槲皮素改善肝细胞脂质堆积作用的实验研究

目的探讨槲皮素(quercetin,Que)对肝细胞脂质堆积细胞模型的作用。方法将培养细胞分为空白对照组、模型组、阳性药小檗碱(10-5mol.L-1)、槲皮素高(10-4mol.L-1)、中(10-5mol.L-1)、低(10-6mol.L-1)组。正常对照组细胞仅用培养液培养;模型对照组在吸弃旧培养液后,换上脂质堆积诱导液诱导;阳性药及给药组分别换上脂质堆积诱导液,同时给予阳性药小檗碱(10-5mol.L-1)、槲皮素高(10-4mol.L-1)、中(10-5mol.L-1)、低(10-6mol.L-1)剂量;上述各组细胞继续培养48 h,进行油红染色,并在光镜下观察脂质堆积细胞病理变化;测定各组细胞吸光度的变化,计算抑制率。为了验证油红O实验的结果,同时测定了细胞内甘油三酯的水平。在诱导48 h后,收集细胞,裂解细胞,并测定细胞内的甘油三酯水平。结果模型对照组与空白对照组比较,其抑制率具有非常显著性差异(P<0.001),小檗碱及槲皮素高、中剂量与模型组比较具有非常显著性差异(P<0.001),槲皮素高、中剂量对脂质细胞的抑制率与阳性药相当,分别为60.7%、58.3%及55.2%,低剂量组与对照组比较不具有显著性差异(P>0.05)。经过诱导后,模型对照组细胞中的甘油三酯含量为正常对照组细胞的3倍。而在给予小檗碱和槲皮素处理后,可明显减少肝细胞中堆积的甘油三酯(P<0.05)。肝细胞中甘油三酯的变化与油红O染色实验的结果一致。结论槲皮素对非酒精性脂肪肝细胞模型具有降脂作用,并呈剂量依赖性。

小颗粒致密低密度脂蛋白氧化特性及对血管内皮细胞脂质过氧化的影响

了解小颗粒致密低密度脂蛋白中抗氧化维生素含量、氧化特性 ,探讨其对血管内皮细胞脂质过氧化的影响。采用二次密度梯度超速离心的方法分离制备小颗粒致密低密度脂蛋白 ,高压液相色谱测定其抗氧化物质维生素A、E和 β 胡萝卜素 ;连续监测小颗粒致密低密度脂蛋白在 2 34nm的吸光度以测定其氧化敏感曲线 ;在血管内皮培养液中分别加入不同浓度的小颗粒致密低密度脂蛋白 ,培养后测定培养液丙二醛的浓度。实验成功分离小颗粒致密低密度脂蛋白 ,与大而轻低密度脂蛋白相比 ,维生素A、E和 β 胡萝卜素等抗氧化物质及总抗氧化能力明显减少 ,只有大而轻低密度脂蛋白的 6 5 %、39%和 2 4 % ,故小颗粒致密低密度脂蛋白氧化的延迟时间只有大而轻低密度脂蛋白的 37.5 % ,但硫代巴比妥酸反应物质值及氧化速率分别是大而轻低密度脂蛋白的 1 .7倍和 1 .2 8倍 ;培养液中丙二醛含量随加入脂蛋白的浓度和作用时间而增高 ,2 4h时小颗粒致密低密度脂蛋白 5 0mg组、1 0 0mg组、1 5 0mg组与相同剂量大而轻低密度脂蛋白组比较丙二醛显著增高 (P <0 .0 5 )。上述结果提示 :小颗粒致密低密度脂蛋白中抗氧化物质及抗氧化能力下降 ,氧化敏感性增高 。

脂滴包被蛋白对鸡前脂肪细胞脂质蓄积的影响

目的:探讨脂滴包被蛋白(perilipin 1)对鸡前脂肪细胞脂质蓄积的影响。方法:首先构建pcDNA3.1-perilipin 1基因真核表达载体,转染鸡原代前脂肪细胞,24h后添加油酸诱导前脂肪细胞分化。然后利用Western blot方法检测perilipin 1的表达;利用油红O提取比色法研究perilipin 1对鸡前脂肪细胞脂质蓄积的影响;利用Real-time RT-PCR方法分析其他与脂类代谢相关的重要基因(FAS、ACC、ATGL)的表达变化。结果:转染pcDNA3.1-perilipin 1基因真核表达载体能明显上调perilipin 1的表达。perilipin 1表达量升高后,鸡前脂肪细胞脂质蓄积能力增强,但其他与脂类代谢相关的重要基因(FAS、ACC、ATGL)的表达量没有发生明显的变化。结论:过表达perilipin 1促进鸡前脂肪细胞的脂质蓄积。

