用低G/C%含量引物通过PCR扩增家蝇细胞色素P-450 cDNA

根据昆虫细胞色素Ｐ－４５０基因的多型性和遗传多态性，以苯巴比妥钠诱导、室内饲养的杀虫剂敏感种群雌性家蝇ＭｕｓｃａｄｏｍｅｓｔｉｃａｖｉｃｉｎａＭａｃｑｕａｒｔ为材料，提取总ＲＮＡ，以Ｏｌｉｇｏ（ｄＴ）－纤维素亲和层析分离出总ｍＲＮＡ；以此为模板反转录合成总ｃＤＮＡ。再以总ｃＤＮＡ为模板，以Ｐ－４５０ＣＹＰ６Ａ１ｃＤＮＡ序列为参考设计一对低Ｇ／Ｃ％含量引物，进行ＰＣＲ扩增，获得１．５ｋｂ左右的预期目的片段。

细胞色素芳香化酶P-450在正常、子宫内膜异位症子宫内膜的表达及意义

目的 :探讨细胞色素芳香化酶P - 45 0在子宫内膜异位症 (内异症 )发病中的作用 ,检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达用于诊断内异症的可行性。方法 :应用免疫组化方法检测正常子宫内膜和内异症的在位及异位内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达。结果 :细胞色素芳香化酶P - 45 0在正常子宫内膜无表达 ,在内异症的在位和异位内膜均有强表达 ,增殖期与分泌期无差别。检测子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达 ,用于诊断内异症的敏感度为 91 5 % ,特异度为 10 0 % ,阳性预测值为 10 0 %。内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0的表达与AFS分期无相关性。结论 :子宫内膜细胞色素芳香化酶P - 45 0分泌增加促进内异症的发生 ;内异症子宫内膜细胞色素芳香化酶P -45

[TPPFe(Ⅲ)]_2O的合成及其对细胞色素P-450的模拟

TPPFe（Ⅲ）Cl通过中性Al2O3色谱柱得到一个新化合物,它在HPLC中的保留时间比TPPFe（Ⅲ）Cl大得多,IR、UV-Vis和元素分析表明,这个新化合物是[TPPFe（Ⅲ）]2O.同TPPFe（Ⅲ）Cl一样,它具有在常温常压下催化碳氢化合物单充氧化的性质。[TPPFe（Ⅲ）]2O倦化下PhIO氧化环己烷的反应,在CH2Cl2和环己烷介质中,氧化产率分别为14.97和62.6％,高于TPPFe（Ⅲ）Cl作催化剂时的产率。在环己烷溶剂中,反应产率与反应时间呈线性关系,且反应有大约3小时诱导期。但在GH2Cl2溶剂中不存在反应产物与时间的线性关系,也不存在诱导期。与TPPFe（Ⅲ）Cl比较,[TPPFe（Ⅲ）]2O对氧化剂更稳定。上述事实表明,[TPPFe（Ⅲ）]2O能够作为细胞色素P-450的模型化合物。

棉酚和烟碱对棉铃虫的生长和细胞色素P-450单加氧酶活性的影响

以人工饲料添加法测定了 0 5%的棉酚和烟碱对棉铃虫的生长和细胞色素P 4 50单加氧酶 (简称P 4 50酶系 )活性的影响。研究结果显示 ,在测定浓度下 ,高龄棉铃虫短期取食含棉酚和烟碱的人工饲料后 ,对幼虫的生长没有显著影响 ,由此表明 ,棉铃虫对其主要寄主植物中的次生物质棉酚和烟碱具有很好的适应能力。与此同时 ,棉铃虫中肠微粒体P 4 50酶系的蛋白组成和酶活性发生了不同的变化 ,有升有降 ,有的没有变化。棉铃虫可能通过调整P 4 50酶系的各种蛋白含量和酶的活力水平 ,来适应对植物次生物质的代谢解毒的需要。另外 ,棉铃虫取食棉酚和烟碱后 ,细胞色素B5含量均显著提高 ,而细胞色素P 4 50含量均显著降低 。

