分子伴侣Tapasin在介导特异性细胞毒性T淋巴细胞反应中的作用

病毒及肿瘤细胞的清除很大程度上依赖于特异性CD8+细胞毒性T淋巴细胞(CTL),CTL通过T细胞受体(TCR)特异性识别病毒肽段并通过MHC-I类分子提呈引起感染细胞融解,经典MHC-I类分子在内质网内的装配要求有抗原肽配体和β2微球蛋白(β2m)的存在,而这一过程需要伴侣分子(chaperones)如Tapasin的参与。Tapasin是抗原递呈相关转运体(TAP)相关蛋白的基因产物,与MHC-I类分子同为免疫球蛋白超家族成员,在介导特异性CTL反应中有着重要作用,本文简述了Tapasin分子结构特征、在介导特异性CTL反应中的作用及与疾病的联系。

树突状细胞吞噬PLA-AFP_(218-226)微球后诱导细胞毒性T淋巴细胞反应

目的研究树突状细胞(DC)吞噬包被有甲胎蛋白HLA-A2限制性表位肽(AFP218-226,LLNQHACAV)的聚乳酸微球(PLA-AFP218-226)后诱导的特异性细胞毒性T淋巴细胞(CTL)对肝癌细胞株HepG2和负载有AFP218-226的T2细胞株的毒性作用。方法用GM-CSF和IL-4诱导HLA-A2+的健康志愿者外周血单核细胞,LPS诱导成熟,使其分化为高纯度DC,在诱导过程中加入PLA-AFP218-226微球,用吞噬了PLA-AFP218-226微球的DC诱导自身T淋巴细胞,使其成为肝细胞癌(HCC)特异性CTL。用流氏细胞仪检测DC膜分子标志,T2细胞与AFP218-226结合实验检测HLA-A2分子与AFP218-226之间的亲合力,MTT法检测特异性CTL杀伤HepG2和T2细胞株的能力。结果AFP218-226与HLA-A2分子具有较高的亲合力,吞噬微球后的成熟DC高表达CD83、CD86、CD40等膜分子,其诱导的特异性CTL对HepG2和负载有AFP218-226的T2细胞株具有强的细胞毒作用。结论PLA-AFP218-226被DC细胞吞噬后,能够诱导HCC特异性CTL的产生,可能成为一种新型的抗肿瘤表位肽疫苗,在肝癌的防治中得到应用。

人类免疫缺陷病毒感染与特异性细胞毒性T淋巴细胞反应

特异性细胞毒性T淋巴细胞是一种能直接杀伤病毒及抗细胞内感染的效应细胞。大多数细胞毒性T淋巴细胞为CD8细胞,其反应是控制人类免疫缺陷病毒感染的重要免疫反应,但细胞毒性T淋巴细胞不能完全清除人类免疫缺陷病毒,这与病毒在体内的高度变异及病毒攻击人体免疫系统导致免疫功能改变有关。

