急性髓细胞性白血病细胞表面CD分子表达及临床意义研究

目的探讨急性髓细胞性白血病(AML)细胞表面CD分子的表达情况。方法采用CD45分子作为靶目标抗原,应用多参数流式细胞术检测300例AML患者细胞表面的CD分子,分析患者的免疫表型。结果以表达百分比﹥20%作为阳性,300例AML患者的CD抗原表达均不相同,cyt-MPO、CD33、CD117和CD38表达最强,为强阳性(80%~100%)。以CD抗原表达>60%为阳性,结果显示:CD33、CD117、CD13、cyt-MPO四种抗原阳性表达的患者,阳性细胞所占的比例高于其他抗原,差异有统计学意义(P﹤0.05)。CD15/CD64、CD15/CD33和CD33/CD64抗原的阳性表达比较,差异均有统计学意义(P﹤0.05);CD33/cyt-MPO抗原的阳性表达比较,差异无统计学意义(P﹥0.05)。结论 AML细胞表面的CD抗原表达具有差异性,CD13、cyt-MPO、CD33、CD117呈高表达。CD分子在AML细胞中阳性表达的差异性可为治疗提供有价值的线索。

肺炎患儿外周血白细胞表面粘附分子CD11b、CD54、CD62L表达的研究

目的 探讨肺炎患儿外周血白细胞表面CD11b、CD5 4、CD6 2L在发病中的作用及其与病情的关系。方法 采用全血直接免疫荧光流式细胞术检测 34例肺炎患儿及 2 2例正常小儿外周血白细胞表面粘附分子 (AMS)CD11b、CD5 4、CD6 2L的表达。结果 1.肺炎组与对照组比较 :淋巴细胞 (L)、单核细胞 (M )、多形核细胞 (PMN)表面CD11b、CD5 4、CD6 2L的阳性细胞百分率 (PPC)和 (或 )平均荧光强度 (MFI)普遍上调 (P <0 .0 5或 <0 .0 0 0 1) ,其中以M的AMS上调最为显著 ;2 .重型肺炎组与轻型组比较 :PMN表面CD11b、L表面CD6 2L的PPC和 (或 )MFI表达上调 ,3类白细胞表面CD5 4的PPC和MFI表达均显著上调 (P <0 .0 5或 <0 .0 0 1)。结论 1.AMS在肺炎的发病中发挥了重要作用 ;2 .在三类白细胞表面CD5 4表达均同时上调的水平有可能作为判断肺炎病情程度的免疫学指标 ;3.

苯乙酸钠增强肿瘤细胞表面HLA分子的表达

以分化绣导剂苯乙酸钠处理肿瘤细胞,以ELISA检测肿瘤细胞表面HLA Ⅰ、Ⅱ类分子表达的变化。结果发现MCF-7、MDA-453、MKN-45以及Hela细胞表面HLA Ⅰ类分子表达较低,而MKN-28和3AO细胞表面HLA Ⅰ类分子高表达。MDA-453、MKN-28、MKN-45、Hela以及3AO细胞表面亦表达HLA Ⅱ类分子,而MCF-7细胞表面缺乏HLA Ⅱ类分子。苯乙酸钠能够诱导MCF-7细胞表面表达HLA Ⅱ类分子;增强MCF-7细胞表面HLA Ⅰ类分子,MDA-453、MKN-28、MKN-45、Hela以及3AO细胞表面HLA Ⅰ、Ⅱ类分子的表达。并且肿瘤细胞表面HLA Ⅰ类分子的表达与苯乙酸钠的作用时间和剂量呈正相关。

人脐血CD34^+细胞体外Dexter基质细胞培养后细胞表面分子变化的动态观察

目的 动态观察人脐血CD34+细胞Dexter基质细胞培养后细胞表面分子的变化情况。方法 应用 MACS磁珠分离系统分离脐带血CD34+细胞,按照Dexter法行脐血基质细胞培养,观察不同时间基质细胞的生长状态及细胞表面分子的变化情况。结果 脐血基质细胞在生长情况、细胞形态与骨髓基质细胞有不同之处,但其细胞表面分子的表达特点却与骨髓基质细胞有类似之处。结论 脐血CD34+细胞在生长因子的辅助下能促进基质细胞集落的形成,有望成为新的基质细胞来源。

