细胞色素P450表氧化酶2J2基因G312R多态性与脑卒中的关系

目的探讨我国汉族人群细胞色素P450表氧化酶2J2(CYP2J2)基因G312R多态性与脑卒中的关系。方法选择脑卒中病例180例和性别、年龄相匹配的健康人群190例,采用PCR-RFLP方法进行CYP2J2基因G312R多态性分析。结果370例均为野生型,未发现杂合子和突变后纯合子。结论CYP2J2基因G312R突变不是我国部分人群缺血性脑卒中、脑出血发病的遗传危险因素。

细胞色素P450表氧化酶2J2基因过表达通过抗炎减轻大鼠肺缺血再灌注损伤

目的探讨细胞色素P450表氧化酶2J2(CYP2J2)基因过表达对大鼠肺缺血再灌注损伤的作用及其机制。方法通过pcDNA3.1质粒将CYP2J2基因转染至SD大鼠,增加大鼠肺组织中CYP2J2蛋白及循环中相应代谢产物的表达。实验动物随机分为5组:空白对照组(Blank)、单纯开胸组(Sham)、肺缺血再灌注组(IR)、肺缺血再灌注+pcDNA3.1-GFP基因转染组(IR+GFP)、肺缺血再灌注+pcDNA3.1-CYP2J2基因转染组(IR+CYP2J2)。并通过阻断左侧肺门1 h,然后恢复通气和血流灌注2 h来构建大鼠急性肺缺血再灌注损伤模型。实验结束后,处死大鼠,评估肺损伤严重程度,并探讨机制。结果与对照组相比,缺血再灌注处理可导致大鼠急性肺损伤,包括增加肺重/体重的比值(LW/BW)、肺湿重/干重比值(W/D)、支气管肺泡灌洗液蛋白浓度(BALF)、以及大鼠血浆IL-1β、IL-8、TNF-α、sP-selectin、sE-selectin等炎症介质水平,降低抗炎细胞因子IL-10水平,而CYP2J2基因转染可减轻大鼠肺缺血再灌注损伤[LW/BW:(4.720±0.756)×10^-3比(4.761±0.905)×10-3比(7.331±0.484)×10^-3比(7.434±0.702)×10^-3比(6.088±0.405)×10^-3,P<0.01;W/D:3.762±0.537比4.084±0.517比7.726±0.895比7.941±1.015比5.633±0.543,P<0.01;BALF:(664.827±219.547)mg/L比(637.381±83.860)mg/L比(2 138.503±81.156)mg/L比(2 130.880±473.470)mg/L比(1 208.030±256.255)mg/L,P<0.01;IL-1β:(28.100±2.930)ng/L比(30.076±5.550)ng/L比(68.532±5.587)ng/L比(66.935±6.469)ng/L比(51.450±6.300)ng/L,P<0.01;IL-8:(38.949±6.441)ng/L比(45.212±5.814)ng/L比(64.661±11.187)ng/L比(64.136±8.634)ng/L比(52.702±6.392)ng/L,P<0.01;TNF-α:(45.359±6.531)ng/L比(98.797±6.610)ng/L比(188.368±16.373)ng/L比(189.677±19.264)ng/L比(121.861±10.994)ng/L,P<0.01;sP-selectin:(4.855±3.032)μg/L比(16.670±8.177)μg/L比(59.428±11.792)μg/L比(53.845±6.925)μg/L比(40.017±8.545)μg/L,P<0.01;sE-selectin:(499.907±151.751)ng/L比(985.640±144.445)ng/L比(1 826.863±370.931)ng/L比(1 684.189±330.473)ng/L比(1 313.309±197.700)ng/L,P<0.01;IL-10:(128.995±3.114)ng/L比(126.487±9.532)ng/L比(47.992±9.730)ng/L比(55.497±4.755)ng/L比(91.854±4.166)ng/L,P<0.01]。而且,缺血再灌注可导致大鼠肺组织中核转录因子-κB(NF-κB)p65活化及核转录因子-κB抑制蛋白α(IκBα)降解,而CYP2J2基因转染逆转了该效应(NF-κB p65:1.000±0.000比1.090±0.078比1.762±0.082比1.681±0.057比1.296±0.142,P<0.01;IκBα:1.000±0.001比0.904±0.060比0.565±0.061比0.601±0.070比0.743±0.044,P<0.01)。结论CYP2J2基因过表达可减轻大鼠肺缺血再灌注损伤,其机制可能是通过激活过氧化物酶体增殖物激活受体γ(PPARγ)通路来实现的。

