硝苯地平和尼卡地平对人成纤维细胞胶原与透明质酸合成及N－乙酰β－氨基葡糖苷酶活性影响

目的：研究硝苯地平（Ｎｉｆ）和尼卡地平（Ｎｉｃ）对人胚肺成纤维细胞胶原与透明质酸（ＨＡ）合成以及Ｎ－乙酰β－氨基葡萄糖苷酶（ＮＡＧ）活性的影响，为应用钙通道阻滞剂防治器官纤维化提供依据。方法：采用３Ｈ－脯氨酸掺入、放射免疫和荧光法分别测定胶原与ＨＡ合成及ＮＡＧ活性。结果：Ｎｉｆ和Ｎｉｃ在１０～４０μｍｏｌ／Ｌ浓度范围内均呈浓度依赖性地抑制胶原与ＨＡ合成；Ｎｉｃ在１０～２０μｍｏｌ／Ｌ浓度时还使细胞培养上清液中ＮＡＧ活性增加。结论：Ｎｉｆ和Ｎｉｃ可望成为抗器官纤维化的有效药物。

抗纤复方对大鼠纤维化肝肝细胞胶原合成的影响

为研究抗纤复方抗肝纤维化的细胞机制,本研究观察了原代培养纤维化肝肝细胞胶原的表达,并以血清药理学方法研究抗纤复方对纤维化肝肝细胞生成胶原的影响。材料与方法1 实验动物 Wistar 雄性大鼠,体重250～300g,由中国科学院上海实验动物中心提供。制作肝纤维化动物模型,以二甲基亚硝胺(DMN 10 mg/kg)腹腔注射3周,每周连续3次。2 主要试剂Ⅳ型胶原酶为 Sigma 公司产品;199培养基、MEM 培养基为 GIBCO BRL 公司产品;Col(Ⅰ)、Col(Ⅲ)、Col(Ⅳ)胶原抗体购自上海医科大学病理教研室;ABC

播散性嗜酸粒细胞胶原病1例

患者女,45岁,3个月前出现双小腿红斑、丘疹伴瘙痒,在当地医院按湿疹治疗,效果不明显。10天前出现低热,体温约38℃,伴乏力,关节痛,肌痛,腹痛,胃纳差。于1997年3月31日入院。既往无慢性疾病及过敏史。检查:慢性病容,体温37.9℃,皮肤科情况:双足背。

槲皮素及异鼠李素对人血管平滑肌细胞胶原合成的影响

目的观察槲皮素、异鼠李素和去甲肾上腺素对人血管平滑肌细胞胶原蛋白合成的影响。方法利用培养的人主动脉血管平滑肌细胞,在培养基中加入不同浓度的槲皮素、异鼠李素、去甲肾上腺素及酚妥拉明,孵育不同时间。采用3H脯氨酸掺入法检测胶原蛋白的合成量。结果10μmol/L去甲肾上腺素有促进血管平滑肌细胞胶原蛋白合成的作用,72h达高峰,去甲肾上腺素的促进作用能被酚妥拉明所阻滞。槲皮素和异鼠李素有抑制血管平滑肌细胞胶原蛋白合成的作用,在1～200μmol/L的浓度范围内其抑制作用有剂量依赖关系,200μmol/L浓度时发挥最大的抑制作用。槲皮素和异鼠李素均对去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞胶原蛋白合成有明显的剂量依赖抑制效应,72h抑制作用最强。槲皮素和异鼠李素在抑制去甲肾上腺素的刺激作用方面具有明显的协同作用。槲皮素和异鼠李素对去甲肾上腺素促血管平滑肌细胞胶原蛋白合成的抑制作用,明显大于未受去甲肾上腺素作用的血管平滑肌细胞。槲皮素和异鼠李素对去甲肾上腺素刺激作用的抑制也明显强于酚妥拉明的作用。结论槲皮素和异鼠李素对人主动脉血管平滑肌细胞的胶原蛋白合成,尤其是对去甲肾上腺素刺激的血管平滑肌细胞胶原蛋白合成有很强的抑制作用。

Triptolide抑制角膜免疫反应及TGF-β诱导角膜基质细胞胶原收缩实验研究

雷公藤内酯醇（Triptolide,TP）是中药雷公藤的一种成分,已证实具有多种药理作用如抗炎、免疫调节等[1]。感染性角膜炎是世界范围内,尤其是发展中国家的主要致盲性眼病之一。TNF-α作为Thl细胞分泌产生的炎性细胞因子之一,与IL-2、IFN-1等共同介导细胞免疫[2,3],这些炎性因子及趋化因子可诱导炎性细胞对组织的浸润功能。

脉冲掺钕钇铝石榴石激光对增生性瘢痕成纤维细胞胶原合成的影响(英文)

