细胞色素P4501B1基因多态性与乳腺癌易感性研究进展

细胞色素P450(cytochrome,CYP)1B1是P450超基因家族酶系的一个重要成员,广泛分布于肝外组织,其代谢受到外源性致癌物、雌激素等多种因素的调控。该基因存在遗传多态性,目前已对CYP1B1基因多态性与乳腺癌易感性进行了多项研究。本文就CYP1B1基因的多态性、调控机制及其与乳腺癌的关系进行了综述。

人类细胞色素CYP1B1基因表达与癌症

细胞色素CYP1B1是细胞色素P450(CYP)氧化酶超家族、CYP1家族的成员,主要在肝外组织中表达。CYP1B1能催化许多内源性(如雌激素)和外源性化合物包括环境前致癌物(如多环芳烃)及药物的代谢。CYP1B1在肿瘤组织中高表达,在正常组织中不表达或低表达。CYP1B1与多种肿瘤发生发展有关。因此,将CYP1B1作为标志物用于癌症的诊断,以CYP1B1为靶标进行癌症预防和治疗具有广阔的前景。了解CYP1B1基因的表达调控机制及其在癌症发生发展中的作用是CYP1B1应用研究的基础。本文综述了CYP1B1基因表达调控机制的研究进展以及CYP1B1基因表达与癌症关系的研究概况。

细胞色素P4501B1及其抑制剂在肿瘤治疗中的应用进展

细胞色素P450酶（CYPs）是1个广泛存在于人体组织中,以铁卟啉为辅基的蛋白质家族,大多为单加氧酶,可以催化多种代谢反应。文献已报道细胞色素P4501B1（CYP1B1）是1种在许多与激素相关的肿瘤组织中特异性高表达的CYP450酶,可代谢雌激素为致癌产物,激活芳香烃类前致癌物,

细胞色素P4501B1与肿瘤关系的研究进展

恶性肿瘤是现今世界最常见、最棘手的疾患之一,肿瘤的发生是多因素的,包含许多不同的机制。细胞色素P4501B1(CYP1B1)在多种恶性肿瘤中过量表达,尤其是在性激素依赖性肿瘤中表达水平更高。随着研究的深入,对CYP1B1的基因结构和基因多态性及其在肿瘤发生、发展过程中的作用机制也有了较为全面的了解。该文对CYP1B1基因多态性与乳腺癌、肺癌、卵巢癌、子宫内膜癌、前列腺癌及子宫内膜异位症等病变间的关系及CYP1B1可能的致癌机制予以综述。

抗癌药细胞色素P4501B1抑制剂的研究进展

介绍了有关人细胞色素P4 50 1B1 (CYP1B1 )抑制剂的研究概况。CYP1B1是一类在导致癌变的雌激素代谢和激活芳香烃化合物致癌性中起重要作用的酶,在正常组织中通常不表达而在许多肿瘤组织中表达活跃,同时对许多抗癌药物的代谢具有重要影响。这表明CYP1B1抑制剂有望成为又一类肿瘤治疗药物。

中药对黄曲霉毒素B1引起肝损伤过程中细胞色素P450影响的研究进展

黄曲霉毒素Bl(AFBl)会对人和动物的肝脏产生损伤,还会引发肝癌。它还与其他致肝癌的因素,如乙型肝炎病毒(HBV)的慢性感染等协同作用而促进肝癌的发生和发展。AFBl可能通过影响DNA修复系统、药物代谢酶系统及细胞色素P450(CYP)代谢酶基因的异常表达导致肝癌的发生。有研究报道,许多中药能通过影响细胞色素P450酶而起到保护肝脏的作用。论文就黄曲霉毒素B1对肝损伤过程中P450代谢酶活性变化及一些中药显著降低AFB1诱发肝癌发生率的机制进行综述。

