Caspase-9和CMYC在弥漫性大B细胞淋巴瘤中的表达及与患者病理特征和预后的关系

目的探讨半胱氨酸蛋白酶-9(Caspase-9)和细胞性骨髓细胞瘤病病毒癌基因(CMYC)在弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)组织中的表达及其与患者病理特征和预后的关系。方法选取2017年2月至2020年2月周口市中心医院收治的60例DLBCL患者纳入研究,比较DLBCL肿瘤组织及病灶旁正常组织的Caspase-9、CMYC表达水平,分析Caspase-9、CMYC表达与临床病理特征的关系,比较预后良好和预后不良患者的临床病理特征、Caspase-9、CMYC表达水平,采用二元Logistic回归分析DLBCL患者预后不良的影响因素。结果DLBCL患者肿瘤组织中Caspase-9阳性率为43.33%,明显低于正常组织的80.56%,CMYC阳性率为36.67%,明显高于正常组织的13.88%,差异均有统计学意义(P<0.05);Ann Arbor分期Ⅰ~Ⅱ期、国际预后指数(IPI)评分0~2分患者DLBCL肿瘤组织Caspase-9阳性率明显高于Ⅲ~Ⅳ期和3~4分患者,CMYC阳性率低于Ⅲ~Ⅳ期、3~4分患者,差异均有统计学意义(P<0.05);预后不良患者Ann Arbor分期中Ⅲ~Ⅳ期占比、IPI评分中3~4分占比、CMYC阳性表达占比分别为73.08%、65.38%、69.23%,均高于预后良好组的35.29%、32.35%、11.76%,Caspase-9阳性表达占比为23.08%,低于预后良好组的58.82%,差异均有统计学意义(P<0.05);Ann Arbor分期、IPI评分、Caspase-9、CMYC均为影响DLBCL患者预后不良的独立影响因素(P<0.05),其中Ann Arbor分期Ⅲ~Ⅳ期预后不良风险是Ⅰ~Ⅱ期的9.008倍;IPI评分3~4分预后不良风险是0~2分的10.298倍;Caspase-9表达阳性预后不良风险是阴性的0.622倍;CMYC表达阳性预后不良风险是阴性的19.922倍。结论Caspase-9、CMYC异常表达参与DLBCL的进展,与肿瘤恶性程度有关,且Caspase-9、CMYC异常表达是DLBCL预后不良的独立影响因素,对DLBCL预后具有一定的预测价值,可作为预测DLBCL患者预后的参考指标。

Ywhab通过靶向Hsp90aa1抑制小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞生长

目的:研究Ywhab在小鼠B细胞淋巴瘤发生发展中的作用,并探讨其可能的分子机制。方法:使用生物信息学分析Ywhab与弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)的相关性。在小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞中感染逆转录病毒构建Ywhab基因过表达细胞系,并采用RT-qPCR和Western blot验证Ywhab的mRNA及蛋白(14-3-3β)水平;通过细胞计数法、CCK-8法和小鼠皮下成瘤实验检测Ywhab过表达对38B9细胞在体内外生长的影响;RT-qPCR和Western blot检测细胞凋亡相关蛋白的表达;应用蛋白质免疫共沉淀联合蛋白质谱(CoIP-MS)筛选与14-3-3β特异性结合的蛋白并采用Western blot及分子对接分析进行验证。结果:Ywhab基因在DLBCL中低表达,其低表达预示DLBCL患者的临床预后较差。与正常小鼠骨髓B细胞相比,Ywhab在38B9细胞中低表达。Ywhab过表达能在体内外诱导38B9细胞凋亡,促进凋亡蛋白Puma、Noxa和Bax的mRNA及蛋白表达,抑制抗凋亡蛋白Bcl2的mRNA及蛋白表达(P<0.05)。14-3-3β蛋白能特异性结合Hsp90aa1蛋白并抑制其表达,从而促进38B9细胞凋亡。结论:Ywhab能够显著诱导小鼠B细胞淋巴瘤38B9细胞凋亡,其机制可能是通过靶向抑制Hsp90aa1蛋白表达来实现的。