Objective In order to explore the selectively i nhibitory effects of pulsed Nd:YAG l aser irradiation on collagen production of scar fibroblasts in vitro.Methods Cultured fibroblasts derived from h ypertrophic scars(HS)and normal human skin were irradiate d with a pulsed Nd:YAG laser(wavelength 1064nm,pulse width 150μs)at various energy density levels(500,1000,1500and 2000J /cm2).At 24hours after laser irradiation,collagen p roduction of fibroblasts was measur ed by the incorporation of 3H proline.The expression of proα1(I)procol-lagen mRNAwas investigated by blot hybridization techniques.Results Collagen production of HS fibroblasts was significantly increased,as 2times as that of normal skin fibrobla sts.Type I procollagen mRNA level in HS fibroblasts was markedly elevate d,as 3times as that in normal skin fibroblasts.Conclusion Pulsed Nd:YAG laser at energy density of 1000J /cm2 can selectively suppress collagen s ynthesis and type I procollagen mRNA level of HS fibroblasts.

播散性嗜酸性细胞胶原病1例

患者,女,33岁,全身红斑、丘疹,脱屑伴瘙痒反复20余年,关节痛、畸形10余年,间断性发热2年。血常规提示白细胞总数升高显著,嗜酸性粒细胞计数大于1.5×109/L超过6个月。皮肤组织病理:真皮浅、中层血管周围及胶原间嗜酸性粒细胞浸润,有真皮胶原增粗及血管内皮细胞肿胀。诊断:播散性嗜酸性细胞胶原病。

疑似皮肌炎的播散性嗜酸性细胞胶原病

报告1例疑似皮肌炎的播散性嗜酸性细胞胶原病。患者女,53岁。全身泛发暗褐色斑,干燥、皲裂伴瘙痒14个月,无肌肉症状。实验室及辅助检查提示,嗜酸性粒细胞增高、血清IgE升高,抗核抗体(ANA)阳性,CT示肺部多发斑片条索影,肺功能限制性通气功能障碍伴弥散功能减低,肌电图示肌源性损害,皮损组织病理提示符合结缔组织病。诊断:播散性嗜酸性细胞胶原病。

导入外源人尿激酶型纤溶酶原激活剂基因对肝星状细胞胶原沉积的影响

目的 利用重组复制缺陷型腺病毒载体将外源非分泌型人尿激酶型纤溶酶原激活剂(uPA)基因导入活化的肝星状细胞 (HSC)内 ,研究uPA表达对HSC胶原沉积的影响。方法 细菌内同源重组构建表达非分泌型uPA的复制缺陷型重组腺病毒AduPA。体外感染肝星状细胞株HSC T6 ,Northern印迹法和免疫细胞化学法检测uPA在HSC中的表达。酶联免疫吸附实验测定培养上清基质金属蛋白酶 2 (MMP 2 )分泌水平。免疫细胞荧光法测定外源uPA基因导入对HSC胞质内Ⅰ、Ⅲ型胶原含量变化的影响。结果 同源重组最终获得约 5× 1 0 1 1 efu/mlAduPA。AduPA体外感染HSC 3d后 ,Northern印迹法和免疫细胞化学法显示uPAmRNA及蛋白表达明显增加 ,细胞上清液中MMP 2分泌水平达 (2 74 .4 5± 7.6 3) pg/ml,明显高于对照组的 (1 4 5 .85± 6 .5 8)pg/ml(P <0 .0 1 )。免疫细胞荧光法提示uPA基因导入HSC后 ,胞质内Ⅰ、Ⅲ型胶原含量明显减少。结论 通过重组腺病毒载体将外源uPA基因导入HSC内可维持uPA高效表达并上调MMP 2分泌水平 ,减少细胞外基质沉积 。

p27基因转染对增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩的影响

目的:研究p27对增生性瘢痕成纤维细胞-胶原网收缩的影响差异,探讨p27在瘢痕形成中的作用。方法:取体外培养的人增生性瘢痕成纤维细胞(HTsFb),p27基因转染HTsFb,建立成纤维细胞-胶原网模型,观察p27基因转染对p27基因转染HTsFb-胶原网收缩的影响差异。结果:p27能抑制HTsFb-胶原网收缩。结论:p27可能通过抑制瘢痕收缩来抑制瘢痕形成。

