目的研究B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及其配体疱疹病毒侵入介体(herpes virus entry mediator,HVEM)在单纯疱疹性角膜基质炎(herpetic stromal keratitis,HSK)小鼠角膜组织中及外周血CD4+T细胞上的表达水...目的研究B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及其配体疱疹病毒侵入介体(herpes virus entry mediator,HVEM)在单纯疱疹性角膜基质炎(herpetic stromal keratitis,HSK)小鼠角膜组织中及外周血CD4+T细胞上的表达水平,探讨共抑制信号BTLA-HVEM是否参与了CD4+T细胞介导的HSK免疫病理反应。方法将106PFU的单纯疱疹病毒I型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)KOS毒株接种于BALB/c鼠的角膜上建立HSK动物模型,分别于角膜接种病毒前(0d),接种病毒后的第3、7、10、14、21天,用毛细管取小鼠的左眼眼眶静脉窦血1mL,分离淋巴细胞,行荧光抗体染色,用流式细胞仪检测CD3+CD4+BTLA+T细胞和CD3+CD4+HVEM+T细胞阳性率;在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜变化;免疫组织化学方法检测BTLA蛋白及HVEM蛋白在角膜组织中的表达。结果 BALB/c鼠的角膜接种HSV-1后的1~5d,角膜擦拭液中均检测出HSV-1复制,表明小鼠感染了单纯疱疹病毒。裂隙灯显微镜观察显示:角膜接种HSV-1后第3天,所有小鼠均患了急性上皮性角膜炎,并于感染后1周内痊愈,自病毒接种后第8天起,小鼠出现角膜基质炎的改变,表现为角膜基质呈灰白色混浊,角膜基质混浊于病毒接种后的第10天达到高峰,持续至第14天后逐渐减轻。流式细胞仪检测显示,小鼠外周血淋巴细胞中CD3+CD4+BTLA+T细胞和CD3+CD4+HVEM+T细胞的阳性率,在角膜接种病毒前(0d)分别为(3.15±0.60)%和(9.84±1.06)%,在角膜接种病毒后第10天(HSK疾病程度最严重时)分别增加到(20.47±3.15)%和(45.18±3.90)%(与0d相比差异均有显著统计学意义,均为P<0.01)。免疫组织化学方法检查HSK小鼠角膜组织中BTLA和HVEM的蛋白表达结果一致:HSK临床表现最严重时,即病毒接种后第10天时,BTLA蛋白和HVEM蛋白在角膜组织中表达最强,主要表达于角膜基质层内浸润的炎性细胞上,角膜上皮层和内皮层也有表达。结论在HSK小鼠模型中,BTLA及其配体HVEM蛋白在角膜组织中及外周血CD4+T细胞上表达明显增强,共抑制信号BTLA-HVEM参与了CD4+T细胞介导的HSK的免疫病理过程。展开更多
目的通过观察膝骨关节炎(knee osteoartbritis,KOA)患者肺功能参数、B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及血清细胞因子的变化情况,探讨KOA患者肺功能变化的可能分子机制。方法选取2011年10月—2012年7...目的通过观察膝骨关节炎(knee osteoartbritis,KOA)患者肺功能参数、B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及血清细胞因子的变化情况,探讨KOA患者肺功能变化的可能分子机制。方法选取2011年10月—2012年7月安徽中医学院第-附属医院风湿病科收治的住院、门诊患者47例。应用肺功能仪检测患者肺功能指标;流式细胞术检测BTLA;ELISA法检测白介素(interleukin,IL).1β、IL-10、基质金属蛋白酶9(matrix metalloproteinase-9,MMP-9)、基质金属蛋白酶组织抑制物-1(tissue inhibitor of matrix metalloprotease-1,TIMP-1);魏氏法测定血沉(erythrocyte sedimentation rate,ESR);日立7060型全自动生化分析仪进行测定超敏c反应蛋白(high—sensitivityC.reactiveprotein。