尿道癌相关基因1通过微小RNA-513a-3p/细胞色素P_(450)1B1生物学轴促进人胃癌细胞增殖和迁移的机制研究

目的研究长链非编码RNA(lncRNA)尿路上皮癌胚抗原1(UCA1)在人胃癌细胞中的表达,并探讨UCA1通过微小RNA-513a-3p(miR-513a-3p)/细胞色素P_(450)1B1(CYP1B1)生物学轴对胃癌细胞增殖和迁移的影响及机制。方法分别向人胃癌细胞中转入UCA1小干扰RNA(siRNA)、miR-513a-3p模拟物和miR-513a-3p抑制剂以抑制UCA1、上调miR-513a-3p和抑制miR-513a-3p表达。通过定量PCR检测不同细胞UCA1、miR-513a-3p和CYP1B1 mRNA的表达,CCK8试剂盒检测细胞增殖,Transwell小室检测细胞迁移。结果与GES-1细胞相比,UCA1在人胃癌细胞HGC-27、SNU-5、AGS、SGC-7901中表达均升高(t=11.106,P<0.001;t=10.872,P<0.001;t=12.134,P<0.001;t=16.178,P<0.001),细胞增殖活性(t=7.252,P<0.001;t=8.964,P<0.001;t=8.666,P=0.003;t=8.697,P<0.001)和细胞迁移能力(t=4.040,P=0.010;t=7.079,P<0.001;t=6.833,P=0.003;t=7.527,P<0.001)均升高。双荧素酶基因报告实验显示miR-513a-3p与UCA1和CYP1B1靶向结合。与NC siRNA组相比,UCA1 siRNA显著下调UCA1和上调miR-513a-3p在SGC-7901细胞中的表达(t=7.895,P<0.001;t=12.911,P<0.001);miR-513a-3p表达上调显著抑制SGC-7901细胞中UCA1和CYP1B1 mRNA表达(t=7.224,P<0.001;t=5.645,P=0.002),而抑制miR-513a-3p则显著上调SGC-7901细胞中UCA1和CYP1B1 mRNA表达(t=9.628,P<0.001;t=11.665,P<0.001)。与单独UCA1敲低的SGC-7901细胞相比,UCA1和miR-513a-3p共同敲低的SGC-7901细胞CYP1B1 mRNA表达、细胞增殖活性和细胞迁移能力均升高(t=3.695,P=0.014;t=4.198,P=0.009;t=3.602,P=0.016)。结论UCA1通过miR-513a-3p/CYP1B1生物学轴促进人胃癌细胞的增殖和迁移。

甘草酸的临床应用和对细胞色素P_(450)影响的研究进展

甘草酸作为甘草的主要活性成分,具有抗炎、抗病毒、镇咳祛痰、免疫调节等药理作用,近年来又陆续发现很多临床新用途,并且会对人和动物的细胞色素P_(450)产生影响。笔者对甘草酸的临床应用及其对细胞色素P_(450)的影响进行了整理分析,以期为临床合理使用甘草酸制剂提供参考。

丹参酮Ⅱ_A磺酸钠治疗先天性人巨细胞病毒性肝炎小鼠的实验研究

目的建立小鼠先天性人巨细胞病毒肝炎动物模型,研究丹参酮Ⅱ_A磺酸钠的治疗机制,为治疗人类感染先天性巨细胞病毒肝炎的合理用药提供理论依据。方法 Balb/c小鼠80只(雌雄各半),配对后随机分对照组、病毒感染组、丹参酮大剂量组、丹参酮小剂量组,丹参酮大、小剂量组经腹腔注射丹参酮Ⅱ_A磺酸钠1、0.5 mg/(10 g·d),对照组、病毒感染组注射等体积细胞维持液DMEM,四组均治疗21d。放射免疫法检测治疗前后小鼠血清肝纤维化血清学指标:层黏连蛋白(LN)、Ⅲ型前胶原(PC-Ⅲ)、Ⅳ型胶原(cⅣ)、透明质酸(HA)、转化生长因子-β_1(TGF-β_1),小鼠肝功能:总胆红素(STB)、胆汁酸(TBA)、丙氨酸氨基转移酶(ALT)、谷氨酰转移酶(GGT)、天冬氨酸氨基转移酶(AST),肝微粒体细胞色素P450亚型酶:CYP2E1、CYP1A2、CYP3A4、CYP2D6、CYP2C9活性。结果经丹参酮Ⅱ_A磺酸钠治疗21 d后,丹参酮大小剂量组LN、PC-Ⅲ、cⅣ、HA、TGF-β_1、STB、TBA、ALT、GGT、AST及CYP2E1、CYP3A4酶活性均有不同程度降低,与病毒感染组比较,差异均有统计学意义(P<0.05),丹参酮大、小剂量组组间比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论丹参酮Ⅱ_A磺酸钠对小鼠接种人巨细胞病毒性肝炎有明确的治疗作用,机制与其活血化瘀、降低TGF-β_1、抑制小鼠肝微粒体细胞色素_(450)亚型酶酶活性,促进肝功能恢复有关。

