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大骨节病差异表达基因PAPSS2对成骨细胞矿化及碱性磷酸酶活性的影响 被引量:5
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作者 王伟卓 程一钊 +2 位作者 郭雄 王坤正 袁普卫 《西安交通大学学报(医学版)》 CAS CSCD 北大核心 2014年第2期175-181,共7页
目的探讨大骨节病差异表达基因PAPSS2在MC3T3-E1细胞成骨样分化过程中的表达及其对碱性磷酸酶(ALP)活性和细胞矿化的影响。方法培养MC3T3-E1细胞并诱导成骨分化,观察PAPSS2在成骨细胞分化过程中的基因及蛋白表达情况;用慢病毒介导的RNA... 目的探讨大骨节病差异表达基因PAPSS2在MC3T3-E1细胞成骨样分化过程中的表达及其对碱性磷酸酶(ALP)活性和细胞矿化的影响。方法培养MC3T3-E1细胞并诱导成骨分化,观察PAPSS2在成骨细胞分化过程中的基因及蛋白表达情况;用慢病毒介导的RNA干扰(RNAi)技术或逆转录病毒转染高表达载体,分别构建PAPSS2低表达慢病毒及逆转录病毒高表达载体包装,滴度测定,验证细胞转染效率;分别转染MC3T3-E1细胞并设空白对照组,观察PAPSS2沉默或高表达后ALP活性的变化及细胞成骨矿化的影响。结果 PAPSS2在成骨细胞分化过程中mRNA及蛋白均随着矿化过程表达增加。用慢病毒介导的RNAi技术,成功降低了MC3T3-E1成骨细胞中PAPSS2的表达,使用逆转录病毒转染高表达载体显著增加PAPSS2基因的表达。PAPSS2沉默表达时,ALP活性和细胞矿化作用显著降低,高表达后其作用相反。结论 PAPSS2可调节成骨细胞ALP活性和细胞矿化作用,其异常表达可能与大骨节病骨骼病变相关。 展开更多
关键词 大骨节病 成骨细胞 基因功能 碱性磷酸酶 骨关节炎 逆转录病毒 PAPSS2 细胞矿化
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rhBMP-2和FGF-2对成骨细胞矿化及ENPP1、ANK、TNAP表达的影响 被引量:1
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作者 李静 王明国 +2 位作者 杨世茂 刘金盼 文玉珍 《口腔颌面外科杂志》 CAS 2012年第5期333-336,共4页
目的:研究重组人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)和重组人碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)对成骨细胞(MC3T3-E1 Subclone 14)矿化及焦磷酸合成酶(ENPP1)、跨膜蛋白(ANK)和组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)表达的影响,探讨生长因子影响细胞矿化的机... 目的:研究重组人骨形态发生蛋白(rhBMP-2)和重组人碱性成纤维细胞生长因子(FGF-2)对成骨细胞(MC3T3-E1 Subclone 14)矿化及焦磷酸合成酶(ENPP1)、跨膜蛋白(ANK)和组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)表达的影响,探讨生长因子影响细胞矿化的机制。方法:将MC3T3-E1 Subclone 14细胞分成3组:成骨细胞诱导液(OS)成骨诱导培养组(对照组),OS与rhBMP-2培养组(rhBMP-2组),OS与FGF-2培养组(FGF-2组)。培养12 d后进行ALP活性检测及茜素红染色,实时荧光定量PCR检测矿化相关基因ENPP1、ANK和TNAP表达的差异。结果:rhBMP-2组ALP活性以及钙化结节明显高于对照组,ENPP1、ANK和TNAP均高表达;FGF-2组ALP活性以及钙化结节明显低于对照组,ENPP1和ANK呈高表达,TNAP低表达。结论:rhBMP-2和FGF-2通过调节ENPP1、ANK和TNAP的表达变化来影响骨的矿化。 展开更多
关键词 FGF-2 RHBMP-2 成骨细胞 细胞矿化 焦磷酸合成酶(ENPP1) 跨膜蛋白(ANK) 组织非特异性碱性磷酸酶(TNAP)
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2,3,7,8-四氯二苯对二恶英染毒对大鼠成骨细胞矿化能力的影响
3
作者 耿华欧 章锦才 +1 位作者 蔡海燕 王京滨 《广东牙病防治》 2008年第5期204-206,共3页
目的探讨2,3,7,8-四氯二苯对二恶英(2,3,7,8-TCDD)染毒对SD大鼠成骨细胞矿化能力的影响。方法培养新生SD大鼠颅骨来源的成骨细胞,随机分为2,3,7,8-TCDD染毒组和对照组(非染毒组)。采用矿化结节计数法评价2,3,7,8-TCDD染毒对细胞矿化能... 目的探讨2,3,7,8-四氯二苯对二恶英(2,3,7,8-TCDD)染毒对SD大鼠成骨细胞矿化能力的影响。方法培养新生SD大鼠颅骨来源的成骨细胞,随机分为2,3,7,8-TCDD染毒组和对照组(非染毒组)。采用矿化结节计数法评价2,3,7,8-TCDD染毒对细胞矿化能力的影响。结果2,3,7,8-TCDD染毒组矿化结节数为28.11±5.25,对照组矿化结节数为37.63±4.33,两组差异有统计学意义(P<0.01)。结论2,3,7,8-TCDD染毒使SD大鼠成骨细胞的矿化能力降低。 展开更多
关键词 成骨细胞 二恶英 细胞矿化
