康复疗法在部队高脂血症患者中的应用及其对巨噬细胞肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6的影响

目的探讨康复疗法在部队高脂血症患者中的应用及其对巨噬细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)的影响。方法选取2021年5月至2023年1月武警重庆总队医院门诊及体检中心的部队高脂血症患者124例进行研究,依据不同的治疗方式分为对照组和研究组两组,各62例。对照组常规干预,研究组在此基础上应用康复疗法,观察对比两组依从性及干预前后血脂水平[三酰甘油(TG)、低密度脂蛋白胆固醇(LDL-C)、总胆固醇(TC)、高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)]、炎性因子水平(IL-6、TNF-α)变化以及心理状态[抑郁自评量表(SDS)、焦虑自评量表(SAS)]、生活质量评分[生活质量综合评定问卷(GQOLI-74评分)]。结果研究组情绪控制、按时用药、坚持运动、合理饮食依从性比对照组高(P<0.05);研究组干预后HDL-C比对照组高(P<0.05),TG、LDL-C、TC、IL-6、TNF-α水平均比对照组低(P<0.05);研究组干预后GQOLI-74评分比对照组高,SDS、SAS评分比对照组低(P<0.05)。结论部队高脂血症患者应用康复疗法不仅可以降低机体中的炎症因子和血脂水平,还可以改善患者负性心理状态,提高其依从性和生活质量,值得推广应用。

白花丹醌对人肝星状细胞肿瘤坏死因子-α、血小板衍化生长因子BB表达的影响

目的:研究白花丹醌对瘦素(Leptin)刺激人肝星状细胞(HSC-LX2)肿瘤坏死因子(TNF-α)、血小板衍化生长因子BB(PDGF-BB)表达的影响。方法:体外培养HSC-LX2,瘦素刺激24 h,各药物与细胞共孵育24 h后,采用荧光实时定量PCR检测各组TNF-αmRNA、PDGF-BB mRNA的表达,免疫印迹法测定各组TNF-α和PDGF-BB蛋白表达情况。结果:白花丹醌作用24 h后,与模型组比较,HSC-LX2细胞中TNF-αmRNA和PDGF-BB mRNA的表达水平显著降低。免疫印记结果显示白花丹醌作用24 h后,HSC-LX2PDGF-BB蛋白表达较模型组显著降低(P<0.01)。结论:白花丹醌抑制HSC-LX,TNF-α、PDGF-BB mRNA和抑制PDGF-BB蛋白水平的表达可能是其抗肝纤维化的主要机制之一。

非诺贝特和吡格列酮对心肌细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响及机制初探

目的 观察过氧化体增殖物激活型受体(peroxisome proliferator-activated receptors,PPARs)激活剂——非诺贝特和吡格列酮对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达水平的影响,探讨可能涉及的机制。方法 体外原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,分别给予不同浓度的非诺贝特(PPARα激活剂)或吡格列酮(PPARγ激活剂)刺激,并辅加脂多糖诱导TNF-α表达。采用半定量RT-PCR法检测TNF-αmNNA的表达,ELISA法检测TNF-α的蛋白水平。心肌细胞瞬时转染TNF-α启动子控制的报告基因载体,测定CAT相对活性以反映TNF-α基因的转录活性。结果 与对照组相比,非诺贝特组和吡格列酮组的TNF-αmRNA及蛋白表达水平均明显降低,且呈剂量依赖性。心肌细胞瞬时转染全长TNF-α启动子控制的报告基因质粒(-721/+17),非诺贝特或吡格列酮可降低脂多糖诱导的CAT相对活性,而转染核因子κB(NF-κB)结合位点缺失的TNF-α启动子控制的报告基因质粒(-182/+17),非诺贝特、吡格列酮或脂多糖刺激均未能改变心肌细胞的CAT相对活性。结论 非诺贝特和吡格列酮可显著抑制新生大鼠心肌细胞中脂多糖诱导的TNF-α表达,具有抗炎作用,其机制可能部分通过抑制NF-κ信息通路发挥作用。

