焦磷酸测序技术检测细胞色素2D6* 10基因多态性方法的建立

目的利用焦磷酸测序技术建立高通量细胞色素2D6*1 0突变检测方法。方法应用带有生物素标记的扩增引物,经聚合酶链式反应扩增及Beads分离,制备该突变位点焦磷酸测序单链模板,并在PyroMarkID焦磷酸测序仪上进行焦磷酸测序,以经典ABI测序法测序结果作为标准对照,观察批量检测96例高血压患者DNA标本细胞色素2D6* 10突变的可靠性。结果建立了基于焦磷酸测序技术的一次性96例细胞色素2D6* 10突变位点的批量检测平台,经重复性检测和标准的ABI测序可靠性检测,焦磷酸测序法对细胞色素2D6* 10突变位点的突变检出率及重复率均达100%。结论本方法可准确、快速、高通量检测细胞色素2D6*10突变,可应用于该单核苷酸多态性位点批量检测需要。

CYP2D6基因分型影响因素研究进展

细胞色素P450家族2亚科D成员6(CYP2D6)是细胞色素P450酶家族中的重要药物代谢酶,是抗抑郁药物、抗精神病药物和阿片类镇痛药物等主要的代谢酶。CYP2D6基因位点的复杂性和诸多等位基因突变体造成了CYP2D6表型的多态性,目前已报道170余种等位基因突变体。CYP2D6酶活性变化很大,从无活性到超快代谢均存在,根据酶活性可将不同表型携带者分为超快代谢者、正常代谢者、中间代谢者和弱代谢者。随着个体化医疗的发展,CYP2D6基因分型试验可以辅助药物遗传学和基因分型技术的研究和临床应用。然而,由于CYP2D6基因存在复杂的突变,包括单核苷酸突变、插入、缺失、基因拷贝数变异和基因重组。CYP2D6基因不仅存在个体化差异,且在不同种族之间等位基因的频率也明显不同。另外,人体内同时存在与CYP2D6同源性很高的非功能性基因CYP2D7,通过基因检测分析CYP2D6表型是一项非常具有挑战性的工作。文章总结了CYP2D6基因的多态性和基因分型的复杂性,并分析了部分不同的基因型突变对CYP2D6基因分型的影响,以帮助临床通过基因分型方法对CYP2D6酶活性进行预测。

细胞色素P4502D6的研究进展

ＣＹＰ２Ｄ６在临床重要药物代谢中具有重要作用。本文综述了 ＣＹＰ２Ｄ６的结构特点，底物，探针药物，影响其活性的因素，基因多态性以及它与疾病的关系。

应用大鼠肝微粒体筛选对细胞色素P4502D6有抑制作用的中药

目的从17种中药(单体、提取物和注射液)中快速筛选出对细胞色素P4502D6(CYP2D6)亚型有抑制作用的中药,建立高通量筛选对CYP2D6有抑制作用中药的技术平台。方法取大鼠空白肝微粒体,分别加入17种中药,HPLC法测定大鼠肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬(DM)的代谢率,通过代谢率降低的现象初步筛选出能抑制肝微粒体中CYP2D6代谢的药物。结果槲皮素、黄芩苷、厚朴提取物、清开灵注射液、盐酸川芎嗪注射液可明显降低DM的代谢率(P<0.01)。结论初步筛选出槲皮素、黄芩苷、厚朴提取物、清开灵注射液、盐酸川芎嗪注射液这5种中药可抑制肝微粒体CYP2D6酶活性。此方法可作为高通量筛选对CYP2D6活性有抑制作用中药的技术平台。

