褪黑素对脑缺血-再灌注损伤大鼠大脑皮质细胞毒性水肿的影响研究

目的 探讨褪黑素对大鼠脑缺血-再灌注损伤(CIRI)后大脑皮质细胞毒性水肿的影响及其机制。方法 将60只成年健康无特定病原体雄性Sprague Dawley大鼠完全随机分为假手术组(Sham组,12只)、CIRI组24只、褪黑素治疗组(24只)。采用改良的Zea-Longa线栓法建立大鼠CIRI模型,其中褪黑素治疗组在建模前、后30 min腹腔注射褪黑素(5 mg/kg);CIRI组在建模前、后30 min经腹腔注射等量的等渗盐水。Sham组分离右侧颈总动脉后缝合皮肤,并于假手术前、后30 min注射等量的等渗盐水。建模后2、6、12、24 h及72 h, 3组大鼠(每组6只)均行活体MRI T2加权成像(T2WI)、扩散加权成像(DWI)检查,结合表观扩散系数(ADC)图,动态分析褪黑素干预后CIRI大鼠脑梗死体积百分比、脑水肿百分比及大脑皮质相对ADC(rADC)值的变化。建模后6、24 h及72 h,采用脱氧核苷酸末端转移酶介导的2′-脱氧尿苷5′-三磷酸盐介导的缺口末端标记(TUNEL)法观察褪黑素对CIRI大鼠缺血侧大脑皮质细胞凋亡的影响;免疫荧光双标法观察褪黑素干预对星形胶质细胞水通道蛋白4(AQP4)和钠-钾-氯协同转运蛋白1(NKCC1)的影响;免疫荧光染色结合蛋白质印记,探讨褪黑素对离子钙接头蛋白抗原(Iba-1)标记的小胶质细胞活化的影响。建模后24 h,苏木素-伊红(HE)染色观察褪黑素对CIRI大鼠缺血侧大脑皮质细胞形态学的影响,酶联免疫吸附测定(ELISA)方法测定褪黑素对炎性因子白细胞介素1β(IL-1β)和肿瘤坏死因子α(TNF-α)的影响。采用Pearson相关性分析结合一般线性回归分析对建模后各时点CIRI组与褪黑素治疗组大鼠缺血侧大脑皮质Iba-1+细胞数差值与胶质纤维酸性蛋白(GFAP+)/AQP4+及GFAP+/NKCC1+细胞数差值进行相关性分析。结果 T2WI和DWI扫描结果显示,Sham组大鼠脑组织信号均匀,未见异常信号。建模后24 h, CIRI组见大范围异常信号脑损伤区,缺血侧大脑半球水肿,大脑中线向对侧移位;褪黑素治疗组脑损伤区范围较CIRI组减小,大脑中线向对侧移位减轻。建模后2、6、12、24 h及72 h,与CIRI组比较,褪黑素治疗组大鼠各时点脑梗死体积百分比、脑水肿百分比显著减少,大脑皮质rADC值显著增高(均P<0.05)。HE染色结果显示,Sham组大脑皮质细胞形态规则、排列整齐;建模后24 h, CIRI组缺血侧大脑皮质细胞形态不规则、排列紊乱,而褪黑素治疗组大脑皮质细胞形态较规则、排列较整齐。TUNEL检测及免疫荧光染色结果显示,Sham组大脑皮质见少量TUNEL+、GFAP+/AQP4+和GFAP+/NKCC1+、Iba-1+细胞表达,小胶质细胞胞体大小适中,呈高度分枝状;建模后24 h, CIRI组缺血侧大脑皮质TUNEL+、GFAP+/AQP4+、GFAP+/NKCC1+、Iba-1+细胞数较Sham组增多,小胶质细胞突起消失,形态呈现阿米巴样,褪黑素治疗组缺血侧大脑皮质TUNEL+、GFAP+/AQP4+、GFAP+/NKCC1+、Iba-1+细胞数较CIRI组减少,小胶质细胞胞体变小,突起较长。建模后6、24 h及72 h,与CIRI组比较,褪黑素治疗组大鼠各时点缺血侧大脑皮质TUNEL+、GFAP+/AQP4+、GFAP+/NKCC1+、Iba-1+细胞数均显著减少(均P<0.05)。蛋白质印迹及ELISA方法分析结果显示,建模后24 h,褪黑素治疗组Iba-1蛋白表达、IL-1β及TNF-α水平较CIRI组显著降低(均P<0.01)。建模后6、24、72 h,褪黑素治疗组与CIRI组缺血侧大脑皮质GFAP+/AQP4+及GFAP+/NKCC1+细胞数差值与Iba-1+细胞数差值呈极强正相关(r值分别为0.937、0.963),差异均具有统计学意义(均P<0.01)。结论 褪黑素可下调CIRI大鼠缺血侧大脑皮质星形胶质细胞AQP4及NKCC1蛋白的表达,改善细胞毒性水肿,减轻CIRI,其机制可能与抑制小胶质细胞活化有关。

