运动训练大鼠长期停训后海马细胞核转录因子NF-kBp65的表达变化

应用免疫组织化学技术探讨长期停训对大鼠海马神经元细胞核转录因子(Nuclear factor of kapa B,NF-kBp65)表达的影响。参照Bedford训练方案,建立有氧与疲劳训练动物模型,连续训练8周后,停训28周,观察大鼠海马NF-kBp65的表达变化。结果表明,疲劳训练组大鼠海马神经元NF-kBp65表达上调,疲劳训练促进停训后大鼠海马神经元NF-kBp65的阳性表达。暗示早年疲劳训练可能会影响到大鼠老年期海马组织细胞的功能。

加味小柴胡汤对顺铂诱导BRL细胞核转录因子和热休克蛋白70表达的影响

目的观察加味小柴胡汤对顺铂诱导的大鼠肝BRL细胞核转录因子-kB(NF-kB)、热休克蛋白70(HSP70)表达的影响。方法将BRL细胞分为4组:空白组、顺铂组及加味小柴胡汤大、小剂量组。采用完整细胞蛋白质斑点印迹、免疫组织化学等方法,检测各组细胞NF-kB、HSP70变化。结果顺铂组NF-kB表达明显较空白组升高,HSP70表达降低,组间比较差异有统计学意义;加味小柴胡汤大、小剂量组NF-kB明显较顺铂组低,差异有统计学意义;加味小柴胡汤大、小剂量组HSP70表达均升高,但仅加味小柴胡汤大剂量组差异明显。结论加味小柴胡汤可下调顺铂诱导的BRL细胞NF-kB表达,上调HSP70表达,此作用可能是该方减轻细胞氧化损伤、抑制细胞凋亡重要机理之一。

我国科学家揭示重要转录因子NF-kB细胞核内调控新机制

2007年7月16日，The Journal of Cell Biology发表了我国科学家关于NF-kB信号通路调控的最新研究成果。中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所王琛研究组新发现了一种名叫UXT的蛋白，它能够在细胞核内与NF-KB转录因子发生相互作用，调节NF-kB在转录增强子（Enhancer）的功能。NF-kB是免疫应答、炎症反应和机体发育过程中的关键转录因子，

凉膈散药物血清对脂多糖诱导体外培养巨噬细胞核转录因子-кB的影响

目的观察凉膈散药物血清对脂多糖(LPS)诱导的体外培养的小鼠腹腔巨噬细胞核转录因子-кB(NF-кB)变化的影响,探讨凉膈散解毒作用的细胞信号转导调控机制。方法制备凉膈散药物血清;提取并体外培养小鼠腹腔巨噬细胞;以凉膈散药物血清及LPS共同刺激已培养细胞,免疫荧光法检测巨噬细胞NF-кB亚基p65,用激光扫描共聚焦显微镜观察并测定各组小鼠腹腔巨噬细胞核的p65的荧光表达情况。结果小鼠巨噬细胞经LPS刺激1h后,其核内的荧光强度(代表p65的表达量)显著增强。与LPS刺激组相比:抑制剂TLCK组、凉膈散药物血清不同剂量组的荧光强度值均较低,有显著性差异,以TLCK及凉膈散大剂量组强度值最低,中、小剂量组次之;空白血清不同剂量组则均无显著差异。药物血清不同剂量组之间有显著差异,呈剂量依赖性关系;空白血清不同剂量组之间无显著性差异。结论不同剂量凉膈散药物血清均能抑制LPS所致的细胞核内p65升高,且呈剂量依赖性,这可能是凉膈散解毒作用的细胞信号转导机制之一。

塞来昔布对人肝癌细胞株HepG2细胞核转录因子-κB活性及蛋白表达的抑制

目的:探讨环氧合酶-2选择性抑制剂塞来昔布(celecoxib)对人肝癌细胞株HepG2细胞核转录因子-κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)活性和蛋白表达的影响.方法:不同浓度的塞来昔布作用于HepG2细胞后,应用凝胶电泳迁移率改变分析技术检测HepG2细胞中NF-κBDNA结合活性;用Western blotting法检测HepG2细胞NF-κBp65蛋白表达.结果:25、50μmol/L塞来昔布作用于HepG2细胞后,药物处理组HepG2细胞NF-κBDNA结合活性明显降低,与空白对照组相比有显著性差异(t=12.58,P=0.000;t=17.97,P=0.000);塞来昔布可明显抑制HepG2细胞NF-κBp65蛋白表达水平,与空白对照组相比,差异均有统计学意义(t=4.24,P=0.013;t=6.38,P=0.003).结论:塞来昔布能有效抑制HepG2细胞NF-κB活性及NF-κBp65蛋白表达.