负载NY-ESO-1多肽的树突状细胞激发特异性细胞毒性T淋巴细胞反应

目的:探讨以NY-ESO-1为靶抗原、树突状细胞(dendritic cell,DCs)为抗原载体激发特异性细胞毒性T淋巴细胞(cytotoxic T lymphocytes,CTLs)反应的能力,以明确特异性CTLs的抗肿瘤免疫功能。方法:在临床前实验基础上选择2014年11月至2015年10月于中国医学科学院肿瘤医院治疗的符合入选标准的15例Ⅱ~Ⅲ期HLAA0201+NY-ESO-1+胃癌患者外周血,分离单个核细胞(peripheral blood mononuclear cells,PBMCs)和外周血淋巴细胞(peripheral blood lymphocytes,PBLs),并诱导出成熟DCs(mature dendritic cell,m DCs);将人工合成的NY-ESO-1多肽负载m DCs后通过流式细胞仪(flow cytometry,FCM)分析细胞表型,检测体外反复致敏PBLs后负载NY-ESO-1的DCs激发特异性CTLs的能力以及CTLs对NY-ESO-1+胃癌细胞的体外杀伤活性,同时患者回输CTLs细胞,每2周1次,共回输2次,检测回输前后患者外周血细胞因子和特异性CTLs水平变化。结果:采用FCM分析DCs细胞表型显示HLA-DR+CD11c+细胞为93.6%±1.2%,其中CD80+细胞为87.3%±3.6%,CD83+细胞为82.8%±2.5%,CD86+细胞为93.4%±6.4%。患者外周血分离的PBLs经NY-ESO-1多肽负载的DCs反复诱导后,细胞不断增殖,其中未负载多肽的DCs也能促进PBLs增殖,但细胞增殖指数(proliferation index,PI)明显低于负载多肽的DCs,两者比较差异有统计学意义(P<0.05)。负载NY-ESO-1多肽DCs诱导的NY-ESO-1多肽特异性的CTLs比例较未负载NY-ESO-1多肽DCs诱导的对照组明显升高(5.2%±1.2%vs.0.4%±0.1%,P<0.05),且致敏后CTLs对NY-ESO-1+胃癌细胞及负载NY-ESO-1+多肽T2靶细胞的杀伤率明显高于对照组。输注CTLs细胞后,患者体内血清中细胞因子IFN-γ、IL-2、IL-12水平较治疗前显著升高[(132.9±10.2)μg/L vs.(46.4±3.1)μg/L;(101.3±6.4)μg/L vs.(26.7±1.2)μg/L;(51.3±2.6)μg/L vs.(26.4±1.1)μg/L;P均<0.05],且患者外周血特异性CTLs细胞比例明显升高。结论:负载NY-ESO-1多肽的DCs体内外均具有激发特异性CTLs反应的能力,可诱导明显的抗肿瘤免疫效应。

艾灸干预免疫抑制兔细胞毒性T淋巴细胞抗原-4的作用效应分析

目的:比较不同艾灸干预下免疫抑制兔细胞毒性T淋巴细胞相关抗原4(CTLA-4)及程序性死亡受体1(PD-1)表达变化的异同。方法:20只大耳白兔随机分为空白组、模型组、艾条灸(MSM)组与隔药饼灸(HPM)组,每组5只,连续7 d腹腔注射环磷酰胺(CTX)诱导免疫抑制模型。造模成功后分别进行MSM与HPM干预,均为隔日灸,共治疗10次。治疗结束后麻醉白兔,取血清、肝脏与脾脏,ELISA检测血清中PD-1、PD-L1含量,免疫组化法检测肝组织PD-1含量,RT-qPCR检测肝、脾组织CTLA-4 mRNA含量。结果:HPM和MSM均可降低免疫抑制下PD-1及PD-L1水平,并可有效抑制脾脏CTLA-4和肝脏PD-1、CTLA-4水平升高,与免疫抑制模型组相比差异均存在统计学意义(P<0.05),且Pearson相关性检验表明肝组织中CTLA-4与PD-1呈显著正相关(r=0.7807,P<0.001)。结论:HPM可通过调控多个免疫抑制位点改善机体免疫功能。

γδT淋巴细胞及其亚型在毒性弥漫性甲状腺肿中的分布研究

目的研究γδT淋巴细胞及其亚型在毒性弥漫性甲状腺肿(GD)中的分布并探讨γδT淋巴细胞在GD免疫学发病机制中的作用。方法选取2022年6-12月上海市嘉定区中心医院内分泌门诊确诊的GD患者59例作为GD组,另选择同期65例健康志愿者作为对照组。检测两组相关甲状腺指标[包括游离三碘甲状腺原氨酸(FT3)、游离甲状腺素(FT4)、促甲状腺激素(TSH)、甲状腺过氧化物酶抗体(TPOAb)、甲状腺球蛋白抗体(TG-Ab)、抗促甲状腺激素受体抗体(TRAb)],采用流式细胞术检测两组外周血中γδT淋巴细胞及其亚型的比例,分析γδT淋巴细胞表面活化分子CD69、HLA-DR及协同刺激分子CD40配体(CD40L)与诱导性共刺激分子(ICOS)的表达水平。结果GD组TSH水平低于对照组,FT3、FT4、TPOAb、TG-Ab、TRAb水平均高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。两组γδT淋巴细胞比例比较,差异无统计学意义(P>0.05);GD组Vδ1γδT淋巴细胞比例高于对照组,Vδ2γδT淋巴细胞比例低于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。GD组γδT淋巴细胞表面活化分子CD69、HLA-DR表达水平及协同刺激分子CD40L、ICOS的表达水平均明显高于对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论GD患者外周血γδT淋巴细胞亚型改变表现为Vδ1γδT淋巴细胞比例上调与Vδ2γδT淋巴细胞比例下调,γδT淋巴细胞功能活化并表达协同刺激分子CD40L、ICOS可能是促进GD产生自身抗体及自身体液免疫应答的重要病理机制。

