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c-myc对肿瘤细胞生长抑制基因的转录调控 被引量:14
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作者 陈龙 陈洁平 《中华肿瘤防治杂志》 CAS 2006年第22期1752-1754,共3页
c-myc基因在许多肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用,它主要通过对靶基因的转录调控发挥作用。对c-myc如何调节肿瘤细胞周期生长抑制基因转录机制进行综述。c-myc对细胞周期的调控主要通过对生长抑制基因转录抑制实现,主要有2个不同机... c-myc基因在许多肿瘤的发生、发展过程中起着重要作用,它主要通过对靶基因的转录调控发挥作用。对c-myc如何调节肿瘤细胞周期生长抑制基因转录机制进行综述。c-myc对细胞周期的调控主要通过对生长抑制基因转录抑制实现,主要有2个不同机制一个通过myc/Max二聚体中c-myc蛋白的羧基端(C末端)与Mil-1形成复合物与生长抑制基因p15等启动子Inr区域结合,拮抗其他转录激活因子如Mil-1与Inr结构结合。另一机制c-myc及可能存在的抑制物与转录激活因子Sp1及SMad(smaandmadhomologue)等形成复合物干扰Sp1等对生长抑制基因的激活。造成细胞恶性转化及增殖。 展开更多
关键词 c—myc基因 转录抑制 肿瘤细胞生长抑制基因 Inr结构 综述文献
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肝细胞生长因子基因重组腺病毒修饰间充质干细胞修复急性放射性损伤大鼠的创面 被引量:3
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作者 哈小琴 张俊 +4 位作者 邓芝芸 董菊子 彭俊华 赵勇 张媛媛 《中国组织工程研究》 CAS CSCD 2012年第49期9226-9231,共6页
背景:基因药物与干细胞联合应用促进难治性大面积创面修复。目的:观察携带肝细胞生长因子基因的重组腺病毒(adenovirus hepatocyte growth factor,Ad-HGF)修饰的间充质干细胞对大鼠皮肤放射性损伤创面促愈合的作用。方法:体外分离、培... 背景:基因药物与干细胞联合应用促进难治性大面积创面修复。目的:观察携带肝细胞生长因子基因的重组腺病毒(adenovirus hepatocyte growth factor,Ad-HGF)修饰的间充质干细胞对大鼠皮肤放射性损伤创面促愈合的作用。方法:体外分离、培养雄性Wistar大鼠骨髓间充质干细胞,转染Ad-HGF后备用。40只雌性Wistar大鼠用X射线局部照射制备急性放射性皮肤损伤模型。并将模型大鼠随机分为单纯间充质干细胞治疗组、单纯Ad-HGF治疗组、Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组、溶剂对照组4组,制备模型即刻各组将相应细胞悬液、病毒悬液及溶剂行创面边缘多点注射。结果与结论:苏木精-伊红染色结果显示,伤后21d Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组再生表皮明显薄于溶剂对照组,并可见丰富的新生小血管,且表皮较单纯间充质干细胞治疗组和单纯Ad-HGF治疗组更平整,新生小血管更丰富;免疫组织化学结果表明,Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组创面中肝细胞生长因子表达均强于其他组;羟脯氨酸含量Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组在7d后显著低于其他组(P<0.05);原位杂交结果显示,Ad-HGF修饰的间充质干细胞治疗组修复的皮肤组织中性别决定基因sry表达强于单纯间充质干细胞治疗组。结果提示,Ad-HGF修饰的间充质干细胞对皮肤放射性损伤创面有显著的促愈合修复作用,且优于二者单独应用。 展开更多
关键词 间充质干细胞 细胞生长因子基因 重组腺病毒 放射损伤 修复
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重组碱性成纤维细胞生长因子基因转染对于骨髓源性成骨细胞的生物学特性及对血管生成的影响 被引量:6
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作者 史德刚 栗国梁 +4 位作者 张积仁 黄忠琴 许灼新 陈志维 陈逊文 《中国组织工程研究与临床康复》 CAS CSCD 北大核心 2009年第33期6411-6417,共7页
