脾虚大鼠胃壁细胞胞浆游离钙离子浓度及黄芪对其调节作用的研究

目的 :检测脾虚模型大鼠胃壁细胞胞内 [Ca2 +]i及黄芪对 [Ca2 +]i的调节作用。方法 :SD大鼠用大黄造成脾虚模型 ,并用黄芪注射液治疗 4日 ,用Fura 2 /AM荧光分光光度法检测壁细胞静息状态下和胃泌素刺激下 [Ca2 +]i。结果 :脾虚模型大鼠壁细胞静息状态下 [Ca2 +]i明显低于正常大鼠 ,胃泌素刺激后 [Ca2 +]i升高幅度亦明显低于正常组 ;脾虚黄芪治疗组大鼠静息状态下[Ca2 +]i有一定升高 ,胃泌素刺激下黄芪治疗组壁细胞 [Ca2 +]i升高幅度明显高于模型组并与正常组比较无明显差异。结论 :脾虚大鼠胃壁细胞静息状态下和胃泌素刺激下 [Ca2 +]i明显低于正常大鼠 ,说明脾虚证时壁细胞功能处于一种低代谢状态 ,推测胞内钙库容量可能降低 ,而且壁细胞表面胃泌素受体数下调或 /和功能下降 ,不能正常介导胞外信号。黄芪能够使低下的胞内代谢水平有一定程度恢复 ,胞内钙库容量有一定增大 ,并能使胃泌素受体数上调和 /或功能加强 。

哮喘患儿淋巴细胞胞浆游离钙离子浓度变化及其与呼吸爆发功能的关系

目的：研究哮喘患儿淋巴细胞胞浆游离钙离子浓度变化及其与呼吸爆发功能的关系。方法：采用Ｑｕｉｎ２荧光技术直接测定淋巴细胞胞浆游离钙离子〔Ｃａ２＋〕ｉ和细胞色素Ｃ还原法测定淋巴细胞呼吸爆发Ｏ÷２释放量。结果：淋巴细胞胞浆〔Ｃａ２＋〕ｉ哮喘发作期明显高于稳定期（Ｐ＜０．０１），稳定期与正常儿童相近（Ｐ＞０．０５），内、外源型哮喘间无显著性差异；淋巴细胞呼吸爆发释放Ｏ÷２量哮喘发作期明显高于稳定期（Ｐ＜０．０１），稳定期仍高于正常儿童（Ｐ＜０．０５），内、外源型哮喘间无显著性差异；相关分析显示哮喘患儿淋巴细胞胞浆〔Ｃａ２＋〕ｉ与其呼吸爆发Ｏ÷２释放量呈正相关关系（ｒ＝０．４１，Ｐ＜０．０５）。结论：哮喘患儿淋巴细胞呼吸爆发功能增强，其Ｏ÷２释放量的增加在哮喘气道炎症中起重要作用，淋巴细胞胞浆〔Ｃａ２＋〕ｉ的增高与其活化有一定关系，但钙拮抗剂不宜作为哮喘治疗的主要药物。

镧对分离兔成熟破骨细胞胞浆内游离钙离子浓度的影响

通过共扣焦激光扫描显微镜，采用Fluo～3／AM细胞内钙离子荧光探针，研究了La^3＋对分离兔成熟破骨细胞胞浆内游离钙离子浓度的影响。结果表明，各时间点1．00×10^-8mol·L^-1的La^3＋对成熟破骨细胞胞浆内游离钙离子浓度没有影响。然而，浓度为1．00×10^-5和1．00×10^-7mol·L^-1的La^3＋能在各时间点剂量依赖性的减少胞浆内游离钙离子浓度，而且随着作用时间的延长，1．00×10^-5和1.00×10^-7mol·L^-1的La^3＋能剂量依赖性的减小破骨细胞的展开面积；浓度为1．00×10^-8mol·L^-1La^3＋对破骨细胞的展开面积没有影响。结果表明，La^3＋可能通过降低破骨细胞胞浆内游离钙离子浓度，导致破骨细胞骨架收缩，影响破骨细胞的黏附能力，进而降低破骨细胞的骨吸收活性。