CD40分子在胃癌组织中的表达及其与细胞凋亡的相关性

目的研究CD40分子表达与胃癌浸润转移等临床病理的关系,并探讨其与胃癌细胞凋亡之间的相关性。方法应用免疫组化技术检测56例胃癌组织和32例癌旁正常组织中CD40分子表达,采用TUNEL法检测肿瘤细胞的凋亡情况。结果CD40分子在胃癌组织中的阳性表达率为33.9％,明显高于癌旁正常组织(P<0.01);CD40阳性表达与淋巴结转移及远处转移有关(P<0.01),与肿瘤分化程度、浸润深度和瘤块大小均无关。CD40阳性组凋亡指数(0.74±0.23)与阴性组(1.48±0.52)相比有显著性差异(P<0.01)。结论CD40表达与胃癌转移、凋亡生物学行为密切相关,有可能作为胃癌诊断、评价转移及预后的客观指标之一,并有望成为胃癌生物治疗的靶分子之一。

细胞粘附分子CD44变异型在食管癌中的表达

目的 研究细胞粘附分子 CD44变异型 (CD44 v)在食管癌中的表达 ,探讨 CD44变异型表达与食管癌侵袭转移的关系。方法 采用免疫组织化学 L SAB技术 ,检测 80例人食管癌手术切除标本变异型 CD44 v5、CD44 v6、CD44 v7和CD44 v10蛋白表达 ,分析其表达与癌侵袭转移的关系。结果 CD44 v蛋白表达与患者的年龄、性别、食管癌病理分型无明显关系。在正常食管鳞状上皮 ,CD44 v5、CD44 v6、CD44 v7和 CD44 v10在上皮的基底层细胞及近基底层细胞均见表达 ,浅表层上皮表达减弱或阴性 ;在癌组织中 ,与 CD44 v5、CD44 v6相比 ,CD44 v7蛋白表达有非常显著性差异 (P <0 .0 1) ,CD44 v10蛋白表达有显著性差异 (P<0 .0 5 ) ;在转移癌中 ,CD44 v5、CD44 v6蛋白表达与原发性癌相比无显著差异 ;但 CD44 v7蛋白表达与原发性癌相比有非常显著性差异(P<0 .0 1) ,CD44 v10蛋白表达有显著性差异 (P<0 .0 0 5 )。结论 CD44 v7和 v10蛋白表达阳性率降低与食管癌侵袭转移潜能相关 ,是判断食管癌侵袭转移的标志之一。

角膜移植患者外周血T细胞及其亚群CD69分子表达研究

目的观察角膜移植患者外周血T细胞CD69分子的表达及意义。方法应用流式细胞仪于术前第1天,术后第1,2,3,8周检测23例角膜移植患者外周血T细胞CD69表达变化。结果角膜高血管化植床组患者术后外周血T细胞CD69分子表达比角膜无血管化植床组患者明显增高,也比术前明显增高(P<0.01),6例发生排斥反应的患者均在高血管化植床组,早期外周血中以CD4+细胞为主。结论外周血T细胞CD69表达与角膜移植排斥反应密切相关,测定外周血中CD69分子表达可更早预见排斥反应的发生。

尿毒症患者T细胞亚群共刺激分子CD28和CD152的表达分析

目的探讨尿毒症患者T细胞亚群表面共刺激分子CD28和CD152(CTLA4)的表达与细胞免疫功能紊乱的关系。方法采用流式细胞术测定尿毒症患者外周血T淋巴细胞上共刺激分子对CD28和CD152(CTLA4)的表达。结果尿毒症患者与健康对照组相比,CD4+T细胞相对计数和CD4/CD8比值均明显增加,共刺激分子CD28和CD152(CTLA4)在CD4+和CD8+T细胞上表达均明显增加,P值均<0.05。尿毒症患者CD4+T细胞表达的CD28明显高于CD8+T细胞,两组间T细胞亚群上共刺激分子CD28表达率差值间比较有显著性差异,P<0.05;患者的CD152分子在CD4+T细胞上的表达较CD8+T细胞上明显减少(P=0.027)。结论尿毒症患者的细胞免疫功能紊乱,T细胞亚群比例失衡,共刺激分子对CD28、CD152(CTLA4)在CD4+和CD8+T细胞上表达均增加,提示可能存在T细胞活化或抑制信号调节失衡。

