细胞膜渗透性对氟喹诺酮耐药表皮葡萄球菌药物敏感性的影响

目的 研究表皮葡萄球菌细胞膜渗透性下降对氟喹诺酮 (FQNs)类药物敏感性的影响。方法 比较合用杆菌肽 (BAC)、EDTA前后 ,敏感菌及耐药菌分别对环丙沙星 (CPLX)、司帕沙星 (SPLX)药物敏感性的变化 ;测定敏感菌、耐药菌细胞内的药物浓度及乙二胺四乙酸 (EDTA)对药物浓度的影响。结果 杆菌肽与 2种FQNs合用对 8株突变耐药菌的部分浓度抑菌指数分别为 0 .5 9和 0 .72 ,表现出协同或相加的抗菌作用。合用EDTA对敏感菌株的MIC影响不大 ,但可显著增加耐药菌对FQNs的敏感性 ,合用 2 .0mmol·L-1EDTA后CPLX和SPLX对耐药菌的MIC均下降了 90 %以上。敏感菌细胞内的FQNs药物浓度明显高于耐药菌 ,合用 2mmol·L-1EDTA可使耐药菌细胞内的CPLX浓度从 40ng·10 -9(cells)增加到 30 0ng·10 -9(cells) ,SPLX的浓度从 12 0ng·10 -9(cells)增加到 30 0ng·10 -9(cells) ,而敏感菌细胞内的药物浓度上升不超过 2 0 %。结论 FQNs耐药的表皮葡萄球菌细胞膜的渗透性显著下降 ,导致进入细胞内的药物减少而引起细菌耐药。合用BAC ,EDTA等可提高细胞膜渗透性的药物或试剂后 。

高密度CO_2处理对E.coli细胞膜渗透性的影响

以E.coli菌悬液为研究对象,通过测定高密度CO2处理(DPCD)后E.coli上清液中蛋白质、核酸、Mg2+、K+离子和丙二醛的含量,辅助透射电镜观察,研究DPCD对E.coli细胞膜渗透性的影响。在7MPa、37℃条件下,E.coli经高密度CO2处理10min后,99%以上的E.coli失活,同时研究发现蛋白质、核酸及Mg2+、K+离子等胞内物质均发生了不同程度的泄漏,丙二醛含量增加,E.coli胞内物质密度降低。密度CO2处理造成E.coli细胞膜渗透性的增加,这也是导致E.coli死亡的原因之一。

茶叶提取物茶多酚对副猪嗜血杆菌抑制及细胞膜渗透性的影响

研究旨在探索茶多酚对副猪嗜血杆菌作用效果。试验采用试管法测定茶多酚对副猪嗜血杆菌的最小抑菌浓度,并通过副猪嗜血杆菌感染小鼠,观察茶多酚对小鼠的保护力;采用离子泄漏测定分析茶多酚对副猪嗜血杆菌细胞膜通透性的影响。结果显示:茶多酚对副猪嗜血杆菌的最小抑菌浓度为10 g/L;高剂量茶多酚对人工感染副猪嗜血杆菌小鼠具有一定的治疗效果,可以提高小鼠抵抗副猪嗜血杆菌感染的能力;细胞膜渗透试验中,随着浓度的增大,OD_(600nm)值也随之增大,表明泄漏物随之增多,茶多酚可作用于副猪嗜血杆菌的细胞膜,改变其通透性。研究表明,茶多酚对副猪嗜血杆菌具有抑制作用,并且抑菌效果随着茶多酚浓度增加而增强。

还原思维在“细胞膜的渗透性实验”中的应用

以还原思维再现细胞膜的渗透性研究的原始过程,对该实验进行了重新设计和改进,分析和讨论两种不同的实验效果,旨在引导学生实现由验证性实验向创新性实验的过渡。

细胞膜的渗透性实验的改进与实践

细胞生物学实验是高校细胞生物学课程的重要实践教学环节,对培养学生基本的专业技能、动手能力、分析问题和解决问题能力以及科研思维起着非常重要的作用。本文对传统的细胞生物学实验“细胞膜的渗透性实验”进行了改进,由原来简单的验证性实验设计成富有挑战性和难度的实验,实践证明学生的学习兴趣和热情得到极大地激发,教学质量和效果显著提高。

缺氧对血管内皮生长因子诱导牛冠状动脉内皮细胞脂蛋白通透性升高的调控及丹酚酸B的抑制作用

目的 为了了解缺氧对血管内皮生长因子(VEGF)增强血管内皮细胞通透性作用的影响及其与动脉粥样硬化的关系 ,考察了正常和缺氧状态下VEGF对体外培养牛冠状动脉内皮细胞 (BCEC)脂蛋白通透性的影响及丹酚酸B的抑制作用。方法 正常及缺氧条件下 ,将VEGF及丹酚酸B加入BCEC共孵育 ,用SN 695型液闪计数器测 [12 5I]低密度脂蛋白([12 5I]LDL)通过BCEC的百分率。结果 VEGF可显著增强BCEC对 [12 5I]LDL的通透性 ,这种增加具有浓度依赖性。缺氧 3h可促进VEGF所致的的通透性增加。丹酚酸B在正常和缺氧条件下均显著抑制VEGF诱导的BCEC通透性升高。结论 VEGF可增强血管内皮细胞的通透性 ,可能在动脉粥样硬化的形成和发展过程中起一定作用。