动物体内细胞色素酶P3A4与饲料黄曲霉毒素B_1毒性的关系

黄曲霉毒素B1(aflatoxin B1,AFB1)作为黄曲霉主要的代谢产物之一,进入动物体内后主要影响动物的抗氧化系统和免疫系统,是霉菌毒素中主要的致病致癌物质。AFB1代谢主要存在于动物肝脏中,肝微粒体中的细胞色素酶P450(cytochrome P450,CYP450s)是动物体内参与多种药物及毒物代谢的主要酶类。细胞色素酶P3A4(cytochrome P3A4,CYP3A4)是CYP450s的同工酶,主要参与肝脏内AFB1的代谢。进入动物机体内的AFB1经CYP3A4代谢的产物一部分与DNA、RNA结合产生致毒效应;另一部分在谷胱甘肽过氧化物酶(GSH-Px)、谷胱甘肽硫转移酶(GST)等作用下进入血液和尿液,发生解毒效应。在饲料中添加抗氧化剂对于缓解AFB1的毒性有良好效果。饲料中添加一些天然物质或化学成分可以适当抑制肝脏内CYP3A4的活性,对于研究AFB1对机体的损伤具有重要意义,还可为开发新的饲料添加剂提供新思路。

1,25-二羟基维生素D_3对乳腺癌MCF-7细胞CYP1B1表达的作用和COX-2/PGE2通路机制

目的分析COX-2、p-ERα、CYP1B1在人乳腺癌组织和ERα阳性表达人乳腺癌细胞系MCF-7中的表达规律,探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]在人乳腺癌细胞MCF-7中通过COX-2/PGE2通路对CYP1B1表达和细胞增殖、细胞周期转化的影响及作用机制。方法用免疫组织化学法检测42例人乳腺癌组织中COX-2、p-ERα、CYP1B1的表达,并分析其相关性;MTT法检测1,25(OH)2D3对MCF-7细胞增殖的影响,并确定后续实验药物浓度;流式细胞术检测细胞周期;RT-PCR检测MCF-7细胞COX-2 mRNA水平;ELISA法检测细胞培养上清液中PGE2水平;蛋白质印迹法检测MCF-7细胞COX-2、p-ERK、p-ERα、CYP1B1蛋白水平;免疫细胞荧光检测COX-2、p-ERα、CYP1B1蛋白在MCF-7中的原位表达。结果在人乳腺癌组织中COX-2、p-ERα、CYP1B1蛋白呈阳性表达,两两之间均呈正相关性(P<0.05)。1,25(OH)2D3对MCF-7细胞增殖具有抑制作用,且呈时间和剂量依赖性(P<0.05)。应用100 nmol/L 1,25(OH)2D372 h后,MCF-7细胞周期阻滞在G0/G1期(P<0.05);细胞COX-2 mRNA表达减少(P<0.05);细胞培养上清中PGE2水平降低(P<0.01);COX-2、p-ERK、p-ERα及CYP1B1蛋白表达均减少(P<0.05)。结论在乳腺癌中,COX-2/PGE2通路对CYP1B1的表达具有正向调控作用。1,25(OH)2D3可通过抑制COX-2/PGE2通路减少CYP1B1的表达,对乳腺癌细胞MCF-7的增殖产生抑制作用。

P15^(INK4B)高表达对人黑色素瘤细胞G1/S进程的阻滞及与MAPK信号相关性之初探

利用TdR-N_2O同步法分别获得P15高表达的MLIK6和表达空载体的MLC2的M期细胞和G_1期细胞,~3H-TdR掺入结果显示,与对照组细胞MLC2相比,实验组细胞MLIK6从G_1期进入S期时间延长2h,并且掺入强度明显减弱,DNA合成被抑制。进一步观察了P15^(INK4B)对G_1/S相关调控蛋白的影响,在M期细胞释放8h(晚G_1期细胞)后,与对照组MLC2细胞相比,实验组MLIK6细胞中CyclinD1,CyclinE,Cdk4,C-Myc蛋白水平均降低。相反,P27^(KIP1)的表达却上升。同时探讨了MAPK信号在P15^(INK4B)阻抑A375细胞G_1/S转换中的作用与相关性,结果显示晚G_1期的MLIK6细胞中ERK1,ERK2水平变化不大,而具有活性的P-ERK1和P-ERK2均表现出下降。上述实验表明,P15^(INK4B)可能通过作用于G_1期相关的周期调节蛋白和抑制ERK1和ERK2活性,阻滞G_1/S转换与抑制DNA合成。