调肝导浊汤对实验性动脉粥样硬化家兔肝脏脂质含量及体外培养肝细胞脂蛋白受体的影响

目的 :观察中药调肝导浊汤对家兔实验性AS模型肝脏脂代谢及体外培养肝细胞膜脂蛋白受体的影响 ,探讨中药防治AS的机制。方法 :高胆固醇饮食饲喂家兔 10W造成AS模型 ,给药 6W结束实验 ,取肝脏匀浆测定TC、TG变化。此外 ,体外培养大鼠肝细胞 ,原位杂交法计数膜LDL受体阳性表达。结果 :调肝导浊汤可有效降低肝组织脂质含量 ,中药可以显著增强肝细胞膜LDL受体mRNA表达。结论 :调肝导浊汤具有良好的保护肝脏、调整脂代谢的作用 ,从而防治AS。

运动对细胞脂质过氧化的影响

由自由基导致的细胞脂质过氧化（LIPOX）可以严重损害细胞的完整性,甚至可以引起细胞的死亡（1）。Ronguist在1982年报道,生物膜上脂质过氧化,尤其在对缺氧组织再灌氧的过程中可以导致细胞功能的一系列变化。这些变化包括细胞膜通透性的提高,肌质网状组织Ca2+转运率的下降,线粒体功能的改变,以及引起其他有毒代谢。在运动中,由于血液的重新分配,有些组织可能缺氧。

手术创伤红细胞脂质过氧化对深静脉血栓形成的危险性探讨

目的:研究手术创伤后红细胞脂质过氧化物(LPO)的降解产物丙二醛(MDA)含量的变化,探讨它对深静脉血栓形成(DVT)的危险性。方法:15例择期手术患者于手术前、术后1、3、7、14 d抽血样保存,同批测定红细胞中过氧化脂质(LPO)的含量,了解红细胞脂质过氧化的情况。结果:与术前相比,术后1、3 d LPO极显著升高(P<0.01),术后7 dLPO显著增高(P<0.01),开始下降,术后14 d LPO增高不明显(P>0.05),基本恢复正常。与腹腔手术相比,胸腔手术后LPO显著升高(P<0.05)。结论:手术创伤后红细胞脂质过氧化增强是DVT发生的危险因素。

高糖对体外培养的乳鼠心肌细胞脂代谢的影响

目的探讨高浓度葡萄糖对高胰岛素水平作用下乳鼠心肌细胞脂代谢的影响。方法用胰岛素抵抗心肌细胞模型,以不同浓度葡萄糖培养基和胰岛素为干预因素进行实验。以脂蛋白脂肪酶的表达来观察心肌细胞脂代谢的改变;用电镜观察心肌细胞的病理性损伤。结果80 mmol/L葡萄糖作用下,胰岛素抵抗心肌细胞的脂蛋白脂肪酶mRNA的表达及活性明显增强(P<0.05);加用10-8mol/L胰岛素共同孵育后,脂蛋白脂肪酶mRNA的表达及活性减弱;不同浓度葡萄糖作用下,相同状态心肌细胞脂蛋白脂肪酶活性及脂质含量无显著性差异(P>0.05);相同浓度葡萄糖作用下,胰岛素抵抗心肌细胞脂质含量明显增加(P<0.05),加用10-8mol/L胰岛素共同孵育后,细胞脂质含量减少。高浓度葡萄糖作用下,正常心肌细胞和胰岛素抵抗心肌细胞出现线粒体肿胀,髓样结构形成,胞内脂滴增多等细胞结构损伤性改变,加用10-8mol/L胰岛素共同孵育后,细胞线粒体无增多及肿胀,胞内脂滴减少。结论胰岛素抵抗心肌细胞脂蛋白脂肪酶表达上调,脂代谢加速,细胞内脂质含量增加,脂蛋白脂肪酶mR-NA表达强度增加,细胞结构发生变化,而较高胰岛素水平可逆转这些变化的发生。

