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血清淀粉酶A蛋白、中性粒细胞表面抗原CD64在新生儿败血症中的诊断价值 被引量:22
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作者 汪盈 杨祖钦 +1 位作者 孙忠敏 黄玉梅 《临床儿科杂志》 CAS CSCD 北大核心 2013年第6期526-529,共4页
目的探讨血清淀粉酶A蛋白(SAA)、中性粒细胞表面抗原CD64在新生儿败血症诊断及疗效评价中的价值。方法 2011年5月至2012年5月住院并疑为感染的80例新生儿,分为败血症组35例,非败血症感染组45例;另设对照组20例。检测各组入院时,以及败... 目的探讨血清淀粉酶A蛋白(SAA)、中性粒细胞表面抗原CD64在新生儿败血症诊断及疗效评价中的价值。方法 2011年5月至2012年5月住院并疑为感染的80例新生儿,分为败血症组35例,非败血症感染组45例;另设对照组20例。检测各组入院时,以及败血症组在治疗1周后的SAA、CD64水平,各组间进行比较,并分析SAA、CD64诊断败血症的敏感性和特异性。结果败血症组和非败血症感染组CD64、SAA均明显高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01);败血症组CD64水平高于非败血症感染组,差异亦有统计学意义(P<0.01)。败血症组经抗感染治疗1周后CD64及SAA水平均较治疗前下降,差异有统计学意义(P均<0.01)。以CD64≥2 943个荧光抗体分子/细胞、SAA≥5.3 mg/L、CRP≥8 mg/L为阳性标准,CD64诊断败血症的敏感性和特异性分别为91.43%、90.00%均较SAA及CRP高。结论中性粒细胞表面抗原CD64是早期诊断新生儿败血症的灵敏指标之一。 展开更多
关键词 新生儿 败血症 血清淀粉酶A 中性粒细胞表面抗原 CD64
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人肝癌细胞系HLE细胞表面抗原多肽的纳升电喷雾串联质谱从头测序分析 被引量:5
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作者 王红霞 李萍 +4 位作者 何家田 周迈 刘炳玉 杨松成 张学敏 《分析化学》 SCIE EI CAS CSCD 北大核心 2006年第7期915-918,共4页
肿瘤细胞表面的抗原多肽能够被细胞毒T淋巴细胞特异性识别而引起免疫应答,因此有可能用于研制基于多肽的抗肿瘤疫苗.用弱酸将人肝癌细胞系HLE 细胞表面抗原多肽和人正常肝细胞表面多肽洗脱后,经RP-HPLC分离,选择HLE细胞表面特异性多肽... 肿瘤细胞表面的抗原多肽能够被细胞毒T淋巴细胞特异性识别而引起免疫应答,因此有可能用于研制基于多肽的抗肿瘤疫苗.用弱酸将人肝癌细胞系HLE 细胞表面抗原多肽和人正常肝细胞表面多肽洗脱后,经RP-HPLC分离,选择HLE细胞表面特异性多肽进行纳升电喷雾串联质谱(nanoESI-MS/MS)测序,共测定5个色谱峰中的20个多肽序列,分子量分布范围为1000~2000 Da.借助MasSeq软件分析出其中12个多肽的序列.经数据库查寻,其中的3个肽段分别来自钙调节蛋白、核蛋白S19和伴侣蛋白10.这些多肽的生物学功能及与肿瘤的关系值得深入研究.该研究表明nanoESI-MS/MS是测定微量混合多肽序列的最有效方法. 展开更多
关键词 HLE细胞 细胞表面抗原多肽 电喷雾串联质谱 从头测序
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抗人滋养层细胞表面抗原-2单抗的制备及免疫学特性分析 被引量:6
3
作者 梁洁 刘琼琼 +6 位作者 张慧林 林红 唐奇 刘玉 苏亦平 冯振卿 朱进 《南京医科大学学报(自然科学版)》 CAS CSCD 北大核心 2011年第5期645-650,共6页
目的:利用杂交瘤技术制备抗人滋养层细胞表面抗原-2(trophoblast cell-surface antigen 2,Trop2)单克隆抗体并鉴定其免疫学特性。方法:以胰腺癌细胞系BxPC3免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合后制备单抗。通过酶联免疫法、免疫... 目的:利用杂交瘤技术制备抗人滋养层细胞表面抗原-2(trophoblast cell-surface antigen 2,Trop2)单克隆抗体并鉴定其免疫学特性。方法:以胰腺癌细胞系BxPC3免疫BALB/c小鼠,取其脾细胞与SP2/0细胞融合后制备单抗。通过酶联免疫法、免疫荧光、免疫沉淀和质谱分析、流式细胞术、免疫组织化学等方法,鉴定单抗的免疫学特性。结果:通过细胞的融合与筛选,获得了持续分泌抗Trop2单抗的杂交瘤细胞株,该抗体可以识别细胞表面的Trop2膜蛋白,也可用于免疫组化识别人肿瘤组织中的Trop2蛋白,同时该抗体对乳腺癌细胞的生长具有一定的抑制作用。结论:该单抗具有作为Trop2阳性表达肿瘤靶向治疗的潜在应用价值。 展开更多
