不同基质蛋白对小鼠胚胎干细胞生殖细胞分化相关基因表达的影响

目的:探讨不同基质蛋白对小鼠胚胎干细胞(mouse embryonic stem cells,mESCs)分化形成拟胚体(embry-oid bodies,EBs)后生殖细胞分化相关基因表达的影响及机制。方法:mESCs分化形成EBs 3 d后接种于不同基质蛋白包被的培养皿中,包括人工基底膜(matrigel,M组)、纤维连接蛋白(fibronectin,F组)、层粘蛋白(laminin,L组)、胶原(collagen,C组)和非生物活性底物琼脂糖(agarose,A组),同时设不加任何基质蛋白的空白对照组(B组)。RT-PCR检测EBs在不同基质蛋白上d1～d4期间生殖细胞分化相关基因的表达,以及mESCs内源性基质蛋白FN(fibronectin)、LN(laminin)以及整合素受体β1基因的表达。结果:L组和F组EBs易贴壁分化,RT-PCR结果也证实原始生殖细胞(PGCs)分化基因Blimp-1、Stella、Mvh和减数分裂启动基因Stra8在L组和F组表达总体趋势为逐渐增强;M组和C组的表达趋势不明显;A组基因表达水平整体偏低;空白对照B组基因表达水平整体偏高但均呈下降趋势。L组和空白对照组细胞表达内源性基质蛋白FN、LN以及整合素受体β1。结论:层粘蛋白/β1信号途径可能对mESCs向PGCs分化具有指导作用,外源性层粘蛋白可能通过其受体β1亚单位传递诱导信号,调节mESCs来源的EBs向PGCs分化,FN可能通过其他整合素受体亚单位发挥作用。无任何外源性基质蛋白时,自身分泌的内源性基质蛋白也促进细胞分化。

腹膜后淋巴结清扫与化学药物治疗在睾丸非精原细胞生殖细胞瘤治疗中的选择:孰优孰劣?

腹膜后淋巴结清扫（retroperitoneal lymph node dissection，RPLND）以及化学药物治疗均为睾丸非精原细胞生殖细胞肿瘤（nonseminomatous germ cell tumor，NSGCT）患者睾丸切除术后重要的初始治疗手段，

睾丸恶性生殖细胞来源肿瘤的CT表现

目的:探讨睾丸恶性生殖细胞来源肿瘤的CT特征,提高对该类疾病的认识。方法:回顾性分析44例经手术病理证实的睾丸恶性生殖细胞来源肿瘤的CT表现。结果:44例均为单发,23例右侧,21例左侧;精原细胞瘤22例,卵黄囊瘤7例,胚胎性癌4例,混合性生殖细胞肿瘤11例。CT表现为大小不等实性肿块,肿块密度不均,内见不同程度囊变坏死,未见明确钙化及脂肪成分;边缘不规则、呈分叶状,并具有侵犯邻近组织器官及远处转移等恶性肿瘤征象。增强扫描示7例卵黄囊瘤实性成分呈明显不均匀渐进性强化;余肿块实性成分呈不同程度强化,囊性坏死区无强化。结论:睾丸恶性生殖细胞来源肿瘤的CT表现具有一定的特征性,结合临床资料尤其是血清甲胎蛋白,有助于提高该类疾病的诊断准确率,但确诊仍依靠组织病理学检查。

弥漫播散性室管膜下生殖细胞瘤1例

患者男,29岁,视物成双伴视力下降半年,头痛伴双眼胀痛1月余,头痛加重2周,1周前非喷射性呕吐1次,无发热;既往体健。专科检查:双眼直接及间接对光反射迟钝,上视不能,左眼外展不及边,双眼视乳头水肿。实验室检查:血清人绒毛膜促性腺激素0.55 mIU/ml。腰椎穿刺提示脑脊液压力>300 mmH_(2)O。

