慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内穿孔素的表达及临床意义

目的研究慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内穿孔素(perforin)、干扰素(IFN-γ)和白介素10(IL-10)表达与病毒的消除间的关系。方法对50例慢性乙型肝炎患者外周血,用流式细胞术测定CD8+细胞内perforin、IFN-γ和IL-10表达,并同30例正常对照组进行比较;利用荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎患者HBV DNA的载量,分析其与CD8+细胞内perforin、IFN-γ和IL-10表达的关系。结果慢性乙型肝炎组CD8+T细胞perforin、IFN-γ和IL-10的表达分别为(5.30±2.62)%、(4.05±2.25)%和(0.77±0.50)%,明显低于正常对照组,差异有统计学意义;慢性乙型肝炎患者CD8+T细胞内perforin和IFN-γ表达率与乙肝病毒DNA载量成负相关(r分别为-0.539、-0.340,P【0.01、P【0.05)。结论慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞存在功能上的缺陷,细胞内perforin、IFN-γ和IL-10表达减少可能与病程迁延不愈有关。

慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内穿孔素、干扰素及白细胞介素10表达与病毒消除的关系

目的对慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内穿孔素(Perforin)、干扰素(IFN-γ)及白细胞介素10(IL-10)表达与病毒消除的关系进行研究分析,为今后的临床工作提供有价值的参考依据。方法选择2017年1月至2019年6月我院收治的获得临床确诊的慢性乙型肝炎患者56例作为研究对象,定义为观察组,另取同期健康体检者56名作为对照组,对其进行外周血短期培养,采取流式细胞术对CD8^(+)细胞内Perforin、IFN-γ、IL-10的表达水平进行检测,并对两组受试者检测结果进行对比分析。采用荧光定量PCR法对慢性乙型肝炎患者HBV DNA载量进行检测,对病毒载量与CD8^(+)细胞内Perforin、IFN-γ、IL-10表达的关系进行分析。结果观察组患者CD8^(+)细胞内Perforin、IFN-γ、IL-10表达水平较对照组发生显著降低(P<0.05);观察组HBeAg阳性患者CD8^(+)细胞内Perforin、IFN-γ、IL-10表达水平较HBeAg阴性患者发生显著降低(P<0.05);观察组CD8^(+)细胞内Perforin、IFN-γ、IL-10的表达水平与HIV DNA载量呈现明显负相关(P<0.05)。结论慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内Perforin、IFN-γ、IL-10表达水平会发生显著减少,并且与慢性乙型肝炎患者病毒长期存在有关,与病程迁延不愈存在密切联系,在今后的临床诊断和治疗中,应对其给予足够的关注。

慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内穿孔素的表达及临床意义

目的研究慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内穿孔素(Perforin)、干扰素(IFN-γ)和白介素10(IL-10)表达与病毒消除间的关系。方法对50例慢性乙型肝炎患者外周血用流式细胞术测定CD8+细胞内Perforin、IFN-γ和IL-10表达,并同30例正常对照组进行比较;利用荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎患者HBV-DNA的载量,分析其与CD8+细胞内Perforin、IFN-γ和IL-10表达的关系。结果慢性乙型肝炎组CD8+T细胞Perforin、IFN-γ和IL-10的表达分别为(5.30±2.62)%、(4.05±2.25)%和(0.77±0.50)%,明显低于正常对照组,差异有统计学意义(t分别为4.50、4.56、4.20,均P【0.01);慢性乙型肝炎患者CD8+T细胞内Perforin和IFN-γ表达率与乙肝病毒DNA载量成负相关(r分别为-0.539、-0.340,P【0.01、P【0.05)。结论慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞存在功能上的缺陷,细胞内Perforin、IFN-γ和IL-10表达减少可能与病毒长期存在,病程迁延不愈有关。