关键词 人滋养层细胞表面抗原-2 单克隆抗体 免疫组化
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滋养层细胞表面抗原2蛋白在鼻咽癌中的表达及其与微血管密度的关系 被引量:6
4
作者 陈顺金 吴笑英 +3 位作者 何锦添 王凤平 叶伟标 李伟滔 《广西医科大学学报》 CAS 2019年第6期939-943,共5页
目的:研究滋养层细胞表面抗原2(Trop2)蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与肿瘤微血管密度(MVD)的关系,探讨Trop2蛋白在鼻咽癌发生发展的作用及临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测40例鼻咽癌组织及20例慢性鼻咽炎组织中Trop2蛋白的表达... 目的:研究滋养层细胞表面抗原2(Trop2)蛋白在鼻咽癌组织中的表达及其与肿瘤微血管密度(MVD)的关系,探讨Trop2蛋白在鼻咽癌发生发展的作用及临床意义。方法:采用免疫组织化学法检测40例鼻咽癌组织及20例慢性鼻咽炎组织中Trop2蛋白的表达情况,并采用CD105抗体标记微血管内皮细胞,计算MVD,统计分析鼻咽癌组织中Trop2蛋白的表达与临床病理参数及MVD之间的关系。结果:与慢性鼻咽炎组织比较,Trop2蛋白在鼻咽癌组织中的表达明显升高(P<0.05)。Trop2蛋白在鼻咽癌组织中的表达与患者性别、年龄无关(P>0.05),与鼻咽癌TNM分期及淋巴结转移密切相关(P<0.05),鼻咽癌组织中Trop2蛋白的表达与MVD呈显著正相关关系(r=0.579,P<0.05)。结论:鼻咽癌组织中Trop2蛋白的表达与肿瘤临床分期、淋巴结转移及MVD密切相关。Trop2蛋白可通过促进肿瘤内血管增生,从而促进鼻咽癌的生长和侵袭转移。 展开更多
关键词 鼻咽癌 滋养层细胞表面抗原2 免疫组织化学 CD105 肿瘤微血管密度
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人滋养细胞表面抗原在宫颈病变中表达的研究 被引量:3
5
作者 龙腾飞 闫芸芳 +2 位作者 彭广兰 叶伟 周家德 《安徽医科大学学报》 CAS 北大核心 2013年第10期1240-1242,共3页
目的观察并探讨人滋养细胞表面抗原(Trop-2)在人宫颈病变中的表达及其临床相关性。方法运用RT-PCR法检测6例正常宫颈组织、6例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ或CINⅡ组织、6例CINⅢ组织和6例宫颈癌组织中Trop-2 mRNA的表达情况;免疫组化法检测Tr... 目的观察并探讨人滋养细胞表面抗原(Trop-2)在人宫颈病变中的表达及其临床相关性。方法运用RT-PCR法检测6例正常宫颈组织、6例宫颈上皮内瘤变(CIN)Ⅰ或CINⅡ组织、6例CINⅢ组织和6例宫颈癌组织中Trop-2 mRNA的表达情况;免疫组化法检测Trop-2蛋白在20例正常宫颈组织、20例CINⅠ或CINⅡ组织、20例CINⅢ组织及20例宫颈癌组织中的表达情况。结果 Trop-2 mRNA在正常宫颈组织、CINⅠ或CINⅡ组织、CINⅢ组织及宫颈癌组织均有表达,且随着病变程度的加重,表达量呈增加趋势;免疫组化法显示Trop-2蛋白在正常宫颈组织不表达或极低表达,在CIN组织及宫颈癌组织中呈阳性表达,主要定位在细胞膜上,且表达水平随着宫颈病变程度的加重也依次升高。结论 Trop-2在宫颈病变中的表达量和强度与病变的严重程度相关,可以反映宫颈疾病的发生发展过程,有可能成为宫颈疾病筛查及诊断的标记物。 展开更多
关键词 宫颈病变 宫颈癌 宫颈上皮内瘤变 人滋养细胞表面抗原 宫颈疾病筛查
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C-反应蛋白、血清淀粉酶A蛋白及中性粒细胞表面抗原CD64对新生儿感染性疾病的早期诊断价值 被引量:24
6
作者 吴玉芹 奎莉越 +3 位作者 赵晓芬 李杨方 崔珊 杜琨 《分子诊断与治疗杂志》 2018年第5期327-331,共5页