SEB诱导的CD4^+ T细胞无能、凋亡及MHC-I类分子表达下调

目的:探讨超抗原金黄色葡萄球菌肠毒素(SEB)体外诱导外周T细胞免疫耐受的作用机制。方法:采用SEB体外刺激C57BL/6J(B6)小鼠的脾细胞后,以MTT比色法检测脾细胞的增殖,并用PI染色后以流式细胞术(FCM)分析不同时间段处于S期、G0～G1期的细胞及无能T细胞的凋亡,测定T细胞亚群及MHC-I(H一2Kb)表达的变化。用琼脂糖凝胶电泳,观察不同时问段凋亡T细胞的DNA特征。结果:部分去除CD8+T细胞后,SEB可刺激B6小鼠脾细胞中CD4+T细胞大量增殖。在SEB刺激后第3天,CD4+T细胞中处于S期的比率最大,此后开始下降;而处于G0～G1期的CD4+T细胞变化则相反。在初次刺激后第3天,增殖的CD4+T细胞出现无能。FCM检测及用琼脂糖凝胶电泳检查DNA ladder证实,在第7天,无能CD4+ T细胞出现凋亡,且凋亡细胞的比率逐渐增多,不因加入抗CD3抗体或ConA而逆转。在SEB刺激后,CD4+ T细胞表面MHC-I类分子(H-2Kb)的表达,随细胞无能的出现而明显下调。结论:SEB诱导的T细胞免疫耐受,可能与CD4+ T细胞的无能、凋亡及细胞表面分子MHC-I的表达下凋有关。

重症肌无力外周血单个核细胞CD28-B7共刺激通路相关分子的表达

目的 :探讨重症肌无力 (MG)患者CD2 8 B7共刺激信号通路相关分子的表达及其与MG发病的关系。方法 :用流式细胞仪检测 18例MG患者和 16例健康对照者外周血CD2 8、CTLA4、B7 1、B7 2分子在CD4 + T细胞和CD8+ T细胞表面的表达。结果 :MG组外周血CD2 8、CTLA4、B7 1、B7 2分子的表达均增强 ,其中CD2 8+ 细胞的增多主要表现在CD4 + T细胞亚群 ,CT LA4的表达增强主要在CD8+ T细胞 ,B7 1和B7 2分子在CD4 + 或CD8+ T细胞的表达 ,MG组与对照组无差别。结论 :MG的发病与CD2 8共刺激通路的活化密切相关 ,检测外周血CD2 8共刺激相关分子的表达可反映MG患者的免疫反应状态 ,有助于临床诊断和用药。

川崎病患儿CD4^+T淋巴细胞表面CD_(40)L表达及其与冠状动脉损伤的关系

目的通过检测川崎病(KD)患儿静脉输注入血丙种球蛋白(丙球)治疗前后外周血T细胞表面CD40L(CD154)表达,探讨KD冠状动脉损伤的发病机制。方法采用流式细胞仪检测26例KD患儿静脉输注丙球治疗前后、16例其他发热性疾病患儿、15例正常儿童外局血T细胞表面的CD40L表达。采用酶联免疫吸附试验检测相应血清中E-选择素。结果KD患儿CD4+T细胞表面CD40L表达及血清E-选择素显著高于其他发热性疾病组及正常对照组(P<0.01),KD患儿静脉输注丙球治疗后明显下降(P<0.01)。CD4+T细胞表面CD40L表达及E-选择素与KD冠状动脉损伤有关,而CD8+T细胞表面CD40L的表达与冠状动脉损伤无关。KD患儿CD4+T细胞表面CD40L表达与E-选择素水平正相关(r=0.626P<0.05)。结论CD40L异常表达及血清E-选择素在KD发病机制中起重要作用。静脉输注丙球能下调CD40L表达及血清E-选择索,有利于血管炎治疗。

