饮酒和CYP1A1-MspI、ALDH-2基因多态性与食管癌的相关性

目的探讨饮酒和细胞色素P4501A1-MspI（CYP1A1-MspI）、乙醛脱氢酶-2（ALDH-2）基因多态性与食管癌发病之间的关系。方法采用病例-对照研究的方法,以160例食管癌患者及160例非癌对照者的外周血白细胞为样本,利用聚合酶链反应（PCR）技术分析了CYP1A1-MspI和ALDH-2基因多态性。结果 CYP1A1-MspI突变纯合型（m2/m2）和ALDH-2变异基因型频率分布分别为39.375%、70.625%（病例组）和20.000%、43.750%（对照组）,二者差异显著（P〈0.01,P〈0.01）。CYP1A1-MspI（m2/m2）患食管癌的风险显著增加（OR=2.598,95%CI=1.819~4.265）。ALDH-2变异基因型者患食管癌的风险也显著增加（OR=3.091,95%CI=1.922~4.738）。基因突变的协同分析发现CYP1A1-Ms-pI（m2/m2）/ALDH-2变异基因型者在食管癌组和对照组中的分布频率分别为31.875%和6.250%,二者有显著差异（P〈0.01）。CYP1A1-MspI（m2/m2）/ALDH-2变异基因型者患食管癌的风险显著增加（OR=9.909,95%CI=3.574~12.532）。病例组的饮酒率显著高于对照组的饮酒率（OR=3.096,95%CI=1.532~4.88 0,P〈0.01）,CYP1A1-MspI（m2/m2）/及ALDH-2变异基因型与饮酒有协同作用（OR=40.727,95%CI=17.965~66.572）。结论 CYP1A1-MspI（m2/m2）/ALDH-2变异基因型和饮酒是食管癌的易患因素,三者的联合在食管癌的发生中起着协同的作用。

细胞色素P450 1A1的研究进展

细胞色素P450酶系参与生物体内许多内源性及外源性物质的生物转化。其中细胞色素 P4501A1(CYP1A1)广泛存在于多种肝外组织,参与了多种前致癌物和致突变物的活化代谢过程,并与 多种肿瘤发生相关。本文综述了CYP1A1在体内的分布、诱导和抑制,遗传多态性及癌症易感性,简要 介绍了该领域研究的进展情况。

鸡细胞色素P450 1A5的原核表达与活性重组

旨在对鸡细胞色素P450 1A5(CYP1A5)蛋白进行体外功能研究,采用大肠杆菌系统进行CYP1A5的异源表达。以鸡的cDNA为模板,扩增出CYP1A5基因,将该基因的N端编码区进行修饰,并连接到pCW载体中构建His-CYP1A5,经IPTG诱导在大肠杆菌中表达。经CO-差示光谱检测,所获得的His-CYP1A5具有典型的P450吸收峰。该蛋白与细胞色素P450还原酶(CPR)进行体外重组,构成的重组酶系表现出乙氧基试卤灵-O-脱乙基酶活性。结果表明,所采用的表达策略可以成功产生出具有催化活性的鸡细胞色素P450 1A5(CYP1A5)蛋白。

辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性及其表达水平的影响

【目的】研究辛硫磷暴露对鲫鱼肝微粒体中细胞色素P4501a(CYP1A)活性及其mRNA和蛋白表达的影响,明确其剂量—效应及时间—效应关系,为揭示有机磷农药对水生生物的代谢调节机制提供理论依据。【方法】设辛硫磷低、中、高浓度组(0.0825、0.165和0.33 mg/L)和丙酮(助溶剂)对照组,采用半静态染毒法染毒鲫鱼,分别于染毒24、48、72和96 h后取样并迅速剖解取出鲫鱼肝胰脏,以CYP1A相关酶7-乙氧基-3-异吩唑酮-脱乙基酶(EROD)活性反映CYP1A活性,采用实时荧光定量PCR和Western blotting分别测定鲫鱼肝微粒体中CYP1A基因mRNA及其蛋白的表达情况。【结果】辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性产生抑制作用,辛硫磷染毒24 h时CYP1A活性与辛硫磷存在明显的剂量—效应关系;各辛硫磷浓度组间均存在明显的时间—效应关系,至染毒96 h时低、中、高浓度组鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性分别较对照组下降54.7%、30.4%和65.5%,且差异极显著(P<0.01,下同)。辛硫磷染毒后,鲫鱼肝微粒体中CYP1A基因mRNA的表达整体上呈明显下调趋势,各染毒时间组间均存在较强的剂量—效应关系,除染毒48 h时CYP1A基因mRNA相对表达量与辛硫磷浓度呈正相关外,其他染毒时间点均呈负相关。辛硫磷对鲫鱼肝微粒体中CYP1A蛋白表达的影响均达极显著水平,且呈明显的剂量—效应及时间—效应关系,至染毒96 h时低、中、高浓度组的表达量分别较对照组降低74.6%、82.6%和85.7%。【结论】辛硫磷能抑制鲫鱼肝微粒体中CYP1A活性并下调CYP1A基因mRNA及其蛋白的表达;相对于辛硫磷产生的剂量—效应影响,其对CYP1A活性及其蛋白表达的时间—效应影响更明显。

饮水型砷暴露地区人群血液CYP1A1mRNA表达对砷中毒患病情况的影响

目的:通过分析饮水型砷暴露人群血液中CYP1A1mRNA的表达情况,探讨CYP1A1mRNA的表达与高砷暴露地区砷中毒患病情况之间的关系。方法:选取内蒙古自治区巴彦淖尔市的砷暴露地区作为调查点,将在此居住10年以上的居民作为调查对象。按饮水砷浓度将233名居民分为4组:对照组(饮水砷浓度<10.0μg/L),低剂量组(饮水砷浓度10.0~99.9μg/L),中剂量组(饮水砷浓度100~199.9μg/L),高剂量组(饮水砷浓度≥200.0μg/L)。采用流行病学调查结合实时荧光定量PCR检测技术,测定血液CYP1A1 mRNA的表达水平,分析基因表达与砷中毒患病情况之间的关系。结果:(1)砷中毒的患病率随水砷浓度升高逐渐升高,与对照组相比,各剂量组人群砷中毒患病存在上升趋势,差异有统计学意义(χ~2=16.97,P<0.05),经线性趋势卡方检验发现随着水砷浓度的升高,砷中毒的病情逐渐加重(χ~2=2.371,P<0.05);(2)长期砷暴露会导致CYP1A1mRNA的表达水平升高,高浓度组CYP1A1mRNA表达水平升高具有统计学意义(P<0.05);(3)随着砷中毒的病情加重,各组之间的CYP1A1mRNA的表达水平没有显著性差异(P>0.05)。结论:长期慢性砷暴露会导致CYP1A1mRNA的表达水平升高,这可能是影响地方性砷中毒患病的重要因素,但CYP1A1mRNA的表达与砷中毒病情严重程度无关。

细胞色素P4501 A1和谷胱苷肽硫转移酶基因多态性与肺癌关系的病例对照研究

目的 探讨细胞色素P4 5 0 1A1(CYP 1A1)和谷胱苷肽硫转移酶 (GST) M1基因多态性与肺癌易感性的关系。方法 选取新发肺癌患者 91例及同期非肺部疾患同性别患者 91例作匹配 ,另选取体检正常者 4 7例做频数对照 ,采用聚合酶链式反应 (PCR)和限制性片段长度多态性 (RFLP)技术检测CYP 1A1和GST M1的基因多态性。结果 单独分析CYP 1A1和GST M1基因多态性与肺癌的关系 ,其OR值分别为 1.5 3和 1.4 2 ,与对照组比较 ,差异均无显著性 (P >0 .0 5 ) ,表明与肺癌的发生无相关性。而将二者联合分析时 ,其OR值为 2 .4 7,95 %CI为 1.0 3～ 5 .90 ,与对照组比较 ,差异有显著性(P <0 .0 5 ) ,表明与肺癌的发生有一定相关性。结论 CYP 1A1和GST M1的单一基因多态性不增加患肺癌的危险 ,而两者联合作用时 ,则可增强患肺癌的风险。