以杯芳烃为基体的仿细胞色素P-450单加氧酶模型的合成

用对叔丁基杯［４］芳烃与卟啉羧酸的酰氯化物反应，并引入金属，合成了杯芳烃－金属卟啉仿细胞色素Ｐ－４５０单加氧酶模型Ａ，Ａ及前体化合物６的结构经ＩＲ，＾１ＨＮＭＲ，ＭＳ和元素分析确定，并确证Ａ中杯环呈“锥体”构象。

中草药对细胞色素P-450酶调控研究进展

对近 5年国内外关于中草药对细胞色素P 4 5 0酶调控的文献进行检索、整理分析和归纳总结 ,综述了有关中草药及其单体化合物对细胞色素P 4 5 0酶调控方面的研究进展并评述了对P 4 5 0酶调控的研究策略。提出加强中草药对P 4 5 0酶作用的研究有重要意义 ,有助于指导中药的安全合理应用和发现新药。

细胞色素P-450酶系的研究进展

细胞色素P-450酶系(简称P-450)因其在内源性和外源性的化学物质尤其对各种杀虫剂和环境有害化学物质的氧化代谢方面起着重要的作用,而受到广泛的重视。该酶系还在昆虫对杀虫剂的抗性机制以及选择毒性中,昆虫对寄主植物的适应性等方面都起着重要作用。

担载金属卟啉模拟细胞色素P-450的催化丙烯环氧化

制备了SiO2化学键合金属卟啉Mn（TPP）Cl，Mn（TDCPP）Cl的担载配合物催化剂，并与单氧给体次氯酸钠（NaClO）构造了细胞色素P－450单加氧酶模拟体系，并考察了该体系的反应性能及其影响因素．金属卟啉经化学修饰的SiO2担载之后，由于表面官能团与金属中心的轴向配位及刚性载体SiO2对金属卟啉在载体表面很好的位置分离作用，使得金属卟啉的抗氧化性及稳定性显著增加，表现出优良的催化丙烯环氧化反应性能．

罗格列酮对大鼠肝细胞色素P-4502E1活性的影响

目的 :探讨罗格列酮对细胞色素P 4 5 02E1活性的影响。方法 :在正常大鼠肝细胞微粒体中加入浓度为 0 ,0 .10 ,0 .2 5 ,0 .5 0 ,1.0 0mmol·L- 1罗格列酮 ,以N 二甲基亚硝胺为底物 ,测定细胞色素P 4 5 0 2E1活性。另外用 0 ,0 .2 ,2 ,2 0mg·kg- 1剂量的罗格列酮分别对用乙醇诱导和未用乙醇诱导的大鼠灌胃 ,然后取大鼠肝细胞微粒体 ,以N 二甲基亚硝胺为底物 ,测定细胞色素P 4 5 0 2E1活性。结果 :在体外试验中 ,加入不同浓度罗格列酮的大鼠肝微粒体中细胞色素P 4 5 0 2E1活性差异无显著意义。在体内试验中 ,给予不同剂量罗格列酮的大鼠的肝细胞色素P 4 5 0 2E1活性差异也无显著意义 ;结论 :罗格列酮对大鼠的肝细胞色素P 4 5 0

