非小细胞肺癌患者血浆游离DNA含量和完整性检测的临床意义

目的评估血浆游离DNA含量和完整性(DNA integrity)在非小细胞肺癌(NSCLC)诊疗中的应用价值。方法收集102例NSCLC患者、30例肺良性疾病患者及30例体检健康者的外周血标本,并对其中44例NSCLC手术患者进行随访。提取血浆游离DNA,用SYBR Green染料实时荧光定量PCR检测血浆游离DNA中长度分别为100 bp及241 bp的人端粒酶逆转录酶(h TERT)目的基因的含量,计算血浆游离DNA完整性,并分析其与临床病理参数的关系。结果 100 bp、241 bp血浆游离DNA含量及DNA完整性在NSCLC、肺良性疾病组及健康对照组中差异有统计学意义(H分别为21.947、52.825、27.110,P均<0.01),NSCLC患者手术前后100 bp、241 bp血浆游离DNA含量和术前游离DNA完整性差异有统计学意义(H分别为3.259,5.149,2.609,P均<0.01)。血浆游离DNA完整性与NSCLC患者的年龄、性别、吸烟状况、临床分期、病理类型、肿瘤细胞分化程度、有无转移及肿瘤大小均无明显相关性。结论血浆游离DNA含量和完整性检测在NSCLC诊疗中有一定的临床价值,可成为NSCLC早期诊断及预后监测的指标。

血浆DNA含量及完整性在早期胃癌诊断中的价值

目的:探讨血浆DNA含量及完整性指数在早期胃癌诊断中的临床应用价值。方法:收集28例Ⅰ/Ⅱ期胃癌术前患者、18例胃良性疾病和28例正常个体外周血标本。通过扩增重复短片段ALU115和长片段ALU247,检测血浆游离DNA含量及完整性指数。结果:血浆ALU115片段含量在早期胃癌组较良性组和正常组明显升高(P=0.0017)。但是完整性指数在三组之间未见到统计学差异。结论:联合检查ALU115和传统肿瘤标记物可以有效筛查早期胃癌。血浆DNA的含量在早期胃癌的筛查中有临床应用价值。

血浆游离DNA完整性指标在恶性甲状腺肿瘤中的诊断价值

目的探讨血浆中细胞游离DNA(cfDNA)浓度和cfDNA完整性指标作为一种非侵入性方法用于术前甲状腺癌诊断的作用。方法收集2017年2月至4月郑州大学第一附属医院甲状腺外一科收治的75例甲状腺肿瘤患者血浆,其中良性甲状腺瘤患者31例,恶性甲状腺瘤患者44例,用ALU-荧光定量聚合酶链反应(PCR)方法检测良恶性肿瘤患者血浆中cfDNA浓度和cfDNA完整性指标,并比较其在这两组中的差异。用受试者工作特征(ROC)曲线研究将血浆中cfDNA浓度和cfDNA完整性指标作为恶性甲状腺肿瘤诊断的可行性。分类资料的比较采用χ2检验。结果恶性甲状腺肿瘤患者血浆中以ALU115为引物定量的cfDNA总浓度为4132μg/L(1055~9372μg/L),良性组1491μg/L(387~3031μg/L);cfDNA完整性指标为0.65(0.56~0.83),良性组0.39(0.25~0.52);恶性组均显著高于良性组(P<0.01,P<0.01)。ROC曲线显示当联合超声检查和血浆cfDNA完整性指标对恶性肿瘤进行诊断时,其灵敏度、特异性、准确率、阳性预测值PPV和阴性预测值NPV分别为95.0%、94.0%、95.0%、89.4%和73.0%。均显著高于以超声、cfDNA总浓度和cfDNA完整性指数单独诊断。结论对于甲状腺肿瘤患者,应首先使用甲状腺超声检查,对于怀疑恶性甲状腺肿瘤的患者,血浆中cfDNA完整性指数有助于恶性甲状腺肿瘤的诊断,从而减少细针穿刺病理活检等有创检查。

血浆游离DNA含量及完整性对胰腺癌的诊断价值研究

目的研究血浆游离DNA含量与完整性指数对胰腺癌的诊断价值。方法收集正常人群及胰腺癌患者血液标本,提取基因组DNA,建立游离DNA定量标准曲线;提取血浆游离DNA,用SYBR Green荧光定量PCR法对其进行含量及完整性指数检测,分析2组之间的差异,用ROC曲线判断分析其对胰腺癌的诊断能力。结果胰腺癌组游离DNA浓度及完整性指数均高于对照组,2组血浆游离DNA含量及完整性差异有统计学差异(Z=-2.92,Z=-6.07,P<0.05)。游离DNA浓度及完整性指数对胰腺癌诊断ROC曲线下面积分别为0.669(95%CI:0.563~0.776)、0.806(95%CI:0.723~0.888)。结论血浆游离DNA浓度及完整性指数均对胰腺癌具有一定的诊断价值,完整性指数的诊断能力虽优于游离DNA浓度,但诊断效果并不理想,尚需深入研究更为有效的胰腺癌的诊断方法。