基于细胞色素氧化酶CYP2D6的何首乌肝细胞毒性及相关成分研究

目的探究何首乌及其主要成分对人肝细胞L02中细胞色素氧化酶CYP2D6 mRNA表达的影响以及抑制CYP2D6活性或表达对何首乌肝细胞毒性的影响及相关成分辨识。方法利用实时荧光定量PCR(RT-qPCR)确定何首乌水提物(Polygoni Multiflori Radix,PMR)及其主要成分对L02细胞CYP2D6 mRNA表达的影响;使用CYP2D6抑制剂奎尼丁初步探究PMR对CYP2D6低活性L02细胞系的细胞毒作用;构建CYP2D6沉默的L02细胞系L02-shCYP2D6,进一步研究L02细胞中CYP2D6表达降低对PMR及其主要成分肝细胞毒性的影响;可能的肝细胞毒性成分与人肝微粒体进行体外孵育,通过考察加入不同CYP450酶特异性抑制剂对其代谢消除率的影响,探究影响其代谢的主要CYP450酶。结果在实验浓度下,PMR和芦荟大黄素(AE)对CYP2D6 mRNA表达有显著抑制作用(P<0.01),大黄素(EM)无明显影响,2,3,5,4’-四羟基二苯乙烯-2-O-β-D-葡萄糖苷(TSG)仅在高浓度有一定激活作用,其余浓度无影响;PMR联合奎尼丁作用于L02细胞,发现PMR在高浓度下对L02细胞有一定毒性(P<0.01),各浓度抑制剂与之联用后均明显加重了其肝细胞毒性(P<0.01);PMR及其主要成分作用于CYP2D6敲低的L02细胞系,除TSG在高浓度下提升了肝细胞毒性外(P<0.01),PMR、EM、AE在实验浓度范围内肝细胞毒性均显著增加(P<0.01);人肝微粒体体外孵育实验显示,CYP2D6为EM、AE重要的代谢酶。结论PMR能够抑制肝细胞中CYP2D6的表达,而CYP2D6的低活性或低表达能够加重PMR肝细胞毒性,其中主要的毒性成分为EM和AE。

代谢酶CYP2D6基因多态性与肺癌易感性的病例对照研究

背景与目的外源性化合物代谢酶参与环境致癌物在体内的代谢,代谢酶基因多态性被认为与肺癌的易感性相关.本研究的目的是探讨代谢酶细胞色素2D6酶(CYP2D6)基因多态性在四川汉族正常人群和肺癌患者中的分布,以及CYP2D6基因多态性与肺癌易感性的关系.方法应用PCR-RFLP技术检测152例正常人和150例原发性肺癌患者的外周血CYP2D6ch基因型;应用病例对照研究分析CYP2D6ch基因多态性与肺癌易感性的关系.结果 (1)CYP2D6ch基因的C和T等位基因在正常人群中分布频率分别为39.5%和60.5%,而肺癌患者中分布频率分别为46.3%和53.7%;两组间C和T等位基因频率比较无显著性差异(P=0.089).(2)CYP2D6ch等位基因型C/C、C/T、T/T在正常人群中分布频率分别为18.4%、42.1%和39.5%,而在肺癌患者中分布频率分别为22.7%、47.3%和30.0%,两组间比较无显著性差异(P=0.215).(3)携带CYP2D6ch非T/T等位基因型的个体患肺鳞癌风险是携带T/T等位基因型的2.084倍(95%CI 1.024～4.244,P=0.043).(4)携带CYP2D6ch非T/T等位基因型的轻度吸烟者患肺癌风险是携带CYP2D6ch T/T等位基因型轻度吸烟者的2.92倍(95%CI 1.087～7.828,P=0.033).结论 CYP2D6ch非T/T等位基因型与肺鳞癌风险升高相关,在轻度吸烟人群中,非T/T等位基因型与肺癌风险升高相关.

CYP2D6基因G4268C单核苷酸多态性与肺癌遗传易感性

目的：研究CYP2D6（cytochromes P450 2D6）基因G4268C单核苷酸多态性与肺癌遗传易感性的关系。方法：应用病例一对照研究及聚合酶链反应一限制性片段长度多态性分析（PCR—RFLP）方法检测肺癌患者和按性别、年龄频数匹配的正常对照各118例的CYP2D6基因G4268C多态性，并应用Logistic回归分析各基因型与肺癌发病危险的关系。结果：肺癌组和对照组人群发生G4268→C的频率可高达69．49％和75．00％；非C4268／C（即G4268／G＋G4268／C）基因型与肺癌风险升高相关，经年龄、性别、吸烟情况调整OR=1．80（95％CI=1．06～3．06），尤其在腺癌中OR=2．95（95％CI=1．39～6．23）；对吸烟情况进行分层分析并经年龄、性别调整后发现，不吸烟者及轻度吸烟者中携带非C4268／C基因型的个体患肺癌的风险显著增高，其OR值分别为2．12（95％CI=1．03～4．36）和3．75（95％CI=1．15～12．22）。结论：CYP2D6C4268／C基因型可能是肺腺癌的遗传保护因素，并可降低不吸烟者、轻度吸烟者患肺癌的危险度。