Hsa-miR9在伯基特淋巴瘤EBV^(+/-)细胞中的差异表达及其与BCL-6调控的关系

目的探究hsa-miR9在伯基特淋巴瘤细胞株EBV^+Raji/EBV-Ramous中差异表达及其与BCL-6的关系。方法荧光定量PCR检测hsa-miR9和BCL-6在EBV^+Raji和EBVRamous细胞中的表达;利用Oligofectamine 2000脂质体法将化学合成的hsa-miR9-inhibitor和随机序列转染高表达hsa-miR9的EBV^+Raji细胞(Raii-miR9-inhibitor组和Raji-CON组),hsa-miR9-mimics和相应的随机序列转染低表达hsa-miR9的EBVRamous细胞(Ramous-miR9-mimics组和Ramous-CON组);运用实时荧光定量PCR、Western blotting检测转染前后BCL-6的表达,AnnexinV/PI双染色法检测细胞凋亡率和观测凋亡细胞形态。结果 hsa-miR9和BCL-6在EBV^+Raji细胞的表达水平显著高于EBVRamous细胞(P<0.01);EBV^+Raji细胞经转染hsa-miR9-inhibitor 48 h后,BCL-6基因和蛋白水平的表达量均降低,而EBVRamous细胞经转染hsa-miR9-mimics 48 h后,BCL-6基因和蛋白水平的表达量均升高,与相应的随机序列组相比均有显著性差异(P<0.05);转染48 h后Raji-miR9-inhibitor组凋亡率明显低于Raji-CON组,Ramous-miR9-mimics组凋亡率明显高于Ramous-CON组,差异具有统计学意义(P<0.05);Raji-CON组和Ramous-miR9-mimics组可见明显凋亡细胞。结论 hsa-miR9正向调控伯基特淋巴瘤细胞株EBV^+Raji/EBVRamous细胞BCL-6的表达和凋亡。

长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18通过微RNA-497-5p/细胞周期蛋白E1轴调节弥漫性大B细胞淋巴瘤的增殖、凋亡和侵袭

目的 探讨长链非编码RNA人类白细胞抗原复合体18(lncRNA HCG18)调控微RNA-497-5p(miR-497-5p)/细胞周期蛋白E1(CCNE1)轴对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞增殖、凋亡和侵袭的影响。方法 实时荧光定量PCR(qRT-PCR)、蛋白质印迹法分别检测2018年5月至2021年5月收集的恩施土家族苗族自治州中心医院DLBCL病人淋巴组织、良性淋巴结增生病人的淋巴组织、人正常B细胞永生化细胞HMy2.CIR、DLBCL细胞系SU-DHL-1、OCI-LY8、U2932中HCG18、miR-497-5p表达及CCNE1蛋白表达,将OCI-LY8细胞分为Ct组(正常培养的OCI-LY8细胞)、pcDNA组(细胞转染过表达物阴性对照)、pcDNA-HCG18组(细胞转染HCG18过表达物)、si-NC组(细胞转染小干扰RNA阴性对照)、si-HCG18组(细胞转染HCG18小干扰RNA)、si-HCG18+inhibitorNC组(细胞转染HCG18小干扰RNA和抑制物阴性对照)、si-HCG18+miR-497-5p inhibitor组(细胞转染HCG18小干扰RNA和miR-497-5p抑制物),CCK-8法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡,Transwell检测细胞侵袭,蛋白质印迹法检测CCNE1、增殖细胞核抗原(PCNA)、Bcl-2相关X蛋白(Bax)、基质金属蛋白酶9(MMP-9)蛋白表达,双萤光素酶验证HCG18与miR-497-5p、miR-497-5p与CCNE1的关系。结果 在DLBCL淋巴组织和细胞中,HCG18、CCNE1蛋白高表达,miR-497-5p低表达,且在OCI-LY8细胞中HCG18、CCNE1蛋白表达上调最高,miR-497-5p表达下调最多(P<0.05),因此,以OCI-LY8细胞进行后续研究,与si-NC组比较,si-HCG18组HCG18(0.26±0.03比1.01±0.01)、CCNE1蛋白(0.45±0.03比1.44±0.19)表达降低,miR-497-5p(1.95±0.14比1.03±0.02)表达升高(P<0.05),与pcDNA组比较,pcDNA-HCG18组HCG18(1.96±0.23比1.02±0.01)、CCNE1蛋白(2.33±0.21比1.42±0.18)表达升高,miR-497-5p(0.28±0.02比1.02±0.02)表达降低(P<0.05),与siHCG18组、si-HCG18+inhibitor NC组比较,miR-497-5p表达降低(1.21±0.09比1.95±0.14、1.94±0.13),CCNE1蛋白(0.87±0.08比0.45±0.03、0.44±0.04)表达上调(P<0.05),沉默HCG18可抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭行为及PCNA、MMP-9蛋白表达,诱导细胞凋亡及Bax蛋白表达,而上调HCG18则呈相反趋势,下调miR-497-5p逆转了沉默HCG18对OCI-LY8细胞增殖、侵袭、凋亡的影响,HCG18靶向调控miR-497-5p/CCNE1。结论 沉默HCG18可能通过调控miR-497-5p/CCNE1抑制OCI-LY8细胞增殖、侵袭,诱导细胞凋亡。