地塞米松对大鼠肝脏微粒体细胞色素P-450的诱导效应

目的:观察地塞米松(dexamethasone,DEX)对细胞色素P-450(cytochrome P450,CYP450)的诱导效应,并探讨其诱导机制。方法:雄性Wistar大鼠分别以DEX 0,25,50和100mg·kg^(-1)·d^(-1)诱导处理(ip)4d后,测定大鼠肝脏总CYP450含量,CYP3A1,CYP3A2和CYP2B1/2的mRNA及蛋白的表达水平,肝脏ERD(CYP3A活性),PROD(CYP2B活性)和BROD(总CYP450活性)。结果:CYP450含量、ERD、PROD和BROD活性在DEX多次诱导后都有升高。CYP3A1 mRNA表达水平、蛋白含量和酶活性有明显的升高,剂量效应关系明显;CYP3A2蛋白明显升高,但mRNA表达水平却无明显变化。PROD和CYP2B1/2的mRNA表达水平以及总CYP450含量均在50mg·kg^(-1)·d^(-1)剂量组达到最高值。结论:DEX对雄性大鼠主要诱导CYP3A1和CYP3A2两个CYP450成员表达上调,对CYP2B1/2也有一定的诱导作用,其诱导作用主要表现在酶活性、酶蛋白含量和mRNA表达水平的升高。CYP3A1和CYP3A2的诱导方式可能不同。

大鼠肝脏微粒体中3种细胞色素P-450同工酶活性研究

目的 研究大鼠肝脏微粒体中CYP2D1/ 2、CYP2C11、CYP1A2 3种细胞色素P 4 5 0同工酶的活性。方法 用诱导剂和抑制剂分别在体内和体外调节大鼠肝脏P 4 5 0同工酶活性 ,并用高效液相法检测同工酶底物的特异性代谢产物来计算同工酶活性。结果 3种同工酶底物的特异性代谢产物的分离度达到了 1.5 ;天内、天间精密度均小于 10 .2 2 % ,天内、天间准确度均小于 14 .95 % ;相关系数都达到 0 .999。在体内腹腔注射地塞米松能使CYP1A2、CYP2D1/ 2、CYP2C11活性分别增加 1.3倍 (P <0 .0 5 )、1倍 (P <0 .0 1)和 2 .3倍 (P <0 .0 1)。β 萘黄酮可使CYP1A2活性增加 13.7倍 (P <0 .0 1)。在体外 ,呋拉茶碱可以不同程度地抑制CYP1A2、CYP2C11活性 ;普罗地芬、α 萘黄酮可以抑制CYP1A2活性 ;奎宁可以抑制CYP2D1/ 2活性。结论 甲苯磺丁脲、右美沙芬和非那西汀可以作为人体的探药 ,因而实验建立的方法有望用于检测人血浆或尿液中 3种探药的特定代谢产物 ,分别用于估测人肝脏CYP2C9、CYP2D6和CYP1A2的活性。

NADPH-细胞色素P-450还原酶的制备及在外来化合物代谢中的作用

ＮＡＤＰＨ－细胞色素Ｐ－４５０还原酶是肝微粒体酶系的主要组成成分。本文报道了一种简单经济制备还原酶的方法，并通过ＮＡＤＰＨ的氧化证明还原酶及细胞色素Ｐ－４５０２Ｂ１重组酶系能代谢苯、二氯乙烯和石棉。但代谢过程中的中间产物未能引起质粒ＤＮＡ电泳图谱的变化。

植物细胞色素P-450(Cyt.P450)对除草剂的代谢作用

植物细胞色素Ｐ┐４５０（Ｃｙｔ．Ｐ４５０）对除草剂的代谢作用向文胜苏少泉赵长山（东北农业大学生命中心哈尔滨１５００３０）（农学院农药与杂草教研室）ＭＡＴＡＢＯＬＩＳＭＯＦＨＥＲＢＩＣＩＤＥＳＢＹＰＬＡＮＴＣＹＴＯＣＨＹＯＭＥＰ┐４５０ＸｉａｎｇＷｅｎ...

