细胞死亡调节因子GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中的表达及意义

目的:探讨细胞死亡调节因子(GRIM-19)蛋白在肾脏透明细胞癌组织和正常肾组织中的表达及意义,阐明GRIM-19在肾脏透明细胞癌发生发展中的抑癌作用。方法:采用免疫组织化学染色方法检测21例肾脏透明细胞癌组织和7例正常肾组织GRIM-19蛋白的表达;RT-PCR方法检测4例正常肾组织和8例肾脏透明细胞癌组织中GRIM-19基因mRNA的表达。结果:免疫组化检测GRIM-19蛋白在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为52.3%(11/21),在正常肾脏组织的阳性表达率为100%(7/7),两者比较差异有显著性(P<0.05)。病理分级Ⅰ、Ⅱ和Ⅲ级的肾脏透明癌组织中的表达率分别为100%(6/6)、40%(4/10)和20%(1/5),三种病理分级GRIM-19表达率比较差异有显著性(P<0.01)。RT-PCR检测GRIM-19基因在肾脏透明细胞癌组织中阳性表达率为62.5%(5/8),在正常肾脏组织的阳性表达率为100%(4/4),两者比较差异有显著性(P<0.01)。结论:GRIM-19在肾脏透明细胞癌基因和蛋白水平表达明显下降,并与其病理分级存在明显的关联性,提示GRIM-19蛋白可能在肾脏透明细胞癌发生发展中发挥抑癌作用。

莪术油对棕榈酸诱导的肾小管上皮细胞脂毒性反应的抑制作用观察

目的观察莪术油对棕榈酸诱导的肾小管上皮细胞毒性反应的抑制作用,并探讨其可能分子机制。方法体外培养肾小管上皮细胞HK-2细胞株分为对照组、棕榈酸组和莪术油组。对照组不作处理,棕榈酸组分别加入终浓度为0.2、0.8 mmol/L的棕榈酸,莪术油组加入终浓度为0.2、0.8 mmol/L的棕榈酸与20 mg/L的莪术油。采用油红染色法检测两组细胞内脂质沉积情况;MTT法检测细胞增殖情况;Real-time PCR法测定细胞内TNF-α、p53 mRNA表达;Western blot法检测p53上调凋亡调控因子(PUMA)、细胞死亡调节因子(Bim)蛋白表达。结果对照组HK-2细胞无明显脂质沉积,棕榈酸组与莪术油组细胞内均有明显脂质沉积,但两组差异不大。棕榈酸组与莪术油组细胞增殖量低于对照组(P均<0.05);TNF-α、p53 mRNA、PUMA相对表达量高于对照组,且莪术油组低于棕榈酸组(P均<0.05);各组Bim蛋白表达无明显差异。结论莪术油可抑制棕榈酸诱导的肾小管上皮细胞增殖,其机制可能与抑制TNF-α、p53 mRNA及PUMA蛋白表达有关。

运动对胰岛素抵抗大鼠肝脏BIM信号通路的影响

目的:探究运动干预对肥胖诱导的胰岛素抵抗大鼠肝脏BIM-JNK1-IRS1-Akt信号通路的影响。方法:40只雄性SD大鼠随机分4组(n=10):对照组(普通膳食喂养16周);高脂膳食安静组(高脂膳食喂养16周);慢性运动组(高脂膳食喂养16周且后8周进行慢性运动干预,5%体重负重的游泳运动,1 h/d,5天/周)和急性运动组(高脂膳食喂养16周后进行同样5%体重负重的6 h急性运动干预,分两个3 h进行,中间间隔休息45 min)。干预结束后,所有大鼠称重后进行口服糖耐量和胰岛素释放实验,分别使用罗氏血糖仪和大鼠胰岛素ELISA试剂盒测定血糖含量和血清胰岛素含量,以胰岛素敏感性指数衡量胰岛素抵抗状态。Western blot方法检测肝脏Bcl-2细胞死亡调节因子(BIM),磷酸化c-Jun氨基末端激酶1(p-JNK1),磷酸化胰岛素受体底物1(p-IRS1)和磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)蛋白水平。结果:与对照组大鼠相比,高脂膳食安静组大鼠体重和内脏脂肪质量显著增加(P<0.01),胰岛素敏感性指数显著下降((P<0.01);肝脏中BIM蛋白水平显著增加(P<0.01),JNK1和IRS1磷酸化水平显著增加(P<0.01),Akt磷酸化水平显著下降(P<0.01)。与高脂膳食安静组相比,慢性运动组大鼠体重和内脏脂肪质量显著降低(P<0.01),急性运动组大鼠体重和内脏脂肪质量无明显变化。与高脂膳食安静组相比,慢性运动组和急性运动组大鼠的胰岛素敏感性指数显著提高(P<0.05),肝脏中BIM蛋白水平显著减少(P<0.01),JNK1和IRS1磷酸化水平显著降低(P<0.01),Akt磷酸化水平显著增加(P<0.01)。结论:慢性运动降低大鼠体重和内脏脂肪质量,急性运动并不影响大鼠体重和内脏脂肪质量,但两种运动方式都可以改善肥胖诱导的胰岛素抵抗,这可能与大鼠肝脏中BIM调节的JNK1-IRS1-Akt信号通路的改变有关。