用Fura-2/AM测定肺炎链球菌粘附A549细胞后胞浆游离钙离子浓度

目的 :通过体外实验 ,研究肺炎链球菌 (Streotococcus pneumoniae,S.pn)是否可触发肺 型上皮细胞 (A5 49)胞浆 [Ca2 +] i 浓度的改变。方法 :用 F ura-2 /AM荧光探针负载 A5 49细胞后测定 S.pn粘附A5 49细胞 3 0、60、90 min的胞内 [Ca2 +] i 浓度。结果 :S.pn粘附 A5 49细胞 3 0、60、90 min后的胞内 [Ca2 +] i均高于对照 [(187.4± 17.3 ) nmol/L ] ,并达到饱和 ,分别为 (4 87.5± 3 8.1)、(5 48.2± 3 5 .6)、(5 5 7.2± 47.5 )nmol/L。结论 :上述结果提示 S.pn粘附 A5 49细胞可增加胞浆内 [Ca2 +] i

极低频弱磁场对PC-12瘤细胞胞内游离钙离子浓度的影响

采用极低频弱磁场对鼠嗜铬细胞瘤 PC- 12株系细胞进行照射 ,利用显微荧光技术动态监测胞内游离钙离子浓度 ([(Ca2 + ]i)的变化 ,实验结果表明 :5 0 Hz,10 0 μT的正弦磁场照射引起 [Ca2 + ]i 明显升高 ;而在同等强度的静磁场和 2 0 0 0 Hz正弦磁场照射下 ,[Ca2 + ]i 基本维持不变。进一步的实验说明 [Ca2 + ]i 的升高部分源于细胞外 Ca2 +的跨膜内流 ,部分源于胞内钙库的释放。证实了一定强度下特定频率的极低频弱磁场能够影响钙离子的跨膜运输和胞内钙库的释放 。

大黄素对豚鼠单个心室肌细胞胞浆游离钙浓度及L-型钙电流的影响

目的 研究大黄素 (emodin)对豚鼠心室肌细胞钙信号的影响。方法 酶解法分离豚鼠单个心室肌细胞 ,应用激光扫描共聚焦显微镜联合全细胞膜片钳技术测量豚鼠心室肌细胞钙信号的变化。结果 在静息状态下 ,1～10 0 μmol·L- 1 大黄素对 [Ca2 +]i 均无影响 ;对 6 0mmol·L- 1 KCl诱导的外钙内流引起的胞浆钙升高有不同的影响 ,1μmol·L- 1 表现为促进作用 ;10 μmol·L- 1 无作用 ;10 0 μmol·L- 1 则表现为抑制作用。膜片钳研究结果表明 ,1μmol·L- 1 大黄素可明显促进L 型钙电流 ,10 μmol·L- 1 对L 型钙电流无影响 ;10 0 μmol·L- 1 明显抑制L 型钙电流。结论 大黄素对心肌细胞内钙及L

原儿茶醛对人红细胞胞浆游离钙浓度的影响

目的观察丹参水溶性有效成分原儿茶醛对人红细胞胞浆游离钙浓度的影响。方法采用Fura-2定量分析法观测原儿茶醛对人红细胞胞浆Ca2+浓度的影响。结果原儿茶醛能够降低人红细胞胞浆Ca2+浓度,并呈剂量依赖性。结论丹参注射液增强红细胞变形能力的作用可能与其有效成分原儿茶醛降低红细胞胞浆Ca2+浓度有关。

重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体的溶栓作用及对血小板聚集和胞浆游离钙离子浓度的影响

目的 研究重组人组织型纤溶酶原激活剂缺失变体(reteplase,Ret)的溶栓作用以及对离体家兔血小板聚集功能和对血小板静息状态胞浆内游离钙浓度的影响。方法 家兔血栓模型采用动-静脉旁路法,血小板聚集实验采用比浊法,血小板静息状态胞浆内游离钙浓度采用Fura-2荧光测定法。结果Ret(3.75×105,7.50× 105,15.0×105U·kg-1)对家兔动-静脉旁路所形成的血栓有明显溶栓作用,可明显减轻血栓干湿重量,并呈一定的剂量依赖性。Ret(1 000,3 000,10 000 U·mL-1)对ADP诱导的血小板聚集可产生浓度依赖性的抑制作用,并可明显降低血小板静息状态的[Ca2+]i,并呈一定的浓度依赖性。结论Ret具有明显的血栓溶解作用,可明显抑制ADP诱导的血小板聚集,并明显降低血小板静息状态的[Ca2+]i。