河南汉族人群细胞色素P-450 1A1与肺癌易感性的关系

目的:探讨CYP1A1基因多态与支气管肺癌癌变关系。方法:采用病例-对照设计和PCR-RFLP方法,检测肺癌组103例和对照组138例CYP1A1基因多态,以logistic回归模型计算比数比(odds ratios,OR)及95%可信区间(confidential intervals,CI)。结果:CYP1A1m1突变型等位基因频率在对照组和肺癌组分别为27.6%和42.7%。logistic回归分析表明,CYP1A1(w1/m1)杂合型(B型)和(m1/m1)纯合突变型(C型)患肺癌的危险度分别升高3.19和2.61倍,差异显著。结论:CYP1A m1突变型等位基因是患肺癌的危险因素。

大鼠心肌组织与肝脏组织中细胞色素P-450的含量测定

对大鼠心肌组织中细胞色素Ｐ４５０含量的测定国内未见报道。本方法利用双光束紫外分光光度计测定了正常大鼠的心肌组织中Ｐ４５０的含量，并与肝组织Ｐ４５０的含量进行比较，以期探讨细胞色素Ｐ４５０与心脏疾病的关系。Ｗｉｓｔａｒ大鼠８只，雄性，体质量２０...

乙醇对肝细胞色素P-450氧化酶2E1的诱导

目的 :研究摄入乙醇对肝脏CYP450 2E1的诱导。方法 :1 8例不同程度酒精性脂肪性肝炎患者 ,其中 1 2例酗酒持续至肝活检术前 1 - 3日内 ,6例则已戒酒 3周至 7个月 ;4例病因不明脂肪性肝炎患者 ,但无酗酒史。采用免疫组化方法对肝组织切片进行CYP450 2E1染色及程度评估。结果 :近日仍酗酒的患者中肝组织切片CYP450 2E1的免疫组化染色显著强于已戒酒、无酗酒者。结论 :持续摄入乙醇能显著诱导CYP450 2E1 ,但戒酒后乙醇的诱导作用可以随之减弱。

昆虫中的细胞色素P-450及其特性

细胞色素P-450在微粒体多功能氧化酶系(MFO)中起着关键性作用。它能与氧分子和底物结合,并参与氧的活化。因此,P-450在杀中剂代谢、昆虫的选择毒性和抗药性、在保幼激素和脱皮激素的代谢以及在昆虫对寄主植物的适应性中都有着极其重要的作用。 自50年代后期以来,人们不仅对P-450的分子性质、光谱性质和多样性进行了详细研究,而且对P-450与P-450-还原酶、磷脂的相互关系及其在膜中的结构也进行了研究。

真菌一氧化氮还原酶细胞色素P-450nor 2 cDNA序列的测定

真菌一氧化氮还原酶细胞色素Ｐ４５０ｎｏｒ２ｃＤＮＡ序列的测定刘德立（华中师范大学生命科学学院武汉４３００７０）ＨｉｒｏｆｕｍｉＳＨＯＵＮ（筑波大学应用生物化学系日本）在真菌的反硝化作用中，一种细胞色素Ｐ４５０起着一氧化氮还原酶的作用，被称为细胞色...

丹参酮对大鼠细胞色素P-450酶系和谷胱甘肽转移酶的作用

目的探讨丹参有效成分丹参酮 (Tan)对大鼠肝、肾组织内的细胞色素P 450酶 (cytochromeP 450,CYP)系和谷胱甘肽转移酶(GT)的影响。方法给予SD雄性大鼠丹参酮 (100mg·kg-1 )灌胃,每日 1次,连续10天后,选用CYP1A1、1A2、2B1、2E1及 3A特异性代谢底物,检测它们在肝和肾微粒体中的活性,同时检测肝、肾微粒体中的GT水平变化。结果实验表明,丹参酮可诱导肝微粒体内的CYP1A1、CYP1A2和CYP2B1活性显著升高(均P<0. 01),同时显著抑制CYP2E1的活性 (P<0. 01),也可诱导肝微粒体中GT的活性升高 (P<0.05)。结论丹参酮对CYP亚型的不同调节作用可能会影响与其合用药物在体内的代谢消除,丹参酮对GT的影响也具有一定的临床意义。