大鼠急性脑缺血再灌注细胞毒性水肿与水通道蛋白-4表达

目的观察大鼠急性脑缺血再灌注细胞毒性水肿与AQP4的表达水平的变化的相关性。方法为假手术组;B组:32只,为缺血再灌注组)。两组随机配对行DWI和T2WI MR检查后处死,脑组织切片免疫组化染色观察AQP-4于不同时间点在梗死区及对侧镜像区的表达。结果B组MCAO后15min即在DWI上出现缺血区高信号;再通后高信号区缩小。可恢复的缺血区拔栓前的rADC平均(69.3±16.4)%;未能恢复的核心区平均(47.6±18.5)%。免疫组化染色显示B组MCAO1h内AQP-4阳性神经细胞△S快速上升。恢复再通后至24h,梗死边缘区移行带阳性细胞明显减少,△S持续下降;梗死中央区阳性细胞缓慢增加,△S缓慢上升。B组拔栓前△S和DWI高信号面积(rs-DWI)均与时间呈线性关系,但再灌注后24h内两项指标均与时间无线性相关。结论脑缺血再灌注状态下AQP-4表达增强与超早期细胞毒性水肿(<1h)以及梗死的形成有关。它也是超早期脑缺血组织rADC值下降,形成DWI上高信号的分子机制之一。

以细胞毒性水肿为影像学特点的神经白塞病一例报告

白塞病（BD）为1937年土耳其皮肤科医生Behcet首次报道而得名。BD以反复发作的口腔、外生殖器溃疡及眼色素层炎为特征，可累及全身多种脏器，如皮肤、关节、动静脉、胃肠道、肺、。肾及神经系统。神经白塞病（NBD）是在BD的基础上出现神经系统损害，其发生率为4％～49％。文献中有关于NBD的DWI表现报道指出NBD病灶ADC值增高。本文笔者报道1例NBD不寻常的影像学表现。

缺血性脑卒中脑水肿研究进展

缺血性脑卒中脑水肿是缺血性脑卒中后脑损伤的重要因素。目前,对缺血性脑卒中脑水肿的深层次机制了解还不够充分,已有的机制复杂且处于动态变化中,临床上尚缺乏普遍有效的预防和治疗手段。该文综述了缺血性脑卒中脑水肿病理变化及检测、治疗相关的研究进展,以期为缺血性脑卒中脑水肿的进一步研究及临床上有效预防、检测、治疗手段的开发提供思路。

水通道蛋白4与脑水肿相关研究进展

水通道蛋白4(AQP4)是脑内最主要的水通道蛋白,广泛分布于脑实质与脑液体成分(脑脊液、血液)的交界处细胞膜上,AQP4的分布特点表明其可能参与调节脑组织的水分进出。近些年研究发现AQP4在脑水肿的形成与消除方面起重要作用,AQP4调节剂为临床治疗脑水肿提供新思路。该文将AQP4的结构、分布、功能和调控以及AQP4与脑水肿(血管源性和细胞毒性水肿)、AQP4抑制剂的研究进展进行综述。

