利培酮治疗与细胞色素P4502D6/C188T酶基因多态性的关联分析

目的 研究利培酮临床效应的个体差异与其代谢酶细胞色素P4 5 0 2D6 (cytochromeP4 5 02D6 ,CYP2D6 )酶基因多态性的相关性。方法 对 88例符合CCMD 3精神分裂症诊断标准的患者和 96例健康对照者作病例 -对照分析。精神分裂症患者给予利培酮治疗 8周 ,用阳性和阴性症状量表 (posi tiveandnegativesymptomscale ,PANSS)评分评价利培酮疗效。采用聚合酶链反应扩增及限制性片段长度多态性 (PCR RFLP)技术对CYP2D6exonⅠ的C188T位点突变进行检测 ,分析利培酮临床效应与其主要代谢酶CYP2D6 /C188T酶基因多态性的相关性。结果 中国上海地区人群的CYP2D6 /C188T突变率(弱代谢型 )为 36 .3% ,病例组和正常对照组间基因型频率总体分布比较无显著差异 (χ2 =1.15 ,df=2 ,P >0 .0 5 ) ,两组间的等位基因频率之间比较也无显著性差异 (χ2 =0 .78,df=1,P >0 .0 5 )。进行性别及有否家族史分组后分析 ,亦无差异存在 ,且CYP2D6 /C188T突变与利培酮临床效应之间并无相关性 (χ2 =1.12 ,df=2 ;χ2 =0 .0 3,df=1,P >0 .0 5 )。结论 未发现中国人CYP2D6 /C188T多态性与利培酮临床效应的个体差异有相关性。

细胞色素P4502D6酶基因多态性与抗精神病药临床效应

目前认为，细胞色素P4502D6酶（CYP2D6）基因多态性可能与精神分裂症的易感性无关。但CYP2D6酶参与绝大多数抗精神病药（尤其是利培酮、氟哌啶醇等）的代谢，进而影响药物疗效、副反应及药物之问的相互作用。因而研究CYP2D6基因多态性与其表型活性之间的关系，对于抗精神病药临床合理应用具有指导意义。

一步法分析细胞色素P450 2D6酶活性缺陷等位基因CYP2D6A和CYP2D6B

目的：ＣＹＰ２Ｄ６Ａ和ＣＹＰ２Ｄ６Ｂ是引起细胞色素Ｐ４５０２Ｄ６（ＣＹＰ２Ｄ６）酶活性缺陷的最主要的等位基因，对ＣＹＰ２Ｄ６Ａ和ＣＹＰ２Ｄ６Ｂ的检测可准确（＞９２％）预测ＣＹＰ２Ｄ６慢代谢者。本研究利用等位基因特异扩增法，建立了一步ＰＣＲ法测定ＣＹＰ２Ｄ６Ａ和ＣＹＰ２Ｄ６Ｂ等位基因。方法：等位基因特异扩增法分析ＣＹＰ２Ｄ６Ａ和ＣＹＰ２Ｄ６Ｂ等位基因；右美沙芬作为探针药物测定表型。结果：经１３０例测定，说明本法更为快捷、更少污染。结论：本法的建立为该项测定应用于临床。

ASA法测定细胞色素P4502D6酶缺陷等位基因CYP2D6E

目的 :建立细胞色素P4 50 2D6(CYP2D6)第 3 0 2 3位A→C突变造成CYP2D6酶活性缺陷的等位基因CYP2D6E的测定方法。方法 :利用等位基因特异扩增法 (ASA)为基本原理 ,设计两对引物分别扩增野生型等位基因和突变型等位基因。结果 :经 3 96例测定 ,发现 2例CYP2D6E与CYP2D6B的异突变型纯合子 ,其表现型均为慢代谢者。阳性对照说明本法重复性好 ,阴性对照显示本法无污染问题。结论 :本法比PCR -RFLP法更为快捷、更少污染。