背景:碱性成纤维细胞生长因子对来源于中胚层和神经外胚层的细胞具有明显的促进增殖作用,对骨髓间充质干细胞具有间接的成骨作用。目的:观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染对骨髓源性成骨细胞生物学特性和血管生成的影响,与骨髓间充质... 背景:碱性成纤维细胞生长因子对来源于中胚层和神经外胚层的细胞具有明显的促进增殖作用,对骨髓间充质干细胞具有间接的成骨作用。目的:观察碱性成纤维细胞生长因子基因转染对骨髓源性成骨细胞生物学特性和血管生成的影响,与骨髓间充质干细胞作对比。设计、时间及地点:对比分析基因转染效果实验,于 2007-11-27/2008-12-01 在南方医科大学珠江医院中心实验室和动物实验中心完成。材料:2 月龄新西兰大白兔用于骨髓间充质干细胞的分离培养及成骨细胞诱导。5 周龄 Wistar 大鼠用于移植实验。牛pcDNA3-bFGF 真核表达质粒由中山大学中山医学院免疫教研室徐霖博士惠赠。方法:分离兔骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞,采用脂质体介导将牛 pcDNA3-bFGF 真核表达质粒分别转染体外培养的兔骨髓间充质干细胞和诱导的骨髓源性成骨细胞,G418 筛选。稳定转染碱性成纤维细胞生长因子的骨髓源性成骨细胞与磷酸钙胶原材料复合培养,植于 Wistar 大鼠后腿肌袋内,正常饲养 2,4 周后取出植入的复合材料,观察血管新生情况。主要观察指标:碱性成纤维细胞生长因子转染前后骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性参数的比较以及骨髓源性成骨细胞转染碱性成纤维细胞生长因子前后新生血管数目的比较。结果:利用 RT-PCR、免疫细胞化学染色分析转染细胞的碱性成纤维细胞生长因子表达情况。从形态、增殖特性和细胞周期、碱性磷酸酶、Ⅰ型胶原等方面分析稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生物学特性。重组牛 pcDNA3-bFGF 真核表达质粒成功转染目的细胞,经 G418 筛选稳定表达。转染的细胞有大量目的基因 mRNA 转录和目的蛋白表达。转染碱性成纤维细胞生长因子基因的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞生长均加快,细胞周期中增殖期细胞比例明显增加,细胞形态无明显变化。转染与未转染的骨髓源性成骨细胞比较,碱性磷酸酶的分泌量无明显变化(P > 0.05),转染后骨髓间充质干细胞的碱性磷酸酶分泌量小于骨髓源性成骨细胞(P < 0.01)。骨髓源性成骨细胞转染与未转染碱性成纤维细胞生长因子基因组均有Ⅰ型胶原 mRNA 表达,但是,转染和未转染的骨髓间充质干细胞中均无Ⅰ型胶原基因mRNA 转录。转染有外源性碱性成纤维细胞生长因子基因的复合材料部分被增生纤维结缔组织包绕,内有新生血管生成,随着时间的延长而增多。结论:稳定表达碱性成纤维细胞生长因子的骨髓间充质干细胞和骨髓源性成骨细胞增殖较快,但作为组织工程骨的种子细胞,骨髓源性成骨细胞较骨髓间充质干细胞更理想。外源碱性成纤维细胞生长因子基因转染后稳定表达,对新生血管的形成具有促进作用,可以作为组织工程化人工骨种子细胞转染的目的基因。 展开更多
关键词 重组碱性成纤维细胞生长因子基因 骨髓间充质干细胞 骨髓源性成骨细胞 生物学特性 血管生成
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腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对血管内皮细胞的作用 被引量:2
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作者 刘本德 吴红军 +1 位作者 熊汝芳 曾秋棠 《中国康复》 2005年第6期330-332,共3页
目的:研究腺病毒载体介导肝细胞生长因子(HGF)基因感染血管内皮细胞后在正常供氧、缺氧及缺氧后复氧的情况下细胞的凋亡情况。方法:将分离、培养的内皮细胞分为3组,分别给予M199(对照组)、HGF(HGF组)和HGF基因腺病毒载体(Ad-HGF组),分... 目的:研究腺病毒载体介导肝细胞生长因子(HGF)基因感染血管内皮细胞后在正常供氧、缺氧及缺氧后复氧的情况下细胞的凋亡情况。方法:将分离、培养的内皮细胞分为3组,分别给予M199(对照组)、HGF(HGF组)和HGF基因腺病毒载体(Ad-HGF组),分别在正常供氧、缺氧及缺氧后复氧3种情况下观察细胞的凋亡情况。结果:Ad-HGF组及HGF组细胞凋亡数均低于对照组(P<0.01),Ad-HGF组与HGF组细胞凋亡数差异无显著性意义。结论:腺病毒载体介导HGF基因感染内皮细胞后能在缺氧情况下有效地阻止细胞凋亡。 展开更多
关键词 人重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因 血管内皮细胞 凋亡 缺氧