血清CAR LMR T淋巴细胞亚群与多发性骨髓瘤患者预后的相关性分析

目的:探讨血清C反应蛋白与白蛋白比值(CAR)、淋巴细胞/单核细胞比值(LMR)、T淋巴细胞亚群与多发性骨髓瘤(MM)患者预后的相关性。方法:选取2020年1月至2022年1月诊治的105例多发性骨髓瘤患者作为研究对象,设立为观察组,同期选取75例健康体检者设立为对照组。根据MM患者治疗后随访2年是否出现复发或死亡分为预后不良组(n=34)和预后良好组(n=71),对比血清CAR、LMR、T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))。采用Logistic回归分析CAR、LMR、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)对MM患者预后的影响。采用ROC曲线模型分析CAR、LMR、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、T淋巴细胞亚群综合参数预测MM患者预后的AUC值、敏感度和特异度。结果:观察组的CAR、CD8^(+)高于对照组,而LMR、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)低于对照组(P<0.05)。预后不良组的CAR、CD8^(+)高于预后良好组,而LMR、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)低于预后良好组(P<0.05)。二元Logistic回归分析显示,CAR、CD8^(+)升高和LMR、CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)下降会对MM患者预后产生影响(P<0.05)。ROC曲线分析显示,CAR、LMR、CD3^(+)、CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、T淋巴细胞亚群综合参数预测MM患者预后的AUC值分别为(0.637、0.792、0.726、0.767、0.669、0.750、0.853,P<0.05)。结论:血清CAR、LMR、T淋巴细胞亚群在MM患者中呈异常表达趋势,检测其变化有利于为评估MM患者的预后提供重要参考。

T淋巴细胞亚群和中性粒细胞/淋巴细胞比值与脓毒症严重程度的相关性分析

目的分析T淋巴细胞亚群、中性粒细胞/淋巴细胞比值(NLR)降钙素原(PCT)等炎症指标水平与脓毒症严重程度的相关性。方法采用前瞻性研究方法。选择2021年1月至2022年12月山东省淄博市中心医院重症医学科收治的78例脓毒症患者作为研究对象。将患者按病情严重程度分为脓毒性休克组(37例)和脓毒症组(41例),以同期40例本院健康体检者作为健康对照组。采用流式细胞仪测定3组受试者CD4^(+)T淋巴细胞(CD4^(+)T)和CD8^(+)T淋巴细胞(CD8^(+)T)计数水平,计算CD4^(+)T/CD8^(+)T淋巴细胞比值(CD4^(+)T/CD8^(+)T)、NLR;采用电化学发光免疫分析法测定PCT、白细胞介素-6(IL-6)水平;采用免疫散射比浊法测定C-反应蛋白(CRP)水平,记录两组患者24h内急性生理学与慢性健康状况评分Ⅱ(APACHEI),比较各组淋巴细胞亚群及各项炎症指标的差异;采用Pearson相关性分析法分析各项指标与APACHEI的相关性。结果脓毒性休克组、脓毒症组CD4^(+)T、CD8^(+)T、CD4^(+)T/CD8^(+)T均明显低于健康对照组[CD4^(+)T计数(×10^(6)L):168.27±76.68、266.08±131.57比789.60±173.78,CD8^(+)T计数(×10^(6)/L):156.50±68.37、205.81±75.60比636.42±90.59,CD4^(+)T/CD8^(+)T:1.09±0.39、1.27±0.34比1.44±0.38,均P<0.01],NLR、PCT、CRP及IL-6水平均明显高于健康对照组[NLR:25.85±11.62、15.94±8.72比2.68±1.31,PCT(μg/L):21.82±15.28、9.09±4.96比0.13±0.10,CRP(mg/L)158.65±62.33、106.97±51.49比6.48±2.08,IL-6(ng/L):1344.64±899.21、245.31±176.99比3.25±1.83,均P<0.01];脓毒性休克组APACHEⅡ评分明显高于脓毒症组(分:32.00±1.00比22.01±1.09,P<0.05)。相关性分析显示:脓毒症患者2组的CD4^(+)T、CD8^(+)T、CD4^(+)T/CD8^(+)T水平与APACHEⅡ评分水平均呈负相关(r值分别-0.571、-0.506、-0.555,均P<0.01),NLR、PCT、CRP及IL-6水平与APACHEⅡ评分均呈正相关(r值分别0.711、0.709、0.777、0.707,均P<0.01)。结论T淋巴细胞亚群水平越低,NLR及PCT等炎症指标水平越高,脓毒症病情越严重。因此,T淋巴细胞亚群及各项炎症指标水平可作为评估脓毒症病情严重程度的标志物。