肾功能不全患者细胞色素P4502D6酶的基因多态性分析

目的研究肾功能不全患者细胞色素P4502D6酶的CYP2D6*10等位基因的基因多态性。方法采用5引物单管聚合酶链反应扩增CYP2D6*10等位基因,对103例肾功能不全患者的细胞色素P4502D6酶基因型进行分析。结果 103例肾功能不全患者的CYP2D6*10等位基因频率为49.51%,其中33例(32.04%)为野生型(C/C),32例(31.07%)为突变型(T/T),其余38例(36.89%)为杂合子型(C/T),与健康汉族人群比较差异有显著意义(P<0.05)。C等位基因频率为50.5%,T等位基因频率为49.5%。结论 CYP2D6*10等位基因是影响肾功能不全的一个因素。

细胞色素P450 2D6/C188T酶基因多态性与阿立哌唑治疗效应的关系

目的研究精神分裂症患者细胞色素P450 2D6酶(CYP2D6)exonⅠC/T188基因多态性与阿立哌唑治疗效应的关系。方法采用阳性和阴性症状量表(PANSS),治疗时需处理的副反应量表(TESS)以及锥体外系副反应量表(RSESE)对92例精神分裂症患者,分别在阿立哌唑治疗前及治疗第1、2、4、6、8周末各进行一次药物反应评定,采用聚合酶链反应技术对CYP2D6 exon Ⅰ C/T188基因多态性进行检测。根据其基因型将患者分为三组(C/C组30例、C/T组38例、T/T组24例),采用治疗前后PANSS减分率≥30%为标准,将92例患者分为治疗有效组和治疗无效组,比较组间药物治疗效应的差异。结果从阿立哌唑治疗后第6周末开始,三组之间PANSS评分的差异有显著性(P<0.01);两两比较发现,C/C组PANSS分低于T/T组(P<0.01);CYP2D6 exonⅠC/T188多态性基因型频率和等位基因频率,阿立哌唑治疗有效组与无效组之间的差异有显著性。但未发现基因型与阿立哌唑药物副反应有关。结论中国人群精神分裂症CYP2D6 exonⅠC/T188多态性可能是影响阿立哌唑临床疗效的遗传易感因素。

红花注射液对大鼠细胞色素P450 2D6亚型的抑制作用

目的研究红花注射液对大鼠细胞色素P450 2D6亚型(CYP2D6)的影响。方法利用探针药物右美沙芬(DM),高效液相色谱法测定各实验组(对照组,红花注射液0.9、1.8、3.6 mL/kg组)大鼠体内尿液中与体外肝微粒体温孵系统中DM的代谢率,考察红花注射液对大鼠CYP2 D6活性的影响。结果体内实验和体外实验中,红花注射液1.8和3.6 mL/kg组DM的代谢率均明显低于对照组(P<0.05、0.01);抑制实验中,体外肝微粒体温孵系统中红花注射液组和西咪替丁组DM的代谢率明显低于空白组(P<0.05);含红花生药量为30 mg/mL时红花注射液组DM的代谢率与西咪替丁(0.6 mg/mL)时DM的代谢率相近,抑制能力相当;红花注射液的IC50为10.64 mg/mL。结论红花注射液对大鼠CYP2D6有显著的抑制作用。

中国健康人群与精神分裂症患者细胞色素P450 2C19/P450 2D6遗传多态性的比较

目的探讨中国健康人群与精神分裂症患者细胞色素P450 2C19(CYP2C19)/P450 2D6(CYP2D6)遗传多态性的相关性。方法应用PCR与DNA测序相结合的方法,对88名符合ICO-10诊断标准的精神分裂症患者和283名健康志愿者进行了CYP2C19基因多态性分析。同时用此方法对87名精神分裂症患者与93名健康志愿者进行了CYP2D6的基因多态性分析。根据CYP2C19*2(G681A)将精神分裂症患者和健康志愿者基因型分为3组(G/G,G/A,A/A);同样方法将CYP2C19*3(G636A)和CYP2D6(C100T)基因型各分为3组。结果在CYP2C19的检测中,健康志愿者中共检测到6个基因型,在精神分裂症患者中检测到7个基因型。2组间等位基因型差异没有统计学意义(CYP2C19*2χ2=4.954,P>0.05;CYP2C19*3χ2=2.334,P>0.05)。但发现精神分裂症患者突变型纯合子A/A的基因型频率明显高于健康志愿者。在CYP2D6(C100T)的基因型和等位基因型检测中,精神分裂症患者和健康志愿者组间的基因型和等位基因差异无统计学意义(χ2=0.202,P>0.05;χ2=0.066,P>0.05)。结论中国精神分裂症患者与健康人群在细胞色素氧化酶CYP2C19/CYP2D6遗传多态性上差异无统计学意义,CYP2C19*2的突变型纯合子可能是中国精神分裂症患者的一个易感因素。