分析MMP-9联合T淋巴细胞亚群及细胞因子在颞叶癫痫诊断中的价值

目的探讨与分析基质金属蛋白酶-9(MMP-9)联合T淋巴细胞亚群及细胞因子在颞叶癫痫中的价值。方法选取2020年12月—2023年6月滨州市第二人民医院收治的83例颞叶癫痫患者作为观察组,另选取同期来滨州市第二人民医院体检的83例健康者作为对照组,比较两组受检者MMP-9、T淋巴细胞亚群及细胞因子表达水平。分析MMP-9、T淋巴细胞亚群及细胞因子与颞叶癫痫的相关性,并建立受试者工作特征(ROC)曲线对颞叶癫痫的评估价值。结果观察组MMP-9、CD8^(+)、Th/Ts、肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-5(IL-5)、白细胞介素-2(IL-2)、白细胞介素-1β(IL-1β)明显高于对照组,CD4^(+)低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05);Spearman相关分析结果显示:MMP-9、CD8^(+)、Th/Ts、TNF-α、IFN-γ、IL-6、IL-5、IL-2、IL-1β与颞叶癫痫呈正相关,CD4^(+)与颞叶癫痫呈负相关,差异有统计学意义(P<0.05);MMP-9联合T淋巴细胞亚群及细胞因子对颞叶癫痫评估的敏感度和特异性达到94.24%和85.72%,阳性预测值为92.45%,阴性预测值为85.58%,AUC值为0.892。结论颞叶癫痫患者血清MMP-9、T淋巴细胞亚群及细胞因子与健康群体有显著差异,上述因子可能与颞叶癫痫的发生与发展高度相关,且MMP-9联合T淋巴细胞亚群及细胞因子对于颞叶癫痫具有重要评估价值。

B淋巴母细胞淋巴瘤伴t(9;22)(q34;q11.2)1例

患者男性,66岁,因发现双侧颈部肿块20余天入院,查体:侧颈部、腹股沟可触及多发肿大淋巴结,最大约2 cm×3 cm,压痛,与周围组织无粘连,肝脏肋下未触及,脾脏肋下约2 cm可触及。骨髓细胞学:骨髓增生明显活跃,淋巴细胞占86%,其中原始淋巴细胞占83.6%,胞核圆形、不规则形,扭曲折叠,核染色质疏松。初步诊断为淋巴瘤。患者发病后随访11个月,经VDCP+达沙替尼治疗1个疗程后完全缓解,经Hyper-CVAD-A+达沙替尼化疗后部分缓解,为预防中枢神经系统白血病给予鞘内注射,未合并感染,无明显骨髓抑制,一般情况尚可,未见累及骨髓及其他部位转移。