CYP2D6基因G4268C和ERCC1基因C8092A位点的单核苷酸多态性与肺癌遗传易感性

目的:探讨辽宁地区CYP2D6基因G4268C和ERCC1基因C8092A位点的单核苷酸多态性对肺癌发生的影响。方法:采用病例-对照研究方法,选取肺癌患者和健康对照者各200例。应用KI法快速抽提人外周血基因组DNA,PCR-RFLP的方法检测CYP2D6基因G4268C和ERCC1基因C8092A位点的单核苷酸多态性。结果:G4268/G、G4268/C和C4268/C这3种基因型在病例和对照组的分布频率分别为1.50%、58.00%、40.50%和2.50%、44.00%、53.50%,非C4268/C基因型的个体发生肺癌的风险是C4268/C基因型个体的1.73倍(95%CI=1.02-2.95),在腺癌中OR=2.75(95%CI=1.27-5.94);按吸烟情况进行分层分析后发现不吸烟者及轻度吸烟者中携带非C4268/C基因型的个体患肺癌的风险显著增高,OR值为2.09(95%CI=1.09-4.25)和3.41(95%CI=1.24-9.93);非A8092/A基因型的个体发生肺癌的风险是A8092/A基因型个体的0.98倍(95%CI=0.52-2.17)。结论:C4268/C基因型在不吸烟者和轻度吸烟者中可能作为保护因素而降低肺癌的易感性,ERCC1 C8092A多态性与肺癌易感性无相关性。

亚洲人群CYP2D6基因多态性与精神分裂症患者利培酮及其代谢物血药浓度关系的系统评价

目的系统评价亚洲人群CYP2D6基因多态性与精神分裂症患者利培酮(risperidone,RIS)及其活性代谢物9-羟利培酮(9-hydroxyrisperidone,9-OH-RIS)血药浓度的关系。方法检索The Cochrane Library、PubMed、Embase、PsychInfo、中国生物医学文献服务系统、中国知网、维普网和万方数据库,纳入截至2017年11月已发表的相关文献。由2位研究者按纳入与排除标准独立进行文献筛选、资料提取和质量评价后,采用Rev Man 5. 3软件进行Meta分析。结果纳入6篇文献,共计466例患者。Meta分析结果显示,携带CYP2D6*10/*10基因型患者RIS血药浓度明显高于携带CYP2D6*1/*10[加权均数差(weighted mean difference,WMD)=-1. 39,95%可信区间(confidence intervals,CI)(-2. 00～-0. 78),P <0.000 1]和CYP2D6*1/*1[WMD=-2. 39,95%CI(-4. 37～0. 41),P=0. 02]基因型患者;携带CYP2D6*10/*10基因型患者的RIS/9-OH-RIS值明显高于携带CYP2D6*1/*10[WMD=-0. 13,95%CI(-0. 22～-0. 044),P=0. 004]和CYP2D6*1/*1[WMD=-0. 29,95%CI(-0. 46～-0. 12),P=0. 001]基因型患者;携带CYP2D6*10/*10基因型患者体内总活性产物浓度高于CYP2D6*1/*1携带者[WMD=-2. 98,95%CI(-4. 75～-1. 21),P=0. 001]; 9-OHRIS血药浓度在不同CYP2D6基因型携带者中无显著差异。结论现有证据表明,亚洲人群CYP2D6基因多态性对精神分裂症患者利培酮的血药浓度有相关性,但仍需高质量的研究进一步验证。

精神分裂症患者CYP2D6基因多态性与利培酮血药浓度及临床疗效关系探究

目的探索精神分裂症(SCH)患者细胞色素P450家族2D6(CYP2D6)基因多态性与利培酮(RISP)血药浓度及临床疗效之间的关系。方法回顾性分析2019年1月—8月我院收治的196例SCH患者的临床资料,将其分为正常功能组(携带CYP2D6*1或*2)40例、低功能1组(携带一个CYP2D6*10)89例及低功能2组(携带2个CYP2D6*10)67例。3组均口服RISP,治疗4周后分析血RISP和9羟基利培酮(9-OH-RISP)浓度及CYP2D6基因多态性;治疗8周后评估3组临床疗效,计算简明精神病量表(BPRS)减分率和不良反应症状量表(TESS)评分。分析CYP2D6基因多态性与9-OH-RISP/RISP比值、BPRS减分率和TESS评分之间的相关性。结果SCH患者CYP2D6*1等位基因频率为29.59%,CYP2D6*2等位基因频率为13.52%,CYP2D6*10等位基因频率为56.89%。正常功能组和低功能1组RISP血药浓度、BPRS减分率和TESS评分显著低于低功能2组,9-OH-RISP和9-OH-RISP/RISP比值显著高于低功能2组(P<0.05)。携带CYP2D6*10与9-OH-RISP/RISP比值呈明显负相关(r=-0.378,P<0.001),与BPRS减分率和TESS评分呈明显正相关(r=0.242、0.284,P<0.05)。结论CYP2D6基因多态性与RISP在体内的代谢速率及其治疗的临床疗效有关。

