人类细胞色素P450s研究概况及其在新药安全性评价中的应用

人类细胞色素P45 0s(CYP45 0s)对许多内源、外源性化合物在体内的I相生物转化有重要作用。人类编码CYP45 0s的基因已基本明确 ,为 5 5个基因 ,2 9个假基因。目前欧美各国已经把CYP45 0s及其同工酶测定用于新药的筛选及安全性评价。本实验室建立了不同种属动物肝细胞色素P45 0s同工酶的测定方法 ,并选择来氟米特、重组人白细胞介素 11(rhIL 11)及重组人表皮生长因子 (rh EGF) ,检测其对不同动物CYP45 0s的影响。实验结果表明 :①来氟米特对Beagle犬肝微粒体蛋白含量、CYP45 0s总量、7 乙氧基试卤灵脱乙基酶 (CYP1A1)、香豆素 7 羟化酶 (CYP2A6 /CYP2A2 )、甲苯磺丁脲羟化酶 (CYP2C8/9)、氯唑沙宗羟化酶 (CYP2E1)的比活性均无明显影响。②大鼠皮下注射rhIL 11后 ,肝微粒体中CYP1A1及CYP2A2比活性明显低于对照组 ,而肝微粒体蛋白含量、CYP45 0总量及CYP2E1比活性无明显变化。③rh EGF对猕猴肝微粒体蛋白含量、CYP45 0s总量、CYP1A1、CYP2A6、CYP2C8/9、S (+) 美芬妥英羟化酶 (CYP2C19)、丁呋洛尔 1 羟化酶 (CYP2D6 )、CYP2E1比活性均无明显影响。本实验建立的犬、大鼠及猴肝CYP45 0s测定方法具有快速、简单、重复性好等特点 ,可广泛用于药物筛选及临床前安全性评价。除合成药物外 。

植物细胞色素P450s及其在植物新陈代谢中的作用

对目前已知功能的CYP450s进行了概述,综述了CYP450s在植物基础代谢和非基础代谢中的重要功能和作用,为进一步研究该基因家族及各成员间的功能提供参考。

细胞色素P450s酶系催化除草剂代谢的研究进展

综述了细胞色素P450s酶系催化的单加氧反应机理,细胞色素P450s酶系在酰胺类、三氮苯类、磺酰脲类、脲类、苯氧羧酸类等除草剂的活性或降解代谢中的催化反应。讨论了研究细胞色素P450s酶系代谢作用在除草剂选择性、抗药性机理,抗除草剂作物的培育以及除草剂安全剂的解毒机理等方面的意义。

细胞色素P450s的纯化与鉴定

综述了细胞色素 P4 5 0 s纯化和鉴定技术的研究进展。纯化技术包括色谱、电泳和基因克隆技术 ;鉴定方法有光谱测定、酶活测定、电泳分析和蛋白质印迹测定。

rh-EGF对恒河猴肝细胞色素P450s的影响

目的 :研究重组人表皮生长因子 (recombinanthumanepidermalgrowthfactor,rh EGF)对恒河猴肝细胞色素P4 5 0s同工酶活性的影响。方法 :恒河猴口服rh EGF 16 ,32 ,16 0 μg·kg-1·d-1,qd ,连续给药 2 6周 ,于停药时及停药 8周后 ,各解剖一半动物 ,制备肝微粒体 ,进行肝细胞色素P4 5 0s总量、肝微粒体蛋白含量测定 ,用荧光分光光度法和HPLC法进行肝细胞色素P4 5 0s同工酶中 7 乙氧基试卤灵脱乙基酶 (CYP1A1)、香豆素 7 羟化酶(CYP2A6 )、甲苯磺丁脲羟化酶 (CYP2C8/ 9)、S (+) 美芬妥英羟化酶 (CYP2C19)、丁呋洛尔 1 羟化酶 (CYP2D6 )、氯唑沙宗羟化酶 (CYP2E1)比活性测定。结果 :给药 2 6周和停药 8周后 ,rh EGF对恒河猴肝细胞色素P4 5 0s总量、微粒体蛋白含量无明显影响 ,肝细胞色素P4 5 0s同工酶 (CYP1A1,CYP2A6 ,CYP2C8/ 9,CYP2C19,CYP2D6 ,CYP2E1)活性无显著变化。结论 :本试验建立的恒河猴肝细胞色素P4 5 0s测定方法快速、简便 ,可广泛用于药物开发早期以及预测药物间相互作用和药物毒性的研究等。rh EGF对恒河猴肝P4 5

细胞色素P450s代谢手性化合物研究进展

综述了细胞色素P450s(CYP450s)对手性化合物代谢的对映体选择性差异,探讨了CYP450s酶工程研究的进展。在环境科学方面,研究CYP450s代谢环境中手性污染物的选择性可为正确评价手性污染物及其产物的毒理作用并为环境中手性污染物的生物修复提供依据。

昆虫发生菊酯抗性细胞色素P450s研究进展

菊酯杀虫剂诱导昆虫产生抗性是一个复杂、涉及许多机制的进化过程。许多研究揭示细胞色素P450s在昆虫菊酯抗性产生起重要作用。本文对昆虫细胞色素P450s功能、菊酯抗性相关P450s基因和P450s抗性基因表达调节机制进行综述。