目的探讨C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)、血清淀粉酶A蛋白(serum amyloid A,SAA)和中性粒细胞表面抗原CD64在新生儿感染性疾病早期诊断中的作用。方法选取2016年5月至2017年5月于昆明市儿童医院新生儿监护病房住院并疑为新生儿感... 目的探讨C-反应蛋白(C reactive protein,CRP)、血清淀粉酶A蛋白(serum amyloid A,SAA)和中性粒细胞表面抗原CD64在新生儿感染性疾病早期诊断中的作用。方法选取2016年5月至2017年5月于昆明市儿童医院新生儿监护病房住院并疑为新生儿感染性疾病病例100例,另选取20例非感染性疾病(如新生儿呼吸窘迫综合征、母乳性黄疸、胃肠功能紊乱、头颅血肿等)新生儿作为对照组,采用酶联免疫吸附试验检测2组新生儿CRP的表达,运用奥普金标数码定量分析仪检测SAA的水平,运用流式细胞仪检测CD64的水平,并分析CRP、SAA及CD64在新生儿感染性疾病早期临床诊断中的作用。结果新生儿感染性疾病组CRP、SAA及CD64的水平均显著高于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。CD64诊断新生儿感染性疾病的敏感性和特异性均高于SAA及CRP。结论CRP、SAA均可以作为判断新生儿患感染性疾病的标准,但CD64是新生儿感染性疾病更为灵敏的早期诊断指标。 展开更多
关键词 新生儿 感染性疾病 C-反应蛋白 血清淀粉酶A 中性粒细胞表面抗原64
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人肺泡Ⅱ型上皮细胞表面抗原在急性呼吸窘迫综合征患者中的变化及地塞米松的保护作用 被引量:5
7
作者 高婧 杨艳荣 梁显泉 《中国中西医结合急救杂志》 CAS 北大核心 2012年第2期83-85,共3页
目的研究血清人肺泡Ⅱ型上皮细胞表面抗原(KL-6)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者中的变化,及地塞米松的保护作用。方法采用回顾性研究方法,选择40例ARDS患者,按是否应用地塞米松分为常规治疗组(20例)和地塞米松治疗组(20例)... 目的研究血清人肺泡Ⅱ型上皮细胞表面抗原(KL-6)在急性呼吸窘迫综合征(ARDS)患者中的变化,及地塞米松的保护作用。方法采用回顾性研究方法,选择40例ARDS患者,按是否应用地塞米松分为常规治疗组(20例)和地塞米松治疗组(20例);于ARDS确诊后1、2、3d检测血清KL-6水平(酶联免疫吸附试验)和氧合指数(PaO2/FiO2)变化。设健康对照组20例。结果健康对照组血清KL-6[(243±121)kU/L]和PaO:/FiO2[(452.78±35.86)mmHg,1mmHg=0.133kPa]水平均在正常范围内。常规治疗组和地塞米松治疗组随病情进展血清KL-6(kU/L)、Pa02/FiO2(mmHg)进行性升高。与健康对照组比较,两组1、2、3d血清KL-6明显升高(常规治疗组:980±132、1121±151、1320±143,地塞米松治疗组:697±132、832±125、957±136),PaO2/FiO2明显下降(常规治疗组:125.73±33.26、172.33±22.18、228.32±41.72,地塞米松治疗组:159.92±30.21、230.18±32.78、352.64±48.72),差异均有统计学意义(均P〈0.01);且地塞米松治疗组血清KL-6较常规治疗组明显下降,Pa02/FiO:较常规治疗组明显升高,差异有统计学意义(均P〈0.05)。结论ARDS患者血清KL-6表达升高,早期应用地塞米松可降低KL-6水平,减轻肺组织损伤。 展开更多
关键词 人肺泡Ⅱ型上皮细胞表面抗原 急性呼吸窘迫综合征 地塞米松
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改良碱性磷酸酶-抗碱性磷酸酶桥联酶染色微板法检测细胞表面抗原 被引量:5
8
作者 蒋红梅 蔡美英 《华西医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第1期143-144,147,共3页
目的 对碱性磷酸酶 -抗碱性磷酸酶 ( APAAP)桥联酶染色常规玻片法进行改良 ,用于检测细胞表面抗原。方法 用微量细胞毒试验反应板 (简称微板 )代替载玻片作细胞载体进行 APAAP桥联酶染色 ,检测人外周血淋巴细胞表面 CD3、CD4、CD8、CD... 目的 对碱性磷酸酶 -抗碱性磷酸酶 ( APAAP)桥联酶染色常规玻片法进行改良 ,用于检测细胞表面抗原。方法 用微量细胞毒试验反应板 (简称微板 )代替载玻片作细胞载体进行 APAAP桥联酶染色 ,检测人外周血淋巴细胞表面 CD3、CD4、CD8、CD11a、CD11b、CD18和 CD5 4的表达。结果 微板法与玻片法检测结果无显著性差异 ( P均 >0 .0 5 ) ,有良好重复性 ,并将检测 7项指标所需的血量由 10 m l减至 2 m l,各种试剂 (一抗、二抗、APAAP复合物和底物 )用量由 5 0μl减至 5μl。结论 微板法节约了试剂及用血量 ,操作方便 ,效果良好 。 展开更多