结外NK/T细胞淋巴瘤伴B淋巴细胞增生2例的临床病理学研究

目的探讨结外NK/T细胞淋巴瘤(extranodal NK/T cell lymphoma,ENKTL)伴B淋巴细胞增生病例的临床病理学特征。方法收集陕西省人民医院2023年6~9月确诊的2例ENKTL伴B淋巴细胞增生病例,采用HE染色、免疫组织化学和原位杂交EB病毒编码的小RNA(Epstein-barr virus encoded small RNA,EBER)检测,观察其组织学特征、免疫表型及原位杂交EBER检测结果,并进行相关文献复习。结果2例老年男性患者,病变部位均为右侧鼻腔,组织学特征为肿瘤细胞弥漫分布,细胞大中小不等,以中大细胞为主,胞核不规则,胞质淡染或透明,核椭圆形,染色质呈颗粒状,核仁不明显,核分裂象较多见,凝固性坏死及凋亡明显;背景见小淋巴细胞灶状聚集,淋巴滤泡散在分布。免疫组织化学CD2,CD3,CD56,TIA-1和颗粒酶B(GrB)阳性表达;CD20,CD79a和PAX-5局灶阳性表达;CD21,CD23及CD35见残存FDC网;CD5阴性表达;Ki-67增殖指数约30%。原位杂交检测EBER肿瘤细胞阳性。病理诊断:ENKTL伴B淋巴细胞增生。结论结外NK/T细胞淋巴瘤伴B淋巴细胞增生少见,尤其是B淋巴细胞增生形成淋巴滤泡时,经验不足很容易造成诊断困扰,需结合临床表现、组织学形态、免疫表型综合分析和诊断。

嵌合抗原受体白血病的护理策略研究T细胞治疗B细胞性急性淋巴细胞

探究嵌合抗原受体T细胞免疫疗法(chimeric antigen receptor T cell immuno-therapy,CAR-T)治疗B细胞性急性淋巴细胞白血病(B-cell acute lymphoblastic leukemia,B-ALL)的护理策略。急性淋巴细胞白血病(acute lymphoblastic leukemia,ALL)是一种临床常见的异质性很高的恶性血液病。CAR-T作为一种新兴的治疗方法,已经在B-ALL患者的治疗中表现出显著疗效。通过分析广东省第二人民医院接受CAR-T治疗的复发/难治性B-ALL患者的临床资料,对比采用规范化医疗及护理体系干预前后CAR-T治疗B-ALL的疗效及不良反应差异。结果显示,规范化医疗及护理体系干预对CAR-T治疗B-ALL的疗效无显著影响,但能够降低细胞因子释放综合征(cytokine release syndrome,CRS)的严重程度。研究发现,CAR-T治疗复发/难治性B-ALL疗效显著,通过规范化医疗及护理体系建设,能够增强医护人员CAR-T治疗全程管理能力,尤其是CAR-T细胞回输后相关并发症的早期观察、早期预防及早期处理能力,保障患者的治疗效果,降低不良反应发生率。