二氧化硫对大鼠肝和肺细胞色素P4502B1和2E1 mRNA表达及活性的影响

目的探讨二氧化硫(SO2)对肝、肺微粒体细胞色素P450两种亚型CYP2B1和CYP2E1mRNA表达及活性的影响。方法采用SO2动式染毒技术使雄性Wistar大鼠染毒7天,每天6h,SO2的染毒剂量分别为14、28和56mg/m3。采用分光光度法测定大鼠肝、肺微粒体CYP2E1活性,采用荧光分光光度法测定肝、肺微粒体CYP2B1活性,采用RT-PCR方法测定各组大鼠肝、肺组织中CYP2B1和CYP2E1mRNA表达水平。结果在肝中,较高剂量的SO2(28和56mg/m3)可使CYP2B1活性及mRNA水平降低,肝微粒体CYP2E1活性及mRNA在各剂量组均未发生显著改变。肺组织中CYP2B1活性在56mg/m3剂量组显著降低,但其mRNA水平在28及56mg/m3剂量组均显著降低;肺微粒体CYP2E1活性及mRNA水平在28及56mg/m3SO2处理组均降低显著。结论SO2可降低大鼠肝中CYP2B1和2E1及肺中CYP2B1和CYP2E1的活性及mRNA水平。

细胞色素P450 1B1基因多态性与子宫内膜癌易感性研究

目的研究细胞色素P4501B1基因外显子2密码子119(G-T)、外显子3密码子432(C-G)多态性与子宫内膜癌遗传易感性的关系。方法采用等位基因特异性聚合酶链反应(AS-PCR)法对72例子宫内膜癌患者和80例对照者进行CYP1B1基因密码子119(G-T)、密码子432(C-G)突变分析,用SP免疫组化法进一步研究雌激素受体(ER)、孕激素受体(PR)的表达是否受CYP1B1基因多态性的影响。结果CYP1B1基因密码子119、432中等位基因G、T和C、G在子宫内膜癌组和对照组分布的差异有显著性(χ2=16.817,P=0.000;χ2=9.133,P=0.003),其中等位基因T、G使患子宫内膜癌危险性分别增加了3.052和2.213倍。CYP1B1基因密码子119G/T各基因型分布两组间有显著性差异(χ2=18.267,P<0.01),纯合突变T/T、G/G基因型、杂合突变G/T、C/G基因型与野生G/G、C/C基因型相比,患子宫内膜癌的危险度分别提高了4.258、3.871倍和3.235、2.214倍。此外,119T/T、G/T基因型、432G/G、C/G基因型者ER阳性表达率高于119G/G、432C/C野生基因型,有显著性差异(χ2=6.750,P=0.034;χ2=6.977,P=0.031)。结论CYP1B1基因密码子119、432突变等位基因与子宫内膜癌的发生有一定关联,突变基因型增加了子宫内膜癌的发病风险,且与ER的表达相关。

细胞色素氧化酶P4504B1基因突变与膀胱癌遗传易感性的关系

目的:探讨细胞色素氧化酶P450(CYP)4B1基因突变与膀胱癌遗传易感性的关系。方法:应用PCR-单链构象多态性(PCR-SSCP)分析和直接测序分析,分别检测152例膀胱癌患者和150例非肿瘤同期住院患者CYP4B1的各个常见突变基因位点,分析基因突变对膀胱癌发病的影响。结果:膀胱癌组CYP4B1 C517T、AT881-882del+G993A+C1018T和C1123T突变基因型频率高于对照组(χ2=8.266、16.218和15.347,P<0.05);不同病理分级及临床分期膀胱癌患者间CYP4B1各突变基因型频率差异无统计学意义(P>0.05)。结论:携带CYP4B1C517T、AT881-882del+G993A+C1018T和C1123T突变基因型者更易患膀胱肿瘤。