滇南地区心脑血管疾病患者细胞色素P_(450)2C19基因分析及临床意义

目的分析滇南地区心脑血管疾病患者细胞色素P_(450)2C19(CYP2C19)基因分布及临床意义。方法回顾性分析滇南中心医院2019年5月至2020年6月诊治的心脑血管疾病患者245例的资料,分析CYP2C19基因分布情况,分析其与民族、年龄、性别、血脂、高血压、糖尿病的关系,并与其他地区进行比较。结果245例患者CYP2C19基因的7种表型^(*)1/^(*)17、^(*)1/^(*)1、^(*)1/^(*)2、^(*)1/^(*)3、^(*)2/^(*)2、^(*)2/^(*)3、^(*)3/^(*)3所占比例分别为2.86%、38.37%、39.18%、5.31%、9.39%、4.08%、0.82%,超快代谢者占2.86%,快代谢者占38.37%,中间代谢者占44.49%,慢代谢者占14.29%。CYP2C19基因的多态性位点突变频率观察值符合Hardy-Weinberg遗传平衡(P>0.05),具有恒定性及群体代表性。使用Fisher检验发现滇南地区心脑血管疾病患者的CYP2C19基因分布与民族、年龄、性别、基础疾病、血脂及心脑血管疾病种类无明显关联,均差异无统计学意义(均P>0.05),滇南地区人群与东莞、江西、福建、川北、赤峰、厦门、陕西、昆明地区人群CYP2C19基因分布均差异有统计学意义(P<0.001、<0.001、0.045、0.008、0.001、0.005、<0.001、0.016)。结论滇南地区心脑血管疾病患者的CYP2C19基因分布与民族、年龄、性别、基础疾病、血脂及心脑血管疾病种类无明显关联。CYP2C19基因分布与地区分布相关,可以指导不同地区个性化用药。

聚合酶链反应技术分析家蝇抗性基因的研究

目的：家蝇对拟除虫菊酯抗药性与细胞色素Ｐ４５０的ＣＹＰ６Ｄ１基因有关，采用分子生物学的特异性基因聚合酶链反应技术分析家蝇抗药性的发生、发展规律，探讨早期预测及防治策略。方法：提取雄性家蝇腹部ＤＮＡ作为反应模板，根据ＣＹＰ６Ｄ１基因序列设计特异性基因引物，进行３０个循环扩增，电泳分析扩增产物与生物测试结果比较。结果：Ｄ－Ｒ品系扩增阳性率１００％，敏感品系扩增阳性率为０，深圳、汕头、韶关、广州、茂名品系扩增阳性率分别为５９％、５６．３％、５４％、５５％及２５％。扩增阳性率与家蝇对拟除虫菊酯抗性倍数呈正相关（ｒ＝０．８３４４，Ｐ＜０．０５）。结论：聚合酶链反应技术应用于家蝇抗性发生、发展规律分析，早期诊断及抗药性发生机理研究有重要意义。

CYP2C19基因多态性及Hp感染与缺血性脑卒中患者的关联性

目的探讨细胞色素氧化酶P_(450)2C19(CYP2C19)基因多态性、幽门螺杆菌(Hp)感染与缺血性脑卒中发病风险和氯吡格雷治疗的关联性。方法回顾性选取2018年9月-2020年8月湖北省武汉市新洲区人民医院收治的92例缺血性脑卒中患者设为研究组,均采用氯吡格雷进行抗血小板治疗;另选取同期于医院体检的非脑血管病变人群60例作为对照组,检测两组CYP2C19基因多态性,缺血性脑卒中患者血清脂蛋白磷脂酶A2(Lp-PLA2)、单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)、同型半胱氨酸(Hcy),分析CYP2C19基因分型和Hp感染与缺血性脑卒中发病风险和氯吡格雷治疗的相关性。结果92例缺血性脑卒中患者中CYP2C19基因分型为野生型GG 44例(47.83%),突变杂合型GA 27例(29.35%),突变纯合型AA 21例(22.83%);高血压、糖尿病、血清Hcy≥25μmol/L、CYP2C19基因为突变型(GA或AA)和Hp感染是缺血性脑卒中发生的影响因素(P<0.05)。缺血性脑卒中患者携带突变杂合型GA和突变纯合型AA的血小板抑制率低于携带野生型GG患者(P<0.05),且氯吡格雷抵抗率高于野生型GG患者(P<0.05)。缺血性脑卒中合并Hp感染患者的血清Hcy、Lp-PLA2和MCP-1水平和上消化道出血发生率均高于未发生Hp感染患者(P<0.05)。结论Hp感染和携带CYP2C19基因突变型GA或AA均可增加缺血性脑卒中发病风险,CYP2C19基因GA型或AA型相比GG型患者更易发生氯吡格雷抵抗,进而降低抗血小板治疗效果。