溶血磷脂酸对人眼小梁细胞胶原合成的影响

目的了解溶血磷脂酸(lysophosphatidic acid,LPA)对体外培养的人眼小梁细胞(human trabecular meshwork cell,HTC)胶原合成的影响,探讨LPA在原发性开角型青光眼(primary open-angle glaucoma,POAG)发病机制中的作用。方法2012年6月取体外培养的第3代HTC12份,随机分成对照组和观察组各6份,对照组加入不含LPA的无血清细胞冻存培养基,观察组加入含LPA10-7μmol/L的无血清细胞冻存培养基,培养48、72、96 h时吸取上述清液0.5 ml,用羟脯氨酸碱水解法测定在酶联免疫检测仪上490 nm处测定吸光度值(A490值)。计量资料采用t检验,P<0.05为差异有统计学意义。结果 48、72、96 h A490值对照组分别为(0.248±0.098)、(0.255±0.013)、(0.304±0.014),观察组分别为(0.264±0.011)、(0.276±0.008)、(0.329±0.008),两组比较差异均有统计学意义(t=3.019、3.370、3.798,均P<0.05),且随着LPA作用时间的增加,A490值呈上升趋势。结论 LPA可通过促进HTC胶原的合成,导致邻管区细胞外基质异常堆积,造成房水引流阻力的增加,参与原发性开角型青光眼的发病。

血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对肝星状细胞Ⅲ型胶原合成的影响

目的观察血管紧张素Ⅱ及其受体拮抗剂对体外培养的肝星状细胞Ⅲ型胶原蛋白合成及其mRNA表达的影响。方法采用HSC-T6肝星状细胞系作为活化的肝星状细胞的研究模型。将培养的肝星状细胞随机分为对照组、血管紧张素Ⅱ(AngⅡ)组、受体拮抗剂(AT1RA)组和血管紧张素Ⅱ+受体拮抗剂(AngⅡ+AT1RA)组。采用ELISA法检测细胞培养上清液中Ⅲ型胶原蛋白的含量;RT-PCR法检测肝星状细胞中Ⅲ型胶原mRNA的表达。结果细胞培养上清液中Ⅲ型胶原蛋白的含量对照组、AngⅡ组和AngⅡ+AT1RA组分别为(6.301±0.432)ng/ml、(7.356±0.237)ng/ml和(6.263±0.236)ng/ml,AngⅡ组高于对照组(P<0.05),AngⅡ+AT1RA组显著低于AngⅡ组(P<0.05)。肝星状细胞Ⅲ型胶原mRNA的表达水平对照组、AngⅡ组和AngⅡ+AT1RA组分别为2.317±0.015、2.643±0.057和2.330±0.036,AngⅡ组高于对照组(P<0.05),AngⅡ+AT1RA组显著低于AngⅡ组(P<0.05)。结论血管紧张素Ⅱ能够促进肝星状细胞Ⅲ型胶原蛋白的合成及其mRNA的表达,而血管紧张素Ⅱ1型受体拮抗剂能够明显抑制这一作用。

胶原的百年研究历程回顾与展望

胶原作为细胞外基质的主要成分,是脊椎动物体内含量最丰富的蛋白。胶原研究历程与人们对生命本质的认识过程密不可分,从纤维学说到细胞学说确立经历了数百年的历程。近百年来,胶原的应用从制革和黏合剂等,逐渐拓展至食品、药品、化妆品、生物材料,近年来拓展至组织工程、再生医学及干细胞定向转化等。结合已有的文献报道及相关研究经验,针对胶原的研究历程、应用范围以及相关技术在胶原研究中的应用、取得的阶段性进步或成果等进行梳理。以期为胶原领域的研究人员提供胶原研究的最新动向,使其充分理解技术进步与科学研究之间的关系,同时有助于促进不同学科领域的交叉与融合。

FGF对兔关节软骨细胞基质胶原和蛋白多糖的影响

关节软骨的损伤与修复是目前骨科临床基础研究的一个重要课题。关节软骨损伤后的修复是极其有限的〔１〕。许多多肽生长因子在关节软骨损伤与修复中起着重要的调节作用，如成纤维细胞生长因子（ｆｉｂｒｏｂｌａｓｔｇｒｏｗｔｈｆａｃｔｏｒ，ＦＧＦ）对中胚层来源的细胞...

肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响

探讨大鼠腹腔肥大细胞对平滑肌源性泡沫细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的影响。用大鼠腹腔肥大细胞上清液和氧化型低密度脂蛋白处理平滑肌细胞 4 8h后 ,逆转录聚合酶链反应检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原mRNA的表达 ,免疫细胞化学染色检测平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原蛋白的表达。结果发现 ,与对照组相比 ,处理组平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原的mRNA表达降低 ,免疫细胞化学染色后 ,处理组细胞浆内棕色颗粒比对照组少且染色浅。结果提示 ,肥大细胞在体外抑制平滑肌细胞Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达 ,并且能协同氧化型低密度脂蛋白对Ⅰ型胶原和Ⅲ型胶原表达的抑制作用。