BκF对体外培养人肝细胞诱导细胞色素P450 1A的研究

目的 :研究体外培养的人肝细胞经苯并 [κ]萤蒽 (BκF)诱导后其细胞色素P4 5 0 1A(CYP1A)亚家族的组成。方法 :采用Bis Tris HCI缓冲的聚丙烯酰胺凝胶免疫印迹电泳系统和多克隆羊抗人CYP1A1/CYP1A2及兔抗人CYP1A2抗体对经 5μmol/LBκF诱导 2 4h的 6名捐献者的肝细胞中表达的CYP1A1和CYP1A2进行分离鉴定。结果 :6份样品中 5份仅检出CYP1A1,而另 1份则 2种CYP均被检出 ,其CYP1A1/CYP1A2的比值为 0 .94 2 ;溶剂对照诱导的肝细胞CYP1A1和CYP1A2均未检出。结论 :新鲜的人肝细胞经BκF诱导后CYP1A亚家族的表达因人而异 ,与直接从组织制备的人肝微粒体中的CYP1A的水平有明显不同。

CYP1A1、CYP1B1、VEGF、CAⅨ基因与肺癌关系的研究进展

细胞色素P4501A1(cytochrome P4501A1,CYP1A1)、细胞色素P4501B 1(cytochrome P4501B1,CYP1B1)、血管内皮细胞生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)以及碳酸酐酶Ⅸ(carbonic anhydraseⅨ,CAⅨ)分别是芳香族化合物受体(aryl hydrocarbon receptor,AhR)信号通路和缺氧诱导因子(hypoxia inducible factor,HIF-1)信号通路的下游基因,这些基因的异常表达被认为与肺癌的发生、发展及血管的形成有着密切的关系。本文对CYP1A1、CYP1B1、VEGF、CAⅨ与肺癌的关系进行综述,旨在于为肺癌研究提供新思路。

细胞色素P45055B1的直接电化学及对一氧化氮的电催化检测

采用戊二醛(GA)交联法将细胞色素P45055B1(CYP55B1)固定在热解石墨电极(PGE)表面,牛血清白蛋白(BSA)封闭多余活性位点,构建了一种新型一氧化氮(NO)生物传感器.并考察了电化学生物传感器的选择性与稳定性.结果表明:CYP55B1实现了直接电子传递,氧化还原峰电位位于-0.355 V和-0.385 V,CYP55B1对NO具有电催化活性,其催化还原峰位于-0.85 V.NO的检测线性范围为14.4~108μmol·L^-1,检测限为10.47μmol·L^-1,且该生物传感器具有良好的稳定性及选择性.

银杏叶提取物对AFB1诱发大鼠肝癌过程中CYP3A4活性的影响

目的动态观察银杏叶提取物(Ginkgo biloba extract,EGb761)在黄曲霉毒素B1(AFB1)诱发大鼠肝癌过程中对肝组织代谢酶CYP3A4活性的影响。方法将70只4周龄Wistar雄性大鼠随机分为3组:AFB1组(25只),AFB1+EGb761组(25只)及对照组(20只)。在诱发肝癌过程中,分别于第13,23,33,43,53,63周对大鼠进行肝活检;实验至第73周处死全部动物取肝组织;利用大鼠肝组织微粒体混合酶体外代谢体系,采用荧光分光光度定量法动态检测肝标本中CYP3A4酶代谢活性。结果 AFB1+EGb761组肝癌发生率明显低于AFB1组(P<0.01),而对照组为无肿瘤发生。各组肝组织CYP3A4活性在第23周和第53周呈现双波峰变化;AFB1+EGb761组在第53周和第63周时CYP3A4酶活性低于AFB1组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论 EGb761可显著降低AFB1诱发大鼠肝癌的发生率。其机制之一可能为抑制大鼠肝组织CYP3A4活性从而减少前致癌物的代谢,降低AFB1致癌性及其化学性肝损伤达到保护肝脏的作用。