细胞毒性T淋巴细胞和T白血病细胞利用柔软性逃避穿孔素介导的杀伤

目的细胞毒性淋巴细胞(CTL)释放的穿孔素仅在肿瘤细胞膜表面打孔,而不在CTL表面形成孔洞,这种单向杀伤机制在免疫学角度尚未被阐明。穿孔素打孔既是一个化学过程,也是一个生物力学过程,细胞可利用其柔软性妨碍穿孔素打孔。方法实验室前期研究发现活化的CTL下调FLNA表达,通过柔软性逃避穿孔素介导的杀伤,这种柔软性同样被T白血病细胞用于免疫逃逸。结果和结论本研究在细胞、动物及病人3个水平结合多组学、原子力显微镜等手段,发现ZAP70介导的YAP Y357磷酸化和活化使filamin A下调来诱导柔软性的形成。并且在CTL中,耐药转运蛋白MDR1表达更高,因此CTL比恶性T细胞对YAP抑制剂更具耐药性。YAP的适度抑制使恶性T细胞变硬,但CTL仍然保持一定的柔软性,从而使CTL在杀伤恶性肿瘤细胞时避免自溶。因此,本发现揭示了一种基于机械力的针对T细胞白血病的免疫治疗策略。本研究基于生物机械力学和肿瘤免疫核心问题进行探究,揭示了T白血病细胞免疫逃逸背后的生物力学机制,为开发基于生物机械力学的新型免疫治疗奠定了理论基础。

慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内穿孔素的表达与病毒载量的关系

目的研究慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内穿孔素（Perforin）、干扰素（IFN-γ）和白细胞介素10（IL-10）表达与病毒消除的关系。方法对50例慢性乙型肝炎患者外周血进行短期培养后，利用流式细胞术测定CD8^＋细胞内Perforin、IFN-1和IL-10表达，并与30例正常对照进行比较；利用荧光定量PCR检测慢性乙型肝炎患者HBVDNA的载量，分析其与CD8^＋细胞内Perforin、IFN-1和IL-10表达的关系。结果慢性乙型肝炎组CD8^＋T细胞Perforin、IFN-1和IL—10的表达分别为（5．30±2．62）％、（4．05±2．25）％和（0．77±0．50）％，明显低于正常对照组（t分别为4．50、4．56、4．20，P均〈0．01）；26例HBeAg阳性的慢性乙型肝炎患者CD8^＋T细胞Perforin和IFN-1的表达分别为（4．54±1．93）％和（3．32±1．59）％，明显低于24例HBeAg阴性的慢性乙型肝炎患者（t分别为2．22、2．54，P均〈0．05）；慢性乙型肝炎患者CD8^＋T细胞内Perforin和IFN-γ表达率与乙肝病毒DNA载量成负相关（r分别为-0．539、-0．340，P〈0．01、P〈0．05）。结论慢性乙型肝炎患者细胞毒T细胞内Perforin、IFN-1和IL-10表达减少，可能与慢性乙型肝炎患者病毒长期存在，病程迁延不愈有关。

年龄对人细胞毒性T淋巴细胞和自然杀伤细胞中穿孔素表达的影响

目的 通过研究健康儿童、成人和老年人外周血淋巴细胞 (PBL)中细胞毒效应分子穿孔素 (PFP)的表达水平的变化 ,了解细胞毒性T细胞 (CTL )的杀伤活性随年龄增长而下降的分子机制。方法 利用抗人PFP、抗人CD3和抗人CD5 6单克隆抗体 (mAb) ,采用单标记免疫组化染色法 ,检测外周血单个核细胞 (PBMC)中PFP的表达。采用双标记免疫组化染色法 ,检测上述细胞表面标志CD3或CD5 6的表达和细胞内PFP的表达。结果 儿童组、成人组及老年组PBL中表达PFP阳性细胞的百分率 (% ) ,分别为 (2 6 .4± 2 .7) % ,(2 1.6± 3.2 ) %和 (13.4± 2 .0 ) % ,老年组明显下降 ,与其他两组相比较P <0 .0 0 1。 3个年龄组CD3+ T细胞表达PFP的阳性率 (% ) ,分别为 (30 .1± 4 .8) %、(2 1.4± 7.3) %和 (18.8± 4 .2 ) % ,随年龄的增长而显著下降。3个年龄组CD5 6 +NK细胞PFP的表达差别不显著。结论 健康人PBL中PFP的表达随年龄增长而递减 ,CD3+ T细胞亚群PFP表达水平的下降尤其显著。