表皮生长因子对细胞核转录活性的直接作用

表皮生长因子（ＥＧＦ）对纯化的鼠胚成纤维细胞（Ｃ３Ｈ１０Ｔ１／２Ｃ１８）胞核＾３Ｈ－ＵＴＰ掺入有明显的促进作用。这一作用在ＥＧＦ与细胞核共同培养９０ｍｉｎ时达到高峰。该作用是ＥＧＦ浓度依赖性的。ＥＧＦ对β射线转化的上述细胞的纯化细胞核，亦同样有促进转录作用。本实验所用的细胞核经光镜，电子显微镜观察，细胞膜、细胞浆标志酶检测及放射性同位素示踪法鉴定，未检出有核外成份的污染。

慢阻肺患者调节性T细胞核转录因子Foxp3的表达及单核苷酸多态性的研究进展

慢性阻塞性肺疾病（慢阻肺）是一种以持续性气流受限为特征的肺部疾病，其气流受限呈不完全可逆的进行性发展。该病以小气道损伤、黏液分泌过多及肺实质破坏为病理特征，是一种由T淋巴细胞参与，并且与炎症及自身异常免疫反应相关的疾病。在慢阻肺的发生及发展过程中，

不同分级慢性阻塞性肺疾病患者调节性T细胞核转录因子叉头状转录因子3表达水平及与炎性因子相关性研究

目的探讨不同分级慢性阻塞性肺疾病(COPD)患者调节性T细胞核转录因子叉头状转录因子3(Foxp3)的表达水平及与炎性因子相关性。方法选取2015年1月至2017年1月来院就诊的120例COPD患者纳入观察组,按照病情严重程度分为COPD1~2级组53例、COPD3~4级组67例,并选择同期进行健康体检的健康志愿者50例为对照组。对3组受试者的Foxp3水平、炎性因子[C-反应蛋白(CRP)、白介素-6(IL-6)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、B型脑尿钠肽(BNP)]水平进行检测对比,并采用Pearson检验对COPD患者Foxp3水平与炎性因子水平间相关性进行分析探讨。结果观察组患者的Foxp3水平低于对照组,炎性因子CRP、IL-6、TNF-α、血浆BNP水平均高于对照组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。观察组内COPD3-4级组患者Foxp3水平低于COPD1-2级组,而CRP、IL-6、TNF-α、BNP水平均高于COPD1-2级组,组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。经Pearson相关性检验,Foxp3水平与CRP、IL-6、TNF-α、BNP呈负相关性(r值分别为-0.571、-0.534、-0.593、-0.516,P<0.05)。结论在COPD患者体内调节性T细胞核转录因子Foxp3的表达水平有降低趋势,并随着患者病情分级加重而进一步降低,且Foxp3与炎性因子水平呈负相关性,通过对COPD患者Foxp3、炎性因子水平监测,对于疾病的临床治疗评估有一定的指导作用。

2-甲氧基雌二醇对骨髓瘤细胞核转录因子XBP-1表达的影响及意义

探讨细胞核转录因子X盒结合蛋白(Xbox-bindingprotein-1,XBP-1)在骨髓瘤细胞中的表达及其在低浓度2-甲氧基雌二醇(2-methoxyestradiol,2ME2)诱导的骨髓瘤细胞分化中的意义。采用RT-PCR及Western印迹方法分析了XBP-1在骨髓瘤细胞系CZ-1、LP-1及NCI-H929细胞中的表达及低浓度2ME2处理对其表达的影响。结果显示CZ-1、LP-1及NCI-H929细胞在未经2ME2处理时均有一定水平XBP-1mRNA及蛋白表达;处理36h后,未观察到XBP-1mRNA及蛋白表达的改变;而处理72h后,则明显上调了XBP-1mRNA及蛋白表达;同时该浓度2ME2明显诱导了三种骨髓瘤细胞形态学的成熟及免疫球蛋白分泌的增多。研究提示,低剂量2ME2可明显诱导骨髓瘤细胞XBP-1mRNA及蛋白表达上调,XBP-1可能参与了2ME2刺激的骨髓瘤细胞的成熟分化。