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截短型小鼠成纤维细胞生长因子受体-1基因慢病毒载体构建及在真核细胞中的表达 被引量:1
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作者 陈伟 陈翀 +4 位作者 张焕新 闫志凌 程海 曾令宇 徐开林 《中国实验血液学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第1期168-172,共5页
本研究旨在克隆小鼠成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,fgfr1)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的截短型fgfr1(△fgfr1)重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以BALB/c... 本研究旨在克隆小鼠成纤维细胞生长因子受体1(fibroblast growth factor receptor 1,fgfr1)基因,构建携带增强型绿色荧光蛋白(EGFP)的截短型fgfr1(△fgfr1)重组慢病毒载体并在真核细胞中表达。采用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)以BALB/c胎鼠脑组织为模板克隆全长型fgfr1基因,连接至克隆载体pCR-Blunt,通过反向PCR技术删除胞内磷酸化区域获得△fgfr1,限制性内切酶酶切后亚克隆至慢病毒转移质粒,构建携带EGFP及△fgfr1双顺反子自身失活型重组慢病毒表达质粒,通过脂质体转染法与包装质粒及包膜蛋白质粒共转染包装细胞293FT,超速离心浓缩病毒颗粒后转染293FT细胞,用荧光显微镜及流式细胞术(FCM)检测EGFP的表达,免疫印迹法(Western blot)鉴定截短型FGFR1蛋白表达。结果表明,成功克隆小鼠fgfr1基因,构建重组慢病毒转移载体LV-IRES-EGFP-△fgfr1及对照载体LV-IRES-EGFP,三质粒系统共转染293FT细胞后获得病毒滴度达到108 TU/ml。以重组病毒载体转染293FT细胞后第4天在荧光显微镜下观察到较强绿色荧光表达,FCM检测转染效率可达95%,Western blot检测显示,转染后293FT细胞表达截短型FGFR1蛋白。结论:成功构建了自身失活型慢病毒载体LV-IRES-EGFP-△fgfr1,并在真核细胞中获得表达。 展开更多
关键词 成纤维细胞生长因子受体基因 慢病毒载体构建 基因表达 293FT细胞
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基因重组细胞生长肽和精氨酸拮抗环孢霉素A的睾丸毒性 被引量:2
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作者 李山 邓耀良 吴闯 《广东医学》 CAS CSCD 2001年第8期679-680,共2页
目的 探讨基因重组细胞生长肽 (bFGF)和精氨酸对环孢霉素A(CsA)在血和睾丸中药物浓度及其睾丸毒性的影响。方法 将 80只大鼠随机分为 4组 :N组 ,正常对照组 ;A组 ,CsA ;B组 ,CsA +精氨酸 ;C组 ,CsA +bFGF。每天腹腔注射给药 ,连续 3... 目的 探讨基因重组细胞生长肽 (bFGF)和精氨酸对环孢霉素A(CsA)在血和睾丸中药物浓度及其睾丸毒性的影响。方法 将 80只大鼠随机分为 4组 :N组 ,正常对照组 ;A组 ,CsA ;B组 ,CsA +精氨酸 ;C组 ,CsA +bFGF。每天腹腔注射给药 ,连续 3周后取血及睾丸测定CsA浓度 ,按抗精子发生效应积分评定法作生精功能的评价 ,测定曲细精管直径及作病理学检查。结果 血药浓度B组明显高于A组 (P <0 0 5) ;A ,B ,C组睾丸的精子发生明显障碍 ,而B ,C组比A组的精子发生障碍要轻 (P <0 0 5) ,曲细精管的直径A ,B ,C组明显小于N组 (P <0 0 5) ,但B组大于A组 (P <0 0 1 )。结论 CsA影响睾丸的生精功能 ,精氨酸和bFGF能明显降低CsA对睾丸的毒性作用 ,精氨酸还能提高血中CsA的浓度。 展开更多
关键词 环孢素A 精氨酸 基因重组细胞生长 睾丸生精功能 男性不育症
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腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对血管平滑肌细胞的作用 被引量:1