大负荷力量训练对举重运动员免疫细胞表面分子表达量的影响

目的:研究大负荷力量训练对举重运动员免疫细胞功能的影响。方法:25名优秀男子举重运动员组成训练组、完成5周"二大一调整"式封闭性力量训练(对照组为同龄男大学生);取训练前、每周训练后基础状态静脉血,检测细胞表面CD3、CD4、CD8、CD14、CD16、CD56、HLA-DR、Vα24、Vβ11分子的表达量。结果:1训练第1、3、5周CD3分子的表达量均较训练前下降;第1、4周CD4分子表达量较训练前下降;第1、2周CD8分子表达量较训练前下降;第1周HLA-DR分子表达量较训练前下降。2大负荷力量训练期间CD14、CD16、CD56分子表达量变化无显著性意义。3第1、2、5周Vα24表达量较训练前增加;第3、4周Vβ11表达量较训练前增加。结论:大负荷力量训练导致T细胞相关表面分子表达量下降及NKT细胞相关表面分子表达量增加,提示T细胞功能下降、NKT细胞功能增强。

舒血宁对急性脑梗死病人外周血白细胞表面黏附分子表达影响的研究

目的 观察舒血宁注射液对急性脑梗死病人外周血白细胞表面黏附分子 (CDlla)表达及白细胞滤过指数 (变形性 )的影响。方法 取病人及健康人外周血 ,分离粒细胞于体外 3 7℃孵育 ,采用抗体荧光标记 ,测定CDlla表达率 ,并测定粒细胞通过核孔滤膜的时间 ,计算滤过指数。结果 CDlla表达率健康人组与空白对照组比较有统计学意义 (P <0 .0 1) ;舒血宁组较空白对照组明显下降 (P <0 .0 5 )。粒细胞滤过指数舒血宁组亦优于空白对照组 (P <0 .0 5 )。

2型糖尿病患者外周血白细胞粘附分子CD_(54)CD_(11b)、CD_(62L)表达的研究

目的探讨 2型糖尿病患者外周血白细胞粘附分子CD54、CD11b、CD62L表达及其与微血管损害的关系。方法用流式细胞仪测定有、无糖尿病微血管病变的 32例 2型糖尿病患者外周血淋巴细胞、单核和多形核细胞粘附分子CD54、CD11b、CD62L表达的百分率 ,同时测定血糖和糖化血红蛋白 ,并分别与 2 0例正常健康人比较。结果与正常组比较 ,无论有无微血管病变的 2型糖尿病患者其外周血白细胞表面上述三种粘附分子表达百分率均有不同程度的增加 ,微血管病变组表达率高于无微血管病变组 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。糖尿病患者血糖和糖化血红蛋白的含量明显增加 ,有微血管病变组高于无微血管病变组 ,差异有显著意义 (P <0 0 5 ,P <0 0 1)。结论 2型糖尿病患者白细胞表面CD54、CD11b、CD62L表达阳性率与高血糖 ,糖化血红蛋白浓度和微血管病变的发生有密切关系。

威麦宁对肺癌细胞（PG）表面粘附分子表达的影响

目的:研究威麦宁对人高转移巨细胞肺癌细胞(PG)表面粘附分子表达的影响,探讨其抗肿瘤转移的分子机制. 方法:实验分为威麦宁高剂量(WMH,100 mg/L)、低剂量(WML,62.5 mg/L)两组.流式细胞术法检测威麦宁对PG细胞表面CD44表达的影响;细胞免疫组化法检测威麦宁对PG细胞表面CD44V6表达的影响;RT-PCR法检测威麦宁对PG细胞αVβ3mRNA表达的影响.

消痰散结方对MKN-45人胃癌细胞黏附分子CD_(44)V_6表达的影响

目的 :观察消痰散结方对体外培养的 MKN- 45人胃癌细胞黏附分子 CD44 V6表达的影响 ,初步探讨了消痰散结方抑制胃癌细胞转移的作用环节。方法 :制备消痰散结药物血清 ,体外培养 MKN- 45人胃癌细胞 ,拟消痰散结方药物血清干预培养细胞 ,采用免疫组化 ABC法检测胃癌细胞中 CD44 V6的表达。结果 :中药组胃癌细胞中CD44 V6表达水平明显低于空白对照组。结论 :消痰散结方抑制胃癌细胞转移的环节可能和影响黏附分子的表达 。