急性肝衰竭时脑水肿的发病机制

脑水肿是急性肝衰竭晚期常见的致死并发症之一,包括细胞毒性脑水肿和血管源性脑水肿。本文 从高血氨及谷氨酰胺的积聚、缺氧与脑血管扩张、内毒素与细胞因子、星形胶质细胞的肿胀、Na+-K+ATP酶活性降 低等方面阐述急性肝衰竭时脑水肿形成的机制。

在缺血性卒中后新表达的由SUR1调控的NCCa-ATP通道介导脑水肿

中枢神经系统的病理状况（如卒中和脑外伤）通常因脑水肿而有所加剧。研究人员最近在缺血的星形胶质细胞发现了一种非选择性的阳离子通道，即NCCa—ATP通道。这种通道由磺酰脲受体1（SUR1）调控，在ATP耗竭时开放，并且这种开放会造成细胞毒性水肿。在本文中，作者通过建立啮齿类动物中风模型来评估这种通道机制的参与过程。

高原脑水肿病理生理机制的研究进展

高原脑病主要是急性低压、低氧引发的中枢神经系统功能障碍，临床上主要表现为高原头痛（high altitude headache，HAH）、急性高山病（acute mountain sickness，AMS）和高原脑水肿（high altitude cerebral edema，HACE）。

中毒性菌痢与多器官衰竭综合征

多器官衰竭综合征(multiple organ failu-re syndrome,MOFS)主要是微循环障碍的严重后果。中毒性菌痢(下称毒痢)的发病甚础是机体对痢疾杆菌内毒素反应强烈,全身小血管痉挛,严重微循环障碍,重要器官血流灌注锐减,组织缺血、缺氧甚至坏死,极易发生多器官功能不全,乃至衰竭。脑功能衰竭(简称脑衰竭):毒痢的脑衰竭主要由脑水肿引起,性质一般属于血管源性脑水肿及细胞毒性脑水肿,具有颅内压升高和脑功能障碍双重临床表现。

AQP4与脑水肿

几乎所有的颅内病变均会伴有脑水肿的发生，脑水肿既是疾病发展到一定程度出现的病理过程，同时又对疾病的发生发展起着至关重要的作用。然而目前临床上对脑水肿的治疗还比较有限，水通道蛋白（aquaporin，AQP）家族的发现，为临床上治疗脑水肿开辟了一条崭新的道路。

苯肾上腺素对单侧颈动脉完全阻断合并严重低血压大鼠细胞毒性脑水肿和脑梗死范围改善作用的实验研究

背景苯肾上腺素是一种选择性α1肾上腺素能受体激动剂，具有收缩外周血管、提升动脉血压的作用。但苯肾上腺素能否改善失血性休克合并颈动脉疾病患者脑缺血损伤的预后尚不明确。方法（实验1）成年雄性SD大鼠21只，进行异氟烷麻醉与机械通气。结扎右侧颈动脉后，放动脉血直至平均动脉压（MAP）低至30mmHg以便造成脑缺血。维持MAP在30mmHg10分钟后，随机将动物分为3组（n=7）。苯肾上腺素组，静脉输注苯肾上腺素维持MAP于70±3mmHg共5分钟。生理盐水组，静脉输注等量的生理盐水5分钟。空白对照组，不输注苯肾上腺素和生理盐水，维持MAP于30mmHg。动脉放血30分钟后，将动脉血以0．25ml／min的速度回输给大鼠。行弥散加权磁共振成像检查，做表观弥散系数图测量细胞毒性脑水肿容积。（实验2）另外选用SD大鼠15只（n=5），采用激光多普勒血流监测仪记录局部脑血流量（rCBF），分析苯肾上腺素对右侧大脑中动脉区域局部脑血流量的影响。结果（实验1）动脉放血10分钟后，苯肾上腺素组（357．5±93．5mm^3）、生理盐水组（333．5±69．6mm^3）和对照组（303．1±85．8mm^3）之间细胞毒性脑水肿体积的差异无显著性，随着时间的推移，对照组低表观弥散系数区域显著增加；在苯肾上腺素组，输注苯肾上腺素后细胞毒性脑水肿区域显著降低，30分钟内几乎完全消失。苯肾上腺素组最终脑梗死范围（3．9±2．6mm^3，P〈0．01）显著低于生理盐水组（341．5±213．7mm^3）和对照组（509．1±197．0mm^3）。（实验2）动脉放血10分钟后，rCBF降低至基础水平的40％-50％，而静脉输注苯肾上腺素后，rCBF可迅速提高至基础水平之上；生理盐水组，rCBF也可显著增高，但较苯肾上腺素组有所延迟。结论在大鼠单侧完全性颈动脉阻塞并严重低血压的模型中，苯肾上腺素可显著改善大鼠细胞毒性脑水肿，减少脑梗死面积。结果提示失血性休克时应用苯肾上腺素可短期提升脑血流量，并不影响脑血管床的张力。