应用大鼠肝微粒体筛选对细胞色素P4502D6有抑制作用的中药

目的从17种中药(单体、提取物和注射液)中快速筛选出对细胞色素P4502D6(CYP2D6)亚型有抑制作用的中药,建立高通量筛选对CYP2D6有抑制作用中药的技术平台。方法取大鼠空白肝微粒体,分别加入17种中药,HPLC法测定大鼠肝微粒体中CYP2D6的探针药物右美沙芬(DM)的代谢率,通过代谢率降低的现象初步筛选出能抑制肝微粒体中CYP2D6代谢的药物。结果槲皮素、黄芩苷、厚朴提取物、清开灵注射液、盐酸川芎嗪注射液可明显降低DM的代谢率(P<0.01)。结论初步筛选出槲皮素、黄芩苷、厚朴提取物、清开灵注射液、盐酸川芎嗪注射液这5种中药可抑制肝微粒体CYP2D6酶活性。此方法可作为高通量筛选对CYP2D6活性有抑制作用中药的技术平台。

人肝细胞色素P450含量及其同工酶1A1、2A6活性的测定

从成人肝细胞中提取微粒体，测定其蛋白浓度、细胞色素Ｐ４５０（ＣＹＰ４５０）总量，并建立了通过测定代谢产物异噁唑和香豆素生成量确定ＣＹＰ４５０ 同工酶ＣＹＰ１Ａ１、ＣＹＰ２Ａ６ 活性的测定方法。结果表明：该测定方法简单、稳定、重复性好。人肝微粒体于－ ８０°Ｃ保存６ 个月对其活性无明显影响。

细胞色素P4502D6与药物代谢

细胞色素Ｐ４５０２Ｄ６（ＣＹＰ２Ｄ６）是一种重要的Ｐ４５０系氧化代谢酶，除参与代谢一些内源性物质和某些环境中毒性化合物外，主要是参与多种重要药物的代谢，如作用于心血管和中枢神经系统的药物。ＣＹＰ２Ｄ６参与代谢的药物占总Ｐ４５０代谢药物的３０％，同时对手性药物的代谢还呈现立体选择性。研究还发现ＣＹＰ２Ｄ６对药物的代谢呈现明显的个体和种族差异，引起这种差异的主要原因是ＣＹＰ２Ｄ６具有的基因多态性，此外还有一些非基因因素，如药物的影响等。目前，ＣＹＰ２Ｄ６的生物学特征已被基本确定，这将十分有助于对ＣＹＰ２Ｄ６的深入研究，从而为临床合理用药提供科学依据。

细胞色素P450 2D6＊10基因多态性对剖腹术后曲马多自控静脉镇痛的影响

目的评价细胞色素P450 2D6*10(CYP2D6*10)基因多态性对剖腹术后曲马多自控静脉镇痛的影响。方法择期剖腹术患者100例,ASAⅠ或Ⅱ级,经肘正中静脉采血2 ml,采用PCR方法进行细胞色素P450 CYP2D6*10基因分型,分为野生型纯合子组(w/w组,n=28),杂合子组(m/w组,n=24)和突变型纯合子组(m/m组,n=42)。手术结束前30 min,静脉注射曲马多100mg、格拉司琼1 mg。清醒后VAS≤4分开始PCA,若VAS>4分追加曲马多50 mg,30 min后VAS≤4分,继续单纯行PCA,若VAS>4分则静脉注射芬太尼50μg,至VAS≤4分继续单纯行PCA,曲马多PCA背景输注速率12 mg/h,PCA剂量15 mg,锁定时间15 min,记录术后2、4、24、48和72 h曲马多累积用量及PCA次数,并行VAS评分。结果术后3 d w/w组、m/w组和m/m组曲马多用量分别为(130±26)mg,(147±44)mg,(157±34)mg,三组差异无统计学意义。与m/m组比较,术后2 h w/w组、m/w组患者VAS评分明显降低(P<0.05)。术后4 h w/w组、m/w组患者自控次数明显减少(P<0.05)。结论 CPY2D6*10基因多态性是影响剖腹术后曲马多自控静脉镇痛遗传因素之一。