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SOST基因在人牙周膜细胞矿化诱导过程中的表达 被引量:2
4
作者 林婷婷 陆尔奕 《上海口腔医学》 CAS CSCD 北大核心 2012年第2期139-144,共6页
目的:探讨SOST基因在人牙周膜细胞矿化诱导过程中的表达变化,为进一步研究SOST基因在牙周组织中的作用提供理论基础。方法:在体外培养条件下,将矿化诱导液作用于人牙周膜细胞(7、14、21d),检测细胞矿化能力、SOST基因以及成骨标志基因... 目的:探讨SOST基因在人牙周膜细胞矿化诱导过程中的表达变化,为进一步研究SOST基因在牙周组织中的作用提供理论基础。方法:在体外培养条件下,将矿化诱导液作用于人牙周膜细胞(7、14、21d),检测细胞矿化能力、SOST基因以及成骨标志基因的表达变化。采用SPSS 17.0软件包对数据进行统计学分析。结果:随着诱导时间的增加,人牙周膜细胞的碱性磷酸酶染色及矿化钙结节染色程度增加,成骨标志基因以及SOST基因的表达量在矿化诱导第14天及21天后明显升高,差异均有统计学意义(P<0.05),并具有时间依赖性。结论:牙周膜细胞在mRNA水平能够表达SOST,而且矿化诱导作用对人牙周膜细胞中SOST基因的表达有促进作用。提示SOST参与人牙周膜细胞的成骨分化过程,并对牙周组织改建有重要作用。 展开更多
关键词 人牙周膜细胞:诱导 SOST
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鸡zp1基因对成骨细胞矿化的影响
5
作者 岳巧娴 黄晨轩 +2 位作者 张寅梁 陈辉 周荣艳 《生物工程学报》 CAS CSCD 北大核心 2023年第7期2684-2694,共11页
本研究旨在克隆编码鸡透明带1(zona pellucida 1,Zp1)蛋白的zp1基因,并研究其组织表达谱及在成骨细胞矿化中的作用。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测蛋鸡... 本研究旨在克隆编码鸡透明带1(zona pellucida 1,Zp1)蛋白的zp1基因,并研究其组织表达谱及在成骨细胞矿化中的作用。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(real-time fluorescence quantitative polymerase chain reaction,RT-qPCR)检测蛋鸡不同组织和性成熟启动前后胫骨中的zp1表达水平;将Zp1过表达载体转染至诱导分化8 d的鸡颅骨成骨细胞内,检测细胞外矿化基质和矿化相关基因表达。结果表明,鸡zp1基因全长3045 bp,编码958个氨基酸残基,具有2个N-糖基化位点。zp1基因在产蛋期鸡肝脏中高水平表达,其次为胫骨和卵黄膜,在蛋壳腺和心脏中不表达。鸡性成熟启动后血浆雌激素(estrogen,E2)、胫骨糖胺聚糖(glycosaminoglycan,GAG)含量和zp1表达量均极显著高于性成熟启动前。在过表达Zp1的鸡成骨细胞中添加雌激素后,细胞外矿化基质和矿化相关基因表达水平均显著升高。因此,zp1基因表达具有组织特异性,在雌激素作用下正向调控鸡成骨细胞矿化,为阐明Zp1在鸡产蛋期骨骼中的功能特性奠定了理论基础。 展开更多
关键词 zp1 成骨细胞 雌激素 细胞矿化
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核心结合因子α1诱导人牙乳头细胞矿化的相关蛋白表达 被引量:11
6
作者 余擎 肖明振 +3 位作者 吴补领 朱庆林 郭婷 李峰 《中华口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期271-274,I004,共5页
目的 在人牙乳头细胞中探讨核心结合因子α1 (corebindingfactorα1 ,cbfa1 )能否调控矿化相关蛋白的表达。方法 体外培养人牙乳头细胞 ,转染pcDNA3 cbfa1重组质粒 ,稳定表达cbfa1后检测碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase ,ALP)和骨钙... 目的 在人牙乳头细胞中探讨核心结合因子α1 (corebindingfactorα1 ,cbfa1 )能否调控矿化相关蛋白的表达。方法 体外培养人牙乳头细胞 ,转染pcDNA3 cbfa1重组质粒 ,稳定表达cbfa1后检测碱性磷酸酶 (alkalinephosphatase ,ALP)和骨钙素 (osteocalcin ,OC)含量 ,同时采用免疫组化、免疫印迹和PCR等方法观察骨桥素 (osteopontin ,OPN )、骨涎蛋白 (bonesialoprotein ,BSP)、骨连素(osteonectin ,ON)、牙本质基质蛋白 (dentinmatrixprotein 1 ,DMP1 )、牙本质涎蛋白 (dentinsialoprotein ,DSP)和牙本质涎磷蛋白 (dentinsialophosphoprotein ,DSPP)的表达。 结果 建立了稳定表达cbfa1基因和蛋白的人牙乳头细胞模型PC 3 ,发现转染后细胞的ALP和OC含量明显增高 ,OPN、BSP、ON、DMP1的表达也明显增高 ,但未发现牙本质特异性蛋白DSP及其编码基因DSPP的表达。结论 在人牙乳头细胞中 ,cbfa1能上调ALP和OC含量 ,诱导多种矿化组织特异性蛋白的表达 ,在牙齿发育矿化中有重要作用 。 展开更多
关键词 核心结合因子Α1 牙乳头细胞 细胞矿化 蛋白表达 基因转染 免疫组