脂多糖诱导大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α表达时活性氧调控的作用

目的探讨在脂多糖(LPS)诱导大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子α(TNF-α)表达过程中活性氧(ROS)的作用及其信号分子机制。方法以体外培养的新生SD(Sprague-Dawley)大鼠心肌细胞为实验模型,应用反转录聚合酶链式反应(RT-PCR)和酶联免疫吸附实验(ELISA)检测TNF-αmRNA和蛋白表达水平;细胞内ROS水平采用ROS敏感的荧光探针二氯荧光素二乙酸(DCF-DA)测定。采用蛋白免疫印迹法测定心肌细胞内丝裂原活化蛋白激酶(MAPKs)亚型p38MAPK的磷酸化水平来反映其活性。结果(1)LPS组心肌细胞TNF-αmRNA和蛋白表达水平分别为(0·29±0·07)和(83·6±14·5)pg/mL,与对照组[(0·07±0·02)、(22·1±7·1)pg/mL]比较差异均有非常显著性意义(P<0·01)。在抗氧化剂氮乙酰半胱氨酸(NAC)干预后,TNF-αmRNA水平(0·13±0·03)和蛋白含量(39·1±10·2)pg/mL与LPS组比较差异均有非常显著意义(P<0·01)。(2)LPS组心肌细胞二氯荧光素(DCF)荧光强度为83±15,与对照组比较(34±9)差异有非常显著意义(P<0·01)。在NAC干预后,DCF荧光强度(19±4)与LPS组比较明显降低,差异有非常显著性意义(P<0·01)。(3)LPS组心肌细胞p38MAPK相对活性为(0·34±0·07),与对照组(0·18±0·05)比较差异有非常显著意义(P<0·01)。NAC干预组p38MAPK活性明显降低(0·24±0·03),与LPS组比较差异有非常显著意义(P<0·01);p38MAPK抑制剂预处理组TNF-α蛋白含量为(46·8±11·6)pg/mL,与LPS组(85·5±22·4)pg/mL比较差异有非常显著意义(P<0·01)。结论LPS可上调心肌细胞内ROS生成,ROS介导的信号通路至少部分参与了LPS诱导TNF-α表达的调控过程,p38MAPK可能是该信号通路的重要下游分子之一。

糖网明目颗粒提取物对缺氧/高糖状态下血管内皮细胞肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-1α表达的影响

目的观察糖网明目颗粒提取物对缺氧/高糖状态下血管内皮细胞EA.hy926炎症相关因子的影响,并探讨其作用机制。方法以Co Cl2和高浓度葡萄糖干预人脐静脉内皮细胞EA.hy926复制缺氧和高糖模型,MTT法检测细胞增殖能力,半定量RT-PCR检测炎症相关基因表达,ELISA检测炎症相关蛋白表达。结果缺氧和高糖均能促进EA.hy926细胞增殖,显著上调肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1α(IL-1α)基因和蛋白表达(P<0.05)。药物干预后,细胞增殖能力降低,TNF-α、IL-1α基因和蛋白表达水平显著降低(P<0.05)。结论糖网明目颗粒提取物可能通过调控缺氧/高糖状态下内皮细胞TNF-α、IL-1α等炎症相关因子的m RNA和蛋白表达从而达到防治糖尿病视网膜病变的目的。

支扩宁合剂对人支气管上皮细胞肿瘤坏死因子-α表达影响的体外研究

目的探讨肿瘤坏死因子-α(TNF-α)在支气管扩张症发病机制中的作用及支扩宁合剂的疗效机理。方法应用支气管扩张症患者痰液刺激分组体外培养的人支气管上皮细胞,检测、分析各组细胞TNF-α表达水平及中药支扩宁合剂的干预效果。结果在支气管扩张症患者的痰液刺激下,支气管上皮细胞TNF-α表达活化;中药支扩宁合剂可抑制支气管上皮细胞TNF-α的表达。结论支气管上皮细胞TNF-α表达在支气管扩张症发病中可能起到重要的作用;中药支扩宁合剂可抑制支气管上皮细胞TNF-α的表达,从而抑制支气管扩张症气道炎症反应,这可能是其疗效机理之一。