关键词 微量细胞毒试验反应板 酶免疫细胞化学技术 细胞表面抗原 APAAP
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血降钙素原、内毒素及中性粒细胞表面抗原CD64在重症肺炎鉴别诊断中的临床意义 被引量:11
9
作者 徐玉辉 魏健平 《现代医院》 2017年第1期134-135,138,共3页
目的探讨血降钙素原(PCT)、内毒素及中性粒细胞表面抗原CD64在重症肺炎鉴别诊断中的临床意义。方法收集重症肺炎患者42例,其中细菌性肺炎组20例,病毒性肺炎组12例,支原体肺炎组10例,通过检测三组患者血PCT、内毒素水平及中性粒细胞表面... 目的探讨血降钙素原(PCT)、内毒素及中性粒细胞表面抗原CD64在重症肺炎鉴别诊断中的临床意义。方法收集重症肺炎患者42例,其中细菌性肺炎组20例,病毒性肺炎组12例,支原体肺炎组10例,通过检测三组患者血PCT、内毒素水平及中性粒细胞表面抗原CD64表达率的变化,探讨血PCT、内毒素、中性粒细胞表面抗原CD64在重症肺炎病原学鉴别诊断中的临床意义;采用受试者工作特征曲线(ROC曲线)分析血PCT、内毒素、中性粒细胞表面抗原CD64在重症细菌性肺炎诊断中的临床意义。结果与重症病毒性肺炎组、重症支原体肺炎组相比,重症细菌性肺炎组患者血PCT、内毒素水平及中性粒细胞表面抗原CD64表达率显著升高(P<0.05),重症病毒性肺炎组与重症支原体肺炎组比较,血PCT、内毒素水平及中性粒细胞表面抗原CD64表达率无统计学差异(P>0.05);ROC曲线分析发现,血PCT、内毒素水平及中性粒细胞表面抗原CD64表达率在诊断重症细菌性肺炎有较高的灵敏度及特异度。结论血PCT、内毒素及中性粒细胞表面抗原CD64是诊断重症细菌性肺炎的可靠指标,可以用于重症细菌性肺炎与重症病毒性肺炎、重症支原体肺炎的鉴别诊断。 展开更多
关键词 降钙素原 内毒素 中性粒细胞表面抗原CD64 重症肺炎 鉴别诊断
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支气管肺泡灌洗液中β-联蛋白、转化生长因子β_1、Clara细胞分泌蛋白16、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6在支气管肺发育不良中的表达及意义 被引量:8
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作者 杨敏 李林瑞 +2 位作者 黄建宝 孟燕妮 陈艳萍 《中国中西医结合儿科学》 2015年第3期219-223,共5页
目的探讨β-联蛋白、转化生长因子β1(TGF-β1)、Clara细胞分泌蛋白16(cc16)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6(KL-6)在支气管肺发育不良(BPD)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中的表达及其意义。方法机械通气早产儿70例,其中40例诊断为BPD的患儿作为... 目的探讨β-联蛋白、转化生长因子β1(TGF-β1)、Clara细胞分泌蛋白16(cc16)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6(KL-6)在支气管肺发育不良(BPD)患儿支气管肺泡灌洗液(BALF)中的表达及其意义。方法机械通气早产儿70例,其中40例诊断为BPD的患儿作为观察组,30例非BPD患儿作为对照组。采用酶联免疫吸附试验法检测两组患儿机械通气1、24、48、72hBALF中β-联蛋白、TGF-β1、cc16、KL-6水平。结果观察组平均胎龄及出生体质量显著低于对照组,差异有统计学意义(P<0.05),吸氧时间及机械通气时间显著长于对照组,差异有统计学意义(P<0.01)。随机械通气时间的延长,观察组cc16水平呈逐渐降低趋势,而β-联蛋白、TGF-β1、KL-6水平呈逐渐升高趋势,且48、72h时均与1h时各指标水平差异有统计学意义(P<0.01)。对照组TGF-β1、cc16于机械通气72h时与1h时水平差异有统计学意义(P<0.01),而β-联蛋白、KL-6水平在各时间点的差异均无统计学意义(P>0.05)。观察组机械通气各时间点β-联蛋白、TGF-β1水平均显著高于对照组各相应时间点指标水平,cc16显著低于对照组水平,差异有统计学意义(P<0.05),而KL-6在机械通气48、72h时高于对照组相应时间点,差异有统计学意义(P<0.05),余时间点差异无统计学意义(P>0.05)。各时间点比较,BPD中重度组β-联蛋白、TGF-β1、KL-6水平均显著高于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05),而cc16水平显著低于轻度组,差异有统计学意义(P<0.05)。多元逐步回归分析结果显示,机械通气时间、吸氧时间的延长及低cc16水平是BPD发生的危险因素(P<0.01)。结论机械通气早产儿BPD的发生与机械通气、吸氧时间的延长及低cc16水平密切相关,通过监测早产儿初始机械通气BALF中β-联蛋白、TGF-β1、cc16水平可对早产儿BPD的发生提供预测依据。 展开更多