MMP-9、LMP-1在鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中的表达及意义

目的通过检测鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中的基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、潜伏膜蛋白-1(LMP-1)蛋白的表达及分布情况,探讨两者间的相互关系,为临床治疗和预后判断提供依据。方法采用免疫组化S-P法检测20例鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中MMP-9、LMP-1的表达情况,同时与组织芯片中其他类型淋巴瘤及10例淋巴组织反应性增生进行比较。结果鼻NK/T细胞淋巴瘤组中MMP-9、LMP-1阳性表达率分别为90.0%(18/20)和45.0%(9/20);组织芯片包含的B细胞淋巴瘤组及外周T细胞淋巴瘤组MMP-9的阳性表达率分别为61.1%(11/18)、50.0%(6/12),LMP-1的阳性表达率分别为11.1%(2/18)、25.0%(3/12)。淋巴组织反应性增生组未见LMP-1的阳性表达,MMP-9的阳性表达率为30.0%(3/10)。鼻NK/T细胞淋巴瘤组MMP-9、LMP-1阳性表达率与淋巴组织反应性增生组比较差异有统计学意义(P<0.05),MMP-9与LMP-1表达呈正相关(r=0.327,P<0.05)。结论MMP-9在鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中存在高表达,与EB病毒感染关系密切,LMP-1能上调MMP-9表达,可能与鼻NK/T细胞淋巴瘤的高度侵袭性有关。

弥漫大B细胞淋巴瘤中SAMD9L的表达及意义

目的探讨SAMD9L在弥漫大B细胞淋巴瘤(diffuse large B cell lymphoma,DLBCL)中的表达及临床意义。方法采用免疫组化EnVision法检测135例DLBCL中SAMD9L的表达,分析SAMD9L表达与DLBCL临床病理特征、治疗反应及总生存期(overall survival,OS)之间的相关性。结果SAMD9L表达与患者年龄(P=0.049)、B症状(P=0.003)、国际预后指数(international prognostic index,IPI)评分(P=0.026)相关,其在年龄>60岁、有B症状以及高IPI评分患者中表达较高。但SAMD9L低表达组和高表达组患者在性别、结外累及、Hans分型、Ann Arbor分期、美国东部肿瘤协作组(Eastern Cooperative Oncology Group,ECOG)体能状态(performances status,PS)评分、Ki-67增殖指数、骨髓浸润、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)水平、白蛋白(albumin,ALB)水平以及治疗反应方面差异无显著性(P均>0.05)。Kaplan-Meier生存曲线分析显示,SAMD9L高表达组较低表达组的OS显著缩短(P<0.001)。单因素和多因素回归分析显示,SAMD9L表达水平是影响OS的相关因素,但非预后的独立影响因素(P=0.710)。结论SAMD9L在患者年龄>60岁、有B症状以及高IPI评分患者中表达较高。SAMD9L高表达组较低表达组的OS显著缩短,SAMD9L表达水平是影响DLBCL患者OS的相关因素,但非预后的独立影响因素。

黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9表达及其与EBV感染的关系

目的探讨MMP9在黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤的表达及其与EBV感染的关系。方法用免疫组化SP法和原位杂交法检测59例黏膜NK/T以及成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER表达情况,统计MMP9表达与EBV感染的关系。结果黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤MMP9和EBER阳性率分别为83.05%和72.88%,EBER阳性率与组织学类型有关(P<0.01);MMP9和EBER表达与临床分期和生存期均无显著性关系(P>0.05),MMP9表达与EBV感染无明显相关性(P>0.05)。结论黏膜NK/T和成熟T细胞淋巴瘤发生与EBV感染密切相关,它可能通过间接上调MMP9等癌基因的表达而促进肿瘤的发生和发展。防治EBV感染有助于预防淋巴瘤的发生和发展。

