原子力显微镜观测CD34阳性细胞的形貌结构

目的用原子力显微镜观测正常人及表达CD34抗原的白血病细胞表面的形貌结构,并比较两者的异同。方法从健康人和M2b型白血病患者各3例骨髓标本中分离出单个核细胞,利用免疫磁柱法纯化CD34+细胞,流式细胞仪检测其纯度。用光学显微镜和原子力显微镜进行观测。结果光学显微镜下两种来源的CD34+细胞形貌相似。原子力显微镜下可观测到细胞表面有许多微绒毛突起,表面粗糙度在不同来源细胞内部呈正态分布,正常人及表达CD34抗原的白血病细胞表面在平均粗糙度、均方根粗糙度方面有显著差别。结论M2b型CD34+白血病细胞较正常CD34+细胞表面皱折程度显著降低。

细胞的原子力显微镜最佳成像条件研究

通过对不同处理条件和测试条件下人肝癌细胞SMMC-7721的原子力显微镜图像的分析和研究,得到了在大气环境和溶液环境中肝癌SMMC-7721细胞的最佳成像条件,同时建立了用原子力显微镜观测活细胞的实验方法.使用0.5%、1%、1.5%的戊二醛溶液固定细胞后再漂洗,变换原子力显微镜的扫描模式,调节扫描参量并在大气环境下观测以寻找该环境下的最佳成像条件;将用多聚赖氨酸处理基底后的培养细胞直接放置于生理溶液中用原子力显微镜进行溶液环境观测,比较扫描时限并分别改变环境液体类型、探针以及扫描频率,比较了不同条件下原子力显微镜图像的差异,在得出最优参量的同时对其相关原理进行了分析,建立了活细胞实时观测的实验方法.比较两种条件下的细胞图像发现,戊二醛溶液固定过的细胞与生理溶液环境中的活细胞有很大差别,在生理溶液条件下的细胞饱满,可见到光滑清晰的细胞边缘;但戊二醛溶液固定的细胞表面粗糙,细胞边缘不清晰,表明固定后观测到的细胞与生理状态下活细胞的表面形貌存在很大差异.

基于原子力显微镜技术的红细胞变形的能量学特征研究

目的探索红细胞变形过程中的被动变形与主动变形的关系,以及红细胞变形性与生理状态下ATP水平的关系。方法在37℃条件下,将正常人红细胞在含有(不含有)葡萄糖的溶液中进行能量耗竭处理,分别提取不同时间段的红细胞进行AFM测量、红细胞内ATP水平测量以及基于激光衍射法的红细胞变形能力宏观检测。

原子力显微镜对生理溶液中活细胞成像条件的研究

本文研究用原子力显微技术(AFM)在生理条件下对活细胞成像的基本方法,并对各种影响成像因素如针尖与细胞表面的非特异性相互作用、AFM悬臂弹性系数及细胞表面柔性等问题提供相应的解决方案。从而为AFM在成像的基础上对活细胞其它性质的研究提供基础。用本文方法清晰地显示了固定细胞与活细胞膜表面所具有的明显差别:活细胞膜完整平滑,固定细胞表面粗糙,边缘不整。

制备适合原子力显微镜观察甲状腺细胞标本方法的探讨

目的寻找适合原子力显微镜(atomic force microscopy,AFM)观察甲状腺活体组织细胞标本的最佳制备方法。方法选用压片组织细胞法、细胞印片法和酶消化离心涂片法制备适合于AFM观察的活体甲状腺组织细胞样品,对比观察三种方法制备的细胞样品在光学显微镜和AFM下的细胞分散度和图像清晰度,从而找出适合AFM观察甲状腺活体组织细胞样品的最佳制备方法。结果细胞印片法制备的甲状腺细胞样品在AFM对其进行扫描时,很容易找到单个细胞,杂质较少、干扰较小,且细胞表面形貌成像清晰,其他两种方法制备效果不理想。结论细胞印片法是最适合AFM观察甲状腺活体组织细胞样品的制备方法;利用AFM扫描活体甲状腺组织细胞的纳米级结构是确实可行的,为进一步利用AFM研究正常甲状腺细胞和肿瘤性甲状腺细胞提供了可能。

新显微技术首次观测到原子——UCLA应用冷原子显微镜成像技术阐明病毒结构

洛杉矶加州大学(UCLA)研究人员在不久前发表于《细胞》杂志上的文章称,他们在一个观测到的足够清晰的原子的分辨率上实现了细胞结构成像,这是首次发表在这一分辨率上对生物复杂体的成像。