CD_(4)^(+)T淋巴细胞穿孔素基因启动子低甲基化水平在戒烟大鼠肺气肿进展中的作用及S-腺苷甲硫氨酸的干预效果

目的探讨CD_(4)^(+)T淋巴细胞穿孔素基因启动子甲基化水平与戒烟后大鼠肺气肿持续进展的关系及S-腺苷甲硫氨酸(SAM)的干预效果。方法将20只SD大鼠随机分为4组:正常对照组、模型组、戒烟4周组、戒烟后SAM干预4周组,各5只,后3组香烟烟雾暴露法建立大鼠肺气肿模型并采取相应措施。各组取右下肺组织行苏木精-伊红(HE)染色观察病理学改变,测量平均内衬间隔(MLI)和平均肺泡数(MAN)。用免疫磁珠法从各组大鼠的脾脏中分选出CD_(4)^(+)T淋巴细胞,提取其DNA,检测CD_(4)^(+)T淋巴细胞穿孔素基因启动子区域的甲基化水平。结果模型组、戒烟4周组、戒烟后SAM干预4周组MLI均较正常对照组增加(均P<0.05),其中戒烟4周组较模型组、戒烟后SAM干预4周组增加(均P<0.05)。模型组、戒烟4周组、戒烟后SAM干预4周组MAN均较正常对照组减小(均P<0.05),其中戒烟4周组较模型组减小(P<0.05)。模型组和戒烟4周组CD_(4)^(+)T淋巴细胞穿孔素基因启动子甲基化水平均低于正常对照组和戒烟后SAM干预4周组[(93.9±3.1)%、(93.1±1.8)%比(97.1±1.1)%、(96.4±1.5)%](均P<0.05)。结论CD_(4)^(+)T淋巴细胞穿孔素基因启动子低甲基化水平在大鼠戒烟后仍持续存在,可能是戒烟后大鼠肺气肿不断恶化的原因之一;而给予SAM干预后,戒烟大鼠的肺气肿恶化可好转。

穿孔素与颗粒酶B在鼻NK/T细胞淋巴瘤诊断中的意义

目的 检测鼻NK/T细胞淋巴瘤中的穿孔素、颗粒酶B表达分布情况 ,为临床治疗和预后判断提供依据。方法 运用免疫组化S P法检测 11例鼻NK/T细胞淋巴瘤中穿孔素、颗粒酶B的表达和分布情况 ;同时与组织芯片中其他类型淋巴瘤进行比较研究 ,10例淋巴组织反应性增生作为对照。结果 11例鼻NK/T细胞淋巴瘤中均见穿孔素和颗粒酶B过度表达。以 6 0例淋巴瘤制成组织芯片的 4 2例B细胞淋巴瘤中见 11例少许穿孔素和 14例少许颗粒酶B阳性表达细胞散在分布于瘤细胞间 ,10例外周T细胞淋巴瘤中 8例少许表达穿孔素和 9例少许表达颗粒酶B。 2例间变性大细胞淋巴瘤见少许穿孔素和颗粒酶B阳性表达细胞。 2例霍奇金淋巴瘤阴性。NK/T细胞淋巴瘤的穿孔素和颗粒酶B表达程度与T、B淋巴瘤比较 ,差异有显著性 (P <0 0 1)。结论 穿孔素和颗粒酶B是鉴定活化的细胞毒性细胞的免疫标记物 ,可作为NK/T细胞淋巴瘤的诊断性标记物 ;其在外周T细胞淋巴瘤和B细胞淋巴瘤中的表达 ,反映了机体存在抗肿瘤的免疫反应机制。