儿童原发性恶性颅外生殖细胞肿瘤复发的风险因素分析

目的探讨儿童原发性恶性颅外生殖细胞肿瘤(MGCT)复发的危险因素。方法回顾性分析2010年1月—2019年12月郑州大学第一附属医院诊断并治疗MGCT患儿的临床资料,使用Logistic回归法分析其复发的高危因素;使用Kaplan-Meier法统计其总生存率(OS)、无事件生存率(EFS)。结果共109例MGCT患儿,5年的OS率、EFS率分别为(91.3±2.8)%、(86.5±3.4)%;复发率为12.8%,主要的复发部位为骶尾部(9/14)。复发组与未复发组相比,在发病部位(χ^(2)=18.45,P<0.01)、COG分期(χ^(2)=11.32,P<0.01)、是否转移(χ^(2)=12.80,P<0.01)、肝转移(χ^(2)=15.29,P<0.01)和肺转移(χ^(2)=9.57,P<0.001)等方面存在差异。Logistic回归分析示骶尾部为其复发的独立危险因素;复发组的OS(59.1±1.4)%低于未复发组(95.7±2.1)%;未完整切除肿瘤组的OS(65.8±1.4)%低于完整切除组(94.5±2.4)%,差异均有统计学意义。结论复发、未完整切除肿瘤的MGCT患儿预后差,骶尾部为MGCT患儿复发的独立危险因素。

貌似原发性中枢神经系统淋巴瘤的生殖细胞瘤一例

颅内生殖细胞瘤(intracranial germinoma)是一种源于原始胚胎细胞的脑肿瘤,好发于儿童和青少年,多发生于松果体、鞍上区,少部分发生于脑实质内如基底节区,占原发性中枢神经系统肿瘤的1%~2%[1]。原发性中枢神经系统淋巴瘤(primary central nervous system lymphoma,PCNSL)是一种累及脑实质。

基底节区生殖细胞瘤的诊断及鉴别诊断

目的总结并分析基底节区生殖细胞瘤的临床及影像学特征,提高对该病的早期诊断水平。方法收集2013年1月至2023年9月北京协和医院收治的基底节区生殖细胞瘤患者的临床及影像资料,对其进行回顾性分析。结果18例基底节区生殖细胞瘤患者(男16,女2)多表现为偏侧肢体无力。所有患者AFP均正常,7例(7/18)血清β-HCG升高,8例(8/15)脑脊液β-HCG升高。共发现19个病灶(1例双侧),MRI表现为Ⅰ型的有7例,T2WI呈斑片状稍高信号,无强化;7例为Ⅱ型,表现为斑片状、类圆形T1WI低信号,T2WI高信号,结节状强化(病灶<3cm);5例为Ⅳ型,表现为囊实性团块影,显著强化(病灶≥3cm)。14例(14/18)出现同侧大脑脚萎缩,8例(8/18)出现同侧大脑半球萎缩。结论基底节区生殖细胞瘤好发于10-14岁男性,影像分型不同但各具特点,结合偏侧肢体无力的临床表现及血清和脑脊液肿瘤标志物(AFP、β-HCG)检查可早期诊断。

儿童颅外生殖细胞肿瘤诊疗专家共识(CCCG-GCTs-2021)

一、背景生殖细胞肿瘤(germ cell tumors,GCTs)发生于原始生殖细胞,在胚胎发育过程中沿肠系膜迁移到生殖腺^([1])。儿童颅外生殖细胞瘤(extracranial germ cell tumors,EGCTs)是指发生在颅外的GCTs,约占儿童癌症的3.5%^([2]),在青少年(15~19岁)中,这一比例增加到14%^([3-4])。

