胰岛素样生长因子结合蛋白3通过线粒体途径诱导软骨细胞凋亡

目的观察外源性胰岛素样生长因子结合蛋白-3（IGFBP-3）对诱导软骨细胞凋亡的效应，探讨其是否通过“细胞核内蛋白Nur77-线粒体易位途径”诱导凋亡。方法原代培养大鼠软骨细胞并传代2—3次后，转入无血清培养培养环境，添加不同浓度的外源性IGFBP-3以及设置对照组，同时处理24h后，分别通过普通及荧光显微镜观察IGFBP-3对软骨细胞的形态学影响、细胞计数试剂盒（CCK-8）吸光度法和流式细胞仪检测软骨细胞凋亡比例、激光共聚交显微镜观察IGFBP-3诱导细胞核内受体Nur77。结果（1）原代培养的单个软骨细胞贴壁后呈不规则多边形，生长至融合时呈“铺路石样”，经过数次传代，细胞由多边形逐渐伸展为成纤维细胞样；（2）普通明场和荧光显微镜下，均可见凋亡小体，表明外源性IGFBP-3软骨细胞能诱导软骨细胞凋亡；（3）CCK-8数值：空白组为1．43±0．03；阴性对照组为1．44±0.05；IGFBP-3组（0．5、1．0μg／ml与2．0μg／m1）分别为1．31±0．03、1．06±0．07、0．82±0．10；空白组与阴性对照组差异无统计学意义（P=0．845），IGFBP-3组内差异有统计学意义（P=0．000、0．000），IGFBP-3组与空白组和阴性对照组分别差异有统计学意义（P=0．000）；（4）流式细胞仪结果：空白组为97．57％；阴性对照组为97．63％；IGFBP-3组（0．5-2．0μg／m1）分别为90．03％、80．03％和67．33％，统计学分析结果同CCK-8；（5）激光共聚交显微镜观察表明，IGFBP-3处理组中，细胞核内受体Nur77从细胞核易位至线粒体，而空白组和阴性对照组均未见此现象。结论IGFBP-3可通过诱导Nur77从细胞核易位至线粒体，从而诱导软骨细胞凋亡。