CYP1A1及GSTP1基因多态性与肺癌易感性关系

目的探讨细胞色素P4501A1(CYP1A1)Exon7和谷胱甘肽硫转移酶P1(GSTP1)Ile105Val基因多态性与内蒙古地区汉族人群肺癌易感性关系。方法采用等位基因特异性扩增法分析216例汉族对照人群和116例肺癌患者CYP1A1 Exon7和GSTP1 Ile105Val基因多态性。结果携带CYP1A1 Exon7突变杂合型和纯合型的个体患肺癌的危险均升高(OR值分别为1.460和1.593),而携带GSTP1 Ile105Val突变杂合型和纯合型的个体患肺癌的风险均降低(OR值分别为0.970和0.602);CYP1A1 Exon7和GSTP1 Ile105Val基因在肺癌易感性方面无协同作用;CYP1A1 Exon7与吸烟有协同作用(OR=2.637,95%CI=1.056～6.530,P=0.032),GSTP1 Ile105Val与吸烟无协同作用。结论 CYP1A1 Exon7突变基因型为肺癌的可疑易感因素,CYP1A1 Exon7突变基因型和吸烟对肺癌易感有协同作用,GSTP1 Ile105Val突变基因型可降低肺癌易感性。

CYP1B1对肥胖小鼠脂肪组织血管新生因子影响

目的探讨血管新生因子血管生成素Ⅰ和Ⅱ在保护幼年细胞色素P4501B1(CYP1B1)基因敲除小鼠营养性肥胖中作用。方法 CYP1B1基因敲除和野生型雄性C57/BL小鼠(3周龄)各16只,给予低脂膳食(10%脂肪)、高脂膳食(60%脂肪)饲料11周;小鼠处死后取附睾脂肪组织检测血管密度及血管新生因子基因和蛋白表达。结果野生高脂组小鼠脂肪组织血管密度下降,基因敲除小鼠脂肪组织血管分布不受影响;高脂膳食诱导下,野生型和基因敲除小鼠血小板-内皮细胞粘附分子CD31 mRNA表达下调(P<0.05),野生型小鼠CD31蛋白表达下调(P<0.05);与野生低脂组比较,高脂诱导后野生型和基因敲除小鼠血管生成素Ⅰ表达量分别为0.35和0.50(P<0.05),瘦素表达量则分别为2.48和1.42(P<0.05);敲除高脂组瘦素表达量较野生高脂组下降(P<0.05)。结论CYP1B1基因敲除对血管新生相关因子的调控可能在其营养性肥胖中起一定保护作用。

苗族人群细胞色素及GSTM1基因多态性分布

目的了解细胞色素P4501A1(CYP1A1)与谷胱甘肽硫转移酶(GST)M1基因多态性在贵州苗族人群中的分布。方法采用聚合酶链反应(PCR)和聚合酶链反应-限制性片断长度多态性(PCR-RFLP)技术检测CYP1A1和GSTM1基因的多态性。结果97人中CYP1A1基因型为野生型、杂合型、突变型的分别有69,18,10人,分别占71.13%,18.56%,10.31%;野生型等位基因频率为0.805,突变型等位基因频率为0.195。97人中有67人为GSTM1基因缺陷型,GSTM1缺陷型占69%。结论贵州苗族CYP1A1m1突变型等位基因频率明显低于亚洲人,而高于欧洲人群;贵州苗族GSTM1基因缺陷率与中国汉族人相比无明显差异,但明显高于日本人、韩国人、德国人和波兰人。