缺血后处理对在体大鼠缺血-再灌注心肌细胞色素P450表氧化酶2J3/环氧二十碳三烯酸系统的影响

目的观察缺血后处理拮抗心肌缺血-再灌注损伤时内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环氧二十碳三烯酸(CYP2J3/EET)系统的变化。方法复制在体大鼠心肌缺血-再灌注损伤及缺血后处理模型。雄性Wistar大鼠(250～300)g随机分为三组:假手术组(Sham)、缺血-再灌注组(I-R)、缺血后处理组(IPo)。动脉插管测定心功能指标,采用TTC染色法测定心肌梗死范围,采用RT-PCR法检测心脏细胞色素P450表氧化酶亚型2J3(CYP2J3)mRNA表达,采用Western blot方法测定心肌组织CYP2J3蛋白水平的变化,高效液相色谱法测定11,12-EET含量。结果与I-R组相比IPo组左室收缩末压(LVESP)、左室内压最大上升/下降速率(±LVdp/dtmax)均显著升高;心肌梗死面积减少20.76%(P<0.01);与Sham组及I-R组相比IPo组CYP2J3 mRNA、CYP2J3蛋白及11,12-EET含量明显升高(P<0.05)。结论IPo可减轻在体心肌I-R损伤同时上调心脏CYP2J3/EET系统;提示CYP2J3/EET系统可能与IPo拮抗心脏I-R损伤作用相关。

阿托伐他汀对自发性高血压大鼠血压和细胞色素P450表氧化酶2C11基因表达的影响

目的 研究阿托伐他汀降低自发性高血压大鼠（SHR）血压的作用是否与其调节细胞色素P450表氧化酶2C11（CYP2C11）基因表达的作用有关。方法 18只SHR随机分为SHR模型组、阿托伐他汀50和10mg·kg^-1组；6只Wistar-Kyoto大鼠（WKY）作为正常对照组。阿托伐他汀ig给药，每日1次，共10周。分别于给药前和给药后每2周测量大鼠尾动脉收缩压（SBP）；RT-PCR和Westem印迹法分别检测心、肝、肾及主动脉组织中CYP2C11 mRNA和蛋白质表达；ELISA方法检测尿液中14，15-二氢二十碳三烯酸（DHET）含量；并测定血脂含量。结果 阿托伐他汀50mg·kg^-1组在给药后第6～10周和10mg-kg^-1组在给药后第10周SBP明显低于SHR模型组。在CYP2C11 mRNA和蛋白质表达中，SHR模型组心、肾和主动脉均明显高于WKY组；给药10周后，阿托伐他汀50mg·kg^-1组的4种组织和10mg·kg^-1组的心、肾和主动脉的表达明显高于SHR模型组。治疗前SHR各组尿液中DHET的含量均显著高于WKY组，给药后阿托伐他汀50mg·kg^-1组的含量明显高于SHR模型组；同时，阿托伐他汀50mg·kg^-1组血脂水平明显低于SHR模型组。结论 阿托伐他汀可上调CYP2C11基因的表达，并增加其代谢产物表氧化二十碳三烯酸。这可能是其降低血压的作用机制之一。