CYP2D6基因多态性对他莫昔芬及托瑞米芬代谢和疗效影响的研究进展

他莫昔芬和托瑞米芬均为选择性的雌激素受体调节剂,通过竞争性结合雌激素受体发挥抗癌作用,是绝经前乳腺癌最常用的辅助内分泌治疗药物,能够显著降低乳腺癌患者的复发和死亡风险。多项研究发现CYP2D6*10基因的突变会影响他莫昔芬的代谢导致预后不良。而托瑞米芬的代谢受CYP2D6基因多态性的影响较小,治疗乳腺癌的疗效与他莫昔芬相当,甚至优于他莫昔芬。本文就CYP2D6基因多态性与两种内分泌药物代谢和疗效的相关性研究作系统阐述。

细胞色素P450的工具药选择及种属差异的研究进展

药物对代谢酶的影响以及代谢产生的药物相互作用与药物安全性密切相关。细胞色素P450(CYP)是参与内、外源性化合物I相代谢反应的重要超家族酶系。特异性探针、诱导剂、抑制剂以及实验动物模型广泛应用于CYP介导的代谢途径以及药物相互作用研究。已知CYP底物存在明显重叠性,且表达调控机制种属差异显著,故研究中选择适当的实验动物以及特异性的探针、诱导剂和抑制剂,成为影响数据外推的关键问题。本文简要综述了CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2D6,CYP3A4/5的常用体内外探针、诱导剂、抑制剂以及动物种属表达调控的差异。

细胞色素酶基因多态性与利培酮浓度研究

目的:研究中国汉族人P450-2D6酶基因Ch多态性对血浆利培酮和9-OH利培酮浓度的影响。方法:30例精神分裂症患者应用利培酮达治疗量1周后,用聚合酶链反应-限制性片段长度多态性分析法(PCR-RFLP)分析患者P450-2D6酶基因Ch多态性。测定患者的血浆利培酮、9-OH利培酮浓度。结果:30例精神分裂症患者中P450-2D6酶基因为Ch/Ch型者7例(23.3%),W/Ch型者15例(50.0%),W/W型者8例(26.7%)。W/W型患者平均血浆利培酮浓度(5.28±1.61)ng/ml,血浆9-OH利培酮浓度(17.13±8.15)ng/ml,W/Ch型患者分别为(5.00±2.10)ng/ml及(15.29±6.74)ng/ml,Ch/Ch型患者分别为(5.89±3.34)ng/ml及(15.97±10.16)ng/ml,三组患者两两间血浆利培酮浓度、9-OH利培酮浓度比较差异均无显著性(P均>0.05)。结论:450-2D6酶基因Ch多态性对血浆利培酮浓度、9-OH利培酮浓度无显著影响。

细胞色素P450 2D6基因多态性与美托洛尔和普罗帕酮联用的安全性

美托洛尔和普罗帕酮是心血管疾病常用药物。2药均通过肝脏细胞色素P450(CYP)2D6代谢,但普罗帕酮不仅是CYP2D6底物,也是CYP2D6抑制剂,与美托洛尔联用可能发生相互作用,导致不良反应发生。这种相互作用也取决于CYP2D6基因型。对于CYP2D6基因表型为慢代谢型(PM)和中间代谢型(IM)的患者,美托洛尔和普罗帕酮联用时可因普罗帕酮对CYP2D6的抑制而导致美托洛尔血药浓度升高。因此,应尽量避免美托洛尔与普罗帕酮联用。对于需要2药联合治疗的患者,用药期间应注意监测患者血压、心率、心电图变化,有条件者应检测CYP2D6基因型并根据检测结果调整药物剂量。