关键词 支气管肺发育不良 β-联蛋白 转化生长因子Β1 Clara细胞分泌蛋白16 Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6 婴儿 新生
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环磷酰胺免疫删减法制备细胞表面抗原单克隆抗体小鼠模型的建立 被引量:1
11
作者 郭紫芬 何淑雅 +1 位作者 朱炳阳 廖端芳 《细胞与分子免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2008年第11期1099-1101,共3页
目的:观察不同剂量环磷酰胺(CP)诱导免疫耐受的作用,建立一个免疫删减法制备细胞表面抗原单克隆抗体(mAb)的动物免疫模型。方法:雌性BALB/c小鼠经CHO细胞免疫后分别给予不同剂量的CP诱导免疫耐受,选择血清抗体效价最低的一组小鼠按常规... 目的:观察不同剂量环磷酰胺(CP)诱导免疫耐受的作用,建立一个免疫删减法制备细胞表面抗原单克隆抗体(mAb)的动物免疫模型。方法:雌性BALB/c小鼠经CHO细胞免疫后分别给予不同剂量的CP诱导免疫耐受,选择血清抗体效价最低的一组小鼠按常规方式腹腔注射CHO-TM5细胞进行免疫。ELISA测定各小鼠血清中CHO抗体及CHO-TM5抗体效价,检测血清抗体对CHO细胞与CHO-TM5细胞结合反应的差异性。结果:BALB/c小鼠腹腔注射不同剂量的CP后,各剂量组均出现不同程度的免疫耐受作用。CP100mg/kg组与CP125mg/kg组小鼠血清抗体效价较低,接近阴性对照组。ELISA检测显示CP100mg/kg组血清抗体与CHO-TM5细胞呈阳性结合反应,不与CHO细胞结合;而CP0mg/kg组血清抗体与CHO细胞与CHO-TM5细胞的结合反应均呈阳性。结论:CP100mg/kg具有良好诱导小鼠对CHO和CHO-TM5细胞的共同抗原表位产生免疫耐受,相对增强对CHO-TM5细胞目的抗原hTM的免疫应答的作用,为免疫删减法制备细胞表面抗原mAb提供了一个理想的动物免疫模型。 展开更多
关键词 免疫耐受 环磷酰胺 细胞表面抗原 ELISA
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离心力对质谱流式细胞技术检测结肠癌细胞表面抗原CD45表达结果的影响 被引量:1
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作者 姜霞 翟从劼 +4 位作者 张峰 孟丽敏 赵增仁 于卫芳 张磊 《山东医药》 CAS 北大核心 2017年第24期13-15,I0001,共4页
目的探讨离心力对质谱流式细胞技术检测结肠癌细胞表面抗原CD45表达结果的影响。方法将体外培养的结肠癌HCT116细胞分为400 g离心组和140 g离心组(每组细胞数均为3×10~6个),分别采用400 g、140 g离心力离心5 min,重复两次,收集细... 目的探讨离心力对质谱流式细胞技术检测结肠癌细胞表面抗原CD45表达结果的影响。方法将体外培养的结肠癌HCT116细胞分为400 g离心组和140 g离心组(每组细胞数均为3×10~6个),分别采用400 g、140 g离心力离心5 min,重复两次,收集细胞。采用质谱流式细胞技术检测两组死亡细胞百分比、抗人CD45金属聚合抗体(154Sm)信号强度>10~2的细胞数占总活细胞数的比例、t-SNE图显示活细胞中高表达CD45的细胞数量。结果 400 g离心力组及140 g离心力组死亡细胞百分比分别为(7.69±0.7)%、(19.06±0.66)%,两组比较P<0.01。400 g离心力组及140 g离心力组154Sm信号强度>10~2的细胞数分别占活细胞总数的0.2%[(0.19±0.08)%]、2.9%[(2.88±0.03)%],两组比较P<0.01。t-SNE图显示,400 g离心力组及140 g离心力组CD45高表达细胞分别为(167.41±70.48)、(201.20±20.96)个,两组比较P<0.01。结论应用质谱流式细胞技术检测结肠癌细胞表面抗原CD45表达时,140 g离心力分离的细胞检测结果更好。 展开更多
关键词 结肠癌 质谱流式细胞技术 细胞离心力 细胞表面抗原CD45
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小鼠抗人T淋巴细胞表面抗原噬菌体抗体库的构建及筛选 被引量:1