穿孔素介导的细胞毒效应在病毒性心肌炎小鼠发病中的作用

目的探讨穿孔素（ＰＦＰ）介导的细胞毒效应在病毒性心肌炎（ＶＭＣ）发病中的作用。方法４０只小鼠等分为ＣＶＢ３感染组及非感染组；所有小鼠于感染后第１０天处死并取其心脏；采用免疫组化技术检测心肌浸润细胞中ＰＦＰ的表达，原位杂交方法检测心肌中ＣＶＢ３ＲＮＡ；半定量分析ＰＦＰ抗原及ＣＶＢ３ＲＮＡ水平，并分析ＰＦＰ抗原水平与ＣＶＢ３复制及心肌病变程度的关系。结果ＰＦＰ抗原阳性信号指数与ＣＶＢ３ＲＮＡ杂交阳性信号指数呈显著负相关（ｒ＝－０．８２，Ｐ＜０．０５），与心肌病变积分呈显著正相关（ｒ＝０．９１，Ｐ＜０．０５）。结论ＰＦＰ介导的细胞毒效应在ＶＭＣ发病中可能具有抗病毒及致心肌损害双重作用。

肺结核患者外周血CD_4^+T细胞穿孔素表达下降

目的研究活动性肺结核患者外周血单个核细胞(PBMCs)穿孔素(Perforin)的表达及临床意义。方法采集19例活动期肺结核患者和23位健康对照外周血,纯化PBMCs,用结核分枝杆菌ESAT-6和CFP-10混合性抗原肽库刺激,通过细胞表面标记和细胞内细胞因子染色技术,采用流式技术检测CD4+、CD8+T细胞穿孔素的表达。结果与对照组比较,肺结核患者PBMCs中的CD4+T、CD8+T细胞亚群分布无显著性差异,但肺结核患者PBMCs及CD4+T细胞中穿孔素的表达比例(百分率)下降(PBMCs:肺结核组19.55%±2.53%,对照组27.53%±1.90%,P<0.05;CD4+T细胞:肺结核组4.42%±0.84%,对照组8.15%±1.29%,P<0.05),而PBMCs及CD4+、CD8+T细胞中穿孔素的表达量无显著性差异。结论活动期初治肺结核CD4+T细胞群内Perforin的表达比例下降可能会使CD4+T细胞对靶细胞的细胞毒性作用(CTL)下降。

肠道白色念珠菌感染对脾虚小鼠小肠黏膜中T细胞亚群和穿孔素-颗粒酶B的影响

目的:通过观察肠道白色念珠菌感染对脾虚小鼠小肠黏膜固有层中T细胞亚群和穿孔素、颗粒酶的影响,探讨机体在脾虚状态下感染白色念珠菌的部分免疫机制。方法:本实验采用饮食失节加劳倦过度的复合因素制备小鼠脾虚模型,经肠道感染白色念珠菌后第14天,应用流式细胞术检测小鼠小肠黏膜固有层中CD_3^+、CD_4^+和CD_8^+T的细胞百分比,采用免疫荧光法检测各组小鼠小肠黏膜中穿孔素、颗粒酶阳性表达细胞数。结果:与正常对照组比较,其他3组小鼠小肠黏膜固有层中CD_4^+T细胞比例均有不同程度下降,CD_8^+T细胞比例均有不同程度上升,有统计学意义(P<0.01);正常感染白念组和脾虚感染白念组小鼠小肠黏膜固有层中穿孔素阳性表达细胞均明显增多(P<0.05或P<0.01),而颗粒酶阳性表达细胞仅脾虚感染白念组明显增多(P<0.01)。其中,脾虚感染白念组最显著,与其他3组均具有统计学意义(P<0.05或P<0.01)。结论:小肠黏膜固有层中穿孔素和颗粒酶的高表达可能是造成小肠局部损伤的免疫机制之一,脾虚小鼠肠道局部免疫功能下降,感染发生后可加重肠道局部损伤程度。