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作者 王祥 刘本德 曾秋棠 《中国康复》 2006年第3期147-149,共3页
目的:研究腺病毒载体介导肝细胞生长因子(HGF)基因感染血管平滑肌细胞后在缺氧和正常供氧时的细胞凋亡和迁移情况。方法:以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)获得HGF基因,并引入酶切位点,转染... 目的:研究腺病毒载体介导肝细胞生长因子(HGF)基因感染血管平滑肌细胞后在缺氧和正常供氧时的细胞凋亡和迁移情况。方法:以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用逆转录-聚合酶链反应技术(RT-PCR)获得HGF基因,并引入酶切位点,转染大肠杆菌,筛选阳性菌落,经酶切及测序,转染腺病毒,经三轮扩増,制备高效表达HGF基因腺病毒载体(Ad-HGF),再感染人血管平滑肌细胞(VSMC)为观察组(Ad-HGF组);未感染为阴性对照组(DMEM组);以含人工合成HGF为阳性对照组(HGF组),分别在正常供氧和缺氧情况下观察细胞的凋亡和迁移情况。结果:与DMEM组及HGF组比较,Ad-HGF组在缺氧和正常供氧时VSMC的迁移率及凋亡细胞数差异均无显著性意义。结论:HGF基因感染VSMC后,在缺氧情况下并不促进VSMC的迁移,亦不抑制其凋亡。 展开更多
关键词 人重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因 血管平滑肌细胞 凋亡 迁移
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基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子促进创面愈合的临床研究 被引量:12
8
作者 李校坤 洪岸 +3 位作者 许华 姚成灿 付小兵 林剑 《暨南大学学报(自然科学与医学版)》 CAS CSCD 2002年第2期22-27,共6页
目的 :观察基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (rbFGF)对急性创面和慢性创面愈合的促进作用。方法 :治疗组 (12 82例 )和对照组 (439例 )被分为深Ⅱ度烧伤、浅Ⅱ度烧伤、供皮区 (包括刃厚和中厚供皮区 )和慢性 (包括残余小创面和慢性溃... 目的 :观察基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子 (rbFGF)对急性创面和慢性创面愈合的促进作用。方法 :治疗组 (12 82例 )和对照组 (439例 )被分为深Ⅱ度烧伤、浅Ⅱ度烧伤、供皮区 (包括刃厚和中厚供皮区 )和慢性 (包括残余小创面和慢性溃疡 )创面 4大类。分别观察应用rbFGF后不同时间创面愈合面积的百分比、创面完全愈合时间 ,以及用药前后的全身情况和不良反应。结果 :浅Ⅱ度烧伤 8d愈合率和创面完全愈合时间 ,对照组为 5 1 7%± 2 6 4 %和 (12 6± 2 9)d(P <0 0 0 1) ,治疗组为 70 6 %± 2 5 0 %和 (10 5± 2 4 )d(P <0 0 0 1)。深Ⅱ度烧伤 15d愈合率和创面完全愈合时间 ,对照组为 5 3 3%± 2 5 4 %和 (2 1 9± 5 5 )d(P <0 0 0 1) ,治疗组为 6 9 7%± 2 7 0 %和 (18 5± 4 4 )d(P <0 0 0 1)。供皮区创面 8d愈合率和创面完全愈合时间 ,对照组为 5 7 6 %± 2 9 4 %和(11 4± 2 7)d(P <0 0 0 1) ,治疗组为 72 1%± 2 8 0 %和 (9 5± 2 4 )d(P <0 0 0 1)。慢性创面完全愈合时间 ,对照组为 (2 8 0± 18 0 )d ,治疗组 (2 2 1± 16 )d(P =0 0 6 8)。用药前后血常规、肝、肾功能无异常变化。结论 展开更多
关键词 基因重组碱性成纤维细胞生长因子 创面愈合 临床试验 rbFGF
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人血管内皮细胞生长因子121基因修饰材料修复桡骨火器性骨缺损 被引量:2
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作者 王建忠 李兵仓 +6 位作者 任宝 高飞 李聪杰 刘伟 王晓冬 雷鸣 高文山 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2015年第47期7561-7566,共6页