紫草素抑制血管平滑肌细胞及巨噬细胞肿瘤坏死因子-α启动子活性

目的:探讨紫草素(shikonin)对血管平滑肌细胞(VSMCs)及巨噬细胞(Mφs)体外转染的TNF-α基因启动子活性的调控作用。方法:利用虫荧光素酶(luciferase)报告基因系统,构建含有人类TNF-α基因启动子的质粒DNA,经阳离子脂质体转染体外培养的VSMCs及Mφs,以LPS及AngⅡ刺激并经不同浓度的紫草素处理后,通过检测luciferase的活性来观察启动子活性的变化。结果:TNF-α启动子在VSMCs及Mφs可高效稳定地表达,分别为阳性对照(CMV启动子)的58.3%和55.6%;而经LPS及AngⅡ刺激的VSMCs和Mφs中,TNF-α启动子活性较未受刺激时呈现明显上调(P<0.05)。在VSMCs中0.25-1μmol/L、Mφs中0.5-2μmol/L的紫草素对未受诱导的TNF-α启动子表现出一定的抑制作用,更可显著抑制经LPS及AngⅡ刺激后上调表达的TNF-α启动子活性,并且呈现剂量依赖关系(P<0.05)。结论:紫草素对TNF-α启动子活性的抑制,证明了其对促炎细胞因子在转录水平的潜在抑制作用及对于心血管系统的潜在抗炎性质。

中药白疕合剂对体外培养HaCaT细胞肿瘤坏死因子-α、白细胞介素-6表达的影响

目的观察中药白疕合剂对体外培养人永生化表皮角质形成细胞(Ha Ca T细胞)分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6及TNF-αm RNA、IL-6 m RNA表达的影响,并探讨其作用机制。方法采用ELISA法检测白疕合剂对Ha Ca T细胞分泌TNF-α、IL-6的影响;采用RT-PCR方法检测白疕合剂对Ha Ca T细胞TNF-αm RNA、IL-6m RNA表达的影响。结果白疕合剂低、中、高剂量组干预Ha Ca T细胞后,对TNF-α、IL-6的分泌量及TNF-αm RNA、IL-6 m RNA的表达均有明显的抑制作用。白疕合剂高剂量组对IL-6分泌量的抑制作用及降低TNF-αm RNA、IL-6m RNA的表达与消银颗粒组和阿维A组比较差异无统计学意义;对TNF-α的抑制作用与消银颗粒组比较差异有统计学意义,与阿维A组比较差异无统计学意义。结论白疕合剂可能通过抑制TNF-α、IL-6的分泌和降低TNF-αm RNA、IL-6 m RNA的表达,发挥对银屑病的治疗作用。

丙泊酚对脂多糖诱导的小胶质细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨丙泊酚能否通过抑制核因子(NF)-κB活化下调脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞肿瘤坏死因子(TNF)-α的表达。方法将BV2细胞分为4组即对照组、丙泊酚组、丙泊酚+LPS组和LPS组。在干预0 h和24 h时使用MTT法检测BV2细胞活性。在干预24 h后使用RTPCR法和Western印迹法对BV2细胞TNF-αmRNA和蛋白的表达水平进行检测;并使用Western印迹法对细胞NF-κB p65磷酸化水平(phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值)进行分析。结果在给予LPS干预24 h后BV2细胞活性明显降低(P均<0.05);但丙泊酚+LPS组细胞活性较LPS组增加(P均<0.05),同时对照组和丙泊酚组细胞活性无统计学差异(P均>0.05)。与对照组相比较,在LPS干预24 h后BV2细胞TNF-αmRNA和蛋白的表达水平以及phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值均明显升高(P均<0.05);但LPS组较丙泊酚+LPS组TNF-α表达的升高以及phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值的增加更加显著(P均<0.05);同时对照组和丙泊酚组TNF-α表达水平和phospho-NF-κB p65/NF-κB p65比值无统计学差异(P均>0.05)。结论丙泊酚可能通过抑制NF-κB的激活下调了BV2细胞TNF-α合成和释放。