雷帕霉素对γδT细胞体外增殖和细胞毒活性的影响

目的探讨雷帕霉素与Torin2对人γδT细胞体外培养增殖和细胞毒活性的影响及相关机制。方法选择10例健康志愿者,其中男性5例,女性5例;平均年龄68.0岁(标准差4.7岁)。选择人慢性淋巴细胞白血病(CLL)肿瘤细胞株MEC-1。从志愿者外周静脉血获得外周血单个核细胞(PBMC),经处理获得γδT细胞。体外增殖培养的人γδT细胞在第10天观察细胞形态特征,流式细胞术检测人γδT细胞百分率。γδT细胞分别用100 nmol/L雷帕霉素(雷帕霉素组)和Troin2处理(Troin2组),同时用RPMI 1640培养液作为空白对照(对照组),分别培养24、48 h,计算活细胞数。采用不同效靶比(1∶1、3∶1、9∶1、18∶1、36∶1),乳酸脱氢酶(LDH)释放法检测人γδT细胞对MEC-1细胞的杀伤作用。流式细胞术检测各组白细胞介素(IL)-17的表达。Western blot检测磷脂酰肌醇3-激酶(PI3K)、丝苏氨酸激酶(AKT)、磷酸化AKT(p-AKT)、哺乳动物雷帕霉素靶蛋白(mTOR)、磷酸化mTOR(p-mTOR)、起始因子4E结合蛋白1(4EBP-1)的表达。结果扩增前人γδT细胞百分含量为4.70%±1.17%,经10 d扩增且纯化后γδT细胞百分含量为94.20%±2.18%。雷帕霉素组24 h扩增倍数为1.45±0.20,48 h扩增倍数为2.71±0.06,与对照组间差异无统计学意义(P>0.05);Torin2组24 h扩增倍数为1.14±0.05,48 h扩增倍数为2.09±0.06,均显著低于雷帕霉素组及对照组(P<0.05)。雷帕霉素组γδT细胞的杀伤活性分别为0.05%±0.01%(1∶1)、10.84%±0.88%(3∶1)、23.02%±0.65%(9∶1)、50.74%±2.96%(18∶1)、77.75%±0.55%(36∶1),均显著高于对照组(P<0.05);Torin2组γδT细胞的杀伤活性分别为0.06%±0.01%(1∶1)、4.06%±0.84%(3∶1)、10.72%±2.97%(9∶1)、18.20%±2.83%(18∶1)、36.18%±2.19%(36∶1),均低于雷帕霉素组及对照组(P<0.05)。雷帕霉素组IL-17表达为(32.7±1.7)%,Troin2组IL-17表达为(12.2±1.4)%,均显著低于对照组(73.1±2.7)%(均P<0.05)。且Troin2组抑制γδT分泌IL-17程度更明显,差异有统计学意义(P<0.05)。Western blot结果显示,与对照组相比,雷帕霉素组、Troin2组mTOR表达水平均下降,差异有统计学意义(t_(雷帕霉素组)=14.23,P<0.05;t_(Troin2组)=11.67,P<0.05);雷帕霉素组、Troin2组p-mTOR表达水平均下降,差异有统计学意义(t_(雷帕霉素组)=16.78,P<0.05;t_(Troin2组)=25.31,P<0.05);雷帕霉素组PI3K表达提高,差异有统计学意义(t=18.77,P<0.05);AKT表达提高,差异有统计学意义(t=22.21,P<0.05);pAKT表达提高,差异有统计学意义(t=19.33,P<0.05);4EBP-1表达提高,差异有统计学意义(t=14.37,P<0.05)。结论雷帕霉素能在不影响体外人γδT细胞增殖的基础上,增强人γδT细胞对MEC-1细胞的肿瘤杀伤活性并抑制其IL-17的水平,其机制可能与mTOR C1/C2位点之间的负反馈机制相关。

乙型肝炎病毒感染者外周血T细胞亚群和穿孔素-颗粒酶变化

目的探讨HBV感染者外周血单个核细胞(PBMC)中T淋巴细胞亚群分布频率及穿孔素和颗粒酶B表达的变化。方法通过细胞表面标记和细胞内细胞因子染色技术,采用流式细胞术分析HBV感染者PBMC中CD4+、CD8+T细胞的分布以及穿孔素和颗粒酶B的表达。结果与正常对照相比,急性和慢性乙肝患者CD4+T细胞百分率无明显改变,CD8+T细胞以及穿孔素和颗粒酶B表达均显著增高(前者P<0.01,后者P<0.05)。HBV携带者CD4+T细胞显著降低(P<0.05),CD8+T无明显改变。三组CD4+/CD8+T比例均显著降低(P<0.05)。结论与HBV携带者不同,急性和慢性乙肝患者CD8+T细胞频数及穿孔素和颗粒酶B表达均明显增高,提示细胞毒T细胞的数量及细胞毒颗粒表达与病毒清除和肝损害相关;急性和慢性患者在增高程度上的差异提示慢性乙肝的细胞免疫和细胞毒反应的不完全。