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铁调素干预成骨细胞(hFOB1.19)后细胞膜转铁蛋白1、铁离子、矿化及成骨基因变化研究 被引量:8
7
作者 张鹏 刘禄林 +4 位作者 贾鹏 林华 赵理平 钱忠明 徐又佳 《中国骨质疏松杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第10期1011-1017,1048,共8页
目的探讨铁调素对成骨细胞铁代谢指标、骨代谢指标的影响和相互关系。方法成骨细胞(hFOB1.19)培养3 d后,使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨细胞(hFOB1.19)的膜转铁蛋白1(ferroportin1,Fpn1)的表达;再用不同浓度的铁调素(25 noml/... 目的探讨铁调素对成骨细胞铁代谢指标、骨代谢指标的影响和相互关系。方法成骨细胞(hFOB1.19)培养3 d后,使用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)检测成骨细胞(hFOB1.19)的膜转铁蛋白1(ferroportin1,Fpn1)的表达;再用不同浓度的铁调素(25 noml/L,50 noml/L,100 noml/L)干预培养环境,对照组加相同体积双蒸水,干预20 h,MTT法检测细胞增殖情况;激光共聚焦扫描显微镜(CLSM)检测成骨细胞内铁离子荧光染色后荧光强度变化情况;Von Kossa染色检测成骨细胞矿化情况;RT-PCR检测骨钙素(BGP)、I型胶原(COL1)、骨保护素(OPG)基因表达。结果 1、成骨细胞存在Fpn1表达;2、铁调素对成骨细胞增殖无显著影响(P>0.05);3、铁调素干预后,成骨细胞内铁离子含量增多,且与铁调素干预存剂量依赖性关系(P<0.05);4、铁调素干预后,成骨细胞矿化功能增强,且与铁调素干预存剂量依赖性关系(P<0.05);5、RT-PCR检测显示不同浓度铁调素干预后,各组COL1、OPG、BGP mRNA均有表达;不同浓度组的COL1、OPG、BGP mRNA表达光密度比值不同,组间密度比值比较存在统计学意义(P<0.05),但铁调素在400 nmol/L时抑制OPG的表达(P<0.05)。结论成骨细胞存在铁调素作用的膜转铁蛋白-1,所以铁调素干预成骨细胞培养环境后细胞内铁离子发生特异性变化,同时细胞矿化指标显著增加、细胞COL1、OPG、BGP mRNA表达含量增加;研究提示:铁调素可能通过膜转铁蛋白影响成骨细胞铁离子变化,细胞铁代谢变化可能引起细胞成骨指标上调改变。 展开更多
关键词 铁调素 铁离子 膜转铁蛋白1 细胞矿化 成骨基因
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大豆异黄酮和钙对大鼠成骨细胞增殖分化和矿化的作用 被引量:4
8
作者 田玉慧 杨献军 +2 位作者 李万里 杨瑞 岳汉军 《卫生研究》 CAS CSCD 北大核心 2003年第4期361-362,401,共3页
为探讨大豆异黄酮和钙对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和矿化的作用 ,体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮和葡萄糖酸钙对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 ... 为探讨大豆异黄酮和钙对体外培养大鼠颅骨成骨细胞增殖、分化和矿化的作用 ,体外培养新生大鼠颅骨成骨细胞 ,然后用噻唑盐 (MTT)法测定大豆异黄酮和葡萄糖酸钙对体外培养成骨细胞的增殖作用 ,氨基安替比林测酚法测成骨细胞内碱性磷酸酶 (ALP)活性 ,茜素红染色方法 (ARS)研究对成骨细胞矿化的影响。结果单纯补钙组大鼠成骨细胞增殖、分化和矿化无显著促进作用。大豆异黄酮可显著地促进成骨细胞的增殖和分化 ,并促使成骨细胞形成矿化结节 ,而补充大豆异黄酮同时补钙可使矿化结节团块增大。大豆异黄酮可以提高成骨细胞的增殖和分化 。 展开更多
关键词 大豆异黄酮 骨质疏松 成骨细胞 细胞增殖 细胞矿化
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BMP-2/Smads信号通路在低剂量X射线促成骨细胞分化与矿化中的作用 被引量:3
9
作者 王勤 吴波 +3 位作者 张建华 李玉前 周晓中 王新峦 《山东医药》 CAS 2018年第29期20-24,共5页
目的探讨骨形态蛋白2(BMP-2)/Smads信号通路在低剂量X射线促成骨细胞分化及矿化中的作用。方法将成骨细胞分为照射组及对照组,照射组给予单次0.1 Gy X射线照射,对照组处于相同的环境下不进行X射线照射。照射后24、48、72 h,采用CCK-8法... 目的探讨骨形态蛋白2(BMP-2)/Smads信号通路在低剂量X射线促成骨细胞分化及矿化中的作用。方法将成骨细胞分为照射组及对照组,照射组给予单次0.1 Gy X射线照射,对照组处于相同的环境下不进行X射线照射。照射后24、48、72 h,采用CCK-8法检测细胞增殖活性,采用对硝基苯磷酸二钠法检测细胞碱性磷酸酶(ALP)活性,采用茜素红染色剂进行细胞矿化染色、十六烷基吡啶试剂进行定量;利用RT-PCR检测BMP-2、Smad1、Smad5、Smad4、成骨相关因子2(Runx2)、锌指结构转录因子(Osterix)及骨钙素(OCN)的mRNA表达;另取成骨细胞分为0.1 Gy组、0.1 Gy拮抗剂组、control组及control拮抗剂组。