背景:骨缺损是导致火器性股损伤骨不连的首要原因,火器性损伤相对比较特殊。自体骨移植和异体骨移植均存在较大弊端,难以满足基层医院需求,采用具有良好血管能力、骨能力的组织工程化骨修复火器性骨缺损将是一种理想的、可行的修复方法... 背景:骨缺损是导致火器性股损伤骨不连的首要原因,火器性损伤相对比较特殊。自体骨移植和异体骨移植均存在较大弊端,难以满足基层医院需求,采用具有良好血管能力、骨能力的组织工程化骨修复火器性骨缺损将是一种理想的、可行的修复方法。目的:探讨人血管内皮细胞生长因子121基因修饰材料在兔桡骨火器性骨缺损修复中的应用。方法:将128只家兔随机分为手术致伤组和火器伤组,每组64只。火器伤组采用56式滑膛枪发射质量为0.25 g的钢珠,建立火器伤桡骨损伤模型;手术致伤组仅用手术方法造成兔桡骨1.2 cm损伤模型。采用人血管内皮细胞生长因子121基因修饰材料进行修复处理,取家兔相关组织细胞,获得骨髓基质干细胞进行培养,制备多孔支架材料,并将获得的材料分别植入手术致伤组和火器伤组家兔桡骨骨缺损部位,分析人血管内皮细胞生长因子121基因修饰材料在兔桡骨火器性骨缺损修复中的应用。结果与结论:与手术致伤组相比,修复8,12,16周后,火器伤组家兔骨缺损部位灰度比值、健侧与修复侧桡骨的抗压缩力学比值降低(P<0.05),新生骨面积增多(P<0.05);修复2,4周后,骨缺损修复处局部血流量显著升高(P<0.05)。结果说明,与单纯手术致桡骨损伤相比,烧伤致桡骨损伤修复过程中由于局部出现了缺血缺氧,采用人血管内皮细胞生长因子121基因治疗效果更理想。人血管内皮细胞生长因子121能够对骨髓基质细胞进行修复,将其运用于火器烧伤中能够提高其合成及分泌成血管因子,提高其局部血流量、降低抗压缩力学比值,且新生骨面积较大。 展开更多
关键词 生物材料 骨生物材料 人血管内皮细胞生长因子121基因 修饰材料 兔桡骨火器性骨缺损 骨髓基质干细胞 局部血流量 灰度比值 抗压缩力学 血管因子 聚乳酸-聚羟基乙酸共聚物 新生骨面积
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碱性成纤维细胞生长因子基因对猪缺血心肌心功能的影响
10
作者 孙林 李易 +3 位作者 光雪峰 孙强明 杨锋 张光明 《中国心血管杂志》 2006年第2期83-84,91,共3页
目的探讨经导管冠状动脉内注射碱性成纤维细胞生长因子基因(pcDNA3-bFGF),对猪缺血心肌心功能的影响。方法构建真核表达质粒pcDNA3-bFGF。开胸结扎猪冠状动脉左回旋支(LCX),建立急性心肌梗死动物模型。实验动物分为三组:手术对照组(n=6)... 目的探讨经导管冠状动脉内注射碱性成纤维细胞生长因子基因(pcDNA3-bFGF),对猪缺血心肌心功能的影响。方法构建真核表达质粒pcDNA3-bFGF。开胸结扎猪冠状动脉左回旋支(LCX),建立急性心肌梗死动物模型。实验动物分为三组:手术对照组(n=6),bFGF基因左冠状动脉注射组(n=6),bFGF基因右冠状动脉注射组(n=6)。术后2周,分别行选择性冠状动脉造影,并经导管冠状动脉内注射pcDNA3-bFGF2000μg。术后4周,通过超声心动图测定左心室射血分数(LVEF),评估左心室收缩功能,并再次行选择性冠状动脉造影,观察冠状动脉侧枝血管新生情况,并通过压力监测装置观察不同组动物左心室舒张末压(LVEDP)。结果(1)术后4周超声心动图示左、右冠状动脉注射基因组LVEF值高于手术对照组,LVDEP低于手术对照组;(2)选择性冠状动脉造影显示,术后4周左右冠状动脉注射基因组侧枝血管明显多于对照组,左冠状动脉注射基因组,侧枝血管多于右冠状动脉基因注射组。结论经导管冠状动脉内注射bFGF基因,能促进猪缺血心肌血管新生,改善缺血心肌血供,改善心功能。 展开更多
关键词 碱性成纤维细胞生长因子基因 心功能
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转染肝细胞生长因子基因对CCl_4损伤人肝细胞株的保护作用
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作者 何勇 周峻 +1 位作者 窦科峰 陈勇 《基础医学与临床》 CSCD 北大核心 2004年第3期348-349,共2页
关键词 转染肝细胞生长因子基因 CCl4损伤 细胞 保护作用 四氯化碳
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腺病毒载体介导肝细胞生长因子基因对冠状动脉再狭窄的预防作用
12
作者 刘本德 吴红军 曾秋棠 《华中科技大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2007年第1期75-77,81,共4页
