

RIP140在女性生殖和脂代谢中的作用

细胞核感受体通常是在精确的时间周期内,通过控制具体的细胞目标基因,调控着大量内分泌反应。它们调节基因复制的能力主要是依靠共活化剂及共抑制剂来完成的,在为数众多的关于共激化剂报道中,160蛋白家族类固醇受体辅激活因子（steroid receptor coactivator，P160／SRC）在许多细胞核感受器成员的复录活化中发挥着重要的作用。

雌激素干预对去卵巢大鼠骨组织的影响

目的:建立绝经后骨质疏松(PMO)模型,外源性补充雌激素,探讨雌二醇(E_2)的骨保护作用及其对胞质活化T细胞核因子1(NFATc1)表达的影响。方法:12周龄Wistar雌性大鼠随机分为假手术组(Sham组)、去势组(OVX组)、实验组(OVX+E_2组),每组10只。OVX+E__2组给予17β-E_2皮下注射,其余2组给予等量生理盐水。16周后,酶联免疫吸附试验(ELISA)测定血清E_2水平,逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)法测定骨组织中NFATc1表达量,微型计算机断层成像(Micro-CT)分析大鼠胫骨平台处骨密度(BMD)、骨体积分数(BV/TV)、骨小梁厚度(Tb.Th)、骨小梁数目(Tb.N)。结果:Sham组、OVX+E_2组与OVX组相比,BMD、Tb.Th、Tb.N、BV/TV、血清E_2水平升高,NFATc1水平下降(均P<0.05)。结论:雌激素可能通过抑制NFATc1的表达减缓骨量丢失。

基于显微多光谱成像的临床皮肤鳞癌病理分析

皮肤鳞状细胞癌(cSCC)是我国三大皮肤恶性肿瘤之一,病理学诊断目前仍是其临床诊断的金标准。为了提升诊断效率以及降低人工劳动强度,本课题组自主研发了一套自动多光谱显微成像系统。利用该系统获取人体正常皮肤组织与鳞癌组织全切片的多光谱病理图像,运用随机森林算法与自适应阈值分割法对不同波段的图像进行精确分割并作伪彩色处理,有效地提取出细胞核、大脂滴和角化珠等重要的诊断信息。此外,利用滑动窗口技术设置200×200像素的窗口,计算窗口内的核质比。结果表明,多光谱病理图像经伪彩色处理后显著增强了病理结构的可视化。经量化分析得到正常皮肤组织与cSCC组织的核质比存在显著的统计学差异(P<0.001)。核质比量化的ROC曲线分析也证明了该系统的敏感性与特异性。实验结果表明,该自动多光谱显微成像系统结合图像处理技术,增强了临床病理信息的可视化和量化能力,为提升病理分析的效率和准确率、降低病理诊断的复杂性提供了坚实的技术基础。

ER、PR在子宫颈的分布及其与宫颈鳞癌的关系

目的：检测ER、PR在正常子宫颈、上皮内瘤及宫颈磷癌的分布，探讨ER、PR的表达状态与宫颈鳞癌的发生发展及预后的关系。方法：采用SP免疫组化方法对21例正常宫颈，40例宫颈上皮内瘤及71例浸润性宫颈鳞癌进行ER、PR检测，结果：正常宫颈ER、PR主要在鳞状上皮、腺上皮及间质细胞核表达，且三者表达状态基本一致，CIN鳞状上皮及浸润性宫颈鳞癌ER、PR核表达率明显降低。结论：ER、PR核表达下调或缺失可能是宫颈鳞癌发生的一重要机制。