乙酰半胱氨酸雾化吸入辅助治疗对病毒性肺炎患者血清炎性因子及T淋巴细胞亚群水平的影响

目的探讨乙酰半胱氨酸雾化吸入辅助治疗对病毒性肺炎患者血清炎性因子及T淋巴细胞亚群水平的影响。方法选取医院2019年1月至2021年12月收治的病毒性肺炎患者148例,按随机数字表法分为对照组和研究组,各74例。两组患者均予奥司他韦胶囊口服治疗,研究组患者加用乙酰半胱氨酸雾化吸入,均每日2次,连用5 d。结果研究组治疗总有效率为94.59%,显著高于对照组的82.43%(P<0.05)。研究组患者发热、咳嗽、咳痰、肺部罗音的临床症状消失时间均显著短于对照组(P<0.05)。治疗后,两组患者的血清炎性因子C反应蛋白(CRP)、降钙原素(PCT)、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)水平均显著降低(P<0.05),且研究组显著低于对照组(P<0.05);两组CD_(3)^(+),CD_(4)^(+),CD_(4)^(+)/CD_(8)^(+)均显著升高,CD_(8)^(+)均显著降低(P<0.05),且研究组上述指标变化更显著(P<0.05)。研究组与对照组治疗期间不良反应总发生率相当(9.46%比14.86%,P>0.05)。结论乙酰半胱氨酸雾化吸入辅助治疗能有效改善患者的临床症状,降低血清炎性因子水平,改善T淋巴细胞亚群水平,且安全性高。

T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3在肺结核免疫反应中的作用机制研究进展

肺结核的发生发展及预后与机体抗结核免疫功能密切相关,T淋巴细胞功能耗竭是肺结核发病的重要机制。T淋巴细胞免疫球蛋白黏蛋白分子3(TIM-3)在肺结核感染后表达升高,能够通过调控效应T淋巴细胞、调节性T淋巴细胞、辅助性T淋巴细胞、黏附蛋白样细胞及单核细胞、巨噬细胞、自然杀伤细胞等免疫细胞的活化和功能,在肺结核的适应性免疫反应和固有天然性免疫反应中发挥作用。通过调节TIM-3的表达和功能,可以控制肺结核的炎症反应和组织损伤,增强肺结核的清除能力和免疫监视能力。因此,TIM-3可能是肺结核治疗和预防的一个重要靶点。

慢性酒精中毒性脑病患者周围血T淋巴细胞亚群及C-反应蛋白水平变化研究

目的探讨慢性酒精中毒性脑病(CAE)患者周围血T淋巴细胞亚群及血清C-反应蛋白(CRP)水平与其病情严重程度的关系,并观察依达拉奉(EDA)+维生素联合治疗的临床效果。方法选取本院2013年2月-2015年2月收治的73例CAE患者,根据治疗前头颅磁共振成像(MRI)检查结果分为CAE组MRI正常组和CAE组MRI异常组,再按照治疗前脑电图(EEG)检查结果又分为CAE组EEG正常组和CAE组EEG异常组。并选取本院同期73例健康体检者为对照组。CAE患者,采取常规措施+EDA+维生素的联合方案治疗;对照组,不用任何药物。记录比较治疗前CAE患者和对照组的周围血T淋巴细胞亚群及血清CRP水平,治疗前CAE患者中CAE组MRI正常组和CAE组MRI异常组血清CRP水平,治疗前CAE患者中CAE组EEG正常组和CAE组EEG异常组血清CRP水平,CAE患者治疗前后周围血T淋巴细胞亚群及血清CRP水平;评价CAE患者用药安全性。结果与对照组相比,治疗前CAE患者CD3^+、CD4^+、CD8^+及CD4^+/CD8^+,均显著下降(P<0.01),且血清CRP水平显著升高(P<0.01)。治疗前CAE患者中CAE组MRI正常组血清CRP水平显著低于CAE组MRI异常组(P<0.01);与CAE组EEG异常组比较,治疗前CAE患者中CAE组EEG正常组血清CRP水平显著更低(P<0.01)。CAE患者治疗后T淋巴细胞亚群水平及血清CRP水平,均显著优于治疗前(P<0.01)。CAE患者用药期间不良反应率仅为5.5%。结论CAE患者机体存在免疫系统紊乱,通过监测其CRP水平可判断病情的严重程度,同时CAE患者应用EDA+维生素的联合方案治疗能显著改善机体免疫功能,降低CRP水平,且不良反应小,为临床诊治CAE提供了新方向。