化疗和卡介苗免疫对结核病小鼠T淋巴细胞亚群内穿孔素和颗粒溶素表达的影响

目的研究探讨化疗和卡介苗免疫对结核病小鼠T淋巴细胞亚群内穿孔素和颗粒溶素表达的影响。方法按体重相近的原则将90只体重(19±1)g,属龄(7±1)个月实验用C57 BL/6小鼠随机分成6组:(1)健康对照组15只(A组);(2)结核病对照组15只(B组);(3)卡介苗免疫组15只(C组);(4)卡介苗免疫成功后结核菌攻击组15只(D组);(5)结核病化疗组15只(E组);(6)结核病化疗1个月后加卡介苗免疫治疗组15只(F组)。分别进行相应的实验处理,对相应的细胞因子进行检测。结果 C组、D组、E组以及F组中CD3^+和CD8^+水平与B组相比有明显统计学意义(P<0.05);4组中F组与其余3组相比明显升高(P<0.05)。C组、D组、E组以及F组中穿孔素和颗粒溶素水平与B组相比有明显统计学意义(P<0.05);4组中F组与其余三组相比明显降低(P<0.05)。结论采用化疗和卡介苗免疫联合治疗对结核病具有更加好的治疗效果。

肝细胞癌患者Treg细胞对CD8^+T淋巴细胞穿孔素表达的影响

目的研究肝细胞癌患者免疫抑制性Treg细胞对CD8+T淋巴细胞穿孔素表达的影响。方法采集20例肝细胞癌患者和20名健康人的外周血,用流式分析法检测抗-CD3/CD28刺激48 h后CD8+T淋巴细胞的穿孔素表达情况。免疫磁珠分离法分离健康人CD8+T淋巴细胞和肝细胞癌患者Treg细胞,一组CD8+T淋巴细胞单独培养,另一组CD8+T淋巴细胞与Treg细胞共同培养,用流式细胞法检测抗-CD3/CD28刺激48 h后两组CD8+T淋巴细胞穿孔素表达情况。结果肝细胞癌患者外周血中CD8+T淋巴细胞穿孔素表达量与健康人相近,分别为(10.74±3.96)%和(12.6±2.48)%,差异无统计学意义(P>0.05)。CD8+T淋巴细胞单独培养和与肝癌患者Treg细胞共培养后,健康人CD8+T淋巴细胞穿孔素表达量分别为(34.2±3.65)%和(20.43±4.52)%,差异有统计学意义(t=11.42,P<0.01)。结论肝癌患者免疫抑制性Treg细胞可使CD8+T淋巴细胞穿孔素表达量降低。

穿孔素与颗粒酶B对诊断鼻NK/T细胞淋巴瘤的价值

目的探讨穿孔素与颗粒酶B对诊断鼻NK/T细胞淋巴瘤的价值。方法收集10例2013年2月~2014年12月我院诊断为鼻NK/T细胞淋巴瘤的患者。选取同期我院诊断为＂B细胞淋巴瘤＂的10例患者与诊断为＂外周T细胞淋巴瘤＂的10例患者作为对照。分析（1）鼻NK/T细胞淋巴瘤组织学。（2）鼻NK/T细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤和外周T细胞淋巴瘤穿孔素和颗粒酶B表达情况。结果 （1）瘤细胞呈多形性,散布或弥漫性分布,血管呈＂袖套样＂改变。（2）鼻NK/T细胞淋巴瘤、B细胞淋巴瘤和外周T细胞淋巴瘤穿孔素和颗粒酶B表达阳性率分别为（80%,70%）、（20%,30%）、（40%,30%）,3组结果比较差异有统计学意义（P〈0.05）。结论本次研究认为鼻NK/T细胞淋巴瘤中穿孔素与颗粒酶B的表达阳性率高于B细胞淋巴瘤和外周T细胞淋巴瘤,可作为诊断标记物。