老年人脂蛋白脂酶及肝内皮细胞脂酶活性变化与HDL亚组分的关系

目的研究老年人脂蛋白脂酶(LPL)和肝内皮细胞脂酶(HEL)活性变化,探讨其与HDL亚组分水平的关系。方法测定40例老年人高密度脂蛋白胆固醇(HDL-C)及其亚组分水平、肝素后LPL和HEL活性,45例非老年人作对照,并用直线相关分析LPL和HEL与HDL亚组分的关系。结果老年人高密度脂蛋白2胆固醇(HDL2-C)水平、LPL活性显著低于非老年人(均P<0.05),HEL活性明显高于非老年人(P<0.05);老年人LPL活性与HDL-C、HDL2-C水平呈正相关(r分别为0.390、0.479,P<0.05、P<0.01),HEL活性与HDL-C、HDL2-C水平呈负相关(r分别为-0.336、-0.453,P<0.05、P<0.01)。结论老年人LPL活性下降及HEL活性升高可能是动脉粥样硬化的危险因素之一。

不同液体复苏对休克大鼠肺损伤和中性粒细胞脂蛋白表达的影响

目的探讨不同液体复苏对休克大鼠肺损伤和中性粒细胞脂蛋白(NGAL)表达的影响。方法清洁级SD大鼠18只分为三组:正常组、限制组与大量组,每组6只大鼠,正常组不制作休克模型,限制组与大量组建立了休克模型。限制组给予限制性液体复苏,大量组给予大量液体复苏。记录三组大鼠的失血量和输液量;采用酶联免疫法检测血清NGAL水平;记录复苏后3 d、5 d与7 d肺组织病理评分、凋亡指数。结果所有大鼠在实验过程中均存活,限制组失血量与大量组对比差异无统计学意义(P> 0.05),限制组的输液量显著低于大量组(P <0.05)。限制组、大量组复苏后7 d的血清NGAL含量均显著低于复苏前(P <0.05),限制组也显著低于大量组(P <0.05),且均高于正常组(P <0.05)。复苏后3 d、5 d与7 d限制组、大量组的肺组织病理评分显著高于正常组(P <0.05),限制组评分显著低于大量组(P <0.05)。复苏后3 d、5 d与7 d限制组、大量组的肺组织凋亡指数显著高于正常组(P <0.05),限制组凋亡指数显著低于大量组(P <0.05)。结论限制性液体复苏在休克大鼠的应用能减轻肺损伤,抑制血清NGAL的表达,减少输液量,抑制大鼠肺组织凋亡,有很好的基础研究应用价值。

大鼠肝内皮细胞脂酶特性的研究

碘代乙酰胺、乙酰咪唑、醋酐-醋酸钠和1,2-环已二酮的预处理对肝内皮细胞脂酶HEL)活性无显著影响,而N-溴代琥珀酰亚胺(NBS)和二异丙基氟磷酸(DFP)预处理分别抑制HEL活性75.2％和68.1％。Ca^(2+)能激活HEL,0.005mol/L Ca^(2+)的激活作用最大。但氯丙嗪可显著地抑制Ca^(2+)的激活作用。HEL在-20℃很稳定,但在室温及4℃都较不稳定。0.1％tritonX-100对HEL活性有显著保护作用。实验结果提示①HEL中组氨酸和丝氨酸残基可能参与HEL活性中心。②Ca^(2+)对HEL的激活作用可能通过钙调控蛋白(Calmodulin)