单细胞成像观测研究进展

综述了近几年各种研究手段如STM,AFM和NOSM等在单细胞成像观测方面的研究进展,并对细胞成像观测的历史、现状及发展趋势作了综述。

原子力显微镜技术及其在细胞生物学中的应用

从原子力显微镜的发展、特点、操作模式以及联用技术等方面对原子力显微镜技术作了简要的介绍,从细胞固定方法、细胞成像、力检测以及细胞操纵等方面综述了原子力显微镜技术在细胞生物学方面的应用,并对原子力显微镜技术的发展进行了展望.

树突状细胞与卵巢癌细胞融合技术的动物实验

随着免疫磁珠技术的应用和发展，在卵巢癌抗肿瘤免疫方面以及树突细胞（dendritic cells,DC）的提取、纯化，融合技术方面进行了大量的研究，为探讨卵巢癌组织的免疫状态及肿瘤细胞逃避机体免疫监视的机制，并使卵巢癌的生物治疗成为可能。我们进行了卵巢癌细胞与DC细胞融合的动物实验，并获得了卵巢癌细胞与DC细胞融合后1～18天内存活的形态。

原子力显微镜技术在固相表面细菌吸附研究中的应用

原子力显微镜技术(Atomic force microscopy,AFM)可用于定量研究微生物细胞的表面形貌及与固相表面间的相互作用,并允许在近生理条件下直接测定细菌与固相表面间纳米水平的吸附力.简述AFM基本操作原理,综述近年来AFM在细菌吸附研究方面的细菌固定技术进展与挑战,非特异性相互作用如范德华力、静电力、疏水力、空间位阻及表面粗糙度等及细胞表面聚合物如多糖、蛋白质、脂多糖等对细菌吸附的贡献,并提出该领域今后研究的特点及应关注的问题.

基于原子力显微镜(AFM)的细胞黏弹特性测量与分析

细胞机械特性在细胞生理病理变化过程中起着重要指示作用,对其进行研究有助于了解生命活动奥秘以及疾病发生发展的内在机理.原子力显微镜(AFM)的发明为单细胞机械特性研究提供了新的技术手段,给细胞力学及癌症等重大疾病带来了大量新的认识.然而现有AFM细胞机械特性探测主要集中在细胞弹性特性,对细胞黏弹特性进行的研究和分析还较为缺乏.本文基于AFM开展了细胞黏弹特性测量和分析研究.首先建立了基于AFM单细胞压痕技术的细胞黏弹特性探测方法,基于此实现了对6种不同类型细胞(包括贴壁细胞、悬浮细胞、正常细胞、癌细胞、细胞系和原代细胞等)黏弹特性(松弛时间)的测量与表征,随后对测量结果进行回归分析揭示出细胞1阶松弛时间和2阶松弛时间之间的关联.研究结果加深了人们对细胞黏弹特性的认识,为单细胞机械特性研究提供了新的思路.

利用AFM和SNOM对淋巴细胞膜表面超微结构及其光学性质的初步研究

利用原子力显微镜(AtomicForceMicroscopy,AFM)对淋巴细胞表面形貌进行了形态学的初步研究,观察到了其膜表面其他显微技术所不能发现的超微结构.同时也运用扫描近场光学显微镜(ScanningNearfieldOpticalMi croscopy,SNOM)对淋巴细胞进行成像,观察了其对光的透射、吸收等光学性质,并对两种成像方法进行了比较.研究发现:淋巴细胞膜表面凹凸不平,分布着大量直径几十到几百纳米不等的小颗粒;淋巴细胞中央部位有自发荧光现象.结果表明,AFM和SNOM可作为进一步探讨淋巴细胞的结构与功能关系的有力工具.