49例儿童颅外生殖细胞肿瘤临床特点、治疗及生存分析

目的:分析儿童颅外生殖细胞肿瘤的临床特点、治疗及生存情况。方法:回顾性分析2013年9月—2021年4月河南省儿童医院血液肿瘤科诊治的49例颅外生殖细胞肿瘤患者的临床资料,以Kaplan-Meier法进行生存分析,以COX回归进行预后影响因素分析。结果:49例患者中男性23例,女性26例,中位年龄2岁2月;随访至2021年4月,中位随访时间3.8年,全组生存率为85.7%,对影响预后的因素进行分析,结果显示性别、肿瘤发生部位、病理类型、分期均是影响预后的因素,病初是否合并甲胎蛋白(AFP)或β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)的升高不是影响预后的危险因素,进行多因素分析结果显示,病理类型及分期是影响预后的独立危险因素,病理类型为卵黄囊瘤和未成熟畸胎瘤患儿预后较好(生存率分别为90.6%和90.0%),而混合性生殖细胞肿瘤患儿预后较差,Ⅰ~Ⅱ期患儿生存率较高(100.0%),Ⅲ期患儿生存率为93.3%,Ⅳ期患儿预后较差。结论:手术联合含铂类药物的化疗使生殖细胞肿瘤患者获得很好的生存,尽早明确生殖细胞肿瘤患儿的病理类型、分期,采用合适的综合治疗,可以提高治愈率、延长生存期。

Asprosin在生殖细胞发育中作用的研究进展

Asprosin是由140个氨基酸组成的蛋白类激素,主要由白色脂肪组织分泌。多囊卵巢综合征(PCOS)和精子无力症是影响生育的常见疾病。Asprosin通过促进卵泡刺激素(LH)诱导小颗粒细胞雌二醇的生成和胰岛素样生长因子1(IGF-1)诱导小颗粒细胞孕酮的生成等方式调节卵巢内卵泡的生长和优势卵泡排卵。Asprosin作用于下丘脑和睾丸,调节性激素的合成和促进生殖细胞对营养物质的摄取,增加精子的数量、存活率和运动能力。Asprosin参与调节卵泡的生长和精子的发生,为不育症的治疗提供新的策略和靶点。

睾丸混合性生殖细胞瘤的多模态超声特征分析

目的探讨睾丸混合性生殖细胞瘤(TMGCT)的多模态超声声像图特征及临床表现。方法选取2013年6月至2023年12月在郑州大学第一附属医院经病理证实的44例TMGCT患者,回顾性分析其声像图资料,包括灰阶超声、彩色多普勒超声、超声造影和弹性成像。结果44例患者年龄(24.65±9.59)岁,肿瘤最大径(50.77±23.31)mm;灰阶超声显示,34例(77.27%)超声表现为囊实性混合回声,7例(15.91%)为实行不均质低回声,1例(2.27%)为实性均匀低回声,1例(2.27%)实性不均质高回声,1例(2.27%)实性不均质中等回声;彩色多普勒超声显示,12例(27.27%)为Ⅰ级血流信号,20例(45.46%)为Ⅱ级血流信号,12例(27.27%)为Ⅲ级血流信号;超声造影显示,3例患者总体表现均为“快进快退”;弹性成像显示,2例病灶压力应变式弹性评分分别为3分、4分。结论多模态超声诊断TMGCT具有一定的影像特征,但总体较为复杂,结合血清肿瘤标志物及临床资料,可明显提高TMGCT的诊断及其鉴别诊断效果。

