细胞周期相关激酶在卵巢癌细胞中的亚细胞定位及其表达的意义

目的分析细胞周期相关激酶(CCRK)在卵巢癌细胞中的亚细胞定位,研究CCRK在正常卵巢组织与卵巢癌组织中的表达差异,分析CCRK表达与卵巢癌患者预后的关系。方法采用激光共聚焦显微镜确定CCRK在卵巢癌细胞中的亚细胞定位,应用免疫组织化学染色(IHC)检测130例卵巢癌组织与30例正常卵巢组织中CCRK表达水平,并将CCRK表达水平与患者预后进行分析。结果激光共聚焦显微镜检测表明CCRK在卵巢癌细胞中的表达主要定位于细胞质和核膜周围,细胞核内也有少量分布。与正常卵巢组织相比,卵巢肿瘤组织中CCRK表达水平明显升高(P<0.05),CCRK表达上调与卵巢癌患者预后呈负相关(P<0.001)。结论 CCRK在卵巢癌细胞中的表达主要定位于细胞质和核膜周围,其在卵巢癌组织中表达异常上调与患者预后密切相关,提示CCRK在卵巢癌发生、发展过程中可能起重要作用。

人细胞周期相关激酶启动子的克隆和初步分析

克隆人的细胞周期相关激酶(CCRK)基因启动子,分析与其表达有关的转录调控因子。通过巢式PCR方法,从人的基因组总DNA中分离出CCRK基因5'端非翻译区大小为1072bp的片段。这段片段的3'端起始点在第一个外显子里第一个翻译密码子ATG(+1)上游128bp处。以1072bp为模板,对启动子进行5'端删除分析,分别扩增951bp穴-1072/-128雪、564bp穴-692/-128雪、313bp穴-441/-128雪、127bp穴-239/-128雪的片段,与pGL3-Basic荧光素酶报告载体重组构建,人工加上克隆位点,5'端带有KpnI、3'端带有XhoI位点。瞬时转染恶性神经胶质瘤细胞株U373,通过双荧光素酶活性进行分析。对分离出的1072bp的片段进行测序,结果与GenBank(AccessionAF035013雪的序列比较,同源序列达到98%。双荧光素酶活性分析564bp片段有最强的活性,313bp片段为有活性的最小片段。本研究为进一步研究分析CCRK的核心启动子和与其相关的转录因子奠定基础。

宫颈癌组织中细胞周期相关激酶的表达功能与化疗药物敏感性的关系

目的探究宫颈癌组织中细胞周期相关激酶(CCRK)的表达功能与化疗药物敏感性的关系。方法收集不同发展时期的90例宫颈癌样本并从中提取出Caski细胞系,通过RT-PCR、Northern blot鉴定筛选最有效的细胞系克隆,建立稳定沉默CCRK的宫颈癌细胞系模型,化疗药物顺铂、5-氟尿嘧啶处理Caski细胞系,分别检测化疗药物处理前后的Caski细胞系的CCRK表达功能。结果Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的宫颈癌组织中CCRK蛋白表达量组间比较差异具有统计学意义(P<0.05)。随着宫颈癌临床分期的增加,CCRK表达的阳性率逐渐升高,Ⅱ、Ⅲ、Ⅳ期的宫颈癌组织CCRK表达的阳性率组间比较差异具有统计学意义(P<0.05);采用5-氟尿嘧啶处理的宫颈癌Caski细胞样本CCRK阳性化疗药物敏感度为49.2%,采用顺铂的CCRK阳性化疗药物敏感度为62.7%,采用5-氟尿嘧啶+顺铂的CCRK阳性化疗药物敏感度为88.1%,三组间差异具有统计学意义(P<0.05)。采用5-氟尿嘧啶、顺铂及5-氟尿嘧啶+顺铂的CCRK阴性化疗药物敏感度差异具有统计学意义(P<0.05)。结论宫颈癌组织中CCRK的表达功能与化疗药物敏感性具有显著相关性,CCRK的表达能够为宫颈癌的临床诊断提供参考,并能为宫颈癌的化疗治疗提供指导与参考。

久泻灵颗粒对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎大鼠结肠髓样分化因子88和白细胞介素受体相关激酶1表达的影响