CYP19A1基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性及临床病理特征的相关性

目的观察老年乳腺癌患者细胞色素氧化代谢酶系19A1亚族(CYP19A1)基因多态性,并分析其与患者遗传易感性、临床病理特征的关系。方法选取广西医科大学附属肿瘤医院112例老年乳腺癌患者作为观察组,另选取112例老年乳腺良性病变患者作为对照组;比较两组基线资料、临床病理特征、乳腺癌相关肿瘤标志物及CYP19A1基因多态性,分析CYP19A1基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性及临床病理特征的关系。结果观察组体质量指数(BMI)明显高于对照组,大量饮酒占比、CYP19A1 r4646位点基因C/C突变占比明显高于对照组(P<0.05);经Logistic回归分析结果显示,BMI偏高、大量饮酒、CYP19A1 r4646位点基因C/C突变与老年乳腺癌患者的遗传易感性有关(OR>1,P<0.05);不同肿瘤淋巴结转移(TNM)、雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)、人表皮生长因子受体(HER)-2、增殖细胞相关抗原(Ki67)表达的乳腺癌患者CYP19A1基因多态性比较,差异有统计学意义(P<0.05);CYP19A1基因多态性与乳腺癌患者TNM分期、ER阳性、PR阳性、HER-2阳性、Ki67阳性具有相关性(P<0.05)。结论CYP19A1基因多态性与老年乳腺癌患者遗传易感性及肿瘤分期、ER表达、PR表达、HER-2表达、Ki67表达有关。

CYP2D6基因多态性对美托洛尔疗效影响的meta分析

目的评价细胞色素P4502D6(CYP2D6)药物代谢酶基因多态性对美托洛尔药物疗效的影响。方法从各数据库(中国知网、维普、万方、SCIE、PubMed、Embase)检索从建库至2019年7月发表的关于CYP2D6与美托洛尔研究的文献,筛选并纳入文献进入质量评价,提取文献数据,对所有纳入文献结局指标使用RevMan 5.3进行定量meta分析。结果共纳入文献8篇,其中具有酶活性代谢组(non-poor metabolizer,non-PM)631例,弱代谢组(poor metabolizer,PM)206例。PM组的收缩压(systolic blood pressure,SBP)降幅较non-PM组大,两者无明显差异(P=0.20)。non-PM组内比较,中速代谢组(intermediate metabolizer,IM)SBP的降幅大于强代谢组(extensive metabolizer,EM),差异有统计学意义(P=0.03)。PM组舒张压(diastolic blood pressure,DBP)的降幅大于non-PM组,差异有统计学意义(P=0.01),IM组的DBP降幅大于EM组,差异有统计学意义(P=0.02)。non-PM组心率(heart rate,HR)降幅大于PM组,差异有统计学意义(P=0.05),IM组HR降幅大于EM组(P=0.002)。结论meta分析结果显示,PM组的降压效果优于non-PM各组(UM、EM及IM组),主要是在降DBP方面,而控制HR的疗效弱于non-PM各组。

辽宁地区CYP2D6 C188T和ERCC1 C8092A单核苷酸多态性与肺癌易感性的病例对照研究

目的:探讨辽宁地区CYP2D6基因C188T和ERCC1基因C8092A位点的单核苷酸多态性与肺癌易感性的关系。方法:采用病例-对照研究方法,选取肺癌患者和对照者各200例。应用KI法快速抽提人外周血基因组DNA,PCR-RFLP的方法检测CYP2D6基因C188T和ERCC1基因C8092A的单核苷酸多态性。结果:C188/C、C188/T和T188/T这3种基因型在病例组和对照组的分布频率分别为21.00%、49.50%、29.50%和18.50%、39.00%、42.50%,非T188/T基因型的个体发生肺癌的风险是T188/T基因型个体的1.78倍(95%CI=1.10-3.04),尤其在鳞癌中OR=2.57(95%CI=1.13-5.46)。按吸烟情况进行分层分析后发现不吸烟者及轻度吸烟者中携带非T188/T基因型的个体患肺癌的风险显著增高,OR值是3.14(95%CI=1.24-9.93)。非A8092/A基因型的个体发生肺癌的风险是A8092/A基因型个体的0.98(95%CI=0.59-2.04)。结论:T188/T基因型在不吸烟者和轻度吸烟者中可能作为保护因素而降低肺癌的易感性,ERCC1 C8092A多态性与肺癌易感性无相关性。