细胞毒性淋巴细胞相关抗原4基因多态性与宁夏地区Graves病的相关性研究

目的分析细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(cytotoxic Tlymphocyte associated antigen 4,CTLA-4)启动子318C/T位点基因多态性与宁夏地区Graves病(Graves'disease,GD)相关性。方法提取61例宁夏地区GD患者和79例正常对照组的外周血白细胞基因组DNA,应用PCR-RFLP技术检测CTLA-4启动子(318)位点C318T的多态性。结果GD组与正常对照组CTLA-4 C318TCC、CT、TT三种基因型分布(χ2=1.80,P=0.18)和等位基因频率(χ2=1.04,P=0.31)差异无统计学意义。结论CTLA-4基因SNP-(318)C/T位点可能不是宁夏地区GD的易感基因。

中国人CTLA-4基因-1722位点多态性与系统性红斑狼疮的相关性

目的研究细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4 (cytotoxic T lymphocyte-associated antigen 4, CTLA-4)基因启动子区-1722位点(T/C)多态性在中国南方地区汉族人群中的分布及其与系统性红斑狼疮(SLE)的相关性。方法103例患者诊断均符合1982年美国风湿病学会修订的SLE分类标准,其中男13例,女90例。正常对照组110例,其中男21例,女89例。全部研究对象均为无血缘关系的中国南方汉族人群。采用微量全血提取法,从EDTA抗凝血中提取DNA。应用聚合酶链反应(PCR)-限制性片段长度多态性(RFLP)方法,对所有SLE患者和正常对照者进行CTLA-4基因-1722位点多态性检测。结果CTLA-4基因-1722位点多态性在中国南方地区人群中普遍存在,与正常对照组比较,SLE患者CTLA-4基因-1722位点TC基因型频率明显升高(42% vs58%,P<0.05), CC基因型频率明显降低(25% vs15%,P<0.05),TT基因型频率虽有降低趋势,但差异无显著性(33% vs27%,P>0.05);而SLE患者等位基因频率和携带者频率分布均无显著性差异(P>0.05)。在不同人种CTLA-4基因-1722位点基因型频率和等位基因频率分布存在差异。结论CTLA-4基因-1722位点多态性与SLE明显相关,CTLA-4基因可能是SLE的易感基因。

广东人汉族群CTLA-4基因外显子1多态性与Graves病的相关性

目的探讨CTLA-4基因外显子1多态性与广东地区汉族人群Graves病的关系。方法以PCR-RFLP技术观察100名健康人与100例Graves病(GD)患者细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)基因外显子1的多态性。结果提示GD患者的CTLA-4外显子1的G49等位基因频率较正常对照组显著增高(P<0.01)。结论CTLA-4基因可能是广东地区汉族人群中GD的易感候选基因。

不同地区幽门螺杆菌cagA基因羧基端可变区及其蛋白序列差异分析

目的:比较不同地区H pylori cagA 3'端可变区序列差异及序列的地域特征,分析差异与疾病的相关性.方法:选择本实验室所收集的20例cagA+的PCR产物进行测序,并通过ExPASy-Translation软件推测其氨基酸序列,搜索并收集GenBank中已公布的不同地区3-6个H pyloricagA 3'端可变区序列及其氨基酸序列进行比较分析.结果:cagA蛋白的氨基酸序列可分为具有明显地域特征的东亚型和西方型两类;部分东亚型菌株表现出西方型变异.87.4%的菌株具有3个串联排列的EPIYA基序,8.2%的菌株具有4个或以上EPIYA基序.新发现1条具有区域特征的含有3个氨基酸的序列.cagA蛋白氨基酸序列中的EPIYA数目与临床结果没有相关性.结论:H pylori cagA基因及其cagA蛋白序列具有明显多态性,可以根据H pylori cagA 3'端可变区的主要序列差异进行地域分型,cagA 3'端可变区的EPIYA基序的数目与临床结果没有相关性.