复方连竹胶囊对糖尿病大鼠脂肪细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的:研究中药复方连竹胶囊对糖尿病大鼠脂肪细胞(lipoblast)肿瘤坏死因子-α(tumornecrosisfactor-α,TNF-α)mRNA表达的影响,寻找防治糖尿病及微血管炎性并发症的有效途径。方法:复制糖尿病大鼠模型,采用核酸原位杂交、组织培养及生化技术分析测定各项指标。结果:糖尿病组大鼠脂肪细胞TNF-αmRNA的表达明显增强,血糖、血脂、糖化血红蛋白、尿蛋白、醛糖还原酶活性及丙二醛含量均明显高于正常对照组(P<0.05);糖尿病组大鼠血浆NO含量明显低于正常对照组(P<0.05)。中药治疗组以上各指标均较糖尿病组有明显改善,但与正常对照组比较差异无显著性意义(P>0.05)。形态学观察,糖尿病组大鼠肾血管及视网膜血管均有炎性浸润性增生改变;中药治疗组其病理改变较糖尿病组减轻。结论:复方连竹胶囊对糖尿病大鼠有明显的治疗作用,并能降低脂肪细胞TNF-αmRNA的表达,减低微血管炎性并发症的产生。

抗人TLR9抗体对CpG寡核苷酸介导的人外周血单核细胞肿瘤坏死因子-α释放的影响

目的:观察细胞膜上的TLR9在CpG寡核苷酸(ODN)激活的信号转导通路中的作用。方法:采用抗TLR9抗体阻断人外周血单个核细胞(hPBMCs)表面的TLR9,观察细胞膜表面的TLR9是否与CpGODN的内化和肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的释放直接相关。结果:虽然CpG ODN和GpC ODN都能被细胞吞噬,但只有CpG ODN能够引起TNF-α释放;氯喹作为内体成熟抑制剂,在抑制这两种寡核苷酸降解的过程中无显著性差别;当使用抗人TLR9抗体阻断细胞膜表面的TLR9,对CpG ODN的内化、CpGODN诱导的TNF-α释放以及氯喹对CpG ODN诱导hPBMCs释放TNF-α的抑制作用均没有显著影响。结论:细胞膜上的TLR9对CpG ODN的内化和hPB-MCs释放TNF-α没有直接影响。

胰岛素对人巨噬细胞肿瘤坏死因子-α蛋白表达分泌的影响

目的 探讨胰岛素对人巨噬细胞肿瘤坏死因子 α(TNF α)蛋白表达分泌的影响以及普伐他汀对其的作用。方法 将佛波酯加入人单核细胞白血病细胞株THP 1细胞培养液中诱导其形成巨噬细胞后 ,加入不同浓度的胰岛素、普伐他汀及甲羟戊酸继续培养 4 8h ,观察人巨噬细胞中TNF α蛋白表达水平及细胞培养上清液中TNF α蛋白水平。结果 胰岛素可诱导人巨噬细胞及其培养上清液中TNF α蛋白水平显著升高 ,且呈剂量依赖性 ,加入普伐他汀后可使胰岛素刺激的人巨噬细胞中及其培养上清液中TNF α蛋白水平显著下降 ,普伐他汀的这种作用可被甲羟戊酸所抑制。结论 普伐他汀对糖尿病患者心血管系统的保护作用可能部分与其抑制胰岛素介导的炎症反应有关。

