同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞表达ICAM-2及与树突状细胞粘附的影响

目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)对人脐静脉内皮细胞(HUVECs)分泌和表达细胞间粘附分子-2(I-CAM-2)以及内皮细胞与树突状细胞(DC)粘附的影响。方法在人脐静脉内皮细胞培养基中加入浓度为0.5mmolHL的Hcy作用不同时间,以及加入不同浓度的Hcy作用24h。用ELISA法检测内皮细胞培养基中HU-VECs分泌ICAM-2的蛋白含量,用Westernblot法检测HUVECs表达ICAM-2的蛋白含量,用分子探针标记的DC与HUVECs共孵育,共聚焦显微镜下计数粘附于HUVECs的DC数量,以检测Hcy对HUVECs与DC粘附的影响。结果用0.5mmolHLHcy干预后,HUVECs分泌ICAM-2蛋白在12h开始高于空白组(P<0.05),24h和48h均增加显著(均P<0.01);而ICAM-2蛋白的表达在6h开始高于空白组(P<0.05),24h达峰值(P<0.01),48h下降显著,且与空白组相比无统计学差异。用不同浓度的Hcy干预24h后,ICAM-2蛋白的分泌和表达及HUVECs与DC粘附均呈剂量依赖性增加,当Hcy浓度高于0.5mmolHL时增加更显著。结论Hcy能刺激HUVECs分泌和表达ICAM-2蛋白,从而促进HUVECs与DC的粘附,这可能是其诱导动脉粥样硬化早期形成的重要机制之一。

细胞间粘附分子-2在妊娠期高血压疾病患者的动态变化和临床意义

目的:探讨细胞间粘附分子-2(ICAM-2)在正常妊娠妇女和妊娠期高血压疾病患者血浆中的变化及其临床意义。方法:研究对象包括25例妊娠期高血压疾病患者(其中子痫前期13例、妊娠期高血压12例)、24例正常妊娠妇女和25例正常未孕妇女,应用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定研究对象妊娠早、中、晚三期血浆中的ICAM-2水平。结果:与未孕组比较,正常妊娠组孕中晚期ICAM-2明显高于未孕组,差异有统计学意义(P<0.05),与正常妊娠组比较,妊娠期高血压组妊娠三期中ICAM-2水平差异有统计学意义(P<0.05),子痫前期组妊娠三期ICAM-2明显高于正常妊娠组,差异均具有统计学意义(P<0.01)。结论:外周血中ICAM-2水平变化与妊娠期高血压疾病密切相关,随着病情加重ICAM-2值明显升高,ICAM-2对预测子痫前期的发生、发展及终止妊娠时机的选择有重要作用;ICAM-2值在正常妊娠中不随孕龄的增长而升高,可能预示不良妊娠结局。

东亚飞蝗DSCAM2多克隆抗体制备

制备唐氏综合征细胞粘附分子2(DSCAM2)多克隆抗体,拟为DSCAM2功能探索提供免疫学工具。采用生物信息学方法对DSCAM2抗原结构进行分析;利用DNA重组技术构建DSCAM2828-957重组表达菌株;采用Ni亲和层析技术纯化重组DSCAM2828-957蛋白,免疫小鼠制备Anti-DSCAM2多克隆抗体;采用ELISA法检测抗体效价、Western Blot法检测抗体特异性、瑞氏-吉姆萨染色和免疫荧光检测DSCAM2在东亚飞蝗血淋巴细胞定位;采用siRNA敲低DSCAM2,进行血淋巴细胞计数。结果表明,所构建的pET30a(+)-DSCAM2828-957/BL21(DE3)原核菌株成功表达重组DSCAM2828-957蛋白;用Ni螯合亲和层析分离获得的DSCAM2828-957重组抗原免疫小鼠,获得了效价高且特异性好的DSCAM2多克隆抗体;细胞定位分析显示DSCAM2在东亚飞蝗嗜碱性粒细胞高表达;敲低DSCAM2表达水平,引起东亚飞蝗总血淋巴细胞数量增多。

食管鳞癌组织的CADM2-AS1和CADM2-AS2水平及临床意义

目的探讨食管鳞癌(ESCC)组织的细胞粘附分子2(CADM2)反义RNA 1(CADM2-AS1)和CADM2反义RNA 2(CADM2-AS2)水平及临床意义。方法采用实时定量PCR(qPCR)检测本院2015年1月至2019年12月手术切除的116对ESCC组织和对应癌旁组织的CADM2、CADM2-AS1和CADM2-AS2水平,比较ESCC组织和癌旁组织中上述指标的水平差异,分析ESCC组织中CADM2、CADM2-AS1和CADM2-AS2水平的相关性及与临床病理特征的关系,根据随访数据并结合Kaplan-Meier法进行生存分析,Log-rank检验和Cox风险比例模型探讨CADM2、CADM2-AS1和CADM2-AS2在ESCC预后预测中的意义。结果ESCC组织的CADM2、CADM2-AS1和CADM2-AS2水平为0.608±0.021、0.785±0.028和0.677±0.025,低于对应癌旁组织的1.401±0.052、2.519±0.096和2.741±0.103,差异均有统计学意义(P<0.05);相关分析显示,CADM2与CADM2-AS1和CADM2-AS2水平呈正相关(r=0.214、0.418,P<0.001),CADM2-AS1和CADM2-AS2水平亦呈正相关(r=0.613,P<0.001)。分层分析发现CADM2水平与肿瘤直径、分化程度、浸润深度和TNM分期有关,CADM2-AS1水平与肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移和TNM分期有关,而CADM2-AS2水平与分化程度、淋巴结转移和TNM分期有关(P<0.05)。生存分析发现肿瘤直径、浸润深度、淋巴结转移、TNM分期、CADM2和CADM2-AS2水平与ESCC的总生存期(OS)有关(P<0.05),其中CADM2和CADM2-AS2高水平的中位OS均未达,优于低水平的35.0和46.0个月(P<0.05),进一步多因素分析发现ESCC组织的CADM2和CADM2-AS2水平降低是OS不良的风险因素(HR=4.513,95%CI:2.127~8.514,P=0.021;HR=1.854,95%CI:1.069~3.547,P=0.036)。结论ESCC组织中CADM2、CADM2-AS1和CADM2-AS2水平下调与ESCC的恶性临床指标有关,在一定程度上参与了ESCC的发生发展,CADM2/CADM2-AS2在ESCC预后预测上有一定价值。

异种器官移植用血管内皮细胞特异表达人CD59重组基因的构建

PCR插入法将人细胞间粘附分子 (ICAM- 2 )启动子、人 CD5 9- enhancer克隆到 hum an CD5 9c DNA -pc DNA3表达质粒中 ,进行序列测定及分析 .成功地构建了异种器官移植用血管内皮细胞特异表达人 CD5 9重组基因 .提供了 CD5