信迪利单抗对晚期非小细胞肺癌患者T淋巴细胞亚群的影响及其治疗效果研究

目的探讨信迪利单抗对晚期非小细胞肺癌(NSCLC)患者T淋巴细胞亚群的影响及其治疗效果。方法根据治疗方法的不同将145例晚期NSCLC患者分为对照组(n=71)和观察组(n=74),对照组患者采用吉西他滨^(+)顺铂(GP)方案化疗,观察组患者在对照组的基础上给予信迪利单抗治疗。比较两组患者的临床疗效、T淋巴细胞亚群[CD4^(+)、CD8^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)、调节性T细胞(Treg)、辅助性T细胞1(Th1)/辅助性T细胞2(Th2)]、肿瘤标志物[血清铁蛋白(SF)、神经元特异性烯醇化酶(NSE)、鳞状细胞癌抗原(SCCA)、癌胚抗原(CEA)]及不良反应发生情况。结果观察组患者的客观缓解率(ORR)为29.73%,与对照组患者的22.54%比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。观察组患者的疾病控制率(DCR)为63.51%,高于对照组患者的46.48%,差异有统计学意义(P﹤0.05)。治疗后,两组患者的CD4^(+)水平、CD4^(+)/CD8^(+)、Th1/Th2均高于本组治疗前,CD8^(+)、Treg水平均低于本组治疗前,观察组患者的CD4^(+)水平、CD4^(+)/CD8^(+)、Th1/Th2均高于对照组,CD8^(+)、Treg水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。治疗后,两组患者的SF、NSE、SCCA、CEA水平均低于本组治疗前,观察组患者的SF、NSE、SCCA、CEA水平均低于对照组,差异均有统计学意义(P﹤0.05)。两组患者的不良反应发生情况比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论信迪利单抗治疗晚期NSCLC患者能够改善机体的免疫功能,降低肿瘤标志物水平,有助于提升疾病控制效果,且具有一定的安全性。

细胞毒性T淋巴细胞来源外泌体抑制肝星状细胞活化的机制

目的探讨细胞毒性T淋巴细胞(CTL)来源外泌体能否下调HBx表达从而抑制肝星状细胞(HSC)活化。方法收集HepG2、HepGA14、CTL细胞上清液提取外泌体(分别简写为NC-exo、HBV-exo、CTL-exo),透射电镜观察其形态,Western Blot检测外泌体标志物CD63和TSG101的表达。将氟硼二吡咯染料(BODIPY)标记的NC-exo、HBV-exo以及CTL-exo与HBV-exo按不同比例混合后,分别与HSC LX-2(HSC-LX2)共培养,荧光显微镜观察外泌体能否进入LX-2细胞,倒置显微镜观察细胞形态学改变,实时荧光定量PCR(qPCR)检测LX-2细胞中TGF-β1、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原蛋白(Collagen1)等活化生物标志物的表达。将CTL-exo加入到HepGA14培养体系中,qPCR检测HepGA14细胞内HBV DNA、cccDNA及外泌体中HBx mRNA表达水平,Western Blot检测外泌体HBx蛋白表达水平。符合正态分布的计量资料两组间比较采用成组t检验,多组间比较采用单因素方差分析,进一步两两比较采用LSD-t检验。结果外泌体均为双层膜结构的微囊,呈圆形或椭圆形,囊泡的直径为50~100 nm,表达标志性蛋白CD63和TSG101。荧光显微镜观察示外泌体可进入LX-2细胞,并且HBV-exo进入LX-2细胞后,HSC胞体增大、胞突伸展。qPCR结果示NC-exo、HBV-exo、NC-exo+HBV-exo和Con组LX-2细胞中TGF-β1、α-SMA、Collagen1基因表达水平差异均有统计学意义(F值分别为444.678、417.144、571.508,P值均<0.05)。CTLexo干预HepGA14细胞后,qPCR结果显示HepGA14细胞中HBV DNA、cccDNA表达水平较对照组明显下降(P值均<0.05),外泌体中HBx mRNA相对表达量明显下降(P<0.05);HBx蛋白表达水平与对照组相比也明显下降,差异有统计学意义(P<0.05)。CTL-exo和HBV-exo按照不同比例(2∶1、5∶1、10∶1)进行混合后干预LX-2细胞,qPCR结果显示各组间LX-2细胞中TGF-β1、α-SMA和Collagen1基因表达随着CTL-exo比例的增加而逐渐减弱,差异有统计学意义(P值均<0.05)。结论CTL-exo可下调HBV-exo中HBx蛋白表达抑制HSC活化,提示CTL-exo有抗乙型肝炎肝纤维化作用。