目的观察久泻灵颗粒对脾肾阳虚型溃疡性结肠炎(UC)大鼠结肠髓样分化因子88(MyD88)和白细胞介素受体相关激酶1(IRAK1)表达的影响,探讨其作用机制。方法采用复合方法制作动物模型。90只Wistar大鼠随机分为空白组、模型组、阳性药组和久泻灵高、中、低剂量组,各给药组给予相应药物灌胃。RT-q PCR、免疫组化和Western blot分别检测MyD88、IRAK1基因和蛋白的表达。结果与空白组比较,模型组大鼠MyD88、IRAK1基因和蛋白表达均增强(P<0.01);与模型组比较,各给药组大鼠MyD88、IRAK1基因和蛋白表达均减弱(P<0.01),久泻灵颗粒高剂量组最为明显。结论久泻灵颗粒可抑制MyD88、IRAK1的表达,影响MyD88信号通路的传导,阻滞下游炎症因子的释放,从而达到治疗脾肾阳虚型UC的目的。

白介素-1受体相关激酶-M在系统性红斑狼疮患者单核细胞中的表达及与临床的相关性

目的:研究白介素-1受体相关激酶-M(Interleukin-1 receptor associated kinases M,IRAK-M)在系统性红斑狼疮(Systemic lupus erythematosus,SLE)患者单核细胞中的表达情况及与临床的相关性。方法:采用实时荧光定量PCR技术,检测SLE组和健康对照组单核细胞中IRAK-M的mRNA表达量;采用酶联免疫吸附试验法检测抗双链DNA抗体(ds DNA)和抗单链DNA抗体(ss DNA);采用动态免疫散射比浊法测定补体3(C3)、补体4(C4)和C-反应蛋白(CRP);采用魏氏法测定红细胞沉降率(ESR)。同时,使用Pearson或Spearman分析IRAK-M与SLEDAI评分、ds DNA、ss DNA、C3、C4、CRP和ESR的相关性。结果:1SLE组IRAK-M的mRNA表达量明显低于健康对照组(P<0.05),活动期SLE组IRAK-M的mRNA表达量明显低于稳定期SLE组(P<0.05)。2SLE组ds DNA、ss DNA、CRP和ESR水平明显高于健康对照组(P<0.05),C3和C4水平明显低于健康对照组(P<0.05);而且,活动期SLE组ds DNA、ss DNA、CRP和ESR水平明显高于稳定期SLE组(P<0.05),C3和C4水平明显低于稳定期SLE组(P<0.05)。3相关分析显示:IRAK-M的mRNA表达量与C3成正相关(P<0.05),与SLEDAI评分、ds DNA、CRP、ESR呈负相关(P<0.05),与ss DNA和C4无相关性(P>0.05)。结论:IRAK-M在SLE发病机制中起着重要的作用;定量检测IRAK-M的mRNA表达量可监测SLE疾病活动度和判断预后。同时,对SLE患者ds DNA、ss DNA、CRP、C3、C4和ESR水平的常规检测和定期监测是非常必要的。

白细胞介素-1受体相关激酶家族与自身免疫性疾病

自身免疫性疾病的发病机制复杂,与免疫调节异常有关。白细胞介素-1受体相关激酶(IL-1 receptor-associatedkinase,IRAK)作为TIR(Toll/IL-1 receptor)信号通路中的重要连接体,通过调节相关信号转导影响机体的免疫状态,在自免疫性疾病的发生发展中起重要作用。文中综述IRAK的分子特点、作用机制及其与自身免疫性疾病的关系等方面的研究进展。