软骨细胞-胶原海绵复合移植修复软骨缺损的形态学研究

目的 研究软骨细胞 -胶原海绵复合移植修复软骨缺损的疗效。方法 软骨细胞取自 3日龄异体幼兔 ,体外培养后接种于胶原海绵支架上 ,再移植于兔膝关节全层软骨缺损处。在同一大白兔双膝关节内外髁分 3组作自身对照研究 ,股骨内髁作软骨细胞 -胶原海绵复合移植组 ,右膝股骨外髁作单纯胶原海绵移植组 ,左膝股骨外髁作空白对照组。移植术后第 4、8、12、16、2 0周分批处死 ,进行大体、组织学和超微结构观察。结果 软骨细胞 -胶原海绵复合移植组缺损处为软骨性修复 ,而单纯胶原海绵移植组和空白对照组为纤维性修复。结论 运用软骨组织工程的原理 ,以胶原海绵作为支架材料的异体软骨细胞移植可修复兔关节软骨缺损 ,为治疗关节软骨缺损提供了一种有效的方法。

血清对角膜基质细胞介导下绿脓杆菌引起的角膜胶原降解作用的实验研究

目的探讨血清在绿脓杆菌和角膜基质细胞介导的角膜胶原降解时的作用。方法Ⅰ型胶原凝胶,不混悬及混悬角膜基质细胞,在不同的血清浓度下(0、5%、10%、20%)与绿脓杆菌培养液共同培养24h,超滤去除天然原纤维,超滤液经过水解,分光光度计测定其羟脯氨酸(HYP)的量作为胶原降解的活性单位。结果不混悬角膜基质细胞组,随血清浓度增加绿脓杆菌所引起的胶原降解量无变化,差异无显著性(P>0.05);混悬角膜基质细胞组,随着血清浓度增加绿脓杆菌所引起的胶原降解量减少,差异有显著性(P<0.025orP<0.05);在相同的血清浓度(0、5%、10%)时,混悬角膜基质细胞组胶原降解量高于不混悬角膜基质细胞组,差异有显著性(P<0.025orP<0.05)。结论血清中的某些活性成分可抑制绿脓杆菌诱导的角膜基质细胞胶原降解。

辛伐他汀对大鼠血管外膜成纤维细胞增殖迁移和胶原合成的影响

为观察辛伐他汀对血管外膜成纤维细胞增殖、迁移和胶原合成的影响 ,用组织贴块法培养SD大鼠的血管外膜成纤维细胞 ,以四氮唑蓝比色法测定细胞增殖 ,以Sarkar方法测定血管外膜成纤维细胞迁移距离 ,以3 H 脯氨酸掺入法测定胶原合成。结果发现 ,随着辛伐他汀浓度增高血管外膜成纤维细胞的A4 90值呈递减趋势 ,10 -7、10 -6、10 -5和 10 -4mol/L组的A4 90值分别为 0 .2 91± 0 .0 11、0 .2 6 5± 0 .0 0 6、0 .2 34± 0 .0 0 8和 0 .2 14± 0 .0 0 6 ,与对照组(0 .335± 0 .0 18)差异显著 (P均 <0 .0 1) ;随着辛伐他汀浓度增高血管外膜成纤维细胞的迁移距离呈递减趋势 ,10 -7、10 -6、10 -5和 10 -4mol/L组的迁移距离分别为 6 .5± 1.1mm、5 .3± 1.2mm、4 .1± 1.0mm和 2 .9± 0 .9mm ,与对照组 (8.1± 1.8mm)差异显著 (P均 <0 .0 1)。随着辛伐他汀浓度的增高的3 H 脯氨酸掺入率呈递减趋势。 10 -7、10 -6 、10 -5及 10 -4mol/L组血管外膜成纤维细胞的3 H 脯氨酸掺入率分别为 (cpm/ 5 0 0 0细胞 ) 385± 5 1、2 72± 4 8、16 1± 38和 14 1± 36 ,与对照组 (6 5 5± 5 8)差异显著 (P均 <0 .0 1)。此结果提示 ,辛伐他汀可以剂量依赖地抑制血管外膜成纤维细胞增殖、迁移和胶原合成 ,这可能对改善血管重塑有一?

p38MAPK参与高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ

目的:探讨p38MAPK信号通路在高糖刺激大鼠肾小管上皮细胞产生细胞外基质胶原Ⅲ中的作用。方法:采用体外培养和Westernblotting等方法,以不同浓度D-葡萄糖、p38MAPK信号通路特异性阻断剂SB203580以及用不同时间刺激正常大鼠肾小管上皮细胞NRK52E,分别检NRK52E细胞p38MAPK磷酸化水平和细胞外基质胶原Ⅲ的表达。结果:随D-葡萄糖浓度增加,p38MAPK磷酸化水平、胶原Ⅲ的产生也增加,SB203580可有效阻断高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高和细胞外基质胶原Ⅲ的表达的增高。结论:高糖引起p38MAPK磷酸化水平的升高可能在糖尿病肾病的肾间质纤维化中发挥重要作用。SB203580有潜在的糖尿病肾病防治的临床应用价值。