食管鳞癌中人乳头瘤病毒16型E6、E7和细胞特异性增强子片段的检测

目的:检测食管鳞癌组织中人乳头瘤病毒(HPV)16E6、E7基因和细胞特异性增强子片段(CTSE)。方法:采用聚合酶链反应法(PCR)检测40例食管鳞癌和20例正常食管黏膜中HPV16E6、E7基因和病毒长控制区内(long control region,LCR)的细胞型特异性增强子(cell type specific enhancer,CTSE)。结果:在40例食管鳞癌中,HPV16的E6、E7基因和CTSE片段的检出率分别是37.5%(15/40)、42.5%(17/40)和40%(16/40),20例正常食管黏膜中E6、E7和CTSE的检出率分别为0%(0/20)、0%(0/20)和5%(1/20),两者均存在显著性差异(P<0.05)。CTSE片段分别与E6和E7基因有明显相关性(P<0.05)。食管鳞癌中E6、E7基因及CTSE的检出率在患者不同性别、年龄、肿瘤浸润程度、淋巴结转移和组织学分级肿瘤中差异均无显著性(P>0.05)。结论:E6和E7基因与CTSE片段共存于HPV16感染的食管鳞癌组织中,三者可能与食管鳞癌的发生和发展有关。

游离型HPV16细胞类型特异性增强子片段的变异对启动子活性的影响

目的 研究宫颈癌中游离型HPV16中细胞特异性增强子（cell-type specific enhancer,CTSE）片段的变异对启动子P97活性的影响,探讨CTSE片段变异与游离型HPV16致癌机制的关系.方法 分别构建含HPV16突变型及野生型CTSE片段的重组报道基因载体（pCAT3-Promoter）表达系统,利用脂质体将重组的报道基因载体转染HeLa细胞;ELISA法测定细胞中CAT蛋白表达量的变化,了解变异CTSE片段对启动子活性的影响.结果 与无增强子的CAT报道质粒pCAT3-Promoter相比,插入HPV16 CTSE序列的pCAT3-Promoter重组报道质粒CAT蛋白表达量增加1.5 ～2.5倍;插入突变型CTSE序列的报道载体与插入野生型CTSE序列的报道载体相比,报道基因CAT蛋白表达量增加了约1.6倍.结论 陕西地区宫颈癌组织中HPV16 YY1位点突变的CTSE序列可激活启动子活性,YY1位点的突变与游离型HPV16 DNA致宫颈癌有密切关系.