T细胞非霍奇金淋巴瘤CCR7、MMP-9及VEGF表达意义初探

目的:探讨趋化因子受体-7(CCR7)、基质金属蛋白酶(MMP)-9及血管内皮生长因子(VEGF)在T细胞非霍奇金淋巴瘤(T-NHL)中的表达及其临床意义。方法:收集41例T-NHL(T-NHL组)及19例反应性增生淋巴结(对照组)标本及其临床病理资料,应用免疫组织化学染色检测CCR7、MMP-9及VEGF的表达,并分析其表达与临床病理指标之间的关系。结果:CCR7、MMP-9及VEGF在T-NHL组中的高表达率分别为82.9%、87.8%及51.2%,均高于其在反应性增生淋巴结组织中的高表达率,差异具有统计学意义(均P<0.01)。多部位发生T-NHL患者CCR7、MMP-9的高表达率高于单部位发生患者,差异有统计学意义(均P<0.05)。CCR7、MMP-9及VEGF的表达之间无明显相关性(均P>0.05)。结论:T-NHL中存在CCR7、MMP-9及VEGF的高表达,这些指标的高表达对于提示预后较差具有一定的价值。

miR-9靶向FOXP1对弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞的作用及机制研究

目的探讨FOXP1上游靶标miR-9对弥漫性大B细胞淋巴瘤(DLBCL)细胞的作用及机制。方法Targetscan分析miR-9与FOXP1的结合,miR-9与FOXP1结合通过荧光素酶基因报告实验验证;以转染mimic Con为对照组,转染mimic miR-9过表达miR-9后,Western blot检测FOXP1表达变化;实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测人DLBCL细胞OCI-Ly3和人B淋巴母细胞IM9中miR-9的表达水平;过表达miR-9后,体外检测OCI-Ly3的增殖以及侵袭能力的变化。结果转染miR-9后,mimic miR-9+FOXP13′UTR WT组的荧光素酶活性低于转染mimic Con+FOXP13′UTR WT组,差异有统计学意义(P<0.0001);过表达miR-9后,mimic miR-9组的FOXP1表达水平低于mimic Con组,差异有统计学意义(P<0.05);miR-9在人DLBCL细胞系OCI-Ly3细胞中的表达水平低于B淋巴母细胞,差异有统计学意义(P<0.05);过表达miR-9后,OCI-Ly3细胞的增殖和侵袭能力低于mimic Con组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论miR-9下调通过靶向FOXP1促进弥漫性大B细胞淋巴瘤细胞的增殖和侵袭。

基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤中的表达及其临床意义

目的:研究基质金属蛋白酶-9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)和血管内皮生长因子(vascular endothelial growthfactor,VEGF)在视网膜母细胞瘤(retinoblastoma,RB)中的表达及其与RB分化程度和视神经浸润的关系,探讨它们在RB浸润、转移过程中的作用和临床意义。方法:采用免疫组化方法检测47例RB中MMP-9和VEGF的表达。结果:47例RB中MMP-9和VEGF的阳性表达率分别为46.8%和78.7%。未分化型RB中MMP-9和VEGF的阳性表达均高于分化型(P<0.05);有视神经浸润的RB中MMP-9和VEGF的阳性水平均高于无视神经浸润的RB(P<0.005和P<0.05)。RB中MMP-9和VEGF的表达呈正相关关系(P<0.05)。结论:RB中MMP-9和VEGF高表达与RB的浸润和转移相关,且MMP-9表达与VEGF表达存在相关性。联合检测MMP-9和VEGF的表达可作为反映RB浸润、转移潜能的生物学指标,有助于筛选转移高危病例及评价患者预后。