细胞周期突变体相关蛋白激酶2、P-糖蛋白和谷胱甘肽巯基转移酶-π在宫颈癌中的表达及临床意义

目的检测宫颈癌中细胞周期突变体(NIMA)相关蛋白激酶(Nek2)与耐药蛋白P-糖蛋白(P-gp)、胱甘肽巯基转移酶-π(GST-π)的表达及其与临床病理特征的相关性。方法应用免疫组织化学法检测144例宫颈癌组织和32例慢性宫颈炎非癌组织中Nek2、P-gp、GST-π的表达。结果 1Nek2、P-gp和GST-π在宫颈癌及宫颈炎组织中的阳性表达率分别为(51.4%vs 31.2%)、(55.6%vs 12.5%)和(73.6%vs 53.1%),组间比较差异有统计学意义(P<0.05)。2Nek2表达与宫颈癌组织学分级、临床分期相关(P<0.05),与年龄、组织学类型、浸润深度、细胞角蛋白(CK)、CK14、癌胚抗原(CEA)、抗癌基因P16、生存时间无关(P>0.05)。P-gp、GST-π在宫颈癌的阳性表达与以上临床病理特征无相关性(P>0.05)。3宫颈癌中Nek2与P-gp、GST-π表达呈正相关(r=0.193和0.207,P<0.05)。结论 Nek2可能介导宫颈癌中P-gp、GST-π的表达。Nek2、P-gp及GST-π蛋白在宫颈癌发生、发展及耐药机制中发挥重要作用。联合检测对宫颈癌治疗方案的合理制定及化疗反应性的评估可能具有积极的临床指导意义。

白细胞介素1受体相关激酶4活性在皮瓣缺血再灌注损伤中的作用

背景:白细胞介素1受体相关激酶4活性引发炎症及感染的作用已得到广泛认可,但其对皮瓣缺血再灌注损伤是否有影响尚无文献报道。目的:探讨白细胞介素1受体相关激酶4活性在皮瓣缺血再灌注损伤中的意义。方法:将36只雄性SD大鼠按随机数字表法分为假手术组、缺血再灌注损伤组、白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂组,每组12只。制备右下腹岛状皮瓣缺血再灌注损伤模型,白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂处理组于再灌注前腹腔注射1 mL白细胞介素1受体相关激酶1/4抑制剂(100μmol/L),分别采集缺血再灌注后1,2,4,6 h的皮瓣行组织病理学观察,取缺血再灌注后1 h的皮瓣组织行白细胞介素1受体相关激酶4的蛋白表达量,并于术后7 d计算皮瓣存活比例。结果与结论:组织病理学观察显示,与缺血再灌注损伤组相比,白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂组中性粒细胞浸润及组织水肿程度明显改善,白细胞介素1受体相关激酶4的蛋白表达量逐渐降低。术后7 d缺血再灌注损伤组皮瓣存活比例为(51.70±7.62)%,白细胞介素1受体相关激酶4抑制剂组皮瓣存活比例高达(86.56±12.23)%,两组比较差异有显著性意义(P<0.01)。提示大鼠皮瓣缺血再灌注损伤后,可以通过抑制白细胞介素1受体相关激酶4活化提高移植皮瓣的成活率。

存活素、细胞S相激酶相关蛋白2在非小细胞肺癌中的表达及其意义

目的探讨存活素(Survivin)基因和细胞S相激酶相关蛋白2(Skp2)在非小细胞肺癌组织中的表达及其意义。方法收集60例非小细胞肺癌患者的肺癌组织标本和40例癌旁正常肺组织标本,采用免疫组化技术检测标本中Survivin和Skp2的表达,并分析其与患者的临床病理之间的关系。结果 Survivin、Skp2在非小细胞肺癌组织中的表达率高于癌旁正常肺组织(P<0.05)。肺癌患者Skp2阳性率与肺癌组织学病理类型、分化程度高低、TNM分期、是否伴随淋巴结转移、吸烟与否及Survivin表达有关(P<0.05)。非小细胞肺癌组织Survivin与Skp2的表达呈正相关关系(P<0.05)。结论 Survivin、Skp2过度表达可能参与非小细胞肺癌的发生发展,检测肺癌组织Survivin与Skp2的表达有助于临床诊治肺癌患者和判断预后。