CYP2J2通过激活Notch1途径改善慢性间歇性低氧后心血管损伤的实验研究

目的:探讨细胞色素P450表氧化酶2J2(CYP2J2)对慢性间歇性低氧(CIH)模型大鼠心血管损伤的影响及机制。方法:将50只SD大鼠随机分为对照组、CYP2J2组、CIH组、CIH+CYP2J2组、CIH+CYP2J2+DAPT组,每组10只。CIH组、CIH+CYP2J2组及CIH+CYP2J2+DAPT组大鼠均构建CIH模型;造模成功后,CYP2J2组、CIH+CYP2J2组、CIH+CYP2J2+DAPT组大鼠一次性尾静脉注射携带CYP2J2基因的重组腺病毒;CIH+CYP2J2+DAPT组再通过腹腔注射DAPT。2周后,采用高分辨率小动物超声影像系统测定各组大鼠左室缩短分数(FS)、射血分数(EF)、左室收缩末期容积(LVESV)和左室舒张末期容积(LVEDV);自动生化分析仪检测血清肌酸激酶同工酶(CK-MB)与心肌肌钙蛋白I(cTnI)含量;硝酸还原酶法测定血清一氧化氮(NO)含量;酶联免疫吸附法(ELISA)测定血浆内皮素-1(ET-1)含量;苏木精-伊红(HE)染色观察主动脉及心肌组织形态学变化;末端DNA转移酶dUTP缺口末端标记法(TUNEL)染色观察心肌细胞凋亡情况;生化指标检测试剂盒测定心肌组织超氧化物歧化酶(SOD)活性与丙二醛(MDA)含量;蛋白免疫印迹法(Western Blot)测定心肌组织Notch受体1(Notch1)信号途径相关蛋白表达水平。结果:与CIH组比较,CIH+CYP2J2组大鼠FS和NO水平升高,LVESV、LVEDV及CK-MB、cTnI、ET-1水平均降低,主动脉结构基本清晰,细胞肿大、脱落及血管壁增厚等现象均有所改善,心肌纤维断裂、心肌细胞肿大等现象减轻,心肌组织TUNEL阳性细胞比例减少,SOD活性升高,MDA含量下降,Notch1和Hes1蛋白相对表达量上调,差异均有统计学意义(P<0.05)。与CIH+CYP2J2组比较,CIH+CYP2J2+DAPT组大鼠FS和NO水平降低,LVESV、LVEDV及CK-MB、cTnI、ET-1水平均升高,主动脉组织及心肌组织病理损伤现象显著,心肌组织TUNEL阳性细胞比例增加,SOD活性下降,MDA含量升高,Notch1和Hes1蛋白相对表达量下调,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:CYP2J2可改善CIH大鼠心血管损伤,减少心肌细胞凋亡,并抑制氧化应激水平,该机制可能与激活Notch1途径有关。

细胞色素氧化酶P4502C9基因多态性与冠心病及血脂水平的关系

目的探讨细胞色素氧化酶P450 2C9(CYP2C9)基因多态性与冠心病和血脂水平的相关性。方法应用聚合酶链反应和基因测序方法,检测218例经冠状动脉造影确诊冠心病或有明确心肌梗死的患者及200例经冠状动脉造影排除冠心病的对照者的CYP2C9基因型,并对突变基因型者和野生基因型者的血脂按常规方法测定并进行比较分析。结果冠心病组突变型CYP2C9*3基因发生率显著高于非冠心病对照组(P<0.05),突变型CYP2C9*3基因型者和野生型CYP2C9*1基因型者血脂水平差异无统计学意义。结论CYP2C9基因多态性与冠心病的发生可能相关,但未发现与血脂水平有相关性。

细胞色素氧化酶P450 2C19的研究进展

细胞色素氧化酶P450 2C1 9(CYP2C1 9)是细胞色素氧化酶家族中的一种很重要的酶 ,它在药物代谢中具有重要作用。本文综述CYP2C1 9的结构特点、基因、底物、探针药物、影响其活性的主要因素和多态性及其分子生物学机制。