目的应用重组腺病毒载体介导的肝细胞生长因子(HGF)基因转染血管内皮细胞(VEC)及血管平滑肌细胞(VSMC),探讨HGF基因对其凋亡的诱导作用。方法以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用RT-PCR技术获得HGF基因,并引入酶切位点,转染大... 目的应用重组腺病毒载体介导的肝细胞生长因子(HGF)基因转染血管内皮细胞(VEC)及血管平滑肌细胞(VSMC),探讨HGF基因对其凋亡的诱导作用。方法以肝细胞中抽提的总RNA为模板,反转录cDNA,采用RT-PCR技术获得HGF基因,并引入酶切位点,转染大肠埃希菌,筛选阳性菌落,经酶切及测序证实后,转染腺病毒,制造病毒包涵体,经3轮扩増,制备高效表达HGF基因腺病毒载体(Ad-HGF)。以此感染VEC及VSMC,设为Ad-HGF组;再以人工合成HGF培养VEC及VSMC为阳性对照组(HGF组);以未感染Ad-HGF的细胞为阴性对照(对照组)。并采用流式细胞仪检测缺氧情况下各组细胞的凋亡率。结果VEC的Ad-HGF、HGF组细胞凋亡率均低于对照组,差异均有极显著性意义(均P<0.01),但VSMC的3组细胞凋亡率差异无显著性意义(P>0.05)。结论腺病毒载体介导HGF基因感染VEC后能在缺氧情况下有效地阻止VEC发生凋亡,但不能有效抑制VSMC凋亡,提示对冠状动脉再狭窄有预防作用。 展开更多
关键词 人重组腺病毒介导肝细胞生长因子基因 血管内皮细胞 血管平滑肌细胞 细胞凋亡 缺氧 冠状动脉再狭窄
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人肝细胞生长因子基因腺病毒重组体的构建及转染血管平滑肌细胞的表达
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作者 冯宗承 胡新华 +3 位作者 于彭 孙达欣 辛世杰 张强 《中国动脉硬化杂志》 CAS CSCD 2004年第3期263-266,共4页
为探讨构建能表达肝细胞生长因子基因的腺病毒重组体的方法,以及这种腺病毒重组体能否在血管平滑肌细胞表达。将含有肝细胞生长因子基因片段的质粒用限制内切酶酶切,以琼脂糖凝胶电泳回收得到目的基因片段;将它用DNA连接酶插入至腺病毒... 为探讨构建能表达肝细胞生长因子基因的腺病毒重组体的方法,以及这种腺病毒重组体能否在血管平滑肌细胞表达。将含有肝细胞生长因子基因片段的质粒用限制内切酶酶切,以琼脂糖凝胶电泳回收得到目的基因片段;将它用DNA连接酶插入至腺病毒穿梭质粒中,并用限制内切酶鉴别插入方向,得到插入方向正确的重组腺病毒穿梭质粒。用限制内切酶酶切重组腺病毒穿梭质粒和表达载体,使它们线性化;以电转化方法使它们共转化至BJ5183细胞中进行同源重组,构成肝细胞生长因子基因腺病毒重组体。以脂质体为转染介质,将肝细胞生长因子基因腺病毒重组体转染到人胚肾细胞中进行包装,使病毒复性具有感染能力。用包装后的肝细胞生长因子基因腺病毒重组体感染体外培养的大鼠主动脉平滑肌细胞;经逆转录-聚合酶链反应和蛋白印迹检测发现肝细胞生长因子呈现过表达。此外,酶切及测序发现重组腺病毒穿梭质粒和肝细胞生长因子基因腺病毒重组体是正确的;绿色荧光蛋白标记对重组体在人胚肾细胞中的包装及包装后感染大鼠主动脉平滑肌细胞进行了荧光示踪。结果提示。肝细胞生长因子基因腺病毒重组体构建成功,为血管疾病转基因治疗奠定了基础,具有一定临床价值。 展开更多
关键词 分子生物学 细胞生长因子基因腺病毒重组体的构建 基因重组 基因表达 细胞生长因子 腺病毒载体 同源重组 血管平滑肌细胞 绿色荧光蛋白
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大鼠胰腺发育不同阶段肝细胞生长因子受体编码基因的表达
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作者 程梅 吴玉龙 +2 位作者 贺秀香 徐仁华 孙丽红 《滨州医学院学报》 2008年第2期81-84,共4页
目的研究肝细胞生长因子受体编码基因c-met在大鼠胰腺发育不同阶段的表达。方法采用高密度寡核苷酸芯片对孕12.5 d(E12.5)、孕15.5 d和孕18.5 d、新生、成年胰腺进行基因转录水平分析,并用RT-PCR技术验证基因在大鼠胰腺不同发育时期的... 目的研究肝细胞生长因子受体编码基因c-met在大鼠胰腺发育不同阶段的表达。方法采用高密度寡核苷酸芯片对孕12.5 d(E12.5)、孕15.5 d和孕18.5 d、新生、成年胰腺进行基因转录水平分析,并用RT-PCR技术验证基因在大鼠胰腺不同发育时期的表达。结果c-met基因在E15.5、E18.5较成年特异性高表达。经RT-PCR验证,c-met基因表达趋势与芯片结果相符;与芯片c-met探针所用引物不同RT-PCR,结果却在各发育阶段呈现与芯片不同的表达趋势。结论提示c-met可能在胰腺发育过程中起到调控作用,参与胚胎胰腺发育中晚期细胞功能完善的信号传导过程。并且c-met在胰腺发育中发挥作用有可能存在不同转录本。 展开更多
关键词 细胞生长因子受体编码基因 C-MET 胰腺生长发育 高通量寡核苷酸芯片 RT-PCR