黄芪多糖对鸡脾脏淋巴细胞内游离钙离子浓度的影响

为进一步探讨黄芪多糖 (APS)的免疫调节机制 ,建立了特异性荧光探针 Fura- 2 / AM测定鸡脾脏淋巴细胞游离钙离子浓度的方法 ,观察了 APS对体外培养的鸡脾脏淋巴细胞内游离钙离子水平的影响。结果表明 :APS以 2 0 0 μg/ ml的终浓度加入体外培养的鸡脾脏淋巴细胞培养液中 ,可极显著升高细胞内游离钙离子的水平 (P<0 .0 1)。提示黄芪多糖通过调节细胞内游离钙离子的浓度而影响机体免疫细胞的信号转导。

1,2-二氯乙烷对大鼠肝细胞内游离钙离子浓度的影响

目的了解1,2-二氯乙烷染毒24h对大鼠肝细胞的损伤及其机理。方法运用显微荧光术测定了大鼠肝细胞内游离钙离子浓度,同时,测定了大鼠肝细胞培养上清液乳酸脱氢酶(LDH)活力作为大鼠肝细胞受损的指标。结果所有剂量组的1,2-二氯乙烷的大鼠肝细胞内游离钙离子浓度与对照组比较差异均无显著性(P>0.05);LDH活力仅在浓度为5mmol/L的1,2-二氯乙烷染毒组与对照组比较差异也无显著性(P>0.05);而1,2-二氯乙烷其他染毒组(即浓度为10mmol/L和20mmol/L)与对照组比较差异均有显著性(P<0.01)。结论较高浓度(10mmol/L和20mmol/L)的1,2-二氯乙烷能损伤大鼠肝细胞,损伤的途径不是通过破坏肝细胞内钙稳态机制。

fMLP诱导的中性粒细胞胞内游离钙离子浓度变化与细胞极性化过程

目的:观察不同浓度的fMLP诱导中性粒细胞的极性变化,并结合胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)变化曲线分析不同时相细胞的极性化变化,探讨二者之间的关系。方法:使用激光共聚焦显微镜对胞内[Ca2+]i变化进行监测,细胞极性化情况通过倒置显微镜来分析。结果:胞内[Ca2+]i变化主要包括静息期(0s)、快速上升期(10s)、快速下降期(150s)、慢速下降期(250s)和终末期等5个阶段,在这5个阶段的10s时细胞膜开始皱缩,启动细胞极性化过程,之后呈现为不断的极性化和去极性化过程。结论:游离钙离子浓度升高可能启动了中性粒细胞的极性化,但对之后的极性化过程影响不明显。

新生儿缺氧缺血性脑病过程中红细胞内游离钙离子浓度的变化

新生儿缺氧缺血性脑病（hypoxic—ischemic encephalopathy，ⅢE）是由于各种围产因素引起的脑缺氧和脑血流减少或暂停而导致的胎儿和新生儿的脑损伤。钙离子内流和细胞内钙超载是其重要的发病机制之一。本研究在此基础上进一步研究缺氧损伤的重要机制“钙超载”．精确测定红细胞胞质内游离钙离子的绝对浓度。

细菌脂多糖对培养心肌细胞胞浆游离钙浓度的影响

正常细胞在静息状态下,胞浆游离钙浓度维持在10-7mol/L水平。产生钙信号的激动剂作用于细胞时,引起胞浆游离钙浓度升高,进而影响细胞功能。文献报告细菌脂多糖在体内和体外影响细胞对钙的摄取和转运。本研究采用quin-2荧光指示剂法测定培养心肌细胞胞浆游离钙浓度,观察脂多糖对心肌细胞基础水平胞浆游离钙浓度的影响。

细胞内胞浆游离钙、血管紧张素Ⅱ和动态血压改变与氨氯地平血药浓度变化的关系

目的观察氨氯地平的降压作用与其血浆血药浓度、细胞内胞浆游离钙浓度（[Ca2＋]i）、血管紧张素Ⅱ浓度（[AT－Ⅱ]）和24h动态血压改变的关系。方法给14名原发性高血压病人及性别、年龄严格匹配的正常对照组口服单剂量（5mg）氨氯地平治疗，治疗前后检测上述指标。结果原发性高血压病人之[Ca2＋]i和[AT－Ⅱ]比正常对照组显著升高。口服单剂量氨氯地平治疗后，随着血药浓度上升，血压、[Ca2＋]i和[AT－Ⅱ]显著下降。药物作用的高峰在服药后的6h，且其药物作用可维持24h。治疗后[Ca2＋]i的下降幅度、血药浓度的上升幅度、血压的下降幅度和[AT－Ⅱ]的下降幅度之间有明显的相关性。原发性高血压病人经氨氯地平治疗后，24h平均血压显著下降，降压谷：峰值比率：收缩压力79．27％，舒张压为68．40％。结论以上资料提示：氨氯地平能平稳、有效地降低高血压病人的血压而且其药物作用能维持24h，其降压作用可能通过降低细胞内胞浆游离钙浓度和血管紧张素Ⅱ的浓度而发挥作用。