穿孔素与细胞毒

穿孔素是NK细胞、细胞毒性T细胞等发挥细胞毒作用的主要效应物质，由于正常细胞中穿孔素的含量较低，因此过去对该物质研究较少。本综述就穿孔素（PFP）的理化性质、表达组织和细胞、作用机制、生物学活性、与临床疾病的关系及检测方法进行了综述。

穿孔素和粒酶在细胞毒T细胞淋巴瘤中的表达

在９８例外周Ｔ细胞淋巴瘤（ＰＴＣＬＳ）中，我们研究了１０例细胞毒表型（ＣＤ３／ＣＤ４／ＣＤ８）的外周Ｔ细胞淋巴瘤的形态学和免疫组化特征。９例肿瘤穿孔素（Ｐｆ）和粒酶Ｂ（ＧｒＢ）细胞毒分子呈阳性，且在大多数恶变细胞中于强阳性。我们窿这些分子在另外９２例Ｔ细胞物自然杀伤（ＮＫ）细胞肿瘤中的表达，有１８例间变的大细胞淋巴瘤（ＡＬＣＬＳ）；６３例ＣＤ４ＰＴＣＬＳ；

小鼠结核病初期T淋巴细胞亚群穿孔素和颗粒酶B的检测

目的了解结核病初期T淋巴细胞亚群内穿孔素和颗粒酶B的表达水平。方法将30只小鼠随机分为2组:对照组和试验组各15只。实验组经尾静脉途径接种结核菌株H37Rv 0.1 mg。感染6周后,应用流式细胞仪检测外周血中T淋巴细胞亚群内细胞因子(穿孔素和颗粒酶B)的表达。结果CD8+T、CD4+CD8+(DP)T淋巴细胞内颗粒酶B阳性细胞百分率比对照组显著升高(P<0.05);CD4+T淋巴细胞内颗粒酶B阳性细胞百分率以及CD8+T、CD4+T、DPT淋巴细胞内穿孔素阳性细胞百分率与对照组比较差异无显著性(P>0.05)。结论在结核病初期,CD8+T、DPT淋巴细胞内颗粒酶B阳性细胞增多,而CD4+T淋巴细胞内颗粒酶B阳性细胞和CD8+T、CD4+T、DPT淋巴细胞内穿孔素阳性细胞无显著变化。

CD4^(+)T细胞、NK细胞穿孔素异常表达对手足口病免疫状态评估及预后的指导价值

目的探究CD4+T细胞、NK细胞穿孔素(PRF)异常表达对手足口病(HFMD)患儿免疫状态和病情评估,分析其对临床预后的指导价值。方法选取2017年1月至2020年6月我院收治的143例HFMD患儿,按照病情严重程度分为普通型组(n=67)、重型组(n=45)和危重型组(n=31),另选体检正常儿童35例作为对照组,比较各组T淋巴细胞亚群(CD3+T、CD4+T、CD8+T)、CD14+单核细胞、NK细胞PRF、颗粒酶B(GrzB)、CD19+B细胞亚群、免疫球蛋白(IgA、IgG、IgM)及补体(C3、C4)水平,并分析CD4+T细胞、NK细胞PRF表达与病情严重程度(PCIS评分,PRISMⅢ评分)及预后关系。结果重症组、危重型组、普通型组患儿CD3+T、CD4+T、CD14+、CD19+B、NK细胞数及低于对照组,NK细胞PRF、GrzB表达高于对照组,其中重症组、危重型组较普通型组变化更明显,差异具有统计学意义(P <0.05);各组IgA、IgG、IgM及补体C3、C4水平差异无统计学意义(P> 0.05);Pearson相关性分析显示,CD4+T细胞与PCIS评分呈正相关(r=0.665,P <0.05),与PRISMⅢ评分呈负相关(r=-0.757,P <0.05),PRF与PCIS评分呈负相关(r=-0.615,P <0.05),与PRISMⅢ评分呈正相关(r=0.596,P <0.05);预后良好患儿CD4+T细胞高于预后不良患儿,NK细胞PRF低于预后不良患儿,差异具有统计学意义(P <0.05)。结论手足口病患儿存在明显CD4+T细胞表达过低、NK细胞PRF表达过高,两者可用于重症患儿细胞免疫状况评估,且与患儿病情严重程度和预后不良有关。