细胞色素P450 2J2在细胞模型中具有抗动脉粥样硬化作用

目的通过在离体培养的人脐静脉内皮细胞(HUVEC)以及人外周单核细胞来源的泡沫细胞模型上过表达细胞色素P450 2J2(CYP2J2),探讨CYP2J2对动脉粥样硬化的影响。方法构建p LVX-IRES-Zs Green1-CYP2J2慢病毒载体,感染HUVEC及人外周单核细胞来源的泡沫细胞,逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)和Western blot分别检测CYP2J2在细胞内的表达情况。离体培养HUVEC分为空白对照组、空载体组(p LV组)和CYP2J2基因过表达组(p LV-CYP2J2组),通过MTS法分别于转染后的12、24、48、72 h测定细胞的增殖情况,通过Transwell实验检测48 h后的细胞迁移能力。另外,采用密度梯度离心法从冠心病患者外周血中分离出单核细胞,以50 nmol/L佛波酯刺激48 h使之转化为巨噬细胞,然后加入终浓度为80 mg/L的氧化型低密度脂蛋白使之转化为泡沫细胞;细胞亦分为空白对照组、p LV组和p LV-CYP2J2组,培养48 h后收集细胞,然后通过油红O染色观察细胞内脂滴变化,通过总胆固醇测定试剂盒检测细胞内总胆固醇的含量。结果 RT-PCR、Western blot结果显示,p LV-CYP2J2病毒感染后,HUVEC以及泡沫细胞中CYP2J2的mRNA和蛋白表达均显著升高。与空白对照组、p LV组相比,p LVCYP2J2处理显著增强了HUVEC在24、48、72 h的细胞增殖能力以及在48 h的细胞迁移能力,而对12 h的细胞增殖则无统计学差异。在人外周单核细胞来源的泡沫细胞模型中,p LV-CYP2J2处理显著降低了泡沫细胞的数量、泡沫细胞内油红脂滴的数量以及总胆固醇的含量。结论 CYP2J2基因过表达可促进HUVEC的细胞增殖和迁移,降低人外周单核细胞来源的泡沫细胞形成,提示CYP2J2具有抗动脉粥样硬化的作用。

细胞色素氧化酶CYP2C9基因多态性及其与心血管药物代谢及疾病关系研究进展

细胞色素氧化酶P4502C9是人类肝脏中一种重要药物代谢酶,代谢约10%临床上常用药物,包括一些心血管系统疾病的用药。细胞色素氧化酶P4502C9基因具有高度多态性,在基因编码区和非编码区存在许多单碱基突变,这种基因多态性对心血管系统疾病的一些重要用药的代谢差异产生重要的影响,并可能和某些疾病的发生相关。

细胞色素P450 2J2基因启动子区单核苷酸多态性与高血压及脑卒中的相关性

目的研究中国汉族人细胞色素P450 2J2(CYP2J2)基因启动子区CYP2J2*7(G-50T)多态性分布频率及其与高血压和脑卒中的相关性。方法采用聚合酶链反应-限制性内切酶片段长度多态(PCR-RFLP)方法,对260例脑卒中患者、364例原发性高血压(EH)患者及年龄、性别与之相近的243例健康对照者进行CYP2J2*7多态性分析。结果脑卒中组、EH组及正常对照组CYP2J2*1(野生型)等位基因频率分别为0.963,0.962和0.957;CYP2J2*7等位基因频率分别为0.037,0.038和0.043。CYP2J2*7等位基因频率与高血压和脑卒中无明显相关性(P>0.05)。三组之间3种等位基因型分布频率无明显差异(均P>0.05),其中CYP2J2*1三组分别为92.69%、92.86%和91.36%;CYP2J2*7/*1分别为6.92%、6.87%和8.64%;CYP2J2*7分别为0.38%、0.27%和0。结论CYP2J2*7等位基因频率与高血压和脑卒中无明显相关性。