姜黄素对小鼠角质形成细胞核转录因子κB及其抑制因子IκBα的影响

目的观察姜黄素对小鼠角质形成细胞291增殖的影响,并探讨姜黄素对核转录因子κB(NF-κB)及其抑制因子IκBα的干预作用。方法常规培养291细胞至90%融合,分别加入5,10,15,20,25μmol/L的姜黄素,继续培养3h和6h,MTT法检测不同浓度的姜黄素作用不同时间,291细胞增殖的情况;在常规培养至90%融合的291细胞中,分别加入肿瘤坏死因子(TNF-α)20ng/mL和/或姜黄素20μmol/L,继续培养3h,显微镜下观察细胞形态和活性;采用MTT法检测细胞吸光度;Western blot法分析各组细胞NF-κB及IκBα蛋白的表达情况。结果姜黄素对291细胞增殖抑制作用随剂量增大、时间延长而增加;显微镜下可见,姜黄素作用于291细胞3h后,细胞收缩,形态变圆,单个视野死亡细胞数较空白组和TNF-α组显著增加,姜黄素组细胞吸光度显著下降(P<0.05);Western blot实验结果显示,姜黄素组NF-κB蛋白表达显著下降,IκBα蛋白的表达显著升高(P<0.05);而TNF-α组NF-κB蛋白表达显著升高(P<0.05)。结论姜黄素抑制角质形成细胞增殖的机制,可能是抑制NF-κB表达,增加IκBα表达。

转录激活因子3、细胞周期素D1、增殖细胞核抗原在尖锐湿疣中的表达及其意义

目的转录激活因子3、细胞周期素D1、增殖细胞核抗原在尖锐湿疣中的表达及其意义。方法采用免疫组化方法检测了40例尖锐湿疣(CA)组织及25例正常包皮组织中转录激活因子3(Stat 3)、细胞周期素D1(Cyclin D1)、增殖性细胞核抗原(proliferating cell nuclear antigen,PCNA)的表达。结果 Stat 3试验组阳性35例,阳性率87.5%,对照组显色10例25.0%,χ2=17.23,P<0.05。Cyclin D1试验组阳性34例,阳性率85.0%,对照组阳性9例,为36.0%,χ2=21.01,P<0.05。PCNA阳性35例,阳性率87.5%,对照组阳性14例,56.0%,χ2=11.67,P<0.05。阳性表达率差异均有统计学意义。结论转录激活因子3、细胞周期素D1、增殖细胞核抗原可能促进人乳头瘤病毒(HPV)感染细胞的增殖参与尖锐湿疣其发病机制。

肝细胞核因子3参与乙肝病毒基因的转录调控

肝细胞核因子３参与乙肝病毒基因的转录调控刘定燮，王昌才（广州第一军医大学分子生物学研究所，广州５１０５１５）关键词肝细胞核因子３，乙肝病毒，转录调控Ｃｏｓｔａ等在研究肝细胞甲状腺素和维生素Ａ载体蛋白（ｔｒａｎｓｔｈｙｒｅｔｉｎ）基因的调控时发现，其转...

沉默信息调节因子1、信号转导与转录激活因子3在眼睑基底细胞癌组织中的表达及其临床意义

目的探讨沉默信息调节因子1(SIRT1)和信号转导与转录激活因子3(STAT3)在眼睑基底细胞癌组织中的表达情况及其与临床病理分类的关系。方法选取二四二医院2014年2月至2017年8月经病理证实为眼睑基底细胞癌且经手术切除保留的癌组织蜡块93例作为观察组,皮肤基底细胞乳头状瘤组织60例作为对照组。采用免疫组化法检测各组织中SIRT1、STAT3蛋白阳性表达率;Spearman法分析SIRT1和STAT3蛋白表达相关性;χ^(2)检验分析SIRT1和STAT3蛋白表达与眼睑基底细胞癌临床病理指标的联系。结果眼睑基底细胞癌组织中SIRT1和STAT3阳性表达率分别为79.57%(74/93)和76.34%(71/93),均显著高于皮肤基底细胞乳头状瘤组织(P<0.05);Spearman法分析眼睑基底细胞癌组织中SIRT1和STAT3蛋白表达具有正相关性(r=0.72,P<0.05);SIRT1、STAT3蛋白在眼睑基底细胞癌组织中的表达与病人年龄、增殖细胞核抗原(PCNA)增殖指数、肿瘤长径和肿瘤病理分型有关(P<0.05)。结论SIRT1和STAT3在眼睑基底细胞癌病人癌组织中均高表达,且呈正相关,与病人年龄、PCNA增殖指数、肿瘤长径和病理分型分类有关,可能是鉴别眼睑基底细胞癌恶性程度的潜在生物标志物。