0.1 Gy组、control组处理同上,两个拮抗剂组分别在0.1 Gy组及control组处理的基础上加入浓度为10μg/m L的头蛋白(NOGGIN)拮抗剂0.5 mg,照射72 h后,分别采用Western blotting及ELISA法检测上述各指标蛋白的表达,并进行各组间的比较。结果照射组与对照组各时间成骨细胞增殖活性比较差异无统计学意义(P均>0.05)。与对照组比较,照射后48 h,照射组ALP活性升高(P<0.05);照射后72 h,照射组细胞矿化定量增加(P<0.05);照射后48 h,照射组BMP-2、Smad1、Smad5、Smad4、Runx2、Osterix及OCN的mRNA表达上调(P均<0.05);照射后72 h,照射组Smad1 mRNA相对表达量高于对照组(P<0.05)。照射后72 h,0.1 Gy组BMP-2、Smad1、Smad4、Smad5、Runx2、Osterix及OCN的蛋白相对表达量高于control组(P均<0.05);0.1 Gy拮抗剂组与control拮抗剂组上述各指标蛋白表达均下降,两组间各指标蛋白表达差异无统计学意义(P均>0.05)。结论 BMP-2蛋白在低剂量X射线照射的成骨细胞中表达升高,其可通过其自分泌/旁分泌方式激活细胞Smads信号通路进而调控下游成骨基因的表达,从而促进成骨细胞分化与矿化。 展开更多
关键词 骨形态蛋白2/Smads信号通路 低剂量X射线 成骨细胞 细胞 细胞矿化
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人牙乳头细胞体外矿化特征及其分化表型的表达 被引量:8
10
作者 王景杰 牛忠英 +1 位作者 倪龙兴 张旻 《实用口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2001年第3期223-226,共4页
目的 :观察人牙乳头细胞体外矿化特征。方法 :组织块法培养人牙乳头细胞 ,取第三代细胞于矿化液中长期培养 ,检测不同培养时间细胞碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase,AL P)活性 ,骨钙素 (osteocal-cin,OC)活性 ,用倒置显微镜观察细胞生... 目的 :观察人牙乳头细胞体外矿化特征。方法 :组织块法培养人牙乳头细胞 ,取第三代细胞于矿化液中长期培养 ,检测不同培养时间细胞碱性磷酸酶 (alkaline phosphatase,AL P)活性 ,骨钙素 (osteocal-cin,OC)活性 ,用倒置显微镜观察细胞生长。结果 :体外培养的牙乳头细胞呈现以下表现特征 :复层增长 ,胞外基质分泌与矿化结节形成。在β- GP和 L -抗坏血酸存在条件下培养第 14天细胞内 AL P活性开始升高而 OC含量在 2 1d才开始升高 ,有细胞外基质分泌 ,但未见矿化。35 d产生特异性牙本质矿化结节。第42天以后 ,OC、AL P活性降低。结论 :培养的人牙乳头细胞具有成牙本质细胞某些表型 ,可在体外形成牙本质或牙本质样矿化物质 ,可作为研究牙本质形成机制的实验模型。 展开更多
关键词 牙胚 牙乳头 表型 细胞特征 培养
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稀土元素钇对体外培养成骨细胞增殖、分化、矿化及凋亡的影响 被引量:1
11
作者 唐春芳 刘喆豪 吴龙火 《赣南医学院学报》 2022年第3期221-224,246,共5页
目的:探讨稀土元素钇对成骨细胞增殖、分化、矿化及凋亡的影响,为研究稀土元素钇对骨质疏松的病理性发展提供一定理论指导。方法:⑴将成骨细胞MC3T3-E1分为对照组(给予PBS)和给药组(给予YCl_(3)至各梯度最终浓度为1×10^(-9),1×... 目的:探讨稀土元素钇对成骨细胞增殖、分化、矿化及凋亡的影响,为研究稀土元素钇对骨质疏松的病理性发展提供一定理论指导。方法:⑴将成骨细胞MC3T3-E1分为对照组(给予PBS)和给药组(给予YCl_(3)至各梯度最终浓度为1×10^(-9),1×10^(-8),1×10^(-7),1×10^(-6),1×10^(-5),1×10^(-4) mol·L^(-1)),利用CCK-8试验检测成骨细胞增殖活力;⑵选取3个浓度梯度YCl_(3)(最终浓度为1×10^(-8),1×10^(-6),1×10^(-4) mol·L^(-1))处理成骨细胞。采用NBT/BCIP试剂盒检测碱性磷酸酶(ALP)表达,根据吸光值分析ALP活性;采用茜素红S染色法检测细胞矿化程度;采用AO/EB双染法测细胞凋亡,利用荧光显微镜观察凋亡细胞形态,分析荧光强度和凋亡情况。结果:稀土元素钇在低剂量(1×10^(-9) mol·L^(-1))时可促进MC3T3-E1细胞增殖,且随着剂量的升高,钇细胞增殖能力活性表现为抑制作用。在浓度为1×10^(-5) mol·L^(-1)时,钇可显著抑制细胞增殖活性。同时,稀土元素钇对细胞ALP活性也表现为低促高抑现象,在浓度为1×10^(-8) mol·L^(-1)时,钇提高了ALP活性,而在浓度高于1×10^(-6) mol·L^(-1)时,ALP活性显著降低。钇显著抑制细胞矿化、诱导细胞凋亡,呈剂量依赖性。结论:稀土元素钇对体外培养MC3T3-E1细胞增殖、分化、矿化及凋亡具有一定的毒性作用,呈剂量依赖性。 展开更多
关键词 细胞增殖 ALP活性 细胞矿化 骨质疏松
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矿化细胞的仿生合成及其性能