非诺贝特对脂多糖诱导的心肌细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 探讨过氧化体增殖物激活型受体α(PPARα)激活剂对新生大鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和PPARα自身表达水平的影响。方法 体外原代培养新生Wistar大鼠心肌细胞,给予不同浓度的非诺贝特(PPARα激活剂)刺激,并辅加脂多糖诱导TNF-α表达。采用半定量逆转录-聚合酶链反应法检测TNF-α和PPARαmRNA的表达,酶联免疫吸附测定法检测TNF-α的蛋白水平,Westem印迹法检测PPARα蛋白表达。结果 与对照组相比,非诺贝特组的TNF-αmRNA及蛋白表达水平明显降低,且呈剂量依赖性。而相应的PPARα mR-NA及蛋白水平则无显著变化。结论 PPARα激活剂可显著抑制新生大鼠心肌细胞中脂多糖诱导的TNF-α表达,PPARα活化后发挥抗炎作用,但PPARα本身的表达水平可能并没有改变。

非诺贝特对氧化型低密度脂蛋白诱导的脂肪细胞肿瘤坏死因子-α分泌的影响

目的探讨调脂药物非诺贝特对兔脂肪细胞分泌肿瘤坏死因子-α(TNF-α)的影响及可能机制。方法取新西兰兔皮下脂肪组织行脂肪细胞原代培养,分别给予不同浓度的氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)及非诺贝特刺激。采用酶联免疫吸附法检测脂肪细胞培养液中TNF-α蛋白水平,半定量逆转录多聚酶链式反应测定脂肪细胞TNF-α和PPARαmRNA的表达。结果较低剂量的OxLDL刺激脂肪细胞TNF-α分泌,呈剂量依赖性;不同浓度的非诺贝特呈剂量依赖性降低OxLDL诱导的脂肪细胞TNF-α分泌及mRNA表达,而相应的PPARαmRNA的表达则无显著变化。结论非诺贝特可显著抑制OxLDL诱导的兔脂肪细胞TNF-α分泌,这一作用可能有利于胰岛素抵抗的改善。

美满霉素对脂多糖诱导的BV-2小胶质细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的探讨美满霉素(MC)对脂多糖(LPS)诱导的BV-2小胶质细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)表达的影响。方法采用相应浓度的MC或LPS(100 ng/ml)对MC组及0.1、1、10、100μmol/L MC+LPS组、LPS组、空白对照组BV-2小胶质细胞进行预处理。ELISA法检测BV-2小胶质细胞TNF-α蛋白的表达,逆转录-PCR检测细胞TNF-αmRNA表达。结果与空白对照组比较,0.1、1μmol/L MC+LPS组及LPS组的TNF-α水平显著升高(均P<0.01)。10、100μmol/L MC+LPS组TNF-α水平显著低于LPS组(均P<0.01)。与空白对照组比较,LPS组及10μmol/L MC+LPS组TNF-αmRNA的表达水平显著增高(均P<0.01)。10μmol/L MC+LPS组TNF-αmRNA表达水平显著低于LPS组(P<0.01)。结论 MC预处理(≥10μmol/L)可显著抑制LPS诱导的小胶质细胞TNF-α的表达。

双歧杆菌脂磷壁酸对刀豆蛋白A活化小鼠肝细胞肿瘤坏死因子-α和一氧化氮水平的影响

目的研究双歧杆菌脂磷壁酸(LTA)对刀豆蛋白A(Con A)活化小鼠肝细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和一氧化氮(NO)水平的影响,探讨临床应用LTA治疗免疫性肝损伤的可能性。方法将用胶原酶灌注法获取的小鼠肝细胞分为对照组(达尔伯克改良伊格尔培养基完全培养液)、LTA+Con A处理组(LTA终浓度分别为1.0、2.0、4.0μg.L-1,Con A终浓度为10 mg.L-1)和Con A组(Con A终浓度为10mg.L-1);细胞处理24 h后,采用酶联免疫吸附法测定肝细胞上清液中TNF-α和NO水平,反转录-聚合酶链反应检测肝细胞TNF-αmRNA水平。结果 ConA组肝细胞上清液中TNF-α和NO水平及肝细胞TNF-αmRNA水平均显著高于对照组(P<0.05),不同浓度的LTA处理后上述各指标均较Con A组显著降低(P<0.05),且LTA的作用与其浓度呈一定的梯度关系。结论 LTA可能通过抑制Con A活化的小鼠肝细胞体外TNF-α和NO的生成发挥对免疫性肝损伤的保护作用。