白细胞介素1受体相关激酶4基因沉默抑制人成骨样细胞相关基因的表达

背景:造成假体周围骨溶解的完整分子机制目前尚未完全清楚。假体周围骨溶解、吸收是人工关节松动的典型病理生理过程。白细胞介素1通过MAPK信号通路影响骨吸收进程。目的:实验通过观察siRNA沉默白细胞介素1受体相关激酶4(interleukin-1 receptor-associated kinase-4,IRAK-4)基因表达对人成骨样细胞株MG63的MAPK信号转导通路的影响,为防治人工关节置换后假体周围骨溶解提供实验基础。方法:以Lipofectamine 2000为载体将IRAK-4-siRNA转染入MG63细胞。实验分为3组,空白组不加入任何转染试剂;对照组以scrambled siRNA序列进行转染;沉默组以特异性IRAK-4-siRNA序列进行转染。Western blot检测靶细胞细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。结果与结论:与对照组相比,靶基因沉默组的IRAK-4 mRNA及蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。MG63细胞IRAK-4表达下调后,与空白组和对照组相比,c-Jun氨基末端激酶1/2P46、磷酸化细胞外调节蛋白激酶1/2、磷酸化p38MAPK表达下调分别为62%,64%,68%(P<0.05)。结果证实,siRNA沉默IRAK-4基因抑制人成骨样细胞株MG63细胞外调节蛋白激酶、c-Jun氨基末端激酶和p38MAPK基因的表达。

细胞S期激酶相关蛋白2在喉鳞癌中的表达及意义

目的探讨细胞S期激酶相关蛋白2(Skp2)在喉鳞癌中的表达及与喉癌分化程度、淋巴结转移和预后的关系。方法在79例喉鳞癌中采用免疫组化方法检测Skp2蛋白的表达,分析Skp2与喉癌的分化程度、淋巴结转移和预后的关系,并以27例声带息肉组织作对照cSKp2在79例喉鳞癌和27例声带息肉中的阳性表达率分别为39.24%和11.11%,两者比较差异有统计学意义(P<0.01);Skp2蛋白表达与喉鳞癌的分化程度、淋巴结转移、预后有关(P<0.05);Skp2蛋白的阳性表达与喉癌患者的性别、年龄、发生部位、分期无关(P>0.05)。Skp2蛋白阳性表达的患者5年累计生存率29.41%(5/13),明显低于Skp2阴性表达的患者88.24%(30/33)。结论 Skp2蛋白与喉鳞癌的分化程度、转移和预后相关,故可作为评价喉鳞癌的恶性程度及预后的参考指标。

细胞周期相关蛋白激酶2在结肠癌中的表达及临床意义

目的:探索细胞周期相关蛋白激酶2(NIMA-related kinase 2,NEK2)在结肠癌中的表达及临床意义。方法:回顾性分析武汉市第一医院2012年11月至2015年5月间收治的120例结肠癌患者临床资料及随访情况。采用免疫组织化学法检测结肠癌组织与癌旁组织中NEK2的表达情况,依据结肠癌免疫组织化学结果分成NEK2高表达组和低表达组,卡方检验分析NEK2的表达与病理因素的关系,单因素及多因素分析影响总生存率及累计复发率的危险因素,Kaplan-Meier(K-M)法绘制生存曲线。结果:NEK2在结肠癌组织中的表达显著高于癌旁组织。NEK2高表达组与年龄(P=0.260)、性别(P=0.580)、肿瘤直径(P=0.522)、浆膜浸润(P=0.116)无关,而与肿瘤分化程度(P=0.021)、淋巴结转移(P=0.017)、AJCC分期(P=0.018)相关。AJCC分期及NEK2的表达为影响总生存率和累计复发率的独立影响因子。NEK2高表达组1,3年总生存率分别为33.4%,19%,NEK2低表达组1,3年总生存率为70.3%,35%,NEK2高表达组1,3年总生存率低于NEK2低表达组(P<0.05);NEK2高表达组1,3年累计复发率分别为69.7%,84.3%,NEK2低表达组1年累计复发率为35.8%,72.4%,NEK2高表达组1,3年累计复发率高于NEK2低表达组(P<0.05)。结论:NEK2在结肠癌组织中高表达,NEK2高表达与恶性临床病理因素相关,NEK2是影响结肠癌患者预后的独立危险因素。