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作者 马晓明 刘朋 +3 位作者 常毅 孟丽丽 崔凯庆 杨林 《河南师范大学学报(自然科学版)》 CAS 北大核心 2018年第6期44-53,共10页
为适应生存环境的不断变化,生物体可以在细胞的调控下组装生成胞内或胞外复杂且有序的无机有机复合纳米矿物质,从而得到具有胞内(外)无机纳米颗粒的矿化细胞.这些无机有机复合纳米矿物质赋予了生物体新的功能,使其在催化、电学、光学及... 为适应生存环境的不断变化,生物体可以在细胞的调控下组装生成胞内或胞外复杂且有序的无机有机复合纳米矿物质,从而得到具有胞内(外)无机纳米颗粒的矿化细胞.这些无机有机复合纳米矿物质赋予了生物体新的功能,使其在催化、电学、光学及生物医学等领域展现出了广泛的应用前景,同时也引起了人们极大的关注.受自然界生物矿化现象的启发,通过设计、修饰矿化基团,改性非矿化的生物体,人们构造出了类型多样、功能各异的矿化生物体.在此综述了利用仿生合成的方法,通过在细菌、真菌、植物及人体细胞等细胞内外合成不同种类无机有机复合纳米材料,从而得到具有新的应用性能矿化细胞的研究进展;着重评述了矿化细胞的仿生矿化合成方法、合成机制以及应用研究现状与前景,并对矿化细胞合成技术的发展趋势进行了展望. 展开更多
关键词 生物 生物合成 细胞 药物运输 生物催
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基于雌激素受体研究氯化锂干预成骨细胞的分化及自噬 被引量:4
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作者 付殷 孙贵才 +2 位作者 陈水林 樊祥伟 彭宇飞 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2019年第5期680-684,共5页
背景:临床应用锂治疗造血系统疾病和双极性疾病已经有数十年,并且发现锂可以直接刺激骨髓间充质干细胞的增殖。目的:研究雌激素受体抑制下氯化锂对大鼠成骨细胞增殖分化及自噬的影响。方法:实验选取10只出生72 h的SPF级SD乳鼠(由黑龙江... 背景:临床应用锂治疗造血系统疾病和双极性疾病已经有数十年,并且发现锂可以直接刺激骨髓间充质干细胞的增殖。目的:研究雌激素受体抑制下氯化锂对大鼠成骨细胞增殖分化及自噬的影响。方法:实验选取10只出生72 h的SPF级SD乳鼠(由黑龙江中医药大学提供)。采用酶消化法和茜素红染色法获得和鉴定成骨细胞。取对数生长期成骨细胞,于培养基中加入不同浓度的氯化锂(0,1,2,5 nmol/L)处理24 h,采用CCK-8法检测各组细胞增殖情况。另取成骨细胞随机分为空白组(正常培养细胞)、抑制剂组(10^(-7) mol/L ICI182780)、治疗组(5 nmol/L氯化锂+10^(-7) mol/L ICI182780)。采用钙化结节染色及碱性磷酸酶活性检测各组成骨细胞分化情况;Western blot法测定各组成骨细胞中Beclin1和Runx2蛋白表达情况。结果与结论:(1)倒置显微镜下观察细胞多为单核、多边形及梭形,局部有细胞密集的细胞团;(2)CCK-8法检测结果显示不同浓度的氯化锂都能对成骨细胞增殖产生促进作用,呈浓度依赖性;(3)茜素红染色结果显示与空白组比较,抑制剂组成骨细胞矿化能力明显降低,与抑制剂组比较,治疗组成骨细胞矿化结节能力明显增加(P <0.05);活性测定结果显示与空白组比较,抑制剂组中碱性磷酸酶活性明显降低,与抑制剂组比较,治疗组中碱性磷酸酶活性明显增加(P <0.05);(4)Western blot结果显示与空白组比较,抑制剂组中Beclin1和Runx2蛋白表达明显降低,与抑制剂组比较,治疗组中Beclin1和Runx2蛋白表达显著增加(P <0.05);(5)结果提示,雌激素受体抑制下氯化锂可以提高大鼠成骨细胞增殖分化及自噬。 展开更多
关键词 骨质疏松 成骨细胞增殖 雌激素受体 自噬 茜素红染色 成骨细胞矿化结节 国家自然科学基金 成骨细胞 组织工程
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葛根素与淫羊藿苷对小鼠前成骨细胞生物学性能影响的比较 被引量:4
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作者 乔鲁卉 马子雨 +1 位作者 郭浩宇 侯玉东 《中国组织工程研究》 CAS 北大核心 2023年第6期872-877,共6页
背景:在种植区域骨缺损的修复方式中,骨组织工程修复策略相较于传统的自体骨移植方式具有创伤小、无免疫原性以及促进骨再生的优势,将不良反应较化学合成药物小的中药成分作用于骨质疏松患者骨缺损区域的方案是骨组织工程药物递送的重... 背景:在种植区域骨缺损的修复方式中,骨组织工程修复策略相较于传统的自体骨移植方式具有创伤小、无免疫原性以及促进骨再生的优势,将不良反应较化学合成药物小的中药成分作用于骨质疏松患者骨缺损区域的方案是骨组织工程药物递送的重要组成部分。目的:比较葛根素与淫羊藿苷对小鼠前成骨细胞(MC3T3-E1)增殖、分化和矿化的影响,选择更为有效的促成骨药物。方法:确定葛根素、淫羊藿苷促MC3T3-E1细胞增殖、分化的最适浓度后将实验细胞分为4组:对照组、17β-雌二醇组和最适浓度葛根素组及淫羊藿苷组。在药物干预后第1,4,7天进行细胞增殖活力检测;成骨诱导第1,7,14天进行碱性磷酸酶活性检测;成骨诱导第21天进行钙化结节茜素红染色;成骨诱导第7天Real Time-PCR检测骨保护蛋白、Runt相关转录因子2 mRNA的表达水平;鬼笔环肽染色观察培养24 h的细胞骨架形态。结果与结论:葛根素与淫羊藿苷促进细胞增殖、分化的最适浓度分别为10^(-7)mol/L,10^(-6)mol/L;经比较发现,培养第4天时,与淫羊藿苷组相比,葛根素促进细胞增殖的能力更强,差异有显著性意义(P<0.05);成骨诱导7 d时,与葛根素组对比,淫羊藿苷组碱性磷酸酶活性更强,骨保护蛋白、Runt相关转录因子2 mRNA的表达水平上调显著,且在诱导21 d时钙结节形成数量和面积显著增加,差异有显著性意义(P<0.05)。培养24 h细胞骨架形态呈网格状铺展,与对照组相比,雌激素组、葛根素组、淫羊藿苷组肌动蛋白走行清晰。结果表明,葛根素对MC3T3-E1细胞增殖的促进作用更强,淫羊藿苷对MC3T3-E1细胞分化、矿化促进作用更强。 展开更多