芳香化酶P450与环氧化酶-2在子宫内膜异位症和子宫腺肌病中的表达及意义

目的研究细胞色素芳香化酶P450(P450arom)和环氧化酶-2(COX-2)在子宫内膜异位症(EMs)和子宫腺肌病(AM)在位和异位内膜中的表达及相关性。方法应用免疫组化Envision法和半定量逆转录聚合酶链反应(RT-PCR)技术检测正常子宫内膜、EMs及AM的在位和异位内膜中P450arom及COX-2的蛋白与mRNA的表达,并进行相关性分析。结果P450arom和COX-2在正常子宫内膜中无表达或弱表达,二者在EMs和AM在位和异位内膜中的表达均高于正常子宫内膜,差异均有显著性意义(P<0.05)。P450arom与COX-2在EMs和AM异位内膜中的表达均高于在位内膜,差异均有显著性意义(P<0.05)。P450arom在EMs和AM增殖期和分泌期表达无差异(P>0.05)。COX-2在正常子宫内膜、EMs分泌期表达高于增殖期,差异均有显著性意义(P<0.05),在AM表达不随月经周期变化。P450arom mRNA与COX-2mRNA在EMs中的表达水平呈正相关(r=0.964,P<0.01);在AM中的表达水平亦呈正相关(r=0.813,P<0.01)。结论P450arom和COX-2在EMs和AM中呈过表达,与EMs和AM的发病相关,二者协同作用促进EMs和AM的发生发展。

人类细胞色素酶P4502J2的研究进展

多年来 ,对细胞色素酶P4 5 0的研究主要集中在其代谢外源性药物和毒物的方面。然而它在内源性物质 ,如类固醇、胆固醇、激素、脂肪酸和维生素等的代谢转化中也起了很重要的作用。CYP2J就是这样一种主要代谢内源性物质花生四烯酸的细胞色素酶P4 5 0超家族。人体内的CYP2J2在不久前被发现 ,它与疾病的相关性正引起研究者广泛的兴趣。本文就人类CYP2J2的组织分布、生理作用、编码基因及其基因突变等方面的研究进展作一简要综述。

茵陈蒿汤对非酒精性脂肪性肝病大鼠细胞色素氧化酶P450-2E1影响研究

目的探讨细胞色素氧化酶 P450-2E1(CYP2E1)在非酒精性脂肪性肝病大鼠中的作用机制,以及茵陈蒿汤对非酒精性脂肪肝病的治疗效果。方法把50只SD大鼠用随机法分成空白对照组15只和实验组35只,空白对照组大鼠饲喂普通饲料,实验组大鼠饲喂改良以后的高脂饲料,并且进行非酒精性脂肪肝病大鼠造模,饲喂24周。待造模成功后,将剩余的实验组大鼠随机分为3组,非酒精性脂肪肝组、辛伐他汀对照组(SVT)和茵陈蒿汤组,每组10只,对大鼠进行灌胃,给予相应的药物治疗,6周后处死大鼠,检测大鼠的低密度脂蛋白胆固醇(LDL-c)含量、肝质量、三酰甘油(TG)、体质量、肝指数、总胆固醇(TC),使用PCR检测肝组织中CYP2E1的表达。结果与空白对照组比较,非酒精性脂肪肝组大鼠的TG、LDL-c、体质量、肝指数、肝质量、TC、CYP2E1的表达均升高(P<0.05);与非酒精性脂肪肝组比较,SVT组、茵陈蒿汤组大鼠各项指标及CYP2E1表达均降低(P<0.05);与SVT组比较,茵陈蒿汤组各项指标及CYP2E1表达均降低(P<0.05)。结论茵陈蒿汤可通过调节大鼠CYP2E1的表达水平,减轻脂质异常代谢,降低组织炎症反应,改善肝功能,保护肝组织。