MMP-9、VEGF在弥漫大B细胞淋巴瘤中的表达及意义

目的探讨MMP-9、VEGF在弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)中的表达及意义。方法采用免疫组化法检测65例DLBCL和20例淋巴结反应性增生中MMP-9、VEGF的表达水平,探讨它们与DLBCL发病及侵袭进展的关系。结果 MMP-9、VEGF在DLBCL中表达率分别为78.46%(51/65)、67.69%(44/65),均高于淋巴结反应性增生中的表达,差异均有统计学意义(P<0.05)。MMP-9在Ⅲ、Ⅳ期患者阳性表达率明显高于Ⅰ、Ⅱ期患者(P<0.05),但与伴发症状、发病部位无关(P>0.05);VEGF表达阳性率与临床分期及伴发症状有关(P<0.05),但与发病部位无关(P>0.05);MMP-9、VEGF的表达无相差异性(2=0.94,P>0.05)。结论 MMP-9、VEGF在DLBCL中的表达高于淋巴结反应性增生,可能与淋巴组织恶变有关。

基质金属蛋白酶-9、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1和血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤组织中的表达

目的探讨视网膜母细胞瘤(RB)组织中基质金属蛋白酶-9(MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制剂-1(TIMP-1)和血管内皮生长因子(VEGF)的表达及其与新生血管形成、视神经浸润和RB分化程度的关系。方法收集2010年1月至2014年3月在湖北医药学院附属襄阳医院接受治疗的RB患者的RB组织标本和癌旁正常组织标本各30例,采用免疫组织化学法测定VEGF、TIMP-1和MMP-9的表达。结果 RB组织中MMP-9和VEGF的阳性表达率显著高于癌旁正常组织(P<0.01);但RB组织与癌旁正常组织中TIMP-1的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。未分化型RB组织中MMP-9和VEGF的阳性表达率显著高于分化型RB(P<0.05,P<0.01);未分化型RB组织与分化型RB组织中TIMP-1的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。有视神经浸润的RB组织中MMP-9和VEGF的阳性表达率显著高于无视神经浸润的RB(P<0.01);有视神经浸润与无视神经浸润的RB组织中TIMP-1的阳性表达率比较差异无统计学意义(P>0.05)。结论 VEGF和MMP-9可能与RB的发生发展、新生血管形成、视神经浸润及RB分化程度有关。

基质金属蛋白酶-2、基质金属蛋白酶-9和血管内皮生长因子在视网膜母细胞瘤中的表达及意义

目的:研究基质金属蛋白酶-2(Matrix metalloproteinase-2,MMP-2)、基质金属蛋白酶-9(Matrixmetalloproteinase-9,MMP-9)和血管内皮生长因子(Vascular endothelial growth factor,VEGF)在视网膜母细胞瘤(Retinoblastoma,RB)中的表达及其与RB分化程度和视神经浸润的关系,探讨它们在RB浸润、转移过程中的作用和临床意义。方法:采用免疫组化方法检测40例RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的表达。结果:40例RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达率分别为52.5%、57.5%和72.5%。未分化型RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性表达均高于分化型(P<0.05);有视神经浸润的RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的阳性水平均高于无视神经浸润的RB(P<0.05)。RB中MMP-2、MMP-9和VEGF的表达呈正相关关系(P<0.05)。结论:RB中MMP-2、MMP-9和VEGF高表达与RB的浸润和转移相关,且MMP-2、MMP-9表达与VEGF表达存在相关性。联合检测MMP-2、MMP-9和VEGF的表达可作为反映RB浸润、转移潜能的生物学指标,有助于筛选转移高危病例及评价患者预后。