核转录因子-κB-圈套抑制血管内皮细胞核转录因子-κB激活机制的探讨

目的:观察核转录因子(NF)-κB圈套(decoy)对脂多糖(LPS)刺激后人脐静脉内皮细胞NF-κB激活的抑制作用,并就其作用机制进行探讨。方法:获取和培养人脐静脉血管内皮细胞(HUVECs),平均分成4组。NF-κB-圈套组和错配-圈套组分别预先以NF-κB-圈套-Lipofectamine2000复合物和错配-圈套-Lipofectamine2000复合物(对照组)处理,LPS组和对照组分别加入同体积的培养液,观察荧光标记DNA转染细胞情况。用10μg/mlLPS刺激2h激活NF-κB,收集细胞,分别提取细胞核蛋白,检测不同组NF-κB活性以及P65和P50亚基蛋白质含量。结果:转染5h后大于90%细胞核内可观察到绿色荧光。NF-κB-圈套组NF-κBP65亚基活性显著低于错配-圈套组和LPS组,但P65和P50亚基蛋白质含量两组之间无显著差异。结论:NF-κB-圈套能抑制细胞核内NF-κB的DNA结合活性,这一作用可能是NF-κB-圈套转入细胞核后占据转录因子核定位区的结果。

病毒感染与细胞核转录因子～κ8信号转导的相互作用关系

自发现细胞核转录因子～κB（NF～KB）以来，人们对其分子生物学特征、作用机制及其与疾病的关系作了广泛的研究。近年来的研究结果发现，NF～κB在病毒感染与疾病发生的过程中发挥着重要作用。病毒感染真核细胞时能诱导NF～κB从细胞质转移到细胞核，

转录激活因子3通过调控活化T细胞核因子1介导足细胞损伤

目的:探讨辅助转录因子——转录激活因子3(activating transcription factor 3,ATF3)调控活化T细胞核因子1(nuclear factor of activated T-cells cytoplasmic 1,NFATc1)在足细胞损伤中的作用。方法:(1)通过免疫荧光染色及激光共聚焦显微镜,观察ATF3在不同肾小球疾病患者足细胞中的表达,并通过Western印迹验证不同肾小球疾病患者肾组织ATF3的表达情况;(2)体外培养小鼠永生化足细胞,用脂多糖(LPS)100μg/ml和ionomycin 2μmol/L分别刺激足细胞0h、1h、2h、4h、6h后,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)和Western印迹检测ATF3 mRNA和蛋白的表达;(3)足细胞转染ATF3 siRNA后,通过Annexin V-FITC/PI双染检测细胞凋亡情况,RTPCR和Western印迹检测凋亡相关标记物BAX、Bcl-2的表达,Western印迹检测足细胞标记蛋白podocin的表达;(4)通过Western印迹、免疫荧光染色、激光共聚焦观察在LPS和Ionomycin刺激下细胞核内ATF3表达情况;(5)通过免疫染色质共沉淀(ChIP)实验观察ATF3与核转录因子NFATc1启动子之间的关系,并通过RT-PCR和Western印迹检测足细胞沉默ATF3后对NFATc1的mRNA及蛋白表达的影响。结果:(1)与正常肾组织相比,肾小球疾病患者肾组织足细胞ATF3表达明显增多;(2)用LPS和Ionomycin刺激足细胞,2h后ATF3的表达增高最明显,随后降低,到6h基本恢复正常;(3)沉默ATF3基因后,细胞凋亡率减少,凋亡相关标记物BAX下调,Bcl-2上调,并部分逆转足细胞标记蛋白podocin的下调;(4)在损伤刺激后,细胞核内ATF3表达增多;(5)ChIP实验显示ATF3与核转录因子NFATc1的启动子区域有结合,在Ionomycin刺激后,结合量明显增加,且沉默ATF3基因后,NFATc1表达减少。结论:辅助转录因子ATF3参与NFATc1介导的足细胞损伤,即通过结合NFATc1启动子,增强NFATc1表达,促进足细胞损伤。