血清游离DNA浓度及完整性在食管癌诊断中的价值

目的探讨血清游离DNA(cf-DNA)浓度及完整性在食管癌诊断中的价值。方法收集68例食管癌患者、36例食管良性病变患者和45例健康体检者的静脉血标本。采用基于Alu序列的实时荧光定量PCR法(Alu-qPCR)扩增重复短片段Alu115和长片段Alu247,检测血清cf-DNA浓度和完整性指数,血清DNA的总水平以Alu115的含量表示,完整性指数以Alu247/Alu115表示。采用化学发光法检测血清癌胚抗原(CEA)和鳞状细胞癌抗原(SCC)浓度。分析血清cf-DNA浓度和完整性指数与食管癌患者临床病理特征以及CEA和SCC的关系。采用受试者工作特征曲线(ROC)评价血清cf-DNA浓度、完整性指数、CEA和SCC的诊断效能。结果食管癌组、食管良性病变组、健康对照组血清Alu115的含量分别为1 162.0(817.8~1 652.4)、496.7(310.9~777.9)和432.3(198.4~634.1)ng/ml,Alu247/Alu115分别为0.57(0.51~0.65)、0.43(0.30~0.51)和0.42(0.33~0.48)。食管癌组血清Alu115含量和Alu247/Alu115均明显高于健康对照组和食管良性病变组(均P<0.01),食管良性病变组与健康对照组血清Alu115含量和Alu247/Alu115的差异无统计学意义(均P>0.05)。食管癌患者血清Alu115含量与患者年龄、性别、肿瘤分化程度、美国癌症联合委员会(AJCC)分期及有无淋巴结转移无关(均P>0.05),但Ⅲ期患者的血清Alu247/Alu115高于Ⅰ~Ⅱ期患者(P<0.05),Ⅳ期患者高于Ⅲ期患者(P<0.05)。食管癌患者血清Alu115含量与CEA和SCC的水平无关(均P>0.05),Alu247/Alu115与CEA和SCC的水平也无关(均P>0.05)。血清Alu115含量和Alu247/Alu115诊断食管癌的ROC曲线下面积分别为0.867和0.854,均高于CEA(0.622)和SCC(0.753),Alu115和Alu247/Alu115联合CEA和SCC检测时,诊断食管癌的灵敏度可分别提高到95.6%和94.1%。结论血清cf-DNA浓度和完整性检测有助于食管癌的早期辅助诊断和病程监测,对食管癌的诊断价值优于CEA和SCC。

MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体与急性胰腺炎患者预后的相关性

探究改良CT严重指数(MCTSI)及外周血游离DNA/中性粒细胞胞外诱捕网(cf-DNA/NETs)、D-二聚体与急性胰腺炎(AP)病情程度和预后的相关性分析。选取175例AP患者为研究对象,根据病情严重程度分为轻症AP组(75例)、中重症AP组(56例)、重症AP组(44例);根据患者3个月内生存情况,可分为生存组(163例)和死亡组(12例)。比较不同严重程度和不同预后患者MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体水平,并分析MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体对预后的评估价值。结果显示,重症AP组患者MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体水平高于中重症AP组,中重症AP组高于轻症AP组,差异均有统计学意义(P<0.05)。死亡组MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体水平高于存活组,差异有统计学意义(P<0.05)。ROC曲线分析显示,MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体预测AP患者预后死亡的AUC分别为0.950、0.997、0.974,采用Z检验比较各指标AUC差异,均无统计学意义(P>0.05)。随着AP病情的加重,MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体呈升高趋势,并且MCTSI、cf-DNA/NETs、D-二聚体与患者预后死亡关系密切,可作为评估预后死亡的参考指标。

弥漫大B细胞淋巴瘤患者预后因素的研究进展

弥漫大B细胞淋巴瘤(DLBCL)是成年人侵袭性非霍奇金淋巴瘤(NHL)中最常见类型, 近年来发病率呈上升趋势。DLBCL患者的分子生物学异常和组织形态学改变具有高度异质性, 因此其预后相关因素较多。国际预后指数(IPI)、细胞来源(COO)等被广泛应用于DLBCL患者预后评估, 而循环游离DNA(cfDNA)的动态变化、外周血中维生素D或者白蛋白水平、系统性炎症等具有潜在预测价值的评估方法亦逐步成为国内、外研究热点。IPI是单纯化疗时代基于患者临床特征的预后评估方法, 简单易行。但是, 进入免疫治疗及靶向治疗时代, IPI评估患者预后的准确性不断受到冲击。COO可更为精准地识别患者疾病类型, 但是较高的标本质量要求和昂贵的检测费用限制了其应用。对于cfDNA、维生素D、白蛋白、相关炎性指标水平, 通过外周血即可获取标本进行检测, 操作简便、经济, 可以弥补IPI和COO等方法的不足。笔者拟就DLBCL相关预后因素的研究进展进行总结, 旨在为指导临床选择最佳预后评价方法提供理论依据。