卵巢恶性生殖细胞肿瘤的临床及超声特征分析

目的:分析卵巢恶性生殖细胞肿瘤的临床表现及超声特征,以提高该类型肿瘤的超声诊断水平。方法:回顾性分析50例卵巢恶性生殖细胞肿瘤患者的临床及超声特征。结果:50例均为单发,其中卵黄囊瘤16例,无性细胞瘤15例,未成熟性畸胎瘤10例,混合性肿瘤6例,类癌2例,胚胎性癌1例;除2例类癌患者为绝经后,其余均<40岁,平均年龄(25.3±12.5)岁。患者多以腹痛、腹部包块、不规则阴道流血就诊;无性细胞瘤多有乳酸脱氢酶(LDH)和β-人绒毛膜促性腺激素(β-HCG)升高,卵黄囊瘤AFP升高,混合性生殖细胞肿瘤糖类抗原125(CA125)、AFP、LDH轻度升高,未成熟性畸胎瘤CA125、AFP轻度升高。超声声像图上表现为附件区较大实性或囊实性肿块,无性细胞瘤以实性为主,呈分叶状,内可见稍高回声纤维分隔;卵黄囊瘤为囊实混合回声包块,内呈蜂窝状改变;未成熟性畸胎瘤和混合性生殖细胞肿瘤主要表现为囊实混合回声包块,形态不规则,内回声杂乱不均,可见散在斑点状强回声,肿瘤实性部分血流信号较丰富。结论:卵巢恶性生殖细胞肿瘤具有一定的超声声像图特征,结合临床特点及肿瘤标志物水平有助于提高其诊断准确率。

术前中性粒细胞与淋巴细胞比值对睾丸生殖细胞肿瘤预后的预测价值

目的:探讨术前中性粒细胞与淋巴细胞比值(neutrophil to lymphocyte ratio,NLR)对睾丸生殖细胞肿瘤(testicular germ cell tumors,TGCT)患者预后的预测价值。方法:收集2016年01月至2023年10月于潍坊市人民医院行睾丸根治术的TGCT患者的临床及随访资料。通过受试者工作特征曲线(ROC)确定NLR的最佳截断值,用Kaplan-Meier法绘制生存曲线,比较高、低NLR组间的癌症特异性生存率(CSS)和无进展生存率(PFS)差异。采用Cox比例风险模型筛选影响CSS和PFS的独立危险因素。结果:共纳入33例患者,包括21例(63.6%)精原细胞瘤和12例(36.4%)非精原细胞瘤。Kaplan-Meier分析结果表明:高NLR预示着更差的CSS(P<0.001)和PFS(P<0.001)。Cox多因素分析显示:高NLR(HR=18.225,95%CI:1.806~183.859,P=0.014)是CSS的独立预后危险因素;高NLR(HR=11.371,95%CI:1.751~73.847,P=0.011)也是PFS的独立预后危险因素。结论:术前NLR高值是影响TGCT患者预后的独立预后危险因素,NLR越高患者的CSS和PFS越差。

人工养殖条件下香螺生殖系统组织学观察及生殖细胞特征

为探明香螺(Neptunea cumingii)雌、雄生殖系统发育规律及特征,以中国山东省烟台市四十里湾海域人工养殖的香螺(体质量为58.09 g±10.70 g)为研究对象,利用组织切片技术对其性腺发育及生殖细胞发生进行连续观察,并研究了水温对性腺发育的影响。结果表明:香螺为雌、雄异体,本次采样性别比为2.45∶1,偏离期望值;雄性生殖系统由交接口、交接器、贮精囊、输精管和精巢5部分组成,精子在精巢的精小叶内形成,雌性生殖系统由产卵器、囊腺体、受精囊、输卵管和卵巢5部分组成,卵细胞在卵巢滤泡中发生;雌、雄性腺发育均分为增殖期、生长期、成熟与排放期和退化期4个阶段;精子发生经过精原细胞、初级精母细胞、次级精母细胞、精细胞和精子5个阶段,卵子发生经过卵原细胞、小生长期卵母细胞、大生长期卵母细胞和成熟卵子4个阶段;在同一个体中,香螺雄性不同生殖细胞具有分批成熟、排放的特点,但雌性生殖细胞成熟、排放较为同步。研究表明,香螺雌、雄性腺均在水温较低的时期进入快速发育阶段,雄性较雌性早成熟1~4个月,在人工养殖条件下同性个体间性腺发育阶段较为接近,产卵期集中在5—6月份,具备人工规模化苗种繁育的条件。