阿拓莫兰对体外循环中中性粒细胞核转录因子-κB的干预作用

目的 研究阿拓莫兰对临床体外循环 (CPB)患儿中性粒细胞核转录因子 (NF) -κB激活的干预作用。方法 随机抽取年龄 6～ 13岁先心病患儿 2 0例 ,配对分组为对照组 10例、干预组 10例 ,干预组CPB预充液中加入阿拓莫兰 30mg kg,分别于术前 2 4h、CPB开始 2 0min、复温前、CPB结束前、术后 4h、术后 2 4h抽取静脉血 ,分离中性粒细胞 ,提取核蛋白 ,以电泳迁移率实验测定NF -κB活性变化。结果 CPB开始 2 0min后 ,中性粒细胞NF -κB已被激活 ,在复温前达到峰值 ,术后 2 4h逐渐恢复至术前水平 ;干预组NF -κB活性下降 ,差异显著 ( P <0 0 5 )。结论 CPB过程可激活中性粒细胞NF -κB ,在中性粒细胞介导的CPB创伤、炎性反应中起重要作用 ;阿拓莫兰可抑制中性粒细胞NF -κB激活 ,减轻炎性反应。

表皮生长因子对游离细胞核特异基因体外转录的影响

ＥＧＦ作用于ＮＣ３Ｈ１０和ＴＣ３Ｈ１０细胞核，对ＲＮＡ聚合酶Ⅱ有促进作用，但对ＲＮＡ聚合酶Ⅰ和酶Ⅲ没有影响，此外还发现转化细胞核内的ＲＮＡ聚合酶Ⅰ和酶Ⅱ的活性比正常细胞高１倍多。但两种细胞的ＲＮＡ聚合酶Ⅱ差别不大。同时，以非放射性标记的ｃ－ｆｏｓ、ＣＬＮ１、ＣＬＮ３探针进行点杂交，结果发现，ＥＧＦ直接作用于细胞核可使ｃ－ｆｏｓ、ＣＬＮ１基因的转录水平提高；但是，对ＣＬＮ３无影响。

肝细胞核因子3β调控小鼠体内HBV转录和复制的实验研究

目的应用复制型HBV小鼠模型观察肝细胞核因子3β(HNF3β)对小鼠体内HBV转录和复制的调控作用。方法通过尾静脉高压注射法将复制型HBV重组质粒pHBV4.1和大鼠HNF3β表达质粒pCMVHNF3β导入小鼠体内,用Northern吸印杂交检测小鼠肝组织中HBV3.5kb、2.4/2.1kb、0.7kb mRNA的转录情况,Southern吸印杂交检测HBV DNA复制中间体水平。结果经小鼠尾静脉高压注射法体内转染质粒pHBV4.1后,小鼠肝组织中检测到HBV3.5kb、2.4/2.1kb mRNA转录信号和HBV DNA复制中间体信号;与共转染pHBV4.1和空载质粒pCMVpA对照组相比,共转染pHBV4.1和pCMVHNF3β使HNF3β过量表达,明显降低了小鼠体内HBV RNA转录和DNA复制水平。结论肝富集转录因子HNF3β对小鼠体内HBV转录和复制具有抑制作用,有可能成为今后抗HBV生物治疗新的靶点。

流动剪切力对血管内皮细胞核周肌动蛋白帽的形成及其对转录因子核质输运影响的研究

目的核周肌动蛋白帽是一种位于细胞核正上方的穹顶状细胞骨架结构,在调节细胞核形态及力信号转导方面有重要作用,基底硬度变化、拉伸力的作用能诱导成纤维细胞、成肌细胞等产生核周肌动蛋白帽。然而,在流动剪切力作用下血管内皮细胞中核周肌动蛋白帽的形成,及其对内皮细胞形态的影响及力转导机制并不清楚,为此初步探究由细胞骨架介导的血管内皮细胞对流动剪切力的响应机制。