护肾固精方下调核因子-κB活化对系膜细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响

目的 :研究护肾固精方 (Hushengujingfang ,HSGJF)对脂多糖 (LSP)刺激大鼠肾小球系膜细胞(mesangialcell,MC)表达炎性细胞因子的影响及其作用机制。方法 :分别以酶联免疫吸附法 (ELISA)检测MCIL 1β、TNF α蛋白水平 ;电泳迁移率变动分析 (EMSA)检测MC核因子 κB(nuclearfactor κB ,NF κB)的活性 ;反转录多聚酶链反应技术 (RT PCR)检测MCTNF αmRNA表达。结果 :HSGJF能抑制LSP刺激肾小球MC分泌IL 1β、TNF α蛋白质增加的同时 ,亦能抑制LSP刺激肾小球MC中NF κB活化 ,在HSGJF作用下炎性细胞因子表达均呈不同程度减弱。结论 :HSGJF通过抑制MCNF κB的活性 ,下调炎性细胞因子的表达。此结果可作为进一步认识和评价该方对肾脏疾病防治作用的实验依据。

高浓度葡萄糖对乳鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α基因表达的影响

目的:观察高糖对不同状态下乳鼠心肌细胞肿瘤坏死因子-α(TNF-α)基因表达的影响,探讨TNF-α在糖尿病心肌病的非特异性炎症中的作用机制。方法:体外培养乳鼠心肌细胞,分别用不同浓度的葡萄糖(0、20、30、50mmol/L)干预正常心肌细胞、胰岛素抵抗心肌细胞,采用逆转录聚合酶链反应检测细胞TNF-αmRNA的表达水平,并在透射电镜下观察心肌细胞结构的变化。结果:(1)在50mmol/L葡萄糖作用下,正常心肌细胞TNF-αmRNA表达(0.58±0.03)明显高于20mmol/L(0.27±0.02)、30mmol/L(0.29±0.05)葡萄糖作用的正常心肌细胞,而后两组之间比较无统计学差异。(2)胰岛素抵抗心肌细胞在0、20、30、50mmol/L葡萄糖作用下,各组心肌细胞TNF-αmRNA表达均有显著性差异(P<0.05),并随着葡萄糖浓度的提高,TNF-αmRNA表达越高;在相同浓度葡萄糖作用下,胰岛素抵抗心肌细胞TNF-αmRNA表达明显高于正常心肌细胞。(3)在高浓度葡萄糖作用下,正常心肌细胞和胰岛素抵抗心肌细胞出现线粒体肿胀,髓样结构形成,胞内脂滴增多等细胞结构损伤性改变。结论:高糖作用下胰岛素抵抗心肌细胞TNF-αmRNA表达明显增加,引起胞内脂滴增多等细胞结构变化。

瘦素对血管内皮细胞肿瘤坏死因子-α表达的影响及阿托伐他汀对其的干预

目的探讨瘦素对血管内皮细胞(vascular endothelial cells,VECs)肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)表达的影响及阿托伐他汀对其的干预作用。方法采用原代细胞培养方法建立大鼠VECs细胞模型;100 ng/mL瘦素刺激内皮细胞0、1、3、6、12 h;10μmol/L阿托伐他汀干预细胞0、1、3、6、12、24 h,再用100 ng/mL瘦素干预细胞6 h。运用双抗体夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定各组细胞上清液TNF-α表达浓度。结果瘦素刺激组TNF-α表达高于对照组,且随着瘦素作用时间延长,TNF-α表达也随之增加。阿托伐他汀组TNF-α的表达低于对照组,且随着阿托伐他汀作用时间的延长,TNF-α表达也随之降低,24 h抑制作用最明显。结论瘦素时间依赖性诱导血管内皮细胞TNF-α的表达,阿托伐他汀可以减弱瘦素诱导的TNF-α的表达。