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作者 王剑利 王一理 司履生 《西安医科大学学报》 CAS CSCD 北大核心 2002年第3期239-241,282,共4页
目的 构建并筛选小鼠抗人静息 /活化T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示抗体库。方法 以人静息 /活化T淋巴细胞免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞 ,RT -PCR扩增VH 和VK 基因 ,拼接为ScFv ,插入噬菌粒载体转化大肠杆菌 ,构建了噬菌体展示抗体库 ,以... 目的 构建并筛选小鼠抗人静息 /活化T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示抗体库。方法 以人静息 /活化T淋巴细胞免疫Balb/c小鼠 ,取脾细胞 ,RT -PCR扩增VH 和VK 基因 ,拼接为ScFv ,插入噬菌粒载体转化大肠杆菌 ,构建了噬菌体展示抗体库 ,以人T淋巴细胞为靶抗原 ,对该库进行了 3轮淘洗 ,ELISA方法鉴定噬菌体抗体。结果 成功构建了最大实际库容量为 1 .75× 1 0 6的小鼠抗人静息T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示ScFv抗体库和小鼠抗人活化T淋巴细胞表面抗原的噬菌体展示ScFv抗体库。结论 所构建的抗体库可进一步用于对T淋巴细胞表面蛋白抗原的差异显示分析及构建基因工程抗体。 展开更多
关键词 T淋巴细胞表面抗原 抗体库 噬菌体展示 单链Fv抗体 T淋巴细胞 噬菌体抗体库技术
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草鱼、中华鳖T淋巴细胞表面抗原的研究 被引量:2
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作者 郭琼林 《水生生物学报》 CAS CSCD 北大核心 2001年第5期455-461,共7页
以草鱼脑组织、中华鳖脑组织和胸腺细胞为抗原制备兔抗草鱼脑血清 (RACBS)、兔抗中华鳖脑血清 (RATBS)和兔抗中华鳖胸腺细胞血清 (RATTS)。补体依赖性细胞毒试验和不同组织对RATBS、RATTS的吸收试验结果表明 :中华鳖胸腺细胞和脑组织均... 以草鱼脑组织、中华鳖脑组织和胸腺细胞为抗原制备兔抗草鱼脑血清 (RACBS)、兔抗中华鳖脑血清 (RATBS)和兔抗中华鳖胸腺细胞血清 (RATTS)。补体依赖性细胞毒试验和不同组织对RATBS、RATTS的吸收试验结果表明 :中华鳖胸腺细胞和脑组织均存在Thy1抗原(亦称脑组织抗原或胸腺 -脑组织T细胞抗原 ) ;草鱼脑组织缺乏Thy1抗原。应用间接酶标免疫组化染色技术显示 :Thy1抗原阳性反应物沉淀于中华鳖胸腺细胞和外周一部分淋巴细胞表面。进一步用抗人白细胞分化抗原CD4、CD8单克隆抗体进行免疫组化交叉反应提示中华鳖淋巴细胞膜上含有与人类T淋巴细胞表面抗原CD4、CD8类似结构的物质。本文讨论了Thy1抗原、CD抗原的出现及其意义 ,探讨了淋巴细胞异质性及RATBS、RATTS的特异性和作用。 展开更多
关键词 草鱼 中华鳖 Thy1抗原 细胞分化抗原 T淋巴细胞表面抗原 发育 水生动物 比较免疫学
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血清肺表面活性蛋白D、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原表达与病毒性肺炎患儿及其近期预后的关系 被引量:4
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作者 赵永静 石红娜 石秀兰 《中国临床医生杂志》 2021年第12期1491-1494,共4页
目的探讨血清肺表面活性蛋白D(surfactant protein D,SPD)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6(krebs yon denlungen-6,KL-6)表达与病毒性肺炎患儿病情及近期预后的关系。方法回顾性选取2018年1月至2021年1月郑州大学附属儿童医院119例病毒性肺炎... 目的探讨血清肺表面活性蛋白D(surfactant protein D,SPD)、Ⅱ型肺泡细胞表面抗原6(krebs yon denlungen-6,KL-6)表达与病毒性肺炎患儿病情及近期预后的关系。方法回顾性选取2018年1月至2021年1月郑州大学附属儿童医院119例病毒性肺炎患儿为病毒组,同时选取同期60例健康儿童为健康组。