白藜芦醇对人白细胞介素-1受体相关激酶-M基因表达的抑制作用及其机制

目的探讨白藜芦醇对人白细胞介素-1受体相关激酶-M(IRAK-M)基因表达的抑制作用及其分子机制。方法用不同浓度的白藜芦醇分别作用于转染神经前体细胞表达发育调控样蛋白4(Nedd4L)-HA或IRAK-M-Flag质粒的Hela细胞和人单核细胞株THP1细胞,处理20 h后采用Western印迹法检测其Nedd4L和IRAK-M的表达。在A549和Hela细胞中分别共转染IRAK-M-Flag和不同浓度的Nedd4L-HA表达质粒,36 h后采用Western印迹法检测IRAK-M和Nedd4L的表达。用IRAK-M-Flag和Nedd4L-HA表达质粒分别单独转染、共同转染至Hela细胞,36 h后用细胞裂解液处理细胞,采用免疫共沉淀法检测IRAK-M与Nedd4L的相互作用。在A549细胞中分别共转染IRAK-M-Flag和Nedd4L-HA表达质粒,36 h后采用免疫荧光法检测IRAK-M和Nedd4L的共定位情况。结果 Hela细胞中分别转染2μg外源Nedd4L-HA或IRAK-M-Flag质粒24 h后,0、10、20μmol/L白藜芦醇处理20 h,Western印迹法检测结果显示,10、20μmol/L白藜芦醇处理组的Nedd4L-HA蛋白质相对表达量均显著高于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.01),而10、20μmol/L白藜芦醇处理组IRAK-M-Flag蛋白质相对表达量均显著低于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.05),且20μmol/L白藜芦醇处理组显著低于10μmol/L白藜芦醇处理组(P<0.01)。0、10、20μmol/L白藜芦醇处理THP1细胞20 h,Western印迹法检测结果显示,10、20μmol/L白藜芦醇处理组的Nedd4L蛋白质相对表达量均显著高于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.01),而IRAK-M蛋白质相对表达量均显著低于0μmol/L白藜芦醇处理组(P值均<0.05)。在A549和Hela细胞中分别转染1μg的IRAK-M-Flag和不同质量(0、0.5、1μg)的Nedd4L-HA表达质粒,Western印迹法结果显示,在A549细胞中,0.5、1μg Nedd4L-HA转染组的IRAK-M-Flag蛋白质相对表达量均显著低于0μg Nedd4L-HA转染组(P值均<0.01);在Hela细胞中,0.5、1μg Nedd4L-HA转染组的IRAK-M-Flag蛋白质相对表达量均显著低于0μg Nedd4L-HA转染组(P值均<0.01)。用IRAK-M-Flag、Nedd4L-HA表达质粒分别单独转染、共同转染至Hela细胞中,免疫共沉淀检测结果显示,在共表达IRAK-M和Nedd4L的细胞裂解物中,用抗Flag的抗体能将Nedd4L-HA沉淀下来,用抗HA的抗体同样能将IRAK-M-Flag沉淀下来。将表达质粒IRAK-M-Flag和Nedd4L-HA共同转染至A549细胞中,36 h后免疫荧光检测结果显示,在共转染的细胞中,可观察到绿色荧光和红色荧光以重叠形式分布于细胞膜和细胞质中。结论白藜芦醇可抑制IRAK-M蛋白的表达,其作用机制可能与Nedd4L蛋白的表达上调有关。

饲粮中添加不同比例黄芪副产物对绵羊脾脏中Toll样受体2和白细胞介素-1受体相关激酶4表达的影响

本试验旨在研究基础饲粮中添加不同比例黄芪副产物对绵羊脾脏中Toll样受体2(TLR2)和白细胞介素-1受体相关激酶4(IRAK4)表达的影响。选取健康、体重[(27.43±3.61)kg]接近的3月龄澳洲白与湖羊杂交F1公羔68只,随机分为4组,每组17只羊。对照组饲喂基础饲粮,试验组分别在基础饲粮中添加2%(2%组)、4%(4%组)、6%(6%组)的黄芪副产物。预试期10 d,正试期60 d。结果表明:1)各组绵羊的终末体重、平均日增重和平均干物质采食量差异不显著(P>0.05)。2%组羔羊的脾脏指数显著高于对照组、4%组和6%组(P<0.05),而4%组、6%组与对照组之间差异不显著(P>0.05)。2)2%组绵羊脾脏中TLR2和IRAK4的mRNA和蛋白相对表达量显著高于对照组、4%组和6%组(P<0.05)。3)免疫组化染色发现TLR2蛋白主要定位在饲喂不同比例黄芪副产物绵羊脾脏红髓的脾窦中,IRAK4蛋白主要定位在饲喂不同比例黄芪副产物绵羊脾脏红髓的脾索中。由此可见,基础饲粮中添加2%的黄芪副产物不仅可以增加绵羊的脾脏指数,还可以上调脾脏中TLR2和IRAK4基因的表达,从而在机体的免疫调节中发挥作用。