MMP-9及HIF-1α在鼻NK/T细胞淋巴瘤表达中的作用研究

目的：研究鼻NK/T细胞淋巴瘤组织中基质金属蛋白酶-9（MMP-9）、缺氧诱导因子-1ɑ（HIF-1ɑ）的表达情况及其与患者临床病理特征的关系。方法：选取右江民族医学院附属医院经病理检查确诊为鼻NK/T细胞淋巴瘤患者,收集病理组织蜡块标本46例（病例组）、同期内镜检查取鼻甲黏膜组织经病理学证实为黏膜慢性炎症标本20例（对照组）,分别采用HE染色法和免疫组织化学法处理两组标本,观察两组标本的病理形态、MMP-9及HIF-1ɑ的表达差异,并分析其与患者临床病理特征的关系。结果：病例组的HIF-1α表达阳性率67.39%（31/46）、对照组表达阳性率为6.52%（3/20）,病例组的HIF-1ɑ表达显著的高于对照组（P〈0.05）。病例组的MMP-9表达阳性率71.74%（33/46）、对照组表达阳性率为6.52%（3/20）,病例组的MMP-9表达显著的高于对照组（P〈0.05）。HIF-1ɑ、MMP-9在阳性表达在Ann Arbor分期（Ⅲ～Ⅳ期）、发生淋巴结转移、血管浸润鼻NK/T细胞淋巴瘤患者的患者组织中出现高表达（P〈0.05）。结论：鼻NK/T细胞淋巴瘤患者组织中HIF-1α、MMP-9呈现高表达,并且与患者发生Ann Arbor分期（Ⅲ～Ⅳ期）、发生淋巴结转移、血管浸润具有一定的关系。

TIM-3配体galectin-9诱导NK/T细胞淋巴瘤细胞的凋亡及其机制

目的:观察TIM-3在NK/T细胞淋巴瘤(natural killer/T cell lymphoma,NK/TCL)细胞株中的表达及其配体galectin-9(GAL-9)诱导瘤细胞凋亡的作用及其部分机制。方法:Western blotting测定NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6、SNT-8和健康人外周血NK细胞中TIM-3的表达;采用不同质量浓度重组人GAL-9(rh GAL-9)作用于NK/TCL细胞株24 h后,通过CCK-8法检测细胞增殖活性;流式细胞术Annexin-V/PI双染法检测瘤细胞凋亡;Western blotting检测caspase-3、PARP及其剪接体和MAPK信号通路蛋白磷酸化表达水平变化。结果:NK/TCL细胞株SNK-1、SNK-6和SNT-8的TIM-3表达较健康人外周血NK细胞显著增高,其中SNK-1、SNK-6细胞株与对照组相比差异具有统计学意义(P<0.05);CCK-8检测结果显示,rh GAL-9对NK/TCL细胞增殖活力具有明显抑制作用,并有浓度依赖性;流式细胞术检测显示,rh GAL-9可诱导3种NK/TCL细胞株凋亡;Western blotting结果显示,cleaved-caspase-3、cleaved-PARP蛋白表达量增高,MAPK通路中JNK蛋白磷酸化水平升高。结论:TIM-3在NK/TCL细胞株中异常高表达,其配体GAL-9可诱导细胞凋亡,其机制可能与JNK磷酸化水平升高相关。

骨巨细胞瘤MMP-9、血管内皮生长因子表达及其意义

[目的]探讨骨巨细胞瘤MMP鄄9、VEGF的表达及其意义。[方法]采用免疫组化法检测82例骨巨细胞瘤标本MMP鄄9、VEGF、PCNA、CD34表达,分析其与骨巨细胞瘤临床病理特性的关系。[结果]MMP鄄9、VEGF的阳性表达率分别为65.85%、57.32%。复发与未复发组间、转移与未转移组间VEGF、MMP鄄9的表达差异有显著性(P<0.05)。多因素Logistic回归分析显示VEGF、MMP鄄9及手术方式对复发有显著影响(P<0.05)。[结论]MMP鄄9、VEGF的表达与骨巨细胞瘤的血管生成、细胞增殖、转移及复发有关,可作为判定骨巨细胞瘤复发潜能、指导临床治疗的参考指标。

合并2型糖尿病对椎间盘退变患者血清半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9、B细胞淋巴瘤2表达水平的影响及其临床意义