乳腺癌CYP1B1的表达对紫杉醇耐药性的影响

目的:探讨乳腺癌细胞CYP1B1表达与紫杉醇耐药产生的相关性。方法:以乳腺癌细胞系MCF-7为研究对象,经TCDD诱导MCF-7表达CYP1B1,观察CYP1B1表达后对紫杉醇药物的细胞毒效应的影响。将紫杉醇联合CYP1B1的拮抗剂ANF使用,观察ANF是否可逆转CYP1B1对紫杉醇的耐药作用。采用RT-PCR测定诱导后CYP1B1 mRNA水平,采用细胞免疫化学染色和蛋白印迹技术测定诱导后CYP1B1蛋白水平,MTS比色法测定紫杉醇对细胞增殖的抑制强度。结果:TCDD可诱导MCF-7细胞表达CYP1B1,其mRNA和蛋白表达水平与TCDD浓度具有明显的剂量依赖性(P<0.05);而单独紫杉醇不能诱导MCF-7细胞表达CYP1B1。当MCF-7细胞经TCDD诱导表达CYP1B1后,紫杉醇浓度在0.01～0.1μg/mL时,紫杉醇对MCF-7细胞的抑制率与对照组相比明显下降(P<0.05)。使用CYP1B1的特异性拮抗剂ANF后,MCF-7细胞对紫杉醇的敏感性升高,细胞抑制率与对照组比较无显著性差异(P>0.05)。结论:CYP1B1表达后可导致细胞产生对紫杉醇耐药。

乳腺癌CYP1B1基因与ER、PR的表达关系及临床意义

目的探讨乳腺癌组织中CYP1B1基因与ER、PR的表达关系及临床意义。方法采用免疫组织化学方法检测41乳腺癌组织的CYP1B1基因与ER、PR的表达情况,分析其表达水平间的相关性及临床意义。结果CYP1B1阳性表达占78%(32/41)。CYP1B1阳性表达率在ER阳性组与阴性组之间无显著差异(73.7%VS81.8%;P>0.05),但在PR阴性组的阳性表达显著高于PR阳性组(91.3%VS61.1%;P<0.05),差异有统计学意义。此外,CYP1B1还与淋巴结转移与临床分期呈正相关(P<0.05),但与组织学分级、病理类型无关(P>0.05)。结论CYP1B1基因可能作为一个乳腺癌诊断及治疗的新靶点。

原花青素B2及黄曲霉毒素B_1对人胚胎肝细胞细胞色素P450亚酶1A2、3A4活力及基因表达的影响

目的探讨原花青素B2(PC-B2)与黄曲霉毒素B_1(AFB_1)对人胚胎肝细胞L-02细胞色素P450(CYP)亚酶1A2、3A4活力及其基因表达的影响。方法 L-02细胞体外培养后分空白对照、溶剂对照、AFB_1染毒、PC-B2处理和PC-B2干预共5组,其中PC-B2处理分为3个亚组,分别采用3、10、30μg/ml PC-B2干预,PC-B2干预分为3各亚组,分别采用3、10、30μg/ml PC-B2预处理12 h后,再加不同浓度PC-B2与AFB_1干预24 h。测定各组细胞的CYP1A2、CYP3A4酶活力以及CYP1A2、CYP3A4基因的mRNA表达水平;测定细胞存活率,倒置荧光显微镜观察细胞形态。结果与空白对照组相比,AFB_1染毒组细胞存活率降低(P<0.05),胞膜结构不清,漂浮细胞增多,CYP1A2、CYP3A4酶活力及其mRNA表达水平明显升高(P<0.05)。与空白对照组相比,3、10μg/ml PC-B2处理组细胞相关指标无明显变化,但30μg/ml PC-B2处理组的细胞存活率升高,CYP1A2、CYP3A4酶活力下降(P<0.05)。与AFB_1染毒比较,30μg/ml PC-B2干预组的细胞存活率升高(P<0.05),各浓度PC-B2干预组的细胞CYP1A2、CYP3A4酶活力及基因表达均降低(P<0.05),且干预浓度越高,CYP1A2、CYP3A4酶活力及基因表达越低(P<0.05)。结论 AFB_1能明显诱导肝细胞CYP1A2、CYP3A4酶活力及其mRNA表达,促使肝细胞凋亡,PC-B2干预可促进肝细胞生长并抑制上述CYP二个亚酶的活力及其基因表达,提示PC-B2可能通过抑制I相代谢酶CYP对AFB_1的活化而对肝细胞有良好保护作用。