低剂量辐射对T细胞CD28和Fas分子表达作用的研究

目的 研究低剂量辐射对T细胞CD2 8受体分子和Fas受体表达的适应性反应 ,探讨低剂量辐射免疫兴奋效应的分子机制。方法 采用直接免疫荧光—流式细胞仪分析技术 ,测定低剂量γ射线辐射后T细胞CD2 8受体分子和Fas受体 (CD95 )表达的变化。用JAM检测技术研究低剂量γ射线辐射后T细胞DNA断裂程度。结果 用低剂量γ射线诱导辐射后 ,正常人CD3+ T细胞CD2 8受体分子的表达有所增加 ;先低剂量辐射再高剂量辐射 ,CD2 8受体分子的表达无明显下降 ,Fas受体的表达和T细胞DNA断裂程度低于单纯高剂量照射组。结论 低剂量γ射线辐射增加CD2 8受体分子的表达 ,先低剂量γ射线辐射再高剂量辐射 ,CD2 8受体分子、Fas受体分子的表达和T细胞DNA断裂程度存在适应性反应 。

细菌感染时新生儿CD4^+T细胞表面标记物的表达

目的 研究新生儿CD4^+T细胞在细菌感染时的作用及作为临床应用感染性证据的可能性。方法应用流式细胞仪和单克隆抗体,分别测定19例正常足月新生儿和17例细菌感染足月新生儿治疗前后其CD4^+T细胞表面的白介素-2受体α链(CD25)、β链(CD122)、γ链(CD132)和CD154的表达情况。结果 CD25、CD122、CD132和CD154在正常新生儿CD4^+T细胞上的表达较低,分别为(3.84±3.61)％、(0.74±0.53)％、(12.70±8.54)％和(1.08±1.04)％,其在细菌感染组新生儿CD4^+T细胞上的表达分别为(9.89±9.66)％、(5.79±11.14)％、(21.78±11.34)％和(6.69±7.87)％,较正常新生儿组明显升高(P<0.05),且治疗前后均无显著变化(P>0.05)。结论 正常新生儿CD4^+T细胞的CD25、CD122、CD132和CD154表达较低,在细菌感染时表达上调,可作为新生儿细菌感染诊断的参考指标。

细胞黏附分子CD44v6在肝癌组织中的表达及意义

目的:检测细胞黏附分子CD44v6在肝癌细胞组织中的表达,并初步探讨其与肝癌部分生物学行为的关系.方法:选择同济医院手术肝细胞癌患者标本32例,以门脉高压肝硬变患者8例及肝外伤患者5例标本作为对照.采用免疫组织化学染色法检测正常肝脏、肝硬化组织和肝癌组织中CD44v6的表达情况,并分析其表达水平与肝癌部分生物学行为如肿瘤直径、有无包膜侵犯、肝癌病理分级(Edmonson分级)、是否伴有肝内外转移、合并肝硬化情况以及甲胎蛋白(AFP)的表达等指标间的关系.结果:正常肝脏组织及肝硬化组织中CD44v6几乎不表达或仅在少量淋巴细胞和间质细胞中呈弱阳性表达,32例肝癌组织中有25例可见CD44v6的强阳性表达,主要集中于细胞质和细胞膜上,阳性率为78.3%.肝癌组织中CD44v6表达阳性率高于正常肝脏组织(78.2%vs40.0%,P<0.05)及肝硬化组织(78.2%vs62.3%,P<0.05).肝癌细胞组织中CD44v6的表达明显强于正常肝脏(113.3±13.3vs23.6±10.6个阳性细胞,P<0.05)及肝硬化组织(113.3±13.3vs42.4±12.3个阳性细胞,P<0.05).有包膜侵润、EdmonsonIV以及转移者CD44v6表达比无包膜侵润、EdmonsonII—III和无转移者显著增高(7125.9±14.7vs95.2±15.2,P<0.05;122.5±24。3VS99.4±15.3,P<0.05;165.4±17.5vs95.3±12.4,P<0.01).CD44v6表达与肿瘤直径、AFP水平以及有无肝硬化无显著相关性(P>0.05).结论:CD44v6的表达有可能作为肝癌恶性程度和转移的指标之一,有必要进一步研究细胞黏附分子CD44v6在肝癌生物学行为中的作用及机制.