检测两组血清SPD、KL-6水平,分析不同病情及预后病毒性肺炎患儿血清SPD、KL-6差异,采用受试者工作特征曲线评价血清SPD、KL-6对病毒性肺炎患儿预后的评估价值。结果病毒组血清SPD、KL-6水平高于健康组(P<0.05)。病毒性肺炎重症患儿血清SPD、KL-6水平显著高于轻症患儿(P<0.05),血清SPD、KL-6水平与急性生理学和慢性健康状况评价Ⅱ评分呈正相关(P<0.05)。治疗无效患儿血清SPD及KL-6水平高于有效患儿,治疗有效患儿血清SPD及KL-6水平又高于痊愈患儿(P<0.05)。SPD+KL-6联合预测治疗无效的受试者工作特征曲线下面积为0.911,联合检测敏感度显著高于单独检测(P<0.05),联合检测特异度与单独检测差异无显著性(P>0.05)。结论血清SPD、KL-6水平与病毒性肺炎患儿病情和治疗效果有关,联合检测SPD、KL-6水平对评估病毒性肺炎患儿预后具有重要价值。 展开更多
关键词 病毒性肺炎 表面活性蛋白D Ⅱ型肺泡细胞表面抗原-6 病情 预后
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用单克隆抗体识别出一种与马立克病肿瘤细胞相关的淋巴细胞表面抗原 被引量:2
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作者 崔治中 《畜牧兽医学报》 CSCD 北大核心 1995年第2期139-146,共8页
从经马立克病病毒(MDV)诱发的肿瘤细胞系MSB-1细胞免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合中,筛选到一株杂交瘤细胞14B367。在酶标抗体和荧光抗体反应中,单抗14B367对MSB-1细胞及MDV诱发的另二株肿瘤细胞系... 从经马立克病病毒(MDV)诱发的肿瘤细胞系MSB-1细胞免疫的小鼠脾细胞与骨髓瘤细胞融合中,筛选到一株杂交瘤细胞14B367。在酶标抗体和荧光抗体反应中,单抗14B367对MSB-1细胞及MDV诱发的另二株肿瘤细胞系RP4和RP1细胞表现明显的阳性反应,但与鸡白血病病毒及网状内皮增生病病毒诱发的肿瘤细胞系RP9和RP13,以及SPF鸡的脾、胸腺、腔上囊细胞仅产生微弱的交叉反应。免疫转印试验和免疫沉淀反应表明,单抗14B367可从MSB-1及RP1细胞中识别出大小分别为90、105-110、140-145Kd3条蛋白带,从RP4细胞中识别出大小为70、85、130,135Kd3条带,它们是糖蛋白或其前体。但RP9、RP13细胞及脾、胸腺细胞、纤血球、鸡胚成纤维细胞(CEF)及MDV感染CEF均呈阴性反应。然而,单抗14B367也能从72和10×7品系鸡的外周血淋巴细胞识别出一条大小为130-135Kd或140-145Kd的条带,表明由单抗14B367识别的与MDV转化细胞上相关的蛋白质是一种与MDV无关但存在于某些亚群正常淋巴细胞表面的一种抗原。对该抗原特性的比较表明,这是一种不同于其它已报道的淋巴细胞表面抗? 展开更多
关键词 马立克病肿瘤 细胞表面抗原 单克隆抗体 糖蛋白
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流式细胞术检测培养细胞表面抗原的样品制备方法探讨 被引量:1
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作者 周向京 《实用医学杂志》 CAS 2007年第8期1259-1260,共2页
目的:探讨不同样品制备方法对贴壁培养细胞表面抗原的影响。方法:应用EDTA、胰酶、细胞刮、联用EDTA及细胞刮制备培养人视网膜色素上皮细胞单细胞悬液。采用流式细胞仪检测人视网膜色素上皮细胞表面HLA-DR及ICAM-1的表达和细胞数。结果... 目的:探讨不同样品制备方法对贴壁培养细胞表面抗原的影响。方法:应用EDTA、胰酶、细胞刮、联用EDTA及细胞刮制备培养人视网膜色素上皮细胞单细胞悬液。采用流式细胞仪检测人视网膜色素上皮细胞表面HLA-DR及ICAM-1的表达和细胞数。结果:单用EDTA或细胞刮制备的细胞悬液中细胞产量低,胰酶或联用EDTA及细胞刮制备的细胞悬液中细胞产量高(F=263.63,P<0.001)。胰酶组细胞表面HLA-DR和ICAM-1的荧光强度明显降低,且以HLA-DR抗原下降比例较多(HLA-DR:F=3.77,P=0.022;CD54:F=10.33,P<0.001)。EDTA组、细胞刮组、EDTA联合细胞刮组间HLA-DR和ICAM-1的荧光强度表达差异无统计学意义(P>0.05)。结论:EDTA联合细胞刮法是贴壁培养细胞制备单细胞悬液的一种好方法。 展开更多
关键词 流式细胞 样品制备 细胞表面抗原
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肌肉来源干细胞表面抗原-1阳性与阴性细胞体外培养成肌特性的比较