关键词 葛根素 淫羊藿苷 细胞增殖 细胞 细胞矿化 成骨细胞
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微小RNA539通过调控远端同源异型盒2基因表达介导MC3T3-E1细胞成骨矿化过程 被引量:3
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作者 韩建国 文平 +5 位作者 杨扬 赵志军 张震军 童康强 吉瑶 张春阳 《中国临床药理学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2019年第15期1636-1639,共4页
目的研究在成骨细胞分化中微小RNA(miRNA)调节成骨细胞矿化的机制。方法用β-甘油磷酸钠和抗坏血酸诱导MC3T3-E1细胞矿化过程。将MC3T3-E1细胞分为2组:对照组(α-MEM培养基)和矿化组(α-MEM培养基+50 mg·L^-1抗坏血酸+10 mmol·... 目的研究在成骨细胞分化中微小RNA(miRNA)调节成骨细胞矿化的机制。方法用β-甘油磷酸钠和抗坏血酸诱导MC3T3-E1细胞矿化过程。将MC3T3-E1细胞分为2组:对照组(α-MEM培养基)和矿化组(α-MEM培养基+50 mg·L^-1抗坏血酸+10 mmol·L^-1β-甘油磷酸钠)。用实时荧光定量聚合酶链反应和蛋白质印迹法检测2组细胞的miRNA-539和Dlx2 mRNA表达水平和蛋白表达水平。结果第14天,对照组和矿化组的miRNA-539表达水平分别为0. 97±0. 08,0. 43±0. 08;对照组和矿化组的Dlx2 mRNA表达水平分别为1. 14±0. 13,4. 30±0. 42。第21天,对照组和矿化组的miRNA-539表达水平分别为1. 21±0. 03,0. 34±0. 05;对照组和矿化组的Dlx2 mRNA表达水平分别为0. 90±0. 21,4. 67±0. 73。矿化组与对照组相比,上述指标的差异均有统计学意义(均P <0. 05)。Dlx2蛋白结果的趋势与基因一致。结论 miRNA-539在成骨细胞矿化过程中起负调控作用,而且是通过作用于Dlx2基因来达到这一效果的。 展开更多
关键词 微小RNA539 远端同源异型盒2基因 成骨细胞矿化 信号通路
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釉基质衍生物促进牙周组织再生作用的研究进展
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作者 唐开亮 李纾 《口腔医学研究》 CAS CSCD 2008年第4期468-470,共3页
关键词 牙周组织 衍生物 再生作用 基质 EMDOGAIN MATRIX MRNA水平 细胞矿化
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The Effect of Cyclic Stretching on Matrix Production, Mineralization and Differentiation of Osteoblasts
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作者 秦建 TANG +4 位作者 LILING Wang Yuanliang Gu Li 《High Technology Letters》 EI CAS 2003年第3期33-35,共3页
A four-point bending apparatus is used to investigate the effects of stretching on collagen synthesis, mineralization and differentiation of osteoblasts. Cells are stretched at 1500 με for 24 hours. The responses of... A four-point bending apparatus is used to investigate the effects of stretching on collagen synthesis, mineralization and differentiation of osteoblasts. Cells are stretched at 1500 με for 24 hours. The responses of osteoblasts to mechanical signal of physiological stretching are evaluated from three aspects: collagen production, extracellular inorganic calcium secretion and ALP activity. The results show that osteoblasts decrease the collagen synthesis, calcium secretion and ALP activity compared to the control cells (65.82%,73.51%,48.10% respectively), confirming that cyclic stretching at 1500 με inhabits the physiological activity of osteoblasts. 展开更多