寄生蜂细胞色素P450s研究进展

细胞色素P450s广泛存在于植物、动物和微生物中,对昆虫内源性物质的合成、代谢和对外源物质的解毒均发挥着重要作用,也与昆虫抗药性的产生密切相关。近年来,化学杀虫剂的过度使用严重威胁着天敌昆虫寄生蜂的生存,降低其作为生物防治剂的防治效果。昆虫耐药性的产生很大程度上依赖于细胞色素P450s对外源有毒物质的代谢作用,因此,对寄生蜂P450s基因进行鉴定和进化分析,了解其介导的抗药性机制,对指导新型农药的开发、通过基因编辑的方法改造寄生蜂P450s基因以增强其对化学药剂的耐受性等,均具有重要研究意义和应用价值。

1,3,8-三羟基-5-甲氧基口山酮对细胞色素P450酶的抑制作用

目的:在人肝微粒体中研究1,3,8-三羟基-5-甲氧基山口山酮(1,3,8-trihydroxy-5-methoxyx-anthone,TMX)对细胞色素P450酶(CYP450s)的抑制作用。方法:研究加入TMX后,微粒体内主要药物代谢酶活性的变化情况。微粒体孵化体系中各探针药物及其代谢产物的含量用高效液相色谱法测定,酶活性用探针药物的代谢产物浓度与母药浓度的比值表示。结果:加入TMX前后CYP1A2,CYP2C9,CYP2C19,CYP2E1,CYP3A4活性改变[均值(95%可信区间)]分别为2.95×10-3(2.03×10-3,3.88×10-3),3.14×10-2(1.87×10-2,4.42×10-2),2.27×10-3(-1.4×10-2,1.81×10-2),7.72×10-2(-0.83×10-2,0.2374),-0.2548(-2.9802,2.4707)。CYP1A2,CYP2C9的活性变化差异有统计学意义。结论:10μmol/L的TMX在体外对CYP1A2和CYP2C9有显著性抑制作用,对CYP2C19,CYP2E1和CYP3A4的抑制作用并不明显。

细胞色素P450酶系的异源表达研究

传统的药物代谢主要以实验动物为对象进行药物早期及临床研究,近几年来,结合生物化学与分子生物学的发展,药物早期代谢研究进入到药物体外代谢的研究阶段,主要围绕人肝内参与代谢的细胞色素P450家族展开.本文就近年来对此家族酶的异源表达及其在药物代谢中的应用进行了综述.

脊椎动物P450s超家族在转基因动物中的研究进展

细胞色素P450s超家族参与生物体内许多物质的代谢反应。现就P450s家族的概况,人P450s家族的分类和主要功能,以及斑马鱼P450s的研究现状作一综述。同时介绍了应用转基因小鼠研究人P450s功能的进展,并对应用转基因斑马鱼研究人P450s在药物代谢方面的作用作一展望。

芥子油苷对豌豆蚜3种解毒酶活性的影响

为明确植物次生物质芥子油苷对豌豆蚜(Acyrthosiphon pisum)体内3种解毒酶的影响,本研究采用豌豆蚜纯人工饲料薄膜饲养技术,设置对照组(0,CK)和3个不同浓度(0.94、1.87、2.86μmol·g^(-1))芥子油苷的处理组,测定豌豆蚜取食含有不同浓度芥子油苷的人工饲料后,体内3种解毒酶活性及可溶性蛋白含量的变化。结果表明:两种色型豌豆蚜取食添加不同浓度芥子油苷的人工饲料后,羧酸酯酶(CarE)、谷胱甘肽S-转移酶(GSTs)和细胞色素P450s酶活性逐渐升高,可溶性蛋白含量呈不同程度上升趋势;随着豌豆蚜取食时间延长和芥子油苷浓度升高,3种解毒酶活性逐渐升高;在芥子油苷浓度为0.94、1.87和2.86μmol·g^(-1)时,3种酶活性基本与对照之间差异显著(P<0.05)。研究结果表明,CarE、GSTs和P450s酶活性逐渐升高,三者相比,P450s酶活性显著高于CarE和GSTs活性(P<0.05),且在芥子油苷浓度为2.86μmol·g^(-1)处理下两种色型豌豆蚜的P450s酶活性分别是对照的4.60倍和1.90倍,该结果体现了两种色型豌豆蚜解毒酶对芥子油苷的响应机制不同。

长期暴露于臭氧能减轻硝基萘对鼻腔黏膜的细胞毒作用

硝基萘（1-NN）的毒性作用机制包括细胞色素P450s激活和随之形成的蛋白加和物。已有研究显示，1-NN对长期暴露于臭氧的大鼠的毒性明显高于呼吸清洁空气的大鼠。

佛司可林生物合成研究进展

佛司可林(forskolin)是一种结构复杂的半日花烷型植物二萜,基于其作为环磷酸腺苷(cAMP)环化酶激活剂的活性,被用于多种疾病的治疗。天然的佛司可林目前仅存在于濒危植物毛喉鞘蕊花根的木栓层中,因提取和化学合成过程复杂,其产量和纯度无法满足商业需求。随着近年合成生物学的快速发展及许多二萜生物合成途径的解析,为佛司可林的绿色生产提供了新途径。该研究对佛司可林的结构与活性、生物合成途径及异源生物合成进行了综述,并对异源生物合成佛司可林存在的问题及解决方案进行了探讨与归纳,为构建高产佛司可林工程细胞提供参考。