原发性肝细胞癌组织中CYP2J2和EETs的表达及临床意义

目的探讨原发性肝细胞癌(hepatocellular carcinoma,HCC)中细胞色素P450表氧化酶2J2(cytochrome P450 arachidonic acid epoxygenase 2J2,CYP2J2)和环氧二十碳三烯酸(epoxyeicosatrienoic acids,EETs)的表达及临床意义。方法采用免疫组化SP法检测86例HCC组织中CYP2J2和EETs的表达,分析CYP2J2和EETs表达与HCC临床病理特征及患者预后的相关性。结果CYP2J2高表达率为41.86%(36/86),低表达率为58.14%(50/86);EETs高表达率为52.33%(45/86),低表达率为47.67%(41/86)。CYP2J2和EETs高表达患者更多见于Ⅲ+Ⅳ期、中+低分化、合并静脉癌栓和淋巴结转移的胃癌。Kaplan-Meier生存分析显示,CYP2J2低表达组患者的2年生存率(52.00%,26/50)高于CYP2J2高表达组(30.56%,11/36),差异有统计学意义(χ^2=9.282,P=0.002);EETs低表达组患者的2年生存率(58.54%,24/41)高于EETs高表达组(26.67%,12/45),差异有统计学意义(χ^2=14.969,P=0.009)。多因素Cox回归分析显示,CYP2J2、EETs是影响HCC患者生存时间的危险因素(P<0.05)。经Spearman等级相关检验发现,CYP2J2和EETs表达呈正相关(r=0.810,P<0.001)。结论CYP2J2和EETs表达与HCC肿瘤分期、分化程度、是否合并静脉癌栓和淋巴结转移具有明显相关性;且CYP2J2、EETs为影响HCC患者预后的危险因素。CYP2J2和EETs能为HCC患者的诊疗及预后预测提供参考依据。

花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶在自发性高血压大鼠血压的调节中的作用

背景与目的 花生四烯酸细胞色素P450(CYP)表氧化酶代谢花生四烯酸产生表氧化廿烷酸(EETs),又称为内皮源性超极化因子(EDHFs),在局部微循环的调节中起着重要作用。然而EETs在血压的调节中是否起作用还不清楚。本研究通过对成年自发性高血压大鼠导入花生四烯酸细胞色素表氧化酶基因来观察其血压变化,从而进一步明确EETs在血压调节中的作用。方法:将含人类细胞色素P450表氧化酶CYP2J2 cDNA的真核细胞表达质粒pcDNA.2J2经静脉注射(3mg/kg)入雄性成年自发性高血压大鼠,并以pcDNA3.1对照。然后用尾部血压计测量血压。并在注射后3周和4周时处死动物,检测CYP2J2在不同组织中的表达情况。结果:注射质粒后对照组血压一直无显著性变化,而pcDNA.2J2治疗组大鼠血压显著降低(P<0.05),这一降压效应持续两周以上。Western blotting显示在实验组动物肺、肝和肾的总蛋白中通过特异性抗-CYPP2J2抗体可检测出显著量的人类CYP2J2蛋白的表达。结论:本实验显示对成年自发性高血压大鼠导入人类CYPP2J2基因,使CYP2J2可以在动物组织中高表达,从而引起相对持久的降压作用,这些结果提示花生四烯酸细胞色素P450表氧化酶通过产生EDHFs参与了动物血压的调节作用。

花生四烯酸细胞色素p450表氧化酶基因对野百合碱诱导大鼠肺动脉高压的治疗作用

目的研究过表达花生四烯酸细胞色素p450表氧化酶基因CYP2J2对野百合碱(MCT)诱导的大鼠原发性肺动脉高压的治疗作用,并对其机制进行初步探讨。方法模型组18只雄性大鼠一次性注射MCT(60 mg/kg·w),对照组18只。三周后分六组:MCT+生理盐水(n=6),MCT +pCB6(n=6),MCT+pCB6-2J2(n=6),生理盐水(n=6),pCB6(n=6),pCB6-2J2(n=6)。两周后,测右室收缩压RVSP和右室肥厚指数RV/(LV+s),western blot检测CYP2J2、Smad4蛋白的表达。结果模型组注射生理盐水、pCB6组RVSP分别为(41.48±0.45)和(38.13±3.68)mm Hg,显著高于正常对照组动物(20.89±3.09)mm Hg,(P<0.05)和模型组注射pCB6-2J2组(29.48±5.67)mm Hg,(P<0.05)。模型组注射生理盐水、pCB6组RV/(LV+S)分别为(0.425±0.08)和(0.358±0.07)显著高于正常对照组动物(0.24±0.03)(P<0.01)和模型组注射pCB6-2J2组(0.28±0.02) (P<0.05)。Western blots显示模型组注射生理盐水、pCB6组Smad4蛋白表达水平均明显低于注射pCB6-2J2组。结论过表达CYP2J2基因显著缓解野百合碱诱导的大鼠肺动脉高压,降低右室收缩压和减轻右心室肥厚程度,上调了TGFβ信号通道中的Smad4蛋白。