驱梅汤联合多西环素对梅毒患者免疫炎症反应及外周血单核细胞TLR2、Foxp3 mRNA的影响

目的探讨驱梅汤联合多西环素对梅毒患者免疫炎症反应及外周血单核细胞(PBMCs)Toll样受体2(TLR2)、叉头框蛋白3(Foxp3)mRNA水平的影响。方法选取2016年12月至2020年12月邢台市第二医院收治的107例梅毒患者作为研究对象。采用随机信封法分为常规组(n=53)和实验组(n=54)。常规组采用多西环素治疗,实验组采用多西环素联合驱梅汤治疗。比较两组梅毒滴度快速血浆反应素试验(RPR)转阴率、临床疗效、T淋巴细胞亚群(CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+))、PBMCs TLR2、Foxp3 mRNA相对表达量及不良反应发生情况。结果实验组治疗后3、6个月RPR转阴率高于常规组(P<0.05);实验组总有效率高于常规组(P<0.05);治疗30 d后实验组CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)高于常规组(P<0.05);治疗30 d后实验组PBMCs TLR2、Foxp3 mRNA相对表达量低于常规组(P<0.05);实验组不良反应发生率低于常规组(P<0.05)。结论驱梅汤联合多西环素治疗梅毒患者能提高转阴率,疗效确切,且安全性较高,这可能与抑制PBMCs TLR2、Foxp3 mRNA表达有关。

细胞毒性相关辅助T淋巴细胞在精原细胞瘤中的表达及其临床意义

目的 检测CD4^(+)细胞毒性相关辅助T淋巴细胞在人类正常睾丸及精原细胞瘤中的表达,探讨其在精原细胞瘤免疫微环境中的作用。方法 通过基因表达相互作用分析数据库(GEPIA)基因表达特征整合分析测序数据库分析CD4^(+)细胞毒性相关辅助T淋巴细胞标记分子CD4和颗粒酶K(GZMK)在正常睾丸及精原细胞瘤中的表达,并分析二者表达相关性及与肿瘤分期间的关系。采用免疫组化及双重荧光染色检测正常睾丸(n=8)与精原细胞瘤(n=12)组织中CD4、GZMK及CD4^(+)GZMK^(+)表达水平,并进行统计分析。结果 GEPIA基因表达谱分析结果显示精原细胞瘤CD4和GZMK表达水平高于正常睾丸,差异有统计学意义(P<0.05);高分期精原细胞瘤患者GZMK表达低于低分期精原细胞瘤,差异有统计学意义(P<0.05);CD4和GZMK表达水平呈正相关(r=0.71,P<0.05);免疫组化结果与GEPIA基因表达谱数据一致,即精原细胞瘤CD4和GZMK表达水平高于正常睾丸,差异有统计学意义(P<0.05);免疫荧光染色结果显示精原细胞瘤中CD4和GZMK表达共定位。结论 精原细胞瘤组织CD4、GZMK及CD4^(+)GZMK^(+)细胞表达水平较正常睾丸组织增高,提示CD4^(+)细胞毒性辅助性T淋巴细胞在精原细胞瘤免疫微环境中发挥重要作用。

Th1/Th2平衡、分化簇抗原28、可诱导共刺激分子、程序性死亡受体-1和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4在急性冠脉综合征患者外周血中的表达

