人脑胶质瘤细胞系BT_(325)细胞骨架的免疫荧光研究

本文报告对人脑胶质瘤细胞系BT_(325)细胞骨架的免疫荧光研究,并比较了几种固定剂和缓冲液对不同细胞骨架成分的影响。除微管及微丝均被染色外,所有细胞均为波形纤维蛋白(vimentin)染色阳性,但只有部分细胞为胶质纤维酸性蛋白(GFAP)染色阳性。说明vimentin是BT_(325)细胞内中间丝的主要成分,而GFAP仅在部分细胞内表达。实验结果还表明,甲醇与甲醛-丙酮、甲醛-Triton固定微管效果较好,而甲醇、醋酸酒精适用于中间丝的固定,甲醛固定也适用于微丝染色。如用Triton处理后进行染色,则缓冲液成分对微管与中间丝影响较大,而微丝不大受影响。本文还观察到,如在Triton处理后先用甲醛固定,再进行免疫染色,则vimentin染色很弱。如先进行免疫染色,然后再用甲醛固定,则vimentin染色很强。结果表明,甲醛固定对vimentin-分子上的抗原位点起遮蔽或破坏作用。

神经节苷脂类抑制BT325细胞系生长机理的初步探讨

用１２５ＩＥＧＦ与人多形成胶质细胞瘤ＢＴ３２５细胞系膜上ＥＧＦ受体的饱和结合实验，竞争抑制实验研究ＧＭ３，ＢＢＧ（ｂｏｖｉｎｅｂｒａｉｎｇａｎｇｌｉｏｓｉｄｅｓ）对ＥＧＦ受体最大结合量，亲和常数及受体数目的影响；放射受体法观察ＥＧＦＥＧＦＲ复合物内吞过程，测定胞质和培养基中ＥＧＦ含量．结果表明：ＢＴ３２５细胞质膜上存在高亲和力ＥＧＦ结合位点，ＧＭ３对ＥＧＦ与其受体的亲和力无明显抑制作用（Ｐ＞００５），但能明显减少其受体的数目（Ｐ＜００５）；ＧＭ３能明显延长ＥＧＦＥＧＦＲ复合物内吞过程；ＧＭ３处理的胞质中ＥＧＦ浓度比对照组显著升高（Ｐ＜００５），培养液中无明显差异。

新城鸡瘟病毒弱毒株对BT325细胞系多细胞球体的作用

为研究新城鸡瘟病毒（ Ｎｅｗｃａｓｔｌｅ ｄｉｓｅａｓｅ ｖｉｒｕｓ ， Ｎ Ｄ Ｖ） 的抗肿瘤作用，观察了 Ｎ Ｄ Ｖ Ｌｏｓｏｔａ４ 弱毒株对人脑多形胶质母细胞瘤细胞系 Ｂ Ｔ３２５ 多细胞球体的杀伤效应。发现：随着培养时间延长，与对照组球体直径相比，各滴度试验组球体平均直径增长数明显减少（ Ｐ ＜ ０ ．０１） ；克隆率分析结果进一步证明， Ｎ Ｄ Ｖ Ｌｏｓｏｔａ４ 弱毒株能有效杀伤 Ｂ Ｔ３２５ 肿瘤细胞（ Ｐ ＜ ０ ．０１） 。

脑胶质瘤不同照射方案生物效应的实验研究

目的 通过对人脑多形性胶质母细胞瘤（BT325细胞系）裸小鼠移植瘤不同分割模式照射后生物效应的实验研究,加深对人脑胶质瘤放射反应生物学特性认识,为临床设计照射计划、制定合理分次治疗方案提供实验依据.方法 对BT325细胞系裸小鼠移植瘤进行单次10、20、30、40、60 Gy照射和2 Gy每周5次每天照射、3 Gy每周3次隔天照射、3 Gy每周5次每天照射、4 Gy每周3次隔天照射,总剂量分别为125、114、126、112 Gy.用肿瘤生长曲线评价剂量效应关系并测定肿瘤体积倍增时间.取贴壁生长的指数生长期BT325细胞,用生长曲线测定细胞倍增时间,细胞克隆形成分析法绘制细胞存活曲线（照射剂量为0、1、2、4、6、8、10 Gy）计算曲线参数值,彗星分析法测定DNA单链断裂半修复时间（T1/2）.结果 单次照射各剂量点均不能有效控制肿瘤.2 Gy5次/周和3 Gy3次/周治疗方案对人脑胶质瘤实体瘤也无明显治疗效果.增加分次剂量可使脑胶质瘤实体肿瘤有较明显的消退,其中4 Gy3次/周方案好于其他方案但仍未能达到治愈肿瘤的效果.表明对肿瘤干细胞的控制不理想.各项生物学参数的测定结果：BT325细胞倍增时间为30.16 h,裸小鼠移植瘤肿瘤倍增时间为43 d;细胞存活曲线LQ模型拟合的α=0.360 Gy-1、β=0.057 Gy-2,多靶单击模型拟合的D0=1.394 Gy、Dq=2.127 Gy、SF2=0.714;5 Gy照射DNA单链断裂的T1/2=9.999 min.结论 本实验从实证实验角度印证了临床上脑胶质瘤是一种放射耐受性较高的肿瘤的看法.研究结果提示增高分割剂量有可能提高肿瘤的近期疗效（使肿瘤消退率增加）,但如何提高对肿瘤干细胞的控制还需进一步深入研究.各项生物学参数测定结果提示脑胶质瘤细胞内在放射敏感性较差.