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重组腺病毒-肝细胞生长因子基因治疗延缓自发性高血压大鼠心室重构及对炎症的影响 被引量:3
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作者 陶长桂 王邦宁 +4 位作者 胡泽平 程源 宋兵 刘敏 陈大年 《安徽医药》 CAS 2012年第7期935-938,共4页
目的该试验旨在探讨重组腺病毒-肝细胞生长因子(Ad-HGF)基因局部心肌注射对自发性高血压大鼠(SHR)左心室重构及炎症的影响。方法实验共分5组,其中自发性高血压大鼠做为心肌纤维化模型,被随机分成4组,每组6只,(1)阳性对照组(P组);(2)空... 目的该试验旨在探讨重组腺病毒-肝细胞生长因子(Ad-HGF)基因局部心肌注射对自发性高血压大鼠(SHR)左心室重构及炎症的影响。方法实验共分5组,其中自发性高血压大鼠做为心肌纤维化模型,被随机分成4组,每组6只,(1)阳性对照组(P组);(2)空白腺病毒组(A组null-Ad5,0.1 ml);(3)低剂量组(L组1×109Pfu.ml-1Ad5-HGF,0.1 ml);(4)高剂量组(H组5×109 Pfu.ml-1 Ad5-HGF,0.1 ml);另6只WKY(wista-kyoto)鼠作为正常对照组(N组);A、L,H组SHR开胸,左心室壁5点分别注射0.1 ml null-Ad5、1×109Pfu.ml-1Ad5-HGF 5×109Pfu.ml-1Ad5-HGF,基因转染后继续饲养,4周后处死。测量自发性高血压大鼠左心室质量指数,测定大鼠左室收缩压、舒张末压、压力变化最大上升和下降速率;免疫组化观察CD34(新生血管密度);ELISA法测量血浆IL-1,CRP,TNF-α;Western blot法测定HGF,NF-κB p50亚基。结果 (1)左心室重量指数:与WKY鼠对比,SHR鼠左心室质量指数明显增加,而重组腺病毒-肝细胞生长因子治疗后SHR鼠左心室质量指数明显减少。(2)血流动力学检测:与SHR模型鼠对比,重组腺病毒-肝细胞生长因子治疗组大鼠左室收缩压、压力变化最大上升和下降速率均明显升高,舒张末压明显降低。(3)心肌间质血管密度:与SHR模型鼠对比,重组腺病毒-肝细胞生长因子治疗组大鼠心肌间质血管密度明显增加。(4)炎症因子及NF-κB p50蛋白:重组腺病毒-肝细胞生长因子治疗组与SHR模型鼠相比,血清白介素-1、CRP、肿瘤坏死因子-α明显降低,心肌组织NF-κB p50蛋白表达显著降低。结论重组腺病毒-肝细胞生长因子改善了自发性高血压大鼠的心功能。抑制炎症因子表达并促进间质血管可能是重组腺病毒-肝细胞生长因子改善心室重构的重要机制之一。 展开更多
关键词 重组腺病毒-肝细胞生长因子基因 心室重构 自发性高血压大鼠(SHR) NF-ΚB
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肝细胞生长因子基因转染对骨质疏松骨愈合的影响及其作用机制 被引量:2
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作者 史凡祺 甄瑞鑫 +2 位作者 郑鑫 刘世全 王媛媛 《川北医学院学报》 CAS 2022年第8期978-982,共5页
目的:探究肝细胞生长因子(HGF)基因转染对骨质疏松骨愈合的影响及其作用机制。方法:分离大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs),以慢病毒作为载体介导HGF转染BMSCs。按照随机数字表法将100只大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、BMSCs... 目的:探究肝细胞生长因子(HGF)基因转染对骨质疏松骨愈合的影响及其作用机制。方法:分离大鼠的骨髓间充质干细胞(BMSCs),以慢病毒作为载体介导HGF转染BMSCs。按照随机数字表法将100只大鼠分为假手术组(Sham组)、模型组(Model组)、BMSCs组、空载慢病毒组(Vehicle组)及HGF慢病毒组(Vehicle+HGF组),后四组构建骨质疏松骨折模型,饲养1个月后测定大鼠骨折愈合程度评分、骨密度,骨痂骨参数,组织中骨愈合相关因子mRNA水平。结果:Model组骨折愈合程度评分、骨密度、百分比骨体积、骨愈合相关因子mRNA低于Sham组,平均断面面积、相对骨体积均高于Sham组(P<0.05);BMSCs组、Vehicle组与Vehicle+HGF组骨折愈合程度评分与骨密度、百分比骨体积、骨愈合相关因子mRNA高于Model组,平均断面面积、相对骨体积均低于Model组(P<0.05);Vehicle+HGF组骨折愈合程度评分与骨密度、骨愈合相关因子mRNA高于BMSCs组、Vehicle组,平均断面面积、相对骨体积均低于BMSCs组、Vehicle组(P<0.05)。结论:HGF基因转染应用于骨质疏松骨愈合可经由促进软骨成骨形成以及骨痂重塑,加速骨质疏松骨愈合进程,改善骨愈合质量。 展开更多