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作者 车晓霞 赵彤 +1 位作者 朱玲玲 郭杰 《华西口腔医学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2011年第4期369-371,374,共4页
目的探讨干细胞表面抗原-1(Sca-1)在成肌细胞增殖分化中的作用。方法采用流式荧光细胞分选技术,从C57BL/6小鼠骨骼肌中分离Sca-1+与Sca-1-细胞进行体外培养,使用CCK-8试剂盒检测2种细胞的增殖曲线,Westernblot测定2种细胞在体外培养过程... 目的探讨干细胞表面抗原-1(Sca-1)在成肌细胞增殖分化中的作用。方法采用流式荧光细胞分选技术,从C57BL/6小鼠骨骼肌中分离Sca-1+与Sca-1-细胞进行体外培养,使用CCK-8试剂盒检测2种细胞的增殖曲线,Westernblot测定2种细胞在体外培养过程中Sca-1、MyoD、成肌素(Myogenin)的蛋白表达。结果在体外培养的前3 d,Sca-1+与Sca-1-细胞增殖曲线没有明显差别;3 d后,Sca-1-细胞增殖比Sca-1+细胞明显加速。同时,2种细胞在体外培养过程中Sca-1均没有明显表达,而Sca-1+细胞的成肌调节因子表达比Sca-1-细胞显著增加。结论 Sca-1的表达在细胞生长发育过程中具有时段性,与成肌细胞细胞周期的起止有关。 展开更多
关键词 细胞表面抗原-1 肌肉干细胞 成肌调节因子 细胞周期
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肥大细胞表面抗原-1高灵敏度定量分析法的建立
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作者 陈洪淼 宋振镇 +3 位作者 陈壮荔 王振 胡国鹏 冯魏 《免疫学杂志》 CAS CSCD 北大核心 2012年第9期797-802,共6页
目的建立肥大细胞表面抗原-1(MASA-1)的高灵敏度定量分析方法。方法首先制备抗人MASA-1的单克隆抗体,然后结合先前制备的多克隆抗体,通过优化包被浓度、温度和反应时间等条件,建立夹心酶联免疫定量方法。结果成功制备了特异性高的小鼠抗... 目的建立肥大细胞表面抗原-1(MASA-1)的高灵敏度定量分析方法。方法首先制备抗人MASA-1的单克隆抗体,然后结合先前制备的多克隆抗体,通过优化包被浓度、温度和反应时间等条件,建立夹心酶联免疫定量方法。结果成功制备了特异性高的小鼠抗人MASA-1的单克隆抗体;夹心ELISA法的检测灵敏度可达0.5 ng/ml。利用该法测出各种呼吸系统疾病病人的肺清洗液中的MASA-1含量为0~130 ng/ml。MASA-1的浓度与甲苯胺蓝染色阳性细胞数之间不存在相关关系,但与MASA-1染色阳性细胞数之间呈显著正相关关系。结论相对于MASA-1细胞染色法,本研究开发的酶联免疫法具有快速、准确及能同时分析大量样品的优点,有助于肥大细胞的实验室研究和临床检测。 展开更多
关键词 肥大细胞表面抗原-1 单克隆抗体 酶联免疫法
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猪骨髓间充质干细胞成骨分化后白细胞表面抗原的表达及意义
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作者 梁文杰 谢肇 +5 位作者 吴雪晖 许建中 郭书权 罗飞 何清义 戴飞 《医学研究生学报》 CAS 2007年第6期578-581,共4页
目的:研究猪骨髓间充质干细胞(MSC)成骨分化(DOC)后在干扰素-γ(IFN-γ)刺激下对猪白细胞表面抗原(SLA)的变化及外周血单个核细胞(PBMC)增殖的影响,了解其免疫原性。方法:以未分化的MSC为对照,采用流式细胞术分别检测未诱导、成骨诱导的... 目的:研究猪骨髓间充质干细胞(MSC)成骨分化(DOC)后在干扰素-γ(IFN-γ)刺激下对猪白细胞表面抗原(SLA)的变化及外周血单个核细胞(PBMC)增殖的影响,了解其免疫原性。方法:以未分化的MSC为对照,采用流式细胞术分别检测未诱导、成骨诱导的MSC、MSC+IFN-γ、DOC+IFN-γ的SLA分子的表达,采用单向混合淋巴反应观察各组细胞对外源凝集素(PHA)刺激PBMC的每分钟脉冲值(CPM)变化。结果:MSC+IFN-γ组和DOC+IFN-γ组SLA-I表达上调(P<0.05),SLA-Ⅱ表达明显上调(P<0.01)。MSC成骨分化后能抑制PHA刺激的PBMC增殖反应。结论:在体外实验中,DOC后的MSC在IFN-γ刺激下仍具有低免疫原性,且具有免疫调节作用。 展开更多
关键词 骨髓间充质干细胞 成骨诱导 细胞表面抗原 免疫原性
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