细胞周期S期激酶相关蛋白2预测乳腺癌预后价值的Meta分析

目的:基于现有文献的Meta分析试阐述Skp2对乳腺癌(breast cancer,BC)预后的价值。方法:2015年10月之前在PubMed、EMBASE和Web of Science等数据库检索到的符合标准的研究。在95%可信区间(confidence interval,CI)内,以风险比(hazard ratio,HR)阐明Skp2表达和BC临床结果之间的相关性,包括总存活数(overall survival,OS)、无病生存数(disease-free survival,DFS)和BC带病生存数。结果:共计9个研究包括1820个病例。Meta分析结果表明:Skp2过表达与BC患者低OS(HR=2.58,95%CI:1.83~3.63,P=0.000)和低DFS(HR=2.12,95%CI:1.48~3.05,P=0.000)相关。结论:Skp2过表达是肿瘤低生存率的独立危险因素。

巴马小型猪冠状动脉微栓塞后白细胞介素-1受体相关激酶1、肿瘤坏死因子受体相关因子6及AU碱基富集区RNA结合因子1 mRNA的表达及意义

目的探讨巴马小型猪冠状动脉微栓塞(CME)后心肌组织白细胞介素-1受体相关激酶1(IRAK1)、肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)及AU碱基富集区RNA结合因子1(AUF1)的动态表达情况及其意义。方法将30只巴马小型猪分为假手术组(n=5)和CME组(n=25)。CME组经微导管于左前降支中远端注入微栓塞球混悬液;假手术组注射等量生理盐水。将CME组均分为5组于建模后3 h、6 h、9 h、12 h、24 h进行观察;假手术组小型猪于6 h后进行观察。光镜下观察各组心肌组织改变,并检测心肌组织IRAK1、TRAF6及AUF1 mRNA表达。结果建模后6 h,CME组血管内均可见微栓塞球,周围出现微梗死灶。建模后6 h,与假手术组比较,CME组心肌组织IRAK1、TRAF6及AUF1 mRNA的表达水平均显著增加(P<0.05)。CME组心肌组织IRAK1、TRAF6及AUF1 mRNA的表达水平都在建模后3 h和6 h升高,9 h达高峰,12 h和24 h下降;与3 h和24 h比较,CME组9 h心肌组织IRAK1、TRAF6及AUF1 mRNA的表达水平均显著增加(P<0.05)。结论 IRAK1、TRAF6及AUF1 mRNA高表达于CME后心肌组织,并呈现出明显的时间变化规律。

缺氧条件下大鼠神经元白细胞介素-1受体相关激酶-1的表达变化

目的观察大鼠神经元B35细胞株中白细胞介素-1受体相关激酶-1(interleukin-1 receptor-associated kina-ses-1,IRAK-1)mRNA及蛋白在缺氧后表达量的变化,并探讨其变化与神经元中TNF-α表达的关系。方法将培养的B35细胞置于低氧(3%O2、5%CO2、92%N2)条件下培养1、3、6、12、24、48、72 h,应用RT-PCR方法检测IRAK-1 mRNA表达的变化;Western blot检测IRAK-1蛋白含量的变化;激光扫描共聚焦观察IRAK-1在细胞内的分布及含量变化;酶联免疫吸附法检测培养液上清肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的含量,并与IRAK-1蛋白进行相关分析。结果B35细胞IRAK-1 mRNA表达与正常对照相比,1 h开始增加[(0.786±0.042),P<0.05],3 h增加明显[(0.947±0.055),P<0.05],6 h达到高峰(1.245±0.077),P<0.05],12 h仍维持在较高水平[(0.911±0.041),P<0.05],24 h降至正常水平以下但无明显差异[(0.596±0.047),P>0.05],48 h以后进一步减少[(0.520±0.049),P<0.05]。IRAK-1蛋白表达变化也呈类似趋势。相关性分析结果显示,培养上清液中TNF-α含量的变化与IRAK-1蛋白表达变化呈正相关(r=0.88,P<0.05)。结论神经元内存在TLR/IL-1R家族信号转导系统的关键因子IRAK-1,缺氧损伤可诱导其表达,与TNF-α的表达相关。