人细胞色素P4502A6cDNA克隆及其在哺乳类细胞中的表达

应用逆转录 -聚合酶链反应 ( RT- PCR)技术和DNA重组技术从人肝组织中克隆细胞色素 P4502 A6( CYP2 A6) c DNA片段至克隆载体 p Blue-script SK( M1 3- )中 ,经限制性酶切图谱分析确证克隆的片段为 CYP2 A6c DNA,然后将该片段亚克隆入真核细胞表达载体 p REP9,用改良磷酸钙共沉淀法转染中国仓鼠肺 CHL细胞系 ,建立 CHL- 2 A6转基因细胞系 ,并对 CYP 2 A6特征表达酶香豆素 - 7-羟化酶 ( COH)活性进行了测定 ,结果显示 CHL-2 A6S9组分的 COH比活性是 ( 2 .58± 0 .68) nmol· min-1· g-1蛋白 ,而对照细胞 CHL测不到 COH活性 ,表明所转 CYP2 A6c DNA表达的蛋白质具有功能 .CHL - 2 A6的建立为药物代谢研究和毒理学研究提供了强有力的工具 .

基因芯片法测定中国人群细胞色素P450 2D6的基因多态性

目的:根据细胞色素P4502D6基因序列的多态性分布特点,针对在中国人群药物代谢中具有潜在作用的突变位点C188T和G4268C,设计寡核苷酸探针,制备寡核苷酸芯片,探讨基因芯片技术应用于CYP2D6基因分型的可行性,观察中国人群细胞色素P4502D6的基因多态性。方法:实验于2005-02/08进行。以克隆并已测序的细胞色素P4502D6基因重组质粒作为标准样品,扩增产物与芯片进行杂交,制备基因芯片,测定312名中国健康志愿者(已签署知情同意书)细胞色素P4502D6基因分型,并使用直接测序法对结果进行验证。结果:312名全部进入结果分析。①312名中国健康志愿者中CYP2D62和CYP2D610的变异频率分别为CYP2D62W10W8.3%,2H10W13.5%,2M10W10.6%,2M10H17.0%,2M10M34.6%,2H10H9.6%,2H10M6.4%。②对部分样本采用直接测序的方法进行进一步确证,结果完全吻合。结论:①CYP2D62和CYP2D610突变型等位基因在中国人群中出现的频率较高。②基因芯片法简便、快捷,适用于中国人群细胞色素P4502D6基因分型研究。

细胞色素P450 2D6与吸烟所致肺癌易感性的关系研究

细胞色素P450 2D6(CYP2D6)是肝脏中重要的Ⅰ相代谢酶,参与烟草中特异性亚硝胺类如4-甲基亚硝胺-1,3-吡啶基-1-丁酮(NNK)及烟碱的代谢,可能涉及吸烟引起的肺癌变过程。对其生物学特性、结构功能和基因多态与肺癌易感性的关系等方面的研究,有助于深入理解CYP2D6基因多态性对个体肺癌易感性的重要影响,并从基因-环境交互作用的角度,更好地进行危险度评价。

细胞色素P4502D6的研究进展

ＣＹＰ２Ｄ６在临床重要药物代谢中具有重要作用。本文综述了 ＣＹＰ２Ｄ６的结构特点，底物，探针药物，影响其活性的因素，基因多态性以及它与疾病的关系。

细胞色素P_(450)2D_6的多态性研究

细胞色素（CYP）P4502D6是最有多态性的酶系，主要参与心血管药物、抗精神病药物等的代谢。基因突变可以引起酶活性异常及水平的差异，最终造成人类对药物反应的个体差异。利用多聚酶链反应和限制性片段长度多态性分析等技术可以检测细胞色素2D6的基因型，而探针则可以检测其表型，将人群分为超强代谢者、强代谢者和弱代谢者。对细胞色素2D6的深入研究将有助于临床上治疗方案的个体化，减少或避免药物不良反应的发生。