亚低温治疗大面积脑梗死临床进展

一、大面积脑梗死的危害 大面积脑梗死（massive cerebral infarction）指脑组织的梗死灶面积大,且多为颈内动脉主干、大脑中动脉主干或皮层支的急性完全性闭塞所致的脑梗死。缺血后数分钟,脑水肿由细胞毒性水肿过渡到血管源性,水肿组织压迫周围正常脑组织,产生颅内高压。

可逆性缺血性神经功能缺损1例报告

1临床资料患者男性,54岁,因'突发左侧肢体乏力伴头昏26小时'于2014年1月8日入住我院神经内科二病区,入院查体:血压:130/80mmHg,神清,宽基底步态,双侧瞳孔等大等圆,对光反射灵敏,直径3mm,双眼球无震颤,颈软,左侧肢体肌力4+级,右侧正常,无肌张力亢进,双侧巴氏征(-),共济运动(+-)。

短暂性脑缺血发作后的持续认知功能障碍

短暂性脑缺血发作定义为在24小时内可以完全恢复的。可是,利用弥散加权成像的研究已经在超过30%的这类患者中发现了超过了症状存在时间的细胞毒性水肿的标志物。短暂性脑缺血发作能够引起短暂的认知障碍,研究表明这种障碍的持续性是很少的。本研究用来确定三个月内出现短暂性脑缺血发作患者的认知表现。

胆红素脑病SD乳鼠模型中脑水通道蛋白-4表达发生变化

神经细胞水肿是胆红素脑病(bilirubin encephalopathy,BE)发生发展过程中的重要病理变化。水通道蛋白-4(aquaporin-4,AQP4)的表达及分布异常与多种疾病所致细胞毒性脑水肿的发生发展具有密切联系。但胆红素脑病中AQP4的表达变化规律及其在病理进展中的作用尚不清楚。采用7日龄SD大鼠小脑延髓池注射胆红素溶液的方法,建立新生大鼠胆红素脑病模型。胆红素脑病模型根据胆红素作用时间的不同,分为12 h、24 h、48 h、72 h和7 d组。采用HE及尼氏染色,检测各新生大鼠脑组织的病理改变;应用透射电镜(TEM),检测胆红素作用24 h后,鼠脑组织超微结构的变化;应用免疫荧光及Western印迹,检测AQP4在脑组织中的表达变化。通过上述实验,以探讨AQP4的表达变化与胆红素所致脑损伤的关系。HE及尼氏染色结果显示,随着胆红素沉积时间的延长,神经细胞逐渐肿胀,细胞间隙增大,尼氏小体数量逐渐减少;电镜结果显示,胆红素脑病24 h后神经细胞线粒体出现肿胀;免疫荧光染色显示,24 h组AQP4的表达范围明显增加,其后表达范围逐渐减少,表达强度也随之减弱;Western印迹结果显示,AQP4表达在不同时间点呈现先增高后降低的趋势,在24 h达到峰值(24 h组138±011vs对照组087±021,P<005),在之后的各时间点上,AQP4的表达呈现下降趋势,而72 h组与7 d组AQP4表达均低于48 h组(P<005),基本恢复到对照组的表达水平(P>005)。上述结果提示,胆红素脑病中胆红素的毒性作用将引起AQP4表达量的改变,AQP4的表达变化与胆红素脑病中细胞毒性脑水肿的发生相关,并且可能在胆红素脑病脑损伤的进展中发挥作用。