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与中国汉族人1型糖尿病、自身免疫性甲状腺病的相关性研究

目的 探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原 4(CTLA 4)基因外显子 1的 49位点A/G多态性与中国汉族人 1型糖尿病、自身免疫性甲状腺病 (AITDs)的关系。方法 对 33例典型 1型糖尿病患者、5 7例成人晚发自身免疫性糖尿病患者 (LADA)、12 2例自身免疫甲状腺病患者 (AITDs)和 84例健康对照者采用聚合酶链反应 限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术分析CTLA 4基因外显子1的 49位点基因型。结果 1型糖尿病患者的CTLA 4G等位基因频率显著高于对照组 (P =0 .0 0 0 5 ) ;胰岛细胞抗体和谷氨酸脱羧酶抗体阳性率与G无明显相关性。AITDs患者CTLA 4G等位基因频率高于对照组 (P <0 .0 0 0 1) ;Graves病组按性别分层分析后发现G等位基因在不同性别的分布差异无显著性。 12例AITDs患者同时合并糖尿病 ,其CTLA 4G等位基因频率与单纯AITDs患者相比差异无显著性。结论 CTLA 4基因外显子 1多态性与中国汉族人 1型糖尿病、AITDs有关 ,G等位基因是 1型糖尿病。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因微卫星多态性与炎症性肠病的关系

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA4)基因微卫星多态性与浙江省炎症性肠病(IBD)患者的相关性。方法对118例无血缘关系的IBD患者(99例溃疡性结肠炎,19例克罗恩病)以及140例正常对照者,采用特异性等位基因PCR方法,检测CTLA4外显子4的3′非翻译区包含(AT)n重复序列的等位基因。扩增产物用12%非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳,硝酸银染色。结果CTLA4微卫星共有20种等位基因。与正常对照组比较,122bp等位基因频率在溃疡性结肠炎患者(P=0.0001/Pc=0.0025,OR=11.393,95%CI:2.574～50.429)和克罗恩病患者(P=0.0003/Pc=0.0050,OR=21.061,95%CI:3.927～112.94)中均显著增高。结论CTLA4基因微卫星多态性与浙江省IBD患者显著相关。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与甲巯咪唑致Graves病患者肝损害的相关性

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)基因多态性与甲巯咪唑(MMI)致山东地区汉族Graves病(GD)患者肝损害的相关性。方法研究对象选自2011年3月至2012年4月到青岛大学医学院附属医院内分泌科就诊或住院的GD患者(GD组)和同期到体检中心查体的健康人(健康对照组)。GD组分为3个亚组:单纯性GD组、MMI致肝损害组和甲亢性肝损害组。收集受试者外周非抗凝静脉血血凝块,提取基因组DNA,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术测定CTLA-4基因第一外显子49位点和启动子区-318位点基因型,计算各组的基因型和等位基因频率。结果共收集到GD患者160例,其中单纯性GD组65例,男10例,女55例,平均年龄(40.4±14.4)岁;MMI致肝损害组40例,男11例,女29例,平均年龄(40.5±13.7)岁;甲亢性肝损害组55例,男9例,女46例,平均年龄(38.0±12.9)岁。健康对照组64例,其中男20例,女44例,平均年龄(40.7±10.7)岁。各组性别、年龄差异无统计学意义(P>0.05)。GD组和健康对照组CTLA-4基因第一外显子49位点AG+GG基因型频率分别为91.9%(147/160)和78.1%(50/64),G等位基因频率分别为74.4%(238/320)和59.4%(76/128),组间差异有统计学意义(χ2=8.153,P=0.004;χ2=6.259,P=0.012);启动子区-318位点的CT+TT基因型和T等位基因频率分布组间差异无统计学意义(P>0.05)。GD组的3个亚组之间两两比较,CTLA-4基因第一外显子49位点AG+GG基因型和G等位基因频率,启动子区-318位点CT+TT基因型和T等位基因频率差异均无统计学意义(均P>0.05)。结论 CTLA-4基因第一外显子49位点及启动子区-318位点多态性与山东地区汉族人群MMI所致肝损害无明显相关性,第一外显子49位点A/G多态性与GD的发生可能相关。