hs.CRP)。结果(1)与正常组比较,KOA患者用力肺活量(forcedvitalcapacity,FVC)、-秒用力呼气容积(forced expiratory volume in 1second,FEVl)、FEVl/FVC、用力最大呼气流量(peak expiratory flow,PEF)、最大呼气中段流量(maximal mid—expiratory flow,MEF25_75)、用力呼气50%流量(Maximalmid-expiratory flow velocity in pulmonary vital capacity50%,MEF50)、用力呼气25%流量(maximal mid—expiratory flow velocity in pulmonary vital capacity 25%,MEF25)、CD3+BTLA+T细胞、CD4+BTLA+T细胞、IL-10、TIMPl明显降低,IL-1β、MMFO明显升高。(2)相关性分析显示,FVC与LequesneMG、症状分级量化总分、病程、MMIO呈负相关,与CD3+BTLA+T细胞、IL.10、TIMPl呈正相关;FEV,与CD3+BTLA+T细胞、CD4+BTLA+T细胞、TIMPl呈正相关,与病程呈负相关;MEF50与CD3‘BTLA+T细胞、CIM+BTLA+T细胞呈正相关。结论KOA患者在发生关节软骨病变的同时,伴有肺功能的下降。其机制可能与BTLA表达水平下降,IL-1p、MMP9明显升高,IL-10、TIMPl明显降低,诱发异常免疫应答,从而介导气道损伤,导致KOA患者肺功能下降有关。展开更多
文摘目的研究B、T淋巴细胞衰减因子(B and T lymphocyte attenuator,BTLA)及其配体疱疹病毒侵入介体(herpes virus entry mediator,HVEM)在单纯疱疹性角膜基质炎(herpetic stromal keratitis,HSK)小鼠角膜组织中及外周血CD4+T细胞上的表达水平,探讨共抑制信号BTLA-HVEM是否参与了CD4+T细胞介导的HSK免疫病理反应。方法将106PFU的单纯疱疹病毒I型(herpes simplex virus type 1,HSV-1)KOS毒株接种于BALB/c鼠的角膜上建立HSK动物模型,分别于角膜接种病毒前(0d),接种病毒后的第3、7、10、14、21天,用毛细管取小鼠的左眼眼眶静脉窦血1mL,分离淋巴细胞,行荧光抗体染色,用流式细胞仪检测CD3+CD4+BTLA+T细胞和CD3+CD4+HVEM+T细胞阳性率;在裂隙灯显微镜下观察小鼠角膜变化;免疫组织化学方法检测BTLA蛋白及HVEM蛋白在角膜组织中的表达。结果 BALB/c鼠的角膜接种HSV-1后的1~5d,角膜擦拭液中均检测出HSV-1复制,表明小鼠感染了单纯疱疹病毒。裂隙灯显微镜观察显示:角膜接种HSV-1后第3天,所有小鼠均患了急性上皮性角膜炎,并于感染后1周内痊愈,自病毒接种后第8天起,小鼠出现角膜基质炎的改变,表现为角膜基质呈灰白色混浊,角膜基质混浊于病毒接种后的第10天达到高峰,持续至第14天后逐渐减轻。流式细胞仪检测显示,小鼠外周血淋巴细胞中CD3+CD4+BTLA+T细胞和CD3+CD4+HVEM+T细胞的阳性率,在角膜接种病毒前(0d)分别为(3.15±0.60)%和(9.84±1.06)%,在角膜接种病毒后第10天(HSK疾病程度最严重时)分别增加到(20.47±3.15)%和(45.18±3.90)%(与0d相比差异均有显著统计学意义,均为P<0.01)。免疫组织化学方法检查HSK小鼠角膜组织中BTLA和HVEM的蛋白表达结果一致:HSK临床表现最严重时,即病毒接种后第10天时,BTLA蛋白和HVEM蛋白在角膜组织中表达最强,主要表达于角膜基质层内浸润的炎性细胞上,角膜上皮层和内皮层也有表达。结论在HSK小鼠模型中,BTLA及其配体HVEM蛋白在角膜组织中及外周血CD4+T细胞上表达明显增强,共抑制信号BTLA-HVEM参与了CD4+T细胞介导的HSK的免疫病理过程。