抗抑郁新化合物SIPI-C和SIPI-F对PC12细胞内游离钙离子浓度的影响

目的研究抗抑郁新化合物SIPI-C和SIPI-F对PC12细胞内游离钙离子浓度([Ca2+]i)的影响,初步探讨其神经毒性的机制。方法 接种PC12细胞于经胶原Ⅰ包被的培养皿,加入钙离子荧光探针Fluo-3/AM染色后,用激光共聚焦显微镜分别记录①有钙外液中,10μmo.lL-1的SIPI-A,B,C和F对PC12细胞[Ca2+]i的影响;②有钙外液中,1,10和100μmol.L-1的SIPI-C和SIPI-F对[Ca2+]i的影响;③有钙外液中,硝苯地平10μmo.lL-1对10μmo.lL-1的SIPI-C或SIPI-F作用的影响;④无钙细胞外液中,10μmo.lL-1SIPI-C和SIPI-F对[Ca2+]i的影响。结果 有钙外液中,SIPI-A 10μmol.L-1给药后[Ca2+]i下降,10μmol.L-1的SIPI-B,SIPI-C和SIPI-F分别使[Ca2+]i增加27%(P<0.05),84%(P<0.05)和87%(P<0.01);SIPI-C和SIPI-F明显升高[Ca2+]i;同时给予SIPI-C 10μmol.L-1和硝苯地平10μmo.lL-1或SIPI-F 10μmo.l L-1和硝苯地平10μmo.lL-1,给药后荧光强度立即上升达到峰值,随后下降,[Ca2+]i分别增加24%和15%(P<0.05)。在无钙外液中,SIPI-C和SIPI-F 10μmo.lL-1分别使[Ca2+]i增加16%和18%(P<0.01)。结论 抗抑郁化合物SIPI-C和SIPI-F可以引起PC12细胞中[Ca2+]i显著增加,此影响可能与其神经毒性有关。

用Fura-2测量活细胞胞浆游离钙浓度的方法

Ca^2+作为细胞为Ca^2+信使系统的重要组成成分之一，在生理、生化和疾病的发生发展中起着重要作用。正常机体内，细胞内Ca^2+浓度为100-200nmoL／L。进入八十年代以来，由于人们对细胞内Ca^2+研究深入，迫切希望有较为可靠的[Ca^2+]i的测定方法。

脂氧素对脂多糖诱导的巨噬细胞游离钙浓度变化及活性氧的影响

近年来越来越多的研究资料表明炎症反应的及时消退是炎症治疗的重要环节.脂氧素对多种炎症细胞和炎症相关基因有显著的负性调节作用,是体内重要的内源性脂质促炎症消退介质.细胞内游离钙离子浓度变化为巨噬细胞活化的重要第二信使.但脂氧素对巨噬细胞内游离钙浓度变化了解较少.为此,本研究采用细胞内钙离子特异性荧光探针Fluo3-AM和活性氧特异性荧光探针DCFH-DA同时标记小鼠巨噬细胞,用激光共聚焦显微镜同时动态观察脂多糖引起巨噬细胞胞内游离钙浓度和活性氧变化及脂氧素的影响作用.

阿魏酸对视网膜神经细胞内游离钙浓度变化的影响

目的研究阿魏酸(FA)对视网膜神经细胞内游离钙([Ca2+]i)水平变化的影响。方法以胚胎7个月人视网膜,新生小牛视网膜和生后4个月小鼠视网膜为研究对象,检测FA作用后[Ca2+]i水平变化。结果500μg/mLFA作用下,胚胎人组[Ca2+]i荧光强度(基值为57.08±3.97)在10s内降至38.41±4.92,维持在38.41±4.92～43.45±3.29;新生小牛组[Ca2+]i(基值为69.48±3.87)在20s内降至52.86±3.69,维持在49.75±3.82～54.39±4.04;成年小鼠组[Ca2+]i(基值为71.54±3.73)在20s内降至54.91±3.57,维持在53.81±3.49～58.14±3.49,且发现胚胎人组[Ca2+]i基值和受光照射后变化明显异于新生期小牛组和成年小鼠组。结论FA能有效降低视网膜神经细胞内游离钙水平,对于促进增殖和保护细胞具有重要作用。