肿瘤细胞生物力学的研究进展

本文介绍了肿瘤细胞生物力学在研究方法、粘弹性、细胞外基质、细胞骨架、分子学等方面的研究状况。

妇科肿瘤细胞的不同制备手段对AFM分析结果的影响

目的：探讨细胞培养技术、细胞印片技术和液基薄层细胞制片技术对原子力显微镜（ AFM）分析人卵巢癌细胞和宫颈癌细胞微观形貌的影响。方法采用细胞培养技术制备人低转移卵巢癌细胞株HO-8910和高转移卵巢癌细胞株HO-8910PM样品，细胞印片技术制备浆液性卵巢癌细胞样品，液基薄层细胞制片技术制备宫颈鳞癌细胞和正常宫颈细胞样品，并采用AFM对3种方法制备的细胞微观形貌进行对比，分析各自特点。结果3种方法制备的妇科肿瘤细胞样品，AFM观察均显示细胞核增大和胞质分散的形貌特征，以及多个细胞核易聚集和叠加重合，导致细胞尺寸进一步增大的特点。细胞培养技术制备的卵巢癌细胞，细胞呈长方形，整体长度为30～40μm，不能清楚分辨细胞核；细胞印片技术制备的卵巢癌细胞，细胞呈不规则的多边形，胞核为圆形，平均直径为15μm左右；液基薄层细胞制片技术制备的宫颈癌细胞，细胞为裸核、圆形，胞核与周围组织关系孤立，平均直径为30μm。结论细胞培养技术、细胞印片技术和液基薄层细胞制片技术制备的妇科肿瘤细胞样品均适用于AFM的观察和分析。不同类型的肿瘤细胞受制备方法不同的影响在基底上的形态不同。

基质刚度调控细胞-细菌相互作用的力学生物学机制研究

目的致病菌劫持并内化入宿主细胞造成持续感染和继发感染。然而,细胞外基质刚度等力学微环境因素如何调节细菌感染及抗菌治疗的力学生物学机制尚不明晰。方法结合细胞微图案化技术构建刚度可调的细胞外基质力学微环境,建立宿主细胞-细菌相互作用实验平台,基于细胞牵引力显微镜方法、原子力显微镜技术、蒙特卡洛模拟算法和单细胞测序技术研究细胞-细菌相互作用的时空动态特征和规律,在此基础上定量探究基底刚度对于内化细菌抗生素治疗的调节作用和机制。

《单细胞分析》

单细胞分析是分析化学、生物学和医学多学科相互渗透发展形成的跨学科前沿领域。 分析化学新方法新技术丛书——《单细胞分析》，由武汉大学程介克教授等著。全书共分15章，全面系统地介绍了单细胞分析的各种方法，包括毛细管电泳、微流控芯片、多种光学显微镜（荧光显微镜、聚焦荧光显微镜、全内反射荧光显微镜、多光子荧光显微镜、荧光相关显微镜、近场扫描光学显微镜等）、扫描电化学显微镜、质谱成像、原子力显微镜、扫描隧道显微镜图像分析、阿达玛变换显微光谱及成像、肿瘤电化学及免疫分析、动力学分析、荧光及发光探针、纳米技术以及实时动态检测等新技术和新方法。

神经元膜NMDA受体蛋白免疫复合物单分子纳米结构及定位AFM比较研究(英文)

目的 探讨NMDAr(N- 甲基- D- 天冬氨酸受体)在神经细胞膜表面定位,对比不同成像方法的特点,建立纳米尺度神经细胞膜表面蛋白单分子三维标记的免疫细胞化学新方法。方法 应用原子力显微镜,对分布在云母表面的抗NMDAR1亚单位IgG 葡萄球菌蛋白A 胶体金颗粒免疫标记复合物分子进行扫描,明确其特定的三维结构作为对照标准,然后扫描结合了免疫标记复合物分子的神经细胞膜表面,对表面形貌作出对比后确定目的抗原的定位和复合物三维结构。并与光镜、激光共聚焦、扫描电镜等方法进行对比。结果 在空白云母表面,免疫复合物分子在原子力显微镜下呈现出均匀分散粒径为49nm的特征性球形结构。在神经元表面结合免疫标记物后可以发现有大量的粒径为53nm的球形或双球形(短棒状)结构,颗粒均匀,截面为双峰或单峰。光镜下染色成片状结果,在共聚焦显微镜下荧光呈颗粒点状分布,扫描电镜结果为单个或结合颗粒,缺乏三维成像能力。结论 原子力显微镜下免疫胶体金标记技术可以在纳米尺度对目的膜受体蛋白进行定位和表面三维结构测定。NM- DA受体蛋白可以结合一个或两个胶体金复合物,与传统成像手段相比,原子力显微镜下胶体金标记方法可以对单个膜NMDA受体蛋白抗原进行定位、定性、定量标记测定。