青鳉gsdf调控Igf2bp2/Igf2bp3-m6A阅读器在雌雄生殖细胞的差异表达

青鳉gsdf敲除导致生殖细胞异常增殖,产生XY巨大精巢或XY巨大卵巢。正常精巢、卵巢及gsdf缺失型XY巨大精巢或巨大卵巢的mRNA转录组比对分析和qPCR验证结果显示,igf2bp2表达可能受gsdf信号调控。脊椎动物igf2bp2的分子结构高度进化保守,igf2bp2 mRNA在胚胎发育各时期均有表达,在成体精巢表达量最高,提示igf2bp2可能在早期胚胎发育、性别分化及精子生成发育中起重要作用。免疫荧光检测显示XY精巢的抗Igf2bp2免疫反应信号强于XX卵巢、gsdf缺失型XY精巢和XY卵巢。不同于gsdf缺失激活igf2bp3的表达,gsdf缺失反而减弱igf2bp2表达。Gsdf对igf2bp2和igf2bp3的正负调控影响其介导的m6A甲基腺苷修饰,以及其靶向的mRNA转录后修饰和翻译,这一分子调控机制可能在脊椎动物性别分化和精子生成过程中普遍存在。

利用白消安制备公鸡生殖前体细胞移植受体的研究

该试验旨在开发适合制备鸡生殖前体细胞移植受体公鸡的方法。试验选用5-7月龄、体重相近、繁殖性能正常的81只岭南黄公鸡进行试验。试验分两次开展,试验一根据公鸡体重计算白消安用量,试验二不以公鸡体重来计算白消安用量,而是每组固定白消安用量。通过分析注射白消安后第15天、30天、45天或60天公鸡的血常规指标、体重、睾丸重、死亡率、曲精细管直径、周长和面积及生育能力,评价白消安直接注射到年轻公鸡睾丸中制备鸡生殖前体细胞移植受体方法的效果。试验一结果表明,注射白消安后第15天仅有1只注射量为1.2 mg/kg的公鸡睾丸部分曲精细管内出现生精细胞减少现象,对血常规指标、死亡率、睾丸大小和重量以及受精率均无影响,而其他鸡只与对照组相比无明显变化。试验二结果表明,公鸡睾丸注射30-50mg/单侧白消安后第15和30天,睾丸大小、重量明显变小,第30天后组织切片分析显示睾丸内精曲细管膜底部和腺腔排空,第45天注射量为30-40mg/单侧的公鸡睾丸内大部分精原干细胞可以恢复,白消安注射组在第15-45天公鸡配种后受精率明显下降,但整个过程中公鸡体重和血常规指标无显著影响。综上表明,公鸡睾丸注射白消安可以清除内源性精原干细胞,且睾丸正常生理生殖功能不受影响,注射剂量为30-40mg/单侧后第30天,公鸡睾丸内精曲小管膜底部和腺腔排空,此时是注射生殖前体细胞最佳时间。

青少年侧脑室混合性生殖细胞瘤1例

患者,男,17岁。患者在无明显诱因的情况下,头痛持续了2个多月,主要表现为额部和顶部的胀痛。疼痛于立位时明显,坐位或卧位时加重,夜间疼痛较白天明显。疼痛严重时伴有恶心和呕吐,但没有出现肢体抽搐,无大小便失禁,病程中有左侧肢体无力。CT表现:右侧侧脑室内见团块状混杂密度影,大小约47.0mm×42.0mm,以等密度影为主,中央见多发小囊变灶,CT值约为5HU~30HU,病灶周围可见轻度水肿。右侧额叶侧脑室前角旁见结节状稍高密度影,大小约11.0mm×7.0mm,CT值约为42HU,病灶周围可见轻度水肿。MRI表现:右侧侧脑室内见团块状异常信号影,T1WI及T2WI均呈混杂信号,大小约47.0mm×40.0mm,病灶周围可见轻度水肿;右侧额叶侧脑室前角旁见结节状T1WI稍低信号T2WI稍高信号影,大小约11.0mm×9.0mm,病灶周围可见轻度水肿。增强扫描显示右侧侧脑室内肿块呈现出明显的不均匀强化,中央见囊状无强化区,右侧额叶结节呈明显均匀强化。