PECAM 1与血管内皮细胞通透性及白细胞渗出

血小板源内皮细胞粘附分子（ｐｌａｌｅｌｅｔｅｎｄｏｔｈｅｌｉａｌｃｅｌｌａｄｈｅｓｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ ，ＰＥＣＡＭ１） 是细胞粘附分子免疫球蛋白超家族成员之一，主要在内皮细胞、血小板、粒细胞和一些淋巴细胞上表达。ＰＥＣＡＭ１在炎症过程中调控内皮细胞通透性、介导白细胞跨内皮细胞迁移到炎症部位有重要作用，其作用机制与ＰＥＣＡＭ１ 的磷酸化、ＰＥＣＡＭ１

“细胞膜的渗透性实验”在“细胞生物学”实验教学中的创新实践

细胞生物学实验是高等院校"细胞生物学"课程的重要教学环节。为了适应"细胞生物学"实验教学实际需要和深化实验教学改革,提高学生学习兴趣,培养学生创新意识,该文对细胞膜的渗透性实验进行了优化创新和实践,增加了必要的实验药品和等渗溶液p H值测定等实验内容,并在本校2017和2018年度实验教学中进行了教学实践。该实践获得了明确的实验结果和分析,对学生的教育意义深刻,取得了良好的教学效果,对高等院校"细胞生物学"实验教学改革创新具有参考意义。

妊娠晚期子宫平滑肌细胞膜通透性的变化

目的研究不同临产状态子宫平滑肌细胞膜通透性的变化，与分娩发动的关系。方法１８例妊娠３８～４１周的孕妇分为未临产、将临产、已临产３组，每组６例，用镧示踪法分别标记子宫体及子宫下段平滑肌，用透射电镜（ＴＥＭ）进行观察。结果妊娠晚期子宫平滑肌细胞膜允许镧（Ｌａ３＋）进入细胞内并沉积在线粒体上。镧标记阳性例数：未临产组，子宫下段明显高于子宫体部；将临产组，子宫上、下段比较无明显差异；已临产组，子宫体部明显高于子宫下段；子宫体之间相比，未临产组与将临产组无明显差异，已临产组则显著高于前二组；子宫下段之间相比，未临产组显著高于将临产与已临产组，将临产与已临产组则无明显差异。且３组标记程度亦不同，前２组镧沉积在平滑肌细胞内体积较大的线粒体上，而已临产组则标记了细胞内所有线粒体的内、外膜及脊上。结论妊娠晚期子宫平滑肌细胞膜通透性的变化，尤其是子宫体部平滑肌细胞膜通透性的升高，与分娩的自然发动有密切关系。

Th细胞亚群测定中通透剂作用效果的评价

目的 建立一种在Th细胞亚群测定中评价通透剂作用效果的方法。方法 将刺激培养并固定后的全血标本在通透剂作用前及用不同剂量的通透剂作用后 ,加入荧光素标记的CD 6 9抗体、髓过氧化物酶 (MPO)抗体和γ干扰素(IFN γ)抗体 ,用流式细胞仪检测含相应抗原的细胞。结果 通透剂作用前及不同剂量的通透剂作用后 ,T淋巴细胞中CD6 9+细胞的百分率均大于 90 % ;通透剂作用前 ,MPO阳性的粒细胞和IFN γ阳性的淋巴细胞均低于 1% ;使用 30 μl通透剂时 ,粒细胞几乎全部为MPO阳性 ,>30 %的淋巴细胞IFN γ阳性 ;使用 5 0 μl通透剂时 ,总细胞数比通透剂作用前显著减少 (t =13 6 2 3,P <0 0 0 1)。结论 MPO可以作为评价通透剂作用效果的指标 ;当细胞数同通透剂作用前无显著差异 ,且粒细胞门的细胞几乎全部被染为MPO阳性时 ,所用的通透剂量为最适用量。

口服化疗增敏剂鲨烯胺对耐药革兰阴性杆菌的作用

耐多药（MDR）病原菌在全球广泛播散，严重影响抗菌药物的疗效。革兰阴性菌比革兰阳性菌多了一层细胞外膜，增加了抗菌药物渗入细菌体内的屏障作用，使许多抗菌药物对革兰阴性菌的作用远较其对革兰阳性菌的作用为差。鲨烯胺可增加革兰阴性菌的细胞膜渗透性，使抗菌药物容易进入细菌体内，并有一定细胞毒作用，有助于杀灭MDR菌株。