关键词 OSTEOBLAST mechanical stretching matrix synthesis DIFFERENTIATION MINERALIZATION
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The Influence of Magnetite Nanoparticles on Human Leukocyte Activity
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作者 Anezka Dzarova Martina Dubnickova +4 位作者 Vlasta Zavisovva Martina Koneracka Peter Kopcansky Hubert Gojzewski Milan Timko 《Journal of Life Sciences》 2010年第5期37-43,共7页
In this contribution the influence of chemically synthesized magnetite particles coated by sodium oleate and PEG (MPEG), and magnetosomes (MS) was gradually tested on the process of phagocytosis and the metabolic ... In this contribution the influence of chemically synthesized magnetite particles coated by sodium oleate and PEG (MPEG), and magnetosomes (MS) was gradually tested on the process of phagocytosis and the metabolic activity (lysozyme and peroxidase activity) in leukocyte. Lysozyme activity is oxygen-independent liquidation mechanisms of engulfed microorganism, peroxidase activity is oxygen-dependent one. The both tested samples MS and MPEG lysed leukocyte cells during incubation. MPEG with concentration 10 and 20 μg/mL lysed almost all leukocytes and their cell viability was in the 14 ± 0.05% range. On the other hand, MS begin to influence leukocytes activity at the concentration of 1 μg/mL and this influence grows with increasing concentration up to 20 μg/mL. MS are more suitable for biological applications than MPEG which are more aggressive material than MS and their using is unavailable for these types of the test mainly for the concentration 10 - 20 μg/mL. 展开更多
关键词 Human leukocytes activity MAGNETOSOMES magnetite particles sodium oleate PEG
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重编程及诱导性多能干细胞在再生医学的研究进展
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作者 刘路 韦曦 凌均棨 《中华口腔医学研究杂志(电子版)》 CAS 2010年第2期59-61,共3页
细胞分化是由多种特定的分化基因网络相互作用、共同调控完成的生物学过程.如骨髓间充质细胞矿化,是在TGFβ/BMP、Wnt、Notch和Cadherin等信号通路协同作用下.先分化为成骨细胞.随后矿化完成的。
关键词 多能干细胞 再生医学 诱导性 CADHERIN 编程 细胞 细胞矿化 骨髓间充质
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Tissue-engineered composite scaffold of poly(lactide-co-glycolide) and hydroxyapatite nanoparticles seeded with autologous mesenchymal stem cells for bone regeneration 被引量:3