增强磁共振成像在儿童星型细胞瘤及鞍区生殖细胞瘤鉴别中的应用

目的探讨增强磁共振成像(MRI)在儿童星型细胞瘤及鞍区生殖细胞瘤鉴别中的临床应用价值。方法回顾性分析2020年2月至2022年2月开封市儿童医院收治的80例鞍区肿瘤患儿,病理活检证实为80例鞍区肿瘤患儿中有42例星型细胞瘤和38例生殖细胞瘤。所有患者均行增强MRI检测,将检测指标进行比较,并采用受试者工作特征(ROC)曲线评估增强MRI参数对患者星型细胞瘤和生殖细胞瘤的鉴别诊断价值。结果生殖细胞瘤在MRI平扫T 1加权成像(T 1WI)增强上呈等或稍低信号,T 2加权成像(T 2WI)增强上呈等或稍高信号。星形细胞瘤在MRI平扫T 1WI增强上呈等或低信号,T 2WI增强上呈高信号,增强扫描可见囊壁强化。星型细胞瘤组和生殖细胞瘤组的肿瘤位置、最大直径、肿瘤组成、边缘、T 1高强度病灶、T 1WI增强和表观扩散系数(ADC)均值比较差异有统计学意义(χ^(2)=18.686,P<0.001;t=157.635,P<0.001;χ^(2)=7.026,P=0.008;χ^(2)=9.937,P=0.002;χ^(2)=19.361,P<0.001;t=9.210,P<0.001;t=2.856,P=0.006)。ROC结果显示,T 1WI增强和ADC均值具有鉴别诊断星型细胞瘤和生殖细胞瘤分型的价值(曲线下面积=0.793,P<0.001;曲线下面积=0.677,P=0.004)。结论增强MRI在诊断儿童星型细胞瘤及鞍区生殖细胞瘤中具有较好的诊断效能,可以为临床鞍区肿瘤儿童治疗方案的制定提供指导作用。

蜜蜂生殖细胞的超低温冷冻方法

蜜蜂是重要的社会性昆虫,占授粉昆虫总数的80%,具有巨大的生态和经济价值,且是实现农业绿色发展的重要一环。我国拥有丰富的蜜蜂遗传资源,然而,在过去十年里全球范围内蜜蜂种群受到巨大威胁,包括来自自然环境、农药、寄生虫等因素[1],蜜蜂珍惜种质资源的保护和开发利用显得尤为重要。超低温冷冻蜜蜂生殖细胞技术不受地域、时间和蜂王寿命的限制,为蜜蜂种质资源的保护开辟了新途径。

干扰牛Zfy基因的载体构建及其在细胞水平上的效果验证

重组载体可以靶向干扰公牛睾丸中Zfy基因的表达,从而影响Y精子的发育和形成过程,引起睾丸中X、Y精子的比例发生偏移。本试验用pLL3.7质粒重组构建3个牛Zfy基因mRNA干扰载体,即pLL3.7/a、pLL3.7/b、pLL3.7/c。同时设置空白对照(等体积生理盐水)、空载体(无干扰片段)等作为对照组,建立生殖细胞系的体外培养体系,用脂质体2000将质粒载体转染到生精细胞,运用RT-qPCR、免疫印迹(Western Blot,WB)方法从细胞水平上筛选出效果最佳的干扰载体。结果表明,同对照组相比,pLL3.7/a能使Zfy基因mRNA表达水平下降68.65%±7.25%(P<0.01);pLL3.7/c能使Zfy基因mRNA表达水平下降23.36%±3.67%(P<0.05);pLL3.7/b能使Zfy基因mRNA表达水平下降11.01%±2.14%(P>0.05)。WB试验与RT-qPCR检测结果一致,因此,pLL3.7/a干扰效果最佳。本研究结果将为从基因层面实现性别控制技术的研发和奶牛养殖业的发展提供技术支撑。