目的探讨合并2型糖尿病对椎间盘退变患者血清半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶9(Caspase-9)、B细胞淋巴瘤2(Bcl-2)表达水平的影响及其临床意义。方法根据是否合并2型糖尿病将343例椎间盘退变患者分为2型糖尿病组216例,非2型糖尿病组127例。比较两组血清Caspase-9、Bcl-2及炎症因子表达水平,以及腰椎间盘退变程度,分析2型糖尿病合并椎间盘退变患者血清Caspase-9、Bcl-2水平与椎间盘退变程度Pfirrmann评分的相关性以及两组患者Caspase-9和Bcl-2水平的相关性。结果 2型糖尿病组患者血清Caspase-9、白细胞介素(IL)-6、IL-18、C反应蛋白水平均高于非2型糖尿病组,血清Bcl-2水平低于非2型糖尿病组;2型糖尿病组患者L_(1/2)、L_(2/3)、L_(3/4)、L_(4/5)、L_(5)/S_(1)节段椎间盘Pfirrmann评分均高于非2型糖尿病组。2型糖尿病合并椎间盘退变患者血清Caspase-9水平与L_(1/2)、L_(2/3)、L_(3/4)、L_(4/5)、L_(5)/S_(1)节段椎间盘Pfirrmann评分均呈正相关,血清Bcl-2水平与L_(1/2)、L_(2/3)、L_(3/4)、L_(4/5)、L_(5)/S_(1)节段椎间盘Pfirrmann评分均呈负相关;两组患者血清Caspase-9水平与Bcl-2水平均呈负相关(均P<0.05)。结论患有2型糖尿病的椎间盘退变患者血清Caspase-9水平升高、Bcl-2水平降低,二者与椎间盘退变程度有关,可能共同调节细胞凋亡,从而加重椎间盘退变的程度。

淋巴瘤细胞AXIN、β-catenin、MMP7和MMP9 mRNA、蛋白表达水平及相互关系探讨

目的:探讨淋巴瘤细胞轴抑制因子(AXIN)、β-链蛋白(β-catenin)、基质金属蛋白酶-7(MMP-7)和基质金属蛋白酶-9(MMP-9)mRNA及其蛋白表达水平和相互关系。方法:应用Western blot及RT-PCR法测定多株淋巴瘤细胞中MMP-7、MMP-9、β-catenin和AXIN的表达。对AXIN相对低表达的淋巴瘤细胞进行分组,然后用pcDNA5-His-β-catenin及pCMV5-HA-AXIN进行瞬时转染,用Western blot及RT-PCR法测定淋巴瘤细胞中MMP-7、MMP-9、β-catenin蛋白及其mRNA表达。通过Transwell浸润实验分析AXIN稳定高表达组、干扰AXIN稳定高表达组、空白对照组细胞浸润和迁移能力。结果:多株淋巴瘤细胞株AXIN与MMP-7、MMP-9和β-catenin表达存在负相关关系。人恶性B淋巴瘤细胞株Raji在AXIN表达上调后,MMP-7、MMP-9和β-catenin mRNA表达均无明显改变,而MMP-7、MMP-9和β-catenin蛋白表达均明显下调(P<0.05)。在β-catenin表达上调后,MMP-7、MMP-9蛋白及其mRNA均明显上调(P<0.05)。干扰AXIN稳定高表达组细胞的AXIN后,MMP-7、MMP-9和β-catenin mRNA表达均无明显改变,而MMP-7、MMP-9和β-catenin蛋白表达均明显上调(P<0.05)。干扰AXIN稳定高表达组细胞的β-catenin后,MMP-7和MMP-9蛋白及其mRNA表达均明显下调(P<0.05)。结论:淋巴瘤细胞AXIN表达上调可导致β-catenin表达降低,进而MMP-7和MMP-9表达明显降低,从而起到阻滞淋巴瘤细胞浸润及迁移的作用。