细胞色素P450酶2A6基因多态性与123例汉族吸烟人群牙周炎及炎性细胞因子表达水平的关系

目的:检测细胞色素P450酶2A6(CYP2A6)基因多态性与汉族吸烟人群牙周炎及炎性细胞因子表达水平的关系。方法:收集2018年10月—2019年10月常州市口腔医院收治的123例吸烟牙周炎患者为实验组,同期125例非吸烟牙周炎患者为对照组。收集患者一般资料,包括年龄、性别、体质量指数(BMI)、咀嚼、刷牙习惯和磨牙情况;检测菌斑指数(PLI)、牙龈出血指数(BI)、牙周探诊深度(PD)和附着丧失(AL)。采用PCR扩增CYP2A6;酶联免疫吸附试验(ELISA)检测龈沟液中炎性细胞因子白介素(IL)17、IL-1、IL-6、IL-23和肿瘤坏死因子α(TNF-α)水平。采用SPSS25.0软件包对数据进行统计学分析。结果:2组性别,PLI,龈沟液中IL-17、IL-1、IL-6、IL-23、TNF-α水平存在显著差异(P<0.05)。对所有样品进行PCR扩增,未扩增出的23例判定为CYP2A6缺失型(CYP2A6del),其中,实验组5例、对照组18例;扩增出的225例判定为CYP2A6野生型(CYP2A6wt),其中,实验组118例、对照组107例。2组CYP2A6基因型存在显著差异(P<0.05)。实验组不同CYP2A6基因型IL-1水平、PLI存在显著差异(P<0.05);对照组不同CYP2A6基因型IL-17水平、PLI存在显著差异(P<0.05)。结论:CYP2A6基因型在汉族人群牙周炎患者是否吸烟中存在差异,但与炎性细胞因子水平的关系尚不明确。

细胞色素P450 2D6遗传多态性的研究进展

细胞色素P450(CYP450)是外源性物质在体内生物转化第一相时最主要的代谢酶,迄今为止,已发现人体肝脏有20多个CYP450亚族,但参与肝脏代谢药物的主要是P450家族的7种同工酶,CYP2D6便是其中之一.研究发现,CYP2D6参与异喹胍、抗心律失常药物、抗精神病药物、抗抑郁药物等50多种临床常用药物的代谢,是最具有遗传多态性的酶系.目前,已知CYP2D6有43个等位基因,共有67个点突变,23个碱基发生9种缺失与插入[1],而CYP2D6基因一旦发生变异,经CYP2D6所催化的药物代谢即发生变化.因此,P450基因多态性是构成药物代谢个体差异和种族差异的基础,测定CYP2D6基因型,将有助于阐明某些药物代谢个体差异的分子机制,发现临床遗传性药物代谢异常,有助于促进合理用药.本文对CYP2D6多态性的分子机制作了详细综述,并论述了其对药物代谢及疾病易感性的影响.

一种新的人细胞色素P450 2A6 cDNA克隆

目的 :克隆人细胞色素P45 0 2A6cDNA。方法 :用逆转录 -PCR和DNA重组技术 ,从人肝组织中扩增人细胞色素P45 0 2A6基因的cDNA ,并将其连接到pBluescript载体上 ,对CYP2A6cDNA进行全序列测定。结果 :所克隆的cDNA与Yamano等发表的CYP2A6cDNA序列相比 ,在编码区有两个变异 ,即codon 8CTG→TTG ,编码的氨基酸不变 ,为亮氨酸。codon479GGC(甘氨酸 )→GTC(缬氨酸 ) ,其余均相同。而在其 3′端非编码区变异很多。与Fernandez -Salguero等报道的CYP2A7序列相比 ,其 5′端虽与所克隆的CYP2A6有较多差异 ,但其codon479也是GTC(缬氨酸 ) ,在 3′端非编码区仅略有差异。而所克隆的CYP2A6cDNA与Yamano等报道的CYP2A7序列相比 ,3′端非编码区至所设PCR引物止 ,所克隆的基因序列完全相同 ,而在编码区却差异较多。结论 :本实验室克隆的CYP2A6cDNA是一种新的CYP2A6cDNA序列 。