裸质粒与脂质体介导转染方法对大鼠平滑肌细胞CYP2J3基因表达的影响

目的比较脂质体介导法和裸质粒直接转染法导入CYP2J3基因表达的效率。方法将CYP2J3真核表达质粒导入原代培养大鼠平滑肌细胞,用半定量RT-PCR方法检测CYP2J3 mRNA表达,Western blotting方法测定CYP2J3蛋白表达,高效液相色谱法测定培养液11,12-EET含量。实验分为裸质粒转染组(2J3)、脂质体介导转染组(L2J3)和对照组,转染后24h和48h收集细胞。结果转染后24h,2个转染组CYP2J3 mRNA表达均较对照组明显增高,差异有统计学意义(P<0.01);L2J3组蛋白含量较对照组低,差异有统计学意义(P<0.01),2J3组蛋白含量较L2J3组高,差异有统计学意义(P<0.05)。培养液11,12-EET含量在3组间差异无统计学意义。转染后48h2个转染组CYP2J3 mRNA表达较24h时弱,但仍较对照组高,脂质体转染组较裸质粒转染组CYP2J3 mRNA表达增强;2J3组及L2J3组蛋白含量均较对照组低,差异有统计学意义(P<0.01);2个转染组培养液中11,12-EET浓度较对照组高,脂质体转染组表达高于裸质粒转染组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论裸质粒直接转染能成功导入CYP2J3基因并表达产物。

人参皂苷Re对H9c2心肌细胞CYP450酶的影响

目的观察人参皂苷Re对H9c2心肌细胞色素P450酶的影响,旨在发现人参皂苷Re对心肌细胞作用的分子机制。方法实验分对照组、人参皂苷Re各剂量组(1、5、10、50、100μmol·L^(-1))处理组,人参皂苷Re作用6、24、36、48及60 h后提取RNA或蛋白进行测定。利用实时定量PCR法检测H9c2心肌细胞CYP2C11、CYP2J3、CYP4A1、CYP4A3、CYP4F4及ANP mRNA的表达;采用Western blot法检测心肌细胞CYP4A1和CYP2J3蛋白的表达。结果人参皂苷Re明显上调心肌细胞CYP2C11、CYP2J3 mRNA的表达至正常对照的1.6、1.8倍,明显下调CYP4A1、CYP4A3及CYP4F4 mRNA的表达至正常对照的0.4、0.15、0.3倍。人参皂苷Re明显上调ANP基因表达水平至正常对照的3.2倍。随着药物浓度的增加,人参皂苷Re对CYP4A1蛋白表达产生明显的下调作用,而对CYP2J3蛋白产生明显的上调作用。结论人参皂苷Re可影响心肌细胞的CYP450酶和ANP基因的表达。

缺氧后处置心肌细胞CYP2J3/EETs变化及PPOH对其的影响

目的探讨缺氧后处置心肌细胞内源性细胞色素P450表氧化酶2J3/环二十碳三烯酸系统(CYP2J3/EETs)变化及细胞色素氧化酶抑制剂PPOH对其的影响。方法取Wistar乳鼠(12～24 h)心脏做原代心肌细胞培养并分为对照组、缺氧/复氧组、缺氧后处置组、二甲基亚砜组、PPOH抑制剂组,分别行相应处理后。MTT法检测心肌细胞活力,Western Blotting法检测CYP2J3蛋白表达,HPLC法检测心肌细胞培养液中11,12-EETs浓度。结果心肌细胞活力、CYP2J3蛋白表达、11,12-EETs浓度,缺氧/复氧组明显低于对照组,缺氧后处置组明显高于缺氧/复氧组,PPOH组心肌细胞活力、CYP2J3蛋白表达、11,12-EETs浓度比缺氧后处置组明显下降。结论缺氧后处置可通过升高CYP2J3/EETs缓解心肌缺氧/复氧损伤。PPOH可抑制缺氧后处置中CYP2J3升高,从而减弱缺氧后处置的心肌保护作用。