目的研究Th1/Th2及相关细胞因子、共信号分子分化簇抗原28(CD28)、可诱导共刺激分子(ICOS)、程序性死亡受体1(PD-1)和细胞毒性T淋巴细胞相关抗原-4(CTLA-4)在急性冠脉综合征(ACS)患者外周血中的表达,并探讨其是否参与ACS的发病机制。方法前瞻性选取2021年7月至2022年4月经中山大学附属第三医院粤东医院心血管内科诊断为ACS的120例患者作为研究对象,采用ACS不同亚型的诊断标准将其分为不稳定型心绞痛(UA)组、ST段抬高型心肌梗死(STEMI)组、非ST段抬高型心肌梗死(NSTEMI)组,每组各40例。选取同时间段行冠状动脉造影检查正常的40例住院患者作为对照组。采用酶联免疫吸附(ELISA)法测定血清中的干扰素(IFN)-γ、白介素(IL)-2、IL-4和IL-10表达水平,采用流式细胞仪检测外周血互助性T细胞(Th)1、Th2细胞占CD4^(+)T细胞的比例以及共信号分子CD28、ICOS、PD-1、CTLA-4在CD4^(+)T细胞表面的表达水平,通过冠脉造影手术采用SYNTAX评分法评估ACS患者冠脉病变严重程度,比较四组上述各指标之间的差异并进行各指标之间的相关性分析。结果ACS患者外周血中Th1/Th2比值、Th1数量及相关细胞因子IFN-γ和IL-2的血清表达量高于对照组,其外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28、ICOS和PD-1表达量也高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);另外,STEMI组和NSTEMI组的这些指标也均高于UA组,差异有统计学意义(P<0.05);SYNTAX评分与外周血Th1数量、Th1/Th2比值、血清IFN-γ及IL-2水平和外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28及ICOS表达量呈明显正相关(P<0.05);外周血CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28及ICOS表达量均与Th1数量、Th1/Th2比值、血清IFN-γ及IL-2表达水平呈明显正相关(P<0.05)。结论ACS患者外周血中的Th1、相关细胞因子IFN-γ和IL-2以及其CD3^(+)CD4^(+)T细胞的CD28、ICOS和PD-1表达较健康体检者均明显上调,其均可能在ACS的发病机制中发挥了重要作用。

EB病毒感染后儿童血液T淋巴细胞亚群及感染指标变化分析

目的:探讨血液T淋巴细胞亚群及C反应蛋白(CRP)、淋巴细胞比例对EB病毒(EBV)感染儿童的诊断价值。方法:选取2021年1月—2022年9月滨州市中心医院收治的EBV感染患儿63例作为观察组,选择同期健康儿童60例作为对照组。采用流式细胞仪检测所有CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+),采用乳胶增强免疫散射比浊法检测CRP水平,采用全自动血细胞分析仪检测淋巴细胞比例。对比两组儿童T淋巴细胞及病毒感染相关指标,采用Spearman分析EBV感染患儿病毒载量与T淋巴细胞、感染指标的相关性。结果:观察组CD3^(+)水平高于对照组,CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平低于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。观察组CRP、淋巴细胞比例高于对照组,差异有统计学意义(P<0.001)。EBVDNA与淋巴细胞比例呈正相关(r=0.574,P<0.05),与CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)呈负相关(r=-0.510、-0.623,P<0.05)。结论:T淋巴细胞亚群及CRP、淋巴细胞比例对EBV感染的诊断效能较好,可作为临床辅助诊断指标。

中药联合复方甘草酸苷片治疗儿童斑秃临床观察及对血清T淋巴细胞影响研究

目的 分析中药联合复方甘草酸苷片治疗儿童斑秃的临床疗效及对血清T淋巴细胞的影响。方法 2020年6月至2022年6月江西省儿童医院收治的60例斑秃患儿,按随机数字表法分为两组,各30例。对照组予以复方甘草酸苷片治疗,观察组加用中药自拟补肾生发汤治疗,均持续用药12周。比较两组临床疗效、皮损评分、皮肤病生活质量量表(DLQI)评分、T淋巴细胞及不良反应发生情况。结果 连续治疗12周,治疗总有效率观察组高于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,斑秃严重程度(SALT)评分、DLQI评分观察组均低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);治疗后,CD3^(+)、CD4^(+)、CD4^(+)/CD8^(+)水平观察组均高于对照组,CD8^(+)水平观察组低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);不良反应两组对比,差异无统计学意义(P>0.05)。结论 中药联合复方甘草酸苷片可提高儿童斑秃治疗效果,降低SALT评分,纠正机体免疫功能异常,减轻疾病对生活质量的影响,安全可靠。