关键词 骨质疏松 细胞生长因子基因转染 骨愈合 作用机制
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基因重组碱性成纤维细胞生长因子在新生儿缺氧缺血性脑病中的应用体会
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作者 杨敏 钟汝玲 +3 位作者 杨辅直 冯哲 李伟生 刘喜红 《武警医学》 CAS 2001年第2期94-94,共1页
关键词 新生儿 缺氧缺血性脑病 基因重组碱性成纤维细胞生长因子
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成纤维细胞生长因子1基因启动子多态性与晚发型阿尔茨海默病的相关性研究
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作者 陈煜森 赵斌 +2 位作者 许志恩 山県英久 三木哲郎 《中国康复理论与实践》 CSCD 2006年第5期394-395,共2页
目的探讨成纤维细胞生长因子1(FGF-1)基因启动子多态性是否与晚发型阿尔茨海默病(LOAD)相关。方法收集206例尸体检查的样本,包括100例LOAD和年龄匹配的对照组106例。PCRRFLP(Restrictionfragmentlengthpolymorphism)法分析FGF1基因启动... 目的探讨成纤维细胞生长因子1(FGF-1)基因启动子多态性是否与晚发型阿尔茨海默病(LOAD)相关。方法收集206例尸体检查的样本,包括100例LOAD和年龄匹配的对照组106例。PCRRFLP(Restrictionfragmentlengthpolymorphism)法分析FGF1基因启动子(-1385A/G)的基因型。结果FGF1基因启动子(-1385A/G)的基因型频率分布是:AA型20例(10%),GA型89例(43%),GG型97例(47%),在LOAD组和对照组之间,不同基因型频率分布有显著性差异(P=0.027);GG基因型与LOAD呈正相关(oddsratio=2.02,95%CI:1.16~3.52)。结论FGF1基因启动子(-1385A/G)多态性与LOAD显著相关。 展开更多
关键词 晚发型阿尔茨海默病(LOAD) 成纤维细胞生长因子1(FGF-1)基因 启动子多态性 相关性
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基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子促进创面愈合的临床研究 被引量:2
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作者 李真树 陈海洲 易梅 《深圳中西医结合杂志》 2021年第21期124-126,共3页
目的:探讨基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)促进烧伤创面愈合的临床效果。方法:将2019年7月至2021年4月湛江中心人民医院收治的烧伤患者60例作为研究对象,根据随机数字表法分为观察组与对照组,各30例。对照组接受清创后无菌凡... 目的:探讨基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子(rbFGF)促进烧伤创面愈合的临床效果。方法:将2019年7月至2021年4月湛江中心人民医院收治的烧伤患者60例作为研究对象,根据随机数字表法分为观察组与对照组,各30例。对照组接受清创后无菌凡士林纱布外敷治疗,观察组接受清创后rbFGF治疗,对患者治疗1周、2周、3周后的愈合率、总愈合时间、浅Ⅱ度创面愈合时间、深Ⅱ度创面愈合时间情况、治疗3周后的总有效率进行观察。结果:与对照组患者相比,观察组治疗1周、2周、3周的愈合率、治疗3周后的总有效率明显较高,总愈合时间、浅Ⅱ度创面愈合时间、深Ⅱ度创面愈合时间明显较短,差异均具有统计学意义(P<0.05)。结论:rbFGF对促进烧伤创面愈合具有良好的效果。 展开更多
关键词 烧伤 基因重组牛碱性成纤维细胞生长因子 创面愈合
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听宫听会穴位注射基因重组碱性纤维细胞生长因子治疗神经性耳聋30例 被引量:1
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作者 高桂花 《中国民间疗法》 2002年第12期15-15,共1页
关键词 听宫听会穴位注射 基因重组碱性纤维细胞生长因子 治疗 神经性耳聋
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