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作者 Bing ZHANG Pei-biao ZHANG +2 位作者 Zong-liang WANG Zhong-wen LYU Han WU 《Journal of Zhejiang University-Science B(Biomedicine & Biotechnology)》 SCIE CAS CSCD 2017年第11期963-976,共14页
Objective: A new therapeutic strategy using nanocomposite scaffolds of grafted hydroxyapaUte (g-HA)/ poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) carried with autologous mesenchymal stem cells (MSCs) and bone morphogene... Objective: A new therapeutic strategy using nanocomposite scaffolds of grafted hydroxyapaUte (g-HA)/ poly(lactide-co-glycolide) (PLGA) carried with autologous mesenchymal stem cells (MSCs) and bone morphogenetic protein-2 (BMP-2) was assessed for the therapy of critical bone defects. At the same time, tissue response and in vivo mineralization of tissue-engineered implants were investigated. Methods: A composite scaffold of PLGA and g-HA was fabricated by the solvent casting and particulate-leaching method. The tissue-engineered implants were prepared by seeding the scaffolds with autologous bone marrow MSCs in vitro. Then, mineralization and osteogenesis were ob- served by intramuscular implantation, as well as the repair of the critical radius defects in rabbits. Results: After eight weeks post-surgery, scanning electron microscopy (SEM) and energy dispersive X-ray spectroscopy (EDX) revealed that g-HNPLGA had a better interface of tissue response and higher mineralization than PLGA. Apatite particles were formed and varied both in macropores and micropores of g-HNPLGA. Computer radiographs and histological analysis revealed that there were more and more quickly formed new bone formations and better fusion in the bone defect areas of g-HNPLGA at 2-8 weeks post-surgery. Typical bone synostosis between the implant and bone tissue was found in g-HNPLGA, while only fibrous tissues formed in PLGA. Conclusions: The incorporation of g-HA mainly im- proved mineralization and bone formation compared with PLGA. The application of MSCs can enhance bone for- mation and mineralization in PLGA scaffolds compared with cell-free scaffolds. Furthermore, it can accelerate the absorption of scaffolds compared with composite scaffolds. 展开更多
关键词 NANOCOMPOSITE Surface modification Bone marrow mesenchymal stem cells BIOMINERALIZATION Bone repair
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