细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4基因多态性与抗甲状腺药物所致白细胞减少的相关性

目的：研究中国北方汉族弥漫性毒性甲状腺肿（GD）患者细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4（CTLA-4）第1外显子49位点A/G多态性与抗甲状腺药物（ATD）所致白细胞减少的相关性。方法：收集2009年10月至2010年6月到青岛大学医学院附属医院内分泌科就诊的GD患者（GD组）和同期到体检中心查体的健康人群（健康对照组）。GD组分为3个亚组：ATD治疗后白细胞减少组、ATD治疗后白细胞正常组和ATD治疗前白细胞减少组。收集所有研究对象外周非抗凝静脉血血凝块,提取基因组DNA,应用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性技术测定CTLA-4基因第1外显子49位点基因型,抽取部分样本进行测序,并计算各组的基因型和等位基因频率。结果：GD组211例患者（ATD治疗后白细胞减少组73例,ATD治疗后白细胞正常组86例,GD合并白细胞减少组52例）、健康对照组85例纳入研究。GD组CTLA-4基因第1外显子49位点AA、AG和GG基因型频率分别为2.4%（5例）、38.8%（82例）、58.8%（124例）,A、G等位基因频率分别为21.8%、78.2%;健康对照组AA、AG和GG的基因型频率分别为15.3%（13例）、32.9%（28例）和51.8%（44例）,A和G的等位基因频率分别为31.8%和68.2%;2组的基因型和等位基因频率差异有统计学意义（χ~2=17.74,P=0.000 1;χ~2=6.48,P=0.01）。CTLA-4基因第1外显子49位点基因型和等位基因频率在ATD治疗后白细胞减少组、ATD治疗后白细胞正常组和GD合并白细胞减少组之间差异均无统计学意义（均P〉0.05）。结论：中国北方汉族人群GD发病与CTLA-4基因第1外显子49位点A/G多态性相关,而ATD导致的白细胞减少似乎与其多态性无关。

免疫印迹试验在诊断儿童幽门螺旋杆菌感染中的应用评价

目的:评价免疫印迹试验(WesternBlotting)在诊断不同年龄组及不同病理表现儿童幽门螺旋杆菌(Helicobacterpylori,HP)感染中的应用价值。方法:对450例有消化道症状的患儿,进行胃镜检查并取病变处胃黏膜组织行病理学检查,以及13C尿素呼气试验(13Cureabreathtest,13CUBT)、血清免疫印迹试验及胃液HPDNAPCR检查。结果:在4岁～6岁和6岁～12岁组患儿中,13CUBTHP检出率明显高于免疫印迹试验(P<0.01);在12岁～18岁组患儿中,13CUBTHP检出率与免疫印迹试验比较差异无显著性(P>0.05)。细胞毒性基因相关蛋白(Cytotoxinassociatedgeneprotein)阳性的HP感染在溃疡病组明显高于慢性胃炎组和正常组(P<0.05),慢性胃炎组CagA(Cytotoxinassociatedgeneprotein,CagA)阳性HP显著高与正常组(P<0.05)。结论:在12岁以上的少年患儿中,免疫印迹试验可作为快速诊断HP感染的可靠手段,并且能判断出是否为产毒菌株感染。在12岁以下的儿童中,免疫印迹试验最好与13CUBT联合使用。

自身免疫性甲状腺疾病相关基因研究进展

自身免疫性甲状腺疾病（autoimmune thyroid disease，AI-TD）是一组器官特异性的自身免疫性疾病，其发病已影响到全球5％的人口，并且主要发生在30-50岁的女性，其发病被认为是遗传易感性、外来基因的影响及环境因素相互作用引起的甲状腺破坏。尽管目前仍在强调环境因素对AITD的影响，但遗传因素对AITD的影响在分子水平上逐渐被破解，这对于进一步理解AITD的发病机制将有更大的帮助。