细菌耐药机制与临床治疗对策

由于广谱抗菌药的滥用以及细菌间耐药基因的转导 ,细菌对常用抗菌药物耐药的发展成为人类健康事业面临的严重问题之一。细菌主要通过产生灭活酶或钝化酶 ,改变抗菌药物作用靶位 ,改变细菌细胞壁的通透性、主动外排作用以及形成细菌生物被膜而对抗菌药物耐药 ,这些耐药机制不是相互孤立存在的 ,两个或更多种不同的机制相互作用决定一种细菌对一种抗菌药物的耐药水平。本文介绍了临床常见致病菌对各类抗菌药物主要的耐药机制及耐药基因 ,并总结了针对常见细菌耐药的合理用药及相关防治对策 ,以期为临床常见致病菌耐药提供解决方案。

禾谷丝核菌的次生代谢产物

禾谷丝核菌 (RhizoctoniacerealisVanderHoeven)菌株对小麦的致病性测定结果表明 ,3个菌株的致病力存在显著差异。小麦品种和禾谷丝核菌菌株间存在显著的相互作用 ,在两个感病品种“苏麦 3号”、“宁麦 6号”和R7、R4 6 两个强致病力菌株间 ,这种相互作用尤为明显。禾谷丝核菌在马铃薯蔗糖培养液中产生的次生代谢物种类多 ,产量高。试验明确了进行禾谷丝核菌次生代谢物分析的最佳液相色谱条件。液相色谱和气质联用的结果显示 ,致病力不同的 3个菌株间 ,次生代谢物的构成上有差异 ,呋喃甲酸和苯甲酸衍生物的产量在菌株间差异最大。禾谷丝核菌的酸性粗提物具一定的生物活性 ,在高浓度和低浓度下的作用相反。禾谷丝核菌的次生代谢物处理后 ,小麦组织的电导率与对照 (未处理 )没有差异 。

豚鼠耳蜗微血管内皮细胞的跨内皮细胞电阻及对牛血清白蛋白的通透性

目的 :研究豚鼠耳蜗微血管内皮细胞跨细胞电阻的动态变化及峰值大小 ,以及细胞单层对12 5I 牛血清白蛋白的通透性。方法 :①用小池技术建立起该内皮细胞通透性的体外模型 ;②研究该体外模型跨细胞电阻及对12 5I 牛血清白蛋白的通透性。结果 :①耳蜗内皮细胞在培养增殖过程中其跨细胞电阻呈动态变化过程 ,以 5×10 4/cm2 的细胞密度接种时 ,7d左右电阻到达峰值 ,其跨细胞电阻峰值大小为 (118.9± 18.5 )Ω/cm2 ;②体外模型中加入12 5I 牛血清白蛋白后 ,贝克 时间变化图呈抛物线型上升曲线 ,90min内几乎呈直线。结论 :跨细胞电阻及对12 5I 牛血清白蛋白变化曲线反映了体外耳蜗微血管内皮细胞的通透性特征。

调控质膜稳态提高枯草芽孢杆菌积累四烯甲萘醌MK-4

维生素MK-4在食品、保健和制药工业中被广泛用于膳食补充剂和药物治疗。为了获得1株四烯甲萘醌MK-4的高产菌株,对细胞膜的稳态进行了系统的分析和优化。首先,对出发菌株Bacillus subtilis BC04细胞膜的完整性相关的基因进行整合分析,发现膜蛋白相关基因srfAD对MK-4的积累有重要的影响;然后对流动性、渗透性相关基因进行整合分析,找到了影响MK-4积累的基因ypkP和fadR。通过组合优化,确定优势菌株为BF14,其整合了基因srfAD、ypkP,敲除了基因fadR。BF14在40℃条件下,摇瓶发酵7 d,产量达到(213.80±2.16)mg/L,比优化前提高了19.51%。基于上述结果,在3 L发酵罐中进行发酵条件优化,确定了初始葡萄糖质量浓度为10 g/L,补料维持葡萄糖质量浓度4~10 g/L的分批发酵工艺,最终MK-4的产量达到(249.65±2.34)mg/L,较摇瓶水平提高了16.77%,生产强度为2.08 mg/(L·h)。研究表明,优化细胞膜的稳态可以有效提高菌株生产MK-4的能力,该成果为进一步提升工业水平MK-4发酵性能奠定了基础。

表面活性剂对大肠杆菌胞外生产α-环糊精葡萄糖基转移酶的影响

研究了不同浓度表面活性剂Tween-80,Triton X-100,SDS对大肠杆菌生产α-环糊精葡萄糖基转移酶(α-CGT酶)的影响。结果表明:发酵初始添加Tween-80和Triton X-100的最适浓度分别为2%,0.5%,最终胞外酶活分别达2.03U/ml和4.92U/ml,相对于未添加表面活性剂时提高4.6倍和12.67倍,且改变添加时间不能提高酶的产量;发酵36h添加0.02%SDS对α-CGT酶产量促进最大,最终胞外酶活达5.31U/ml,较对照组提高12.75倍。表面活性剂对α-CGT酶生产的促进作用可能是由大肠杆菌细胞内外膜渗透性增加所致,使细胞周质空间中α-CGT酶能更加快速地渗透到胞外。