肿瘤中细胞周期相关激酶的研究进展

细胞周期相关激酶(cell cycle-related kinase,CCRK)是细胞周期蛋白依赖性激酶(cyclin-dependent kinase,CDK)家族中与人类肿瘤密切相关的成员。越来越多的研究发现,CCRK在宫颈癌、大肠癌、卵巢癌、胶质母细胞瘤、肺癌以及肝癌中高表达,在细胞周期中发挥重要作用,参与各种信号通路,调节肿瘤免疫反应,并且可以增强抗肿瘤药物的药效。本文对CCRK在各种肿瘤中的研究成果进行综述。

白细胞介素-1受体相关激酶1在脂多糖诱导的足细胞损伤中的作用及其机制

目的探讨白细胞介素(IL)-1受体相关激酶1(IRAK1)在脂多糖(LPS)诱导的足细胞损伤中的作用及其机制。方法将体外培养的永生化人足细胞分为5组:正常对照组(control组)、LPS组、LPS+空载转染组(LPS+si-NC组)、LPS+IRAK1干扰质粒转染组(LPS+si-IRAK1组)、LPS+肿瘤坏死因子受体相关因子6(TRAF6)干扰质粒转染组(LPS+si-TRAF6组)。采用蛋白质免疫印迹法(Western Blot)及实时荧光定量聚合酶链反应(RT-PCR)分别检测5组足细胞IRAK1和TRAF6蛋白及其mRNA的相对表达水平;采用免疫荧光检测5组足细胞紧密连接蛋白(ZO)-1、结蛋白(Desmin)的定位及相对表达水平;采用Western Blot检测5组足细胞IL-1β、IL-6、肿瘤坏死因子(TNF)-α、人核因子(NF)-κB抑制蛋白(IKB)α、NF-κB(p65)、磷酸化NF-κB(p-p65)蛋白的相对表达水平;采用免疫共沉淀(Co-IP)实验检测IRAK1和TRAF6结合情况。结果LPS组足细胞IRAK1、TRAF6蛋白及mRNA相对表达水平均高于control组,LPS+si-IRAK1组足细胞上述指标均低于LPS组(P<0.05)。LPS组、LPS+si-NC组足细胞Desmin、IL-1β、IL-6、TNF-α、p65、p-p65蛋白相对表达水平均高于control组,ZO-1、IKB-α蛋白相对表达水平均低于control组;LPS+si-IRAK1组、LPS+si-TRAF6组足细胞Desmin、IL-1β、IL-6、TNF-α、p65、p-p65蛋白相对表达水平均低于LPS组、LPS+si-NC组,ZO-1、IKB-α蛋白相对表达水平均高于LPS组、LPS+si-NC组(P<0.05)。Co-IP实验结果显示IRAK1与TRAF6存在结合。结论LPS诱导足细胞发生损伤并激活炎症反应,调控IRAK1通过靶向TRAF6/NF-κB通路减轻LPS导致的足细胞损伤。

卵巢癌细胞周期相关激酶与病理特性的相关性

目的探讨卵巢癌细胞周期相关激酶与病理特性的相关性。方法选择卵巢癌患者123例作为研究对象,采用免疫组化法检测病灶组织标本与癌旁组织标本的细胞周期相关激酶(cell cycle-related kinase,CCRK)表达水平,分析其与患者的病理特性的相关性。结果病灶组织的CCRK表达阳性率为54.5%,显著高于癌旁组织的2.4%(P<0.05)。在123例患者中,不同组织学分化、临床分期、远处转移、淋巴结转移患者的CCRK表达阳性率对比差异有统计学意义(P<0.05)。直线相关分析显示患者的CCRK表达与组织学分化、临床分期、远处转移、淋巴结转移、吸烟呈显著相关(P<0.05)。结论卵巢癌组织中细胞周期相关激酶(CCRK)呈高表达,与卵巢癌临床病理特征密切相关。