细胞脂质分析和DNA分子杂交在短状杆菌分类学研究中的作用

利用薄层层析和气相色谱测定１２株细菌的脂肪酸组份，通过ＵＰＧＭＡ聚类分析绘制其树状图谱；用双相薄层层析获得特征性的极性酯图谱；经光敏生物素非放射性标记ＤＮＡ进行分子杂交测定实验菌株间的ＤＮＡ同源值．一致的结果表明，１２株菌株应分别划归短状杆菌属的３个种，其中有２个被命名为新种，即ＢｒａｃｈｙｂａｃｔｅｒｉｕｍｃｏｎｇｌｏｍｅｒａｔｕｍＩＦＯ１５４７２Ｔ和Ｂ．ｐａｒａｃｏｎｇｌｏｍｅｒａｔｕｍＩＦＯ１５２２４Ｔ．应用上述方法，能有效地对难以从形态特征。

P53与肿瘤细胞脂代谢

肿瘤细胞除线粒体有氧代谢减弱,糖酵解过度活跃外,脂代谢的异常也是其重要的特征。本文通过综述抑癌基因P53对肿瘤细胞脂代谢的调节过程,为探究肿瘤代谢重编程的分子机制以及寻找治疗靶点提供线索。

结核分枝杆菌感染致巨噬细胞脂代谢改变的研究进展

结核分枝杆菌引起的结核病是全球致死性传染病之一,结核感染期间结核分枝杆菌利用巨噬细胞脂质作为主要碳源。结核分枝杆菌与巨噬细胞间的相互作用、巨噬细胞内的免疫应答及脂质平衡密切相关。结核病患者肺内脂质含量明显增加,而外周血内胆固醇含量却明显降低。本文从巨噬细胞中结核分枝杆菌的能量代谢、结核分枝杆菌感染致肺部及血中巨噬细胞脂代谢改变等方面对结核分枝杆菌感染致巨噬细胞脂代谢改变的研究进展作一综述,以期发现结核病治疗的新靶点和新方法。

高浓度葡萄糖对3T3-L1脂肪细胞脂联素分泌的影响

目的:探讨高浓度葡萄糖对3T3-L1脂肪细胞脂联素分泌的影响。方法:3T3-L1脂肪细胞诱导分化后分为4组,处理如下,(1)5.5mmol/L葡萄糖;(2)5.5mmol/L葡萄糖+50μmol/LPD98059;(3)17.5mmol/L葡萄糖;(4)17.5mmol/L葡萄糖+50μmol/LPD98059。48h后半定量RT-PCR法检测3T3-L1脂肪细胞过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPAR-γ)mRNA的表达,ELISA法检测培养液中脂联素浓度。结果:(1)高浓度葡萄糖可以降低PPAR-γmRNA的表达、减少3T3-L1脂肪细胞脂联素的分泌;(2)PD98059能够部分逆转由高糖引起的PPAR-γmRNA表达降低及脂联素分泌的下降。结论:高浓度葡萄糖通过激活细胞丝裂原活化蛋白激酶信号传导通路降低PPAR-γmRNA的表达,同时减少3T3-L1脂肪细胞脂联素的分泌。

溶酶体相关膜蛋白3过表达促进肝细胞脂质沉积

目的探讨溶酶体相关膜蛋白3(lysosome associated membrane protein 3,LAMP3)对肝细胞脂质代谢的作用。方法以肝癌细胞系Huh7为研究对象,利用qRT-PCR及Western blot法检测游离脂肪酸(free fatty acids,FFAs)0.4 mmol/L处理后肝细胞LAMP3表达变化;过表达LAMP3后,分别使用油红染色及甘油三酯检测试剂盒检测肝细胞内脂滴及甘油三酯沉积情况;采用ATP及β-羟基丁酸检测试剂盒检测细胞内ATP及β-羟基丁酸含量变化;过表达LAMP3,使用qRT-PCR、Western blot法检测脂质合成相关基因PPARγ与SCD-1及脂质分解相关基因CPT1A与PGC-1α表达变化。结果 FFAs处理后肝细胞Huh7中LAMP3表达显著上调(P<0.05);过表达LAMP3可显著促进肝细胞内脂滴和甘油三酯的沉积(P<0.05);过表达LAMP3对肝细胞内ATP及β-羟基丁酸含量的影响差异无统计学意义(P>0.05);过表达LAMP3可促进PPARγ及SCD-1表达(P<0.05),但对CPT1A、PGC-1α表达的影响差异无统计学意义(P>0.05)。结